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东亚钳蝎中一个中性哺乳动物神经毒素全长cDNA的克隆和分析
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作者 朱智慧 曾宪春 +2 位作者 王三霞 李文鑫 朱顺义 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期431-434,共4页
构建了东亚钳蝎毒腺cDNA文库 ,根据东亚钳蝎中性哺乳动物神经毒素BmKM4的氨基酸序列设计并合成引物 ,用PCR方法从文库中筛选到BmKM4全长cDNA序列。它由 5′UTR、可读框和 3′UTR组成。与其他东亚钳蝎哺乳动物神经毒素cDNA的相应区域相比... 构建了东亚钳蝎毒腺cDNA文库 ,根据东亚钳蝎中性哺乳动物神经毒素BmKM4的氨基酸序列设计并合成引物 ,用PCR方法从文库中筛选到BmKM4全长cDNA序列。它由 5′UTR、可读框和 3′UTR组成。与其他东亚钳蝎哺乳动物神经毒素cDNA的相应区域相比 ,BmKM4cDNA的 5′UTR高度保守 ,而其 3′UTR则变异较大。AUG的旁侧序列为AAAATGAA ,与绝大多数蝎毒素基因一致。在BmKM4mRNApoly(A)尾上游 17nt处 ,有一典型的腺苷化信号 (AATAAA)。可读框编码 84个氨基酸的毒素前体 ,包括N端 19个氨基酸残基组成的信号肽 ,中间 6 4个氨基酸残基组成的成熟毒素 ,以及C末端的额外碱性氨基酸Arg。椐据一般规律 ,尾端Arg在毒素前体的成熟过程中会被切除。 展开更多
关键词 东亚钳蝎 中性哺乳动物神经素 BmKM4 CDNA 基因克隆 氨基酸序列
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东亚钳蝎毒素BmKT四个同源基因的克隆及基因组织分析
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作者 罗锋 刘辉 李文鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期365-372,共8页
BmKT是从本室构建的cDNA文库中筛选到的1个α钠通道毒素,根据其全长cDNA序列设计引物,采用PCR法以蝎总基因组DNA为模板,获得4个BmKT的同源基因,分别命名为BmKT′和BmKTa、BmKTb、BmKTb′.序列分析表明:BmKT′和BmKTa基因含有大小分别为5... BmKT是从本室构建的cDNA文库中筛选到的1个α钠通道毒素,根据其全长cDNA序列设计引物,采用PCR法以蝎总基因组DNA为模板,获得4个BmKT的同源基因,分别命名为BmKT′和BmKTa、BmKTb、BmKTb′.序列分析表明:BmKT′和BmKTa基因含有大小分别为509bp和506bp的内含子,位于信号肽编码区内,插入信号肽-4位残基Gly密码子的第一个碱基G之后;而BmKTb和BmKTb′的内含子大小均为418bp.这4个BmKT的同源基因内含子符合GTAG拼接规律,其中BmKT′和BmKTa的内含子A+T含量分别为61.7%和61.9%,低于目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量,大大低于它们第一外显子A+T含量(71.7%),略高于第二外显子A+T含量(55.5%);而BmKTb,BmKTb′的内含子A+T含量分别为75.8%和76.1%,与目前已报导的大多数蝎毒素基因A+T含量相似.BmKT′基因的外显子与BmKT基因cDNA所对应氨基酸序列仅在信号肽中-7位有一个氨基残基的差异(BmKT:Leu→BmKTa:Val);而BmKTa基因外显子所推断的氨基酸序列与BmKT前体比较,则在成熟肽的+54位发生了突变(BmKT:Lys→BmKTa:Asn),是与BmKT同源的一个新基因.BmKTb基因和BmKTb′基因所编码的前体肽与BmKT基因对应的前体肽同源性约为65%,显然BmKTb和BmKTb′是不同于BmKT的2个新基因(GenBank登录号:BmKT′,AY786186;BmKTa,AY676142;BmKTb,AY676140;BmKTb′,AY676141). 展开更多
关键词 东亚钳蝎 BmKT' BmKTa BmKTb BmKTb' 基因组织 Na^+通道毒素
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白蚁信息素研究进展 被引量:8
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作者 邓晓军 张珈敏 +2 位作者 胡建芳 杨娟 胡远扬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期666-672,共7页
采用信息素防治白蚁这种世界性害虫是当前白蚁研究的一大热点。本文从化学和生物两个方面总结了几十年来国内外白蚁信息素及其类似物研究进展。讨论了影响信息素活性的几个因素。并根据最新的研究情况 。
关键词 白蚁 信息素 研究进展 害虫防治
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东亚钳蝎氯毒素BmKCT的表达和功能鉴定(英文) 被引量:10
