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肺腺癌中FPR1的表达及其对细胞迁移、成瘤能力的影响 被引量：4
1
作者 黄波 郭红荣 +2 位作者 丁洁 王红娟 徐建群 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1104-1109,共6页
目的探讨甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)在肺腺癌组织中的表达以及对肺腺癌细胞迁移、成瘤能力的影响。方法采用免疫组化法检测肺腺癌组织及癌旁组织中FPR1的表达,分析患者临床资料的相关性。采用人肺腺癌细胞A549为分析... 目的探讨甲酰肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)在肺腺癌组织中的表达以及对肺腺癌细胞迁移、成瘤能力的影响。方法采用免疫组化法检测肺腺癌组织及癌旁组织中FPR1的表达,分析患者临床资料的相关性。采用人肺腺癌细胞A549为分析对象,检测FPR1激动剂甲酰甲硫氨酰(N-formyl methionyl leucyl phenylalanine,f MLP)以及拮抗剂Boc2对细胞迁移的影响;构建裸鼠皮下成瘤模型,绘制肿瘤生长曲线; 2周后处死全部裸鼠,比较各组裸鼠肿瘤平均质量;应用酶联免疫吸附反应(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组裸鼠血清中血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factorC,VEGF-C)的表达水平;应用Western blot检测各组细胞中FPR1、ERK蛋白活性以及各组裸鼠肿瘤中FPR1蛋白的表达变化。结果 50例肺腺癌癌组织中FPR1阳性率为68%(34/50),与肺腺癌TNM分期显著相关;与患者年龄、性别、吸烟史无相关性。与对照组相比,f MLP能显著促进癌细胞的迁移能力、促进FPR1和p-ERK1/2蛋白表达(P均<0. 01),而Boc2则抑制了该作用(P均<0. 01)。与模型组相比,f MLP能促进肿瘤的生长及肿瘤中FPR1、血清中VEGF-C的水平(P均<0. 01),而Boc2则对该效果起抑制作用(P均<0. 05)。结论 f MLP能通过上调FPR1表达促进人肺腺癌细胞的迁移和成瘤能力,可能与ERK信号通路的激活有关及VEGF-C的分泌调控相关;且FPR1的阳性与肺腺癌TNM分期呈显著相关性,提示FPR1表达可能与肺腺癌的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 甲酰肽受体1 迁移 成瘤能力
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NLRP3基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及miR-22-3p靶向调控 被引量：4
2
作者 伍军 李相友 +2 位作者 朱戈丽 张艳霞 毕智敏 《广东医学》 CAS 2018年第23期3463-3468,共6页
目的构建核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NACHT,LRR and PYD domains-containing protein 3,NLRP3)基因3'非编码区(untranslated region,UTR)野生型及突变型双荧光素酶报告质粒载体,分析微小RNA(miR)-22-3p对NLRP3的调控作用。... 目的构建核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NACHT,LRR and PYD domains-containing protein 3,NLRP3)基因3'非编码区(untranslated region,UTR)野生型及突变型双荧光素酶报告质粒载体,分析微小RNA(miR)-22-3p对NLRP3的调控作用。方法应用生物信息软件预测miR-22-3p与NLRP3基因的结合位点;将NLRP3基因的3'UTR序列及其突变体克隆到双荧光素酶报告基因载体psi CHECK2中,构建野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒载体,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)及基因测序方法鉴定载体是否构建成功;将培养的人胚肾293T细胞(HEK293T)分为4组:(1) miR-22-3p对照+psi CHECK2;(2) miR-22-3p对照+psi CHECK2-NLRP3-3'UTR(野生型);(3) miR-22-3p模拟物(mimic)+psi CHECK2-NLRP3-3'UTR(野生型);(4) miR-22-3p模拟物(mimic)+psi CHECK2-NLRP3-3'UTR^(mut)(突变型),分别检测细胞荧光素酶活性。