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作者 杨锐 彭方 +4 位作者 刘辉 曹志贱 李文鑫 毛歆 蒋达和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期19-23,共5页
从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生... 从中国东亚钳蝎ButhusmartensiiKarsch的毒腺cDNA文库中分离得到了一个编码毒素蛋白多肽 (命名为BmKCT)前体的全长cDNA序列 .该毒素多肽与已报道的氯毒素 (chlorotoxin)高度同源 ,其蛋白质一级序列有 6 8%的同源性 .为了鉴定BmKCT的生物学功能 ,通过pGEX系统成功地表达了BmKCT ,并用GST亲和层析和凝胶过滤的方法获得了纯化的重组BmKCT毒素蛋白 (rBmKCT) .通过膜片钳实验 ,记录了rBmKCT对人脑星型胶质瘤细胞 (gliomascell)表面的氯离子通道电流的作用 .结果显示 ,BmKCT可以显著抑制人脑星型胶质瘤细胞表面的氯离子通道电流 ,并且这种抑制作用在一定程度上是可逆的 .实验证明 ,在细胞水平上 ,BmKCT是一种新的短链氯离子通道抑制剂 . 展开更多
关键词 胶质瘤细胞 氯离子通道 表达 人脑 膜片钳 GST 抑制作用 东亚钳蝎 毒腺 功能鉴定
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Ⅰ型内含子核酶研究进展 被引量:6
5
作者 李志杰 张翼 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期363-369,共7页
Ⅰ型内含子核酶作为最早被发现的RNA催化剂 ,在过去 2 0年里得到了深入研究 .相关研究成果使人们在RNA的生物学功能、催化特征、结构与折叠特征等方面的认识有了革命性更新 .回顾了Ⅰ型内含子核酶研究的主要进展 ,重点对近年来在Ⅰ型内... Ⅰ型内含子核酶作为最早被发现的RNA催化剂 ,在过去 2 0年里得到了深入研究 .相关研究成果使人们在RNA的生物学功能、催化特征、结构与折叠特征等方面的认识有了革命性更新 .回顾了Ⅰ型内含子核酶研究的主要进展 ,重点对近年来在Ⅰ型内含子核酶的结构和折叠方面所取得的重要成果进行了介绍 。 展开更多
关键词 Ⅰ型内含子核酶 催化 结构 折叠 RNA催化剂
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一个新的东亚钳蝎毒素(BmKT_1)全长cDNA的克隆和分析 被引量:3
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作者 曾宪春 李文鑫 +3 位作者 朱智慧 朱顺义 彭方 毛歆 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第5期616-619,共4页
首先构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ;根据已知的东亚钳蝎哺乳动物毒素氨基酸序列保守区设计引物 ,并用 PCR从 c DNA文库中扩增出一个 c DNA片段作为筛选 c DNA文库的探针 ;从 c DNA文库中筛选到二个编码同一个新的蝎毒素多肽的 c D... 首先构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ;根据已知的东亚钳蝎哺乳动物毒素氨基酸序列保守区设计引物 ,并用 PCR从 c DNA文库中扩增出一个 c DNA片段作为筛选 c DNA文库的探针 ;从 c DNA文库中筛选到二个编码同一个新的蝎毒素多肽的 c DNA,它们除 3′- UTR外 ,其余序列完全一致 .它们均含有 2 55bp长的开放阅读框 ,编码 85肽的前体毒素 ,包括 1 9个氨基酸残基的信号肽 ,66个残基的成熟毒素 (命名为 Bm KT1) ;Bm KT1氨基酸序列与已知的蝎毒素具有较大的同源性 ,与 Bm KM1,Lqq ,Lqhα IT和 Bm K M10 的同源性分别为 77%、67%、67%和 65% .Bm KT1的 C端不存在末端修饰步骤且具有一个与这些毒素不相同的特征结构 ,即在末端延伸了两个氨基酸残基 - P- S,推测 Bm KT1具有新的活性功能特征 . 展开更多
关键词 东亚钳蝎毒素 药物设计 CDNA文库 克隆 序列分析
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以白色念珠菌为模型高通量筛选潜在抗真菌药物 被引量:5
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作者 蒋笑艳 杜冠华 张翼 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第12期919-922,共4页
目的通过高通量药物筛选来寻找有活性的广谱性抗真菌药物,专一性抗白色念珠菌药物以及特异性抑制含核酶的白色念珠菌生长的药物。方法以两株基因型不同的白色念珠菌菌株(一株含I型内含子核酶,一株不含核酶)和一株非病原真菌啤酒酵母(不... 目的通过高通量药物筛选来寻找有活性的广谱性抗真菌药物,专一性抗白色念珠菌药物以及特异性抑制含核酶的白色念珠菌生长的药物。方法以两株基因型不同的白色念珠菌菌株(一株含I型内含子核酶,一株不含核酶)和一株非病原真菌啤酒酵母(不含I型内含子核酶)为细胞模型,3种菌株依次以96孔板为容器,在起始菌液浓度的A580nm为01时分别加入10720种药物样品(包含化合物与天然产物),在30℃静止培养6h,选取抑菌效率超过50%的样品进行复筛。结果通过初筛和复筛,发现了23种药物在10μg·mL-1的浓度时的抑菌效率超过50%,其中1种药物特异性抑制含核酶的白色念珠菌生长,是潜在的抗核酶药物;4种药物特异抑制白色念珠菌的生长,是潜在的抗白色念珠菌药物;18种药物抑制所有模式菌株的生长,是潜在的广谱性抗真菌药物。结论本研究在国内首次采用自动化工作站进行抗真菌药物的高通量药物筛选,方法简便快捷,筛选结果稳定可靠,并筛选到一些有希望向临床发展的抗真菌药物活性样品。此方法有可能应用于抗其他病原微生物的药物筛选。 展开更多
关键词 高通量筛选 抗真菌药物 白色念珠菌 啤酒酵母 Ⅰ型内含子核酶
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γ-氨基丁酸和脑缺血 被引量:6
8
作者 何小华 罗易宁 李文鑫 《卒中与神经疾病》 2003年第6期373-375,共3页
γ-氨基丁酸(GABA)作为中枢神经系统内的最重要的抑制性神经递质,在脑缺血诱发的神经元死亡中的作用开始受到重视,GABA能药物在许多动物脑缺血模型中均显示良好的神经保护作用[1].本文重点在于阐述GABA神经传递在脑缺血诱发的神经元死... γ-氨基丁酸(GABA)作为中枢神经系统内的最重要的抑制性神经递质,在脑缺血诱发的神经元死亡中的作用开始受到重视,GABA能药物在许多动物脑缺血模型中均显示良好的神经保护作用[1].本文重点在于阐述GABA神经传递在脑缺血诱发的神经元死亡中的作用,并提供缺血诱发的神经元死亡与GABA神经传递改变之间的关系以及GABA能药物对神经细胞保护作用的证据. 展开更多
关键词 Γ-氨基丁酸 脑缺血 抑制性神经递质 神经细胞 细胞信号传导
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细胞凋亡与自身免疫病 被引量:4
9
作者 付文祥 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期85-88,共4页
细胞凋亡在维持淋巴细胞稳态及自身耐受中起重要作用。细胞凋亡受多种基因控制与调节,主要可通过外源性和内源性两条通路来触发。而凋亡功能的失常可诱发自身免疫病,如自身免疫淋巴增生综合症、Hashimoto甲状腺炎、Graves病、胰岛素依... 细胞凋亡在维持淋巴细胞稳态及自身耐受中起重要作用。细胞凋亡受多种基因控制与调节,主要可通过外源性和内源性两条通路来触发。而凋亡功能的失常可诱发自身免疫病,如自身免疫淋巴增生综合症、Hashimoto甲状腺炎、Graves病、胰岛素依赖性糖尿病、多发性硬化等。另外凋亡细胞清除缺陷也会诱发自身免疫病。 展开更多
关键词 细胞凋亡 自身免疫病 凋亡细胞清除
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作用于钾离子通道蝎毒素的结构特征及活性表面研究进展 被引量:4
10
作者 吴英亮 曹志贱 +2 位作者 蒋达和 毛歆 李文鑫 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期96-102,共7页
对作用于钾离子通道的蝎毒素的空间结构特点进行了简要归纳,发现高含量碱性残基在不同结构单元广泛分布而少量酸性残基特征性分布等新特点。蝎毒素活性表面研究进展表明,利用空间结构的分子模建结合残基突变是确定活性表面的有效方法。... 对作用于钾离子通道的蝎毒素的空间结构特点进行了简要归纳,发现高含量碱性残基在不同结构单元广泛分布而少量酸性残基特征性分布等新特点。蝎毒素活性表面研究进展表明,利用空间结构的分子模建结合残基突变是确定活性表面的有效方法。基于少量酸性残基特征分布与活性表面取向的相关性,提出酸性残基为活性调节残基的新观点和简单的“拇指”规则预测钾毒素活性表面的方法,从而可望加速蝎毒素的结构与功能关系研究。 展开更多
关键词 钾离子通道 蝎毒素 空间结构 碱性残基 活性表面
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微生物资源在解决人类资源危机中的作用 被引量:5
11
作者 李雁 《氨基酸和生物资源》 CAS 2002年第3期3-5,共3页
随着社会的发展 ,人口的不断增长 ,人类面临着资源危机包括粮食危机、能源危机及环境污染所造成的环境资源的破坏。人类要解决资源紧缺这一严重问题 ,其必然趋势是从利用有限的非生物资源的时代过渡到利用无限的生物资源时代。在生物资... 随着社会的发展 ,人口的不断增长 ,人类面临着资源危机包括粮食危机、能源危机及环境污染所造成的环境资源的破坏。人类要解决资源紧缺这一严重问题 ,其必然趋势是从利用有限的非生物资源的时代过渡到利用无限的生物资源时代。在生物资源中 ,微生物资源所具有的独特的生理代谢优势 。 展开更多
关键词 自然资源 微生物资源 人类资源危机 作用
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核因子-κB活性增强参与胃癌细胞长春新碱耐药 被引量:2