结果成功构建了NLRP3基因3'UTR野生型及突变型重组双荧光素酶报告质粒载体; NLRP3-3'UTR野生型与miR-22-3p mimic共转染293T细胞后,荧光素酶活性降低,下降43%,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论成功构建NLRP3基因3'UTR双荧光素酶报告质粒载体并初步验证miR-22-3p对NLRP3的调控作用。 展开更多
关键词 NLRP3 miR-22-3p 双荧光素酶报告基因
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痛风治疗药物的研究进展 被引量：20
3
作者 郭润竹 王雄 +4 位作者 邹吉利 伍军 尹青桥 吴金虎 李相友 《医学综述》 2017年第16期3265-3269,共5页
近年来痛风的发病率逐渐增多,已成为第二大代谢类疾病,仅次于糖尿病,威胁着人类的健康。痛风的治疗药物目前多用西药,如非甾体消炎药、秋水仙碱、别嘌醇、丙磺舒等。根据西医理论,针对不同阶段痛风病的特点,它们分别通过各自的作用机制... 近年来痛风的发病率逐渐增多,已成为第二大代谢类疾病,仅次于糖尿病,威胁着人类的健康。痛风的治疗药物目前多用西药,如非甾体消炎药、秋水仙碱、别嘌醇、丙磺舒等。根据西医理论,针对不同阶段痛风病的特点,它们分别通过各自的作用机制来治疗痛风,疗效良好,但有较多的不良反应。中医治疗痛风也有丰富的理论体系,近来研究发现,许多中药对痛风的疗效不亚于西药。另外,民族药治疗痛风有丰富的经验,亟待更深入的研究和开发。目前,多提倡中西医结合治疗痛风,这种方法已发展的越来越成熟。 展开更多
关键词 痛风 高尿酸血症 中药
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高糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞NLRP3-IL-1β的影响 被引量：5
4
作者 李相友 伍军 +5 位作者 罗丹 陈晚先 朱戈丽 张艳霞 毕智敏 封宝红 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期954-960,共7页
目的:观察高糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞NLRP3-IL-1β的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞株第5~10代[HMr SV5,DMEM/F12培养基含10%(体积分数)胎牛血清],观察1.5%、2.5%、4.25%(质量分数)葡萄糖腹膜透析液(dextrose)及线粒体呼吸链... 目的:观察高糖腹膜透析液对人腹膜间皮细胞NLRP3-IL-1β的影响。方法:体外培养人腹膜间皮细胞株第5~10代[HMr SV5,DMEM/F12培养基含10%(体积分数)胎牛血清],观察1.5%、2.5%、4.25%(质量分数)葡萄糖腹膜透析液(dextrose)及线粒体呼吸链复合酶Ⅰ抑制剂鱼藤酮(rotenone),线粒体呼吸链复合酶Ⅱ抑制剂噻吩甲酰三氟丙酮(thenoyltrifluoroacetone,TTFA),线粒体呼吸链复合酶Ⅲ抑制剂抗霉素A(antimycin A)对细胞IL-1β表达的影响(免疫印迹);通过小RNA干扰技术下调NLRP3的表达,免疫印迹分析4.25%高糖腹膜透析液作用下细胞IL-1β的表达;通过白藜芦醇(resveratrol,RSV)诱导自噬,3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)、自噬相关蛋白5(autophagy related gene 5,ATG5)siRNA、自噬相关蛋白(Beclin1)siRNA抑制自噬,流式细胞仪分析细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS),免疫印迹分析IL-1β的表达。