12
作者 罗和生 王维 +1 位作者 包鹏辉 张翼 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期472-475,共4页
目的 研究核因子 κB(NF κB)在胃癌耐药形成中的作用。方法 应用凝胶电泳迁移率分析研究长春新碱 (VCR)对胃癌细胞SGC790 1及耐药细胞SGC790 1/VCR内NF κBDNA结合活性的影响 ,细胞 ELISA法检测细胞内NF κB抑制因子IκB α蛋白的表... 目的 研究核因子 κB(NF κB)在胃癌耐药形成中的作用。方法 应用凝胶电泳迁移率分析研究长春新碱 (VCR)对胃癌细胞SGC790 1及耐药细胞SGC790 1/VCR内NF κBDNA结合活性的影响 ,细胞 ELISA法检测细胞内NF κB抑制因子IκB α蛋白的表达 ,免疫细胞化学法观测细胞内 p6 5核转位 ,MTT法检测细胞对药物的敏感性。结果 SGC790 1/VCR耐药细胞中NF κB的基础活性比敏感细胞高 1.4倍。不同浓度VCR(5、10、2 0、5 0 μg/L)均可引起耐药细胞NF κBDNA结合活性增强 ,同时伴有IκB α蛋白表达下降和 p6 5核转位 ,亲本敏感细胞产生的上述效应均不及耐药细胞明显。与敏感细胞相比 ,10 μg/LVCR作用不同时间时 ,SGC790 1/VCR细胞中NF κB活性上升速度慢但维持时间长。NF κB抑制剂MG 132可抑制VCR诱导的NF κB活化 ,IκB α降解和 p6 5核转位 ,并提高耐药细胞对VCR的敏感性。结论 NF κB活性增强参与胃癌细胞对VCR耐药。 展开更多
关键词 核因子-ΚB 活性增强 胃癌细胞 长春新碱 耐药性 肿瘤
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枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析 被引量:4
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作者 苗丽霞 曹军卫 +2 位作者 刘瑞杰 王友亮 曾永辉 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1111-1117,共7页
利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨... 利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因 ,得到一个约 2 3kb的DNA片段 ,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因。与野生菌株的proB基因相比 ,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变 ,其中一个碱基的变化 (从起始密码子开始第 781位由T→A)导致了一个氨基酸发生改变 (Ser→Thr) ,另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株 ,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现 ,其与proB基因头尾重叠 ,在proA基因起始密码子上游第 14个碱基处有一个类似于SD的序列 ,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌 16 8的同源性为 77% 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗脯氨酸结构类似物突变株 筛选 proBA基因 克隆 序列分析
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Effects of antisense glutamic aciddecarboxylase oligodeoxynucleotide on epileptic rats induced by pentylenetetrazol 被引量:2
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作者 何小华 李文鑫 +2 位作者 王伟 阮旭中 张梁 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2002年第3期425-429,共5页
OBJECTIVE: To investigate the effects of antisense glutamic acid decarboxylase (GAD(67)) oligodeoxynucleo-tide (ODN) on behavior, seizure threshold and EEG of hippocampus in the epileptic rats induced by pentylenetetr... OBJECTIVE: To investigate the effects of antisense glutamic acid decarboxylase (GAD(67)) oligodeoxynucleo-tide (ODN) on behavior, seizure threshold and EEG of hippocampus in the epileptic rats induced by pentylenetetrazol (PTZ). METHODS: A model of chronic epilepsy in rats was established by PTZ. The inhibition of GAD(67) mRNA expression in hippocampus was selectively induced by antisense oligodeoxynucleotide of GAD(67). The effect of antisense GAD(67) ODN on behavior, seizure threshold and EEG recording of kindled rats was examined. RESULTS: Antisense GAD(67) ODN could inhibit the expression of GAD(67) mRNA and the concentration of GABA. It also could significantly shorten the latencies of seizure and increase the level of seizure and the frequency of epileptiform discharges. CONCLUSION: The gene of GAD(67) may be an anti-seizure gene, which might inhibit epileptiform discharge. The treatment of epilepsy by GAD(67) gene will have a bright future. 展开更多
关键词 Animals Electroencephalography Epilepsy Glutamate Decarboxylase Hippocampus ISOENZYMES Kindling (Neurology) Male Oligonucleotides Antisense PENTYLENETETRAZOLE Rats Research Support Non-U.S. Gov't gamma-Aminobutyric Acid
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蝎Na^+通道毒素的结构及功能研究进展 被引量:2
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作者 朱顺义 曹志贱 李文鑫 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期176-178,共3页
蝎Na+ 通道毒素为低分子量肽类物质 ,由 6 0~ 76个氨基酸残基组成 ,含有 4对二硫键。这类分子为电压门控Na+ 通道功能门控机制的高亲和性配体 ,具有重要的理论价值和应用前景。本文对Na+ 通道毒素的初级和高级结构。
关键词 蝎毒素 结构 功能 Na^+通道 研究进展
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唇裂上唇黏膜的组织病理研究 被引量:1
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作者 傅夏洲 蔡恒星 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2007年第1期50-52,共3页
目的:本研究通过对唇裂患儿上唇黏膜的组织学研究,探讨现代红唇整复技术的理论依据。方法:对18例单侧唇裂患儿的上唇组织标本进行组织学观察,并对上皮细胞中角蛋白的表达进行研究。结果:干性黏膜和湿性黏膜除具有唇黏膜的共同特点之外,... 目的:本研究通过对唇裂患儿上唇黏膜的组织学研究,探讨现代红唇整复技术的理论依据。方法:对18例单侧唇裂患儿的上唇组织标本进行组织学观察,并对上皮细胞中角蛋白的表达进行研究。结果:干性黏膜和湿性黏膜除具有唇黏膜的共同特点之外,两者在组织学上有一定差异。干性黏膜上皮表面有角化层,基底细胞层较薄,上皮钉突不明显,黏膜下结缔组织中无粘液腺;湿性黏膜上皮表面为不全角化,基底细胞层较厚,上皮钉突明显,湿性黏膜下结缔组织中有粘液腺。免疫组化显示,皮肤鳞状上皮细胞角蛋白的表达明显强于黏膜,但在干性黏膜及湿性黏膜的鳞状上皮表达未见明显差别。结论:干性黏膜和湿性黏膜在组织学上属于不同的黏膜组织,在唇裂的整复过程中要分别进行整复,以达到最理想的效果。 展开更多
关键词 唇裂 红唇黏膜 组织学
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一个东亚钳蝎蝎毒素BmTXKβ基因的克隆及其基因表达调控 被引量:2
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作者 曹志贱 肖帆 +2 位作者 毛歆 刘辉 李文鑫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期679-683,共5页