结果:对照组、1.5%高糖腹膜透析液、2.5%高糖腹膜透析液、4.25%高糖腹膜透析液、鱼藤酮(10μmol/L)、抗霉素A(50 mg/L)、噻吩甲酰三氟丙酮(10μmol/L)各组细胞上清IL-1β的相对表达依次为0、0.175±0.082、0.418±0.163、2.357±0.288、2.642±0.358、3.271±0.462、0.123±0.091,提示2.5%高糖腹膜透析液、4.25%高糖腹膜透析液、鱼藤酮、抗霉素A作用细胞IL-1β表达明显升高,应用NLRP3 siRNA可阻断上述效应;此外,对照组、阴性对照siRNA(negative control,NC siRNA)、RSV(50μmol/L,诱导自噬)、3-MA(10 mmol/L,抑制自噬)、ATG5 siRNA(抑制自噬)、Beclin1 siRNA(抑制自噬)各组总线粒体荧光强度分别为1.76±0.42、1.83±0.55、1.85±0.62、7.36±0.92、5.35±0.77、5.06±0.62,超氧化线粒体荧光强度分别为821.68±95.12、868.15±102.82、723.39±92.56、1 660.08±113.65、1 433.01±107.24、1 562.36±112.88,结合免疫印迹结果,提示抑制自噬可增强线粒体ROS产生和提高IL-1β表达,诱导自噬对ROS、IL-1β无明显影响。结论:长期应用高糖腹膜透析液, 展开更多
关键词 高糖腹膜透析液 人腹膜间皮细胞 NLRP3 IL-1Β
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2型糖尿病患者血清微小RNA-130b、白细胞介素-17A水平变化及临床意义 被引量：2
5
作者 肖玲 杨晓 +2 位作者 张砚敏 罗丹 尹青桥 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第4期664-667,649,共5页
目的:探讨血清MRNA-130b(miR-130b)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17A)水平与2型糖尿病患者早期肾脏损伤的关系。方法:选择2016年1月-2016年12月武汉市第三医院收治肾病患者116例,依据尿蛋白排泄率(Urine protein excretion rate,U... 目的:探讨血清MRNA-130b(miR-130b)、白细胞介素-17(Interleukin-17,IL-17A)水平与2型糖尿病患者早期肾脏损伤的关系。方法:选择2016年1月-2016年12月武汉市第三医院收治肾病患者116例,依据尿蛋白排泄率(Urine protein excretion rate,UAER)分为正常白蛋白尿(DM组,41例),微量白蛋白尿(DN1组,37例),临床白蛋白尿(DN2组,38例),另选健康体检者(NC组)40例。采集空腹静脉血检测糖化血红蛋白(Glycated hemoglobin,HbAlc)、空腹血糖(Fasting blood glucose,FPG)、三酞甘油(Triglycerin,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋胆固醇(HDL cholesterol,HDL-C)、尿素氮(Urea Nitrogen,BUN)、肌酐(Creatinine,Cr)、尿微量白蛋白肌酐比值(Urinary microalbumin-creatinine ratio,ACR)、白细胞介素17A(IL-17A)浓度,采用实时荧光定量PCR检测血清mi R-130b的表达,分析上述指标间的相关性。结果:DN1组和DN2组BUN、Cr、ACR显著高于NC组和DM组,且DN2组显著高于DN1组(均P<0.05);DM组、DN1组IL-17A显著高于NC组(均P<0.05),DN2组IL-17A显著低于其余三组(均P<0.05);其余三组的mi R-130b表达水平显著低于NC组(均P<0.05),且DM组<DN1组<DN2组(均P<0.05)。DN患者IL-17A与TG、LDL-C、BUN、Cr、ACR呈负相关(r=-0.361、-0.383、-0.396、-0.417、-0.425,均P<0.05),mi R-130b与HbAlc、TG、LDL-C、BUN、Cr、ACR呈负相关(r=-0.276、-0.335、-0.294、-0.296、-0.315、-0.289,均P<0.05)。结论:血清mi R-130b表达水平和IL-17A浓度与DN患者肾脏损伤均呈负相关,可能通过调节炎症反应和细胞信号通路等途径参与DN的进展,有望成为T2DM患者早期肾损伤的生物学标志物。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 IL-17 miR-130b 肾脏损伤 相关性
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