从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号... 从东亚钳蝎 (ButhusmartensiiKarsch ,BmK)毒腺组织cDNA文库中分离的长链钾通道毒素BmTXKβcDNA序列 ,克隆了BmTXKβ基因组序列 .BmTXKβ基因含有一个长度为 886bp的内含子 ,定位于BmTXKβ成熟肽中 ,与其它蝎毒素基因内含子定位于信号肽的基因结构不同 .并且 ,BmTXKβ基因的内含子特征也与其它蝎毒素基因不同 .研究结果从基因水平上证实了BmTXKβ是一个新的蝎毒素样肽 .以BmTXKβcDNA序列为探针与蝎基因组DNASouthern杂交出现 2条特异性杂交带 .杂交结果为蝎毒素基因可能通过DNA重排、多拷贝或多基因家族来调控基因表达提供了证据 . 展开更多
关键词 东亚钳蝎 蝎毒素 BmTXKβ基因 克隆 基因表达调控
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用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌 被引量:2
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作者 钱娜 赵永芳 《分析测试学报》 CAS CSCD 2000年第3期8-10,共3页
建立了用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌的薄层色谱法。甲基营养菌No.2培养液经二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A -25离子交换剂、Sep -PakC18 Cartridge纯化后 ,可获得纯度92 %以上的吡咯喹啉醌 (PQQ)粉末。在碱性条件下丹磺酰氯 (DNS_Cl)可与... 建立了用丹磺酰氯定性鉴定吡咯喹啉醌的薄层色谱法。甲基营养菌No.2培养液经二乙氨基乙基交联葡聚糖凝胶A -25离子交换剂、Sep -PakC18 Cartridge纯化后 ,可获得纯度92 %以上的吡咯喹啉醌 (PQQ)粉末。在碱性条件下丹磺酰氯 (DNS_Cl)可与PQQ生成具有特征性的DNS_N_PQQ荧光衍生物 ,将其点样于聚酰胺薄膜上 ,经正庚烷 -正丁醇 -醋酸 (体积比3∶3∶1)系统展开 ,Rf 值为0.73。 展开更多
关键词 吡咯喹啉醌 丹磺酰氯 辅酶 薄层色谱法 鉴定
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枯草芽孢杆菌突变株proBA基因植物表达载体的构建及转基因拟南芥的耐盐性能初探
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作者 曾永辉 陈喜涵 +1 位作者 苗丽霞 曹军卫 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期316-322,共7页
从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抗脯氨酸结构类似物突变株中克隆得到脯氨酸合成途径中的关键酶基因proB(编码γ-谷氨酰胺激酶)和proA(编码谷氨酰胺-γ-半醛脱氢酶),同时设计引物从拟南芥基因组中扩增得到吡咯啉-5-羧酸合成酶B基因(p5... 从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)抗脯氨酸结构类似物突变株中克隆得到脯氨酸合成途径中的关键酶基因proB(编码γ-谷氨酰胺激酶)和proA(编码谷氨酰胺-γ-半醛脱氢酶),同时设计引物从拟南芥基因组中扩增得到吡咯啉-5-羧酸合成酶B基因(p5csB)的第一个内含子序列,将其分别与proB和proA基因通过PCR拼接后,酶切连接构建得到植物双元表达载体pBI121pro。以LBA4404为介导,采用真空抽滤的方法转化得到转proBA基因拟南芥;第三代的纯合子(T3)通过半巢式PCR的方法验证外源基因已整合到拟南芥基因组中,GUS活性分析表明外源基因在叶片中表达最强,茎部其次,根部最弱;对600mmol.L-1致死浓度NaCl耐受能力的分析表明,转基因拟南芥的平均存活时间(37.8min)明显高于野生型拟南芥(26min)。 展开更多
关键词 拟南芥 转基因 枯草芽孢杆菌 proBA基因 pBI121 耐盐
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蝎毒液肽基因内含子剪接信号分析 被引量:1
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作者 朱顺义 曹志贱 李文鑫 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期695-702,共8页
从中国蝎ButhusmartensiiKarsch基因组DNA中分离到两个毒液肽基因的内含子。在此基础上 ,通过编辑和分析目前已出版的蝎毒液肽基因内含子序列 ,确定了这类基因内含子剪接信号的共有序列 ,并将其与其它物种进行了比较。
关键词 蝎毒液肽 基因组织 剪接信号 内含子
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