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雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选 被引量：3
1
作者 李俊琳 蒋明森 +2 位作者 钟沁萍 明珍平 董惠芬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期482-486,共5页
目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体，无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆，反复冻融3次，离心取上清液，考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌... 目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体，无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆，反复冻融3次，离心取上清液，考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌虫卵黄腺段虫体，冷消化法制备细胞悬液，调整细胞数为1×10^9／L后，将卵黄细胞接种于小盖玻片上，RPMI-1640含20％小牛血清培养，根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组（0、10、50、100、150、200mg／L组）。培养第7天，以核仁组织区相关嗜银蛋白（argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins，AgNORs）及乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）为评价指标，对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色，Olympus-BH2显微镜观察，输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值。结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加，培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深，至100mg／L时最深,随后又逐渐变浅。图像分析显示，雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组（q10=14．2189、q50=18．3358、q100=35．6491、q150=13．1849、q200=13．8604，P＜0．01；g10=10．3377、q50=11．7532、q100=23．1883、q150=10．2792、q200=9．3052，P＜0．01）。雄虫抽提物100mg／L组与其他各组比较，AgNORs及LDH明显升高（q100=21．4302、q50=17．3132、q150=22．4642、q200=21．7887，P＜0．01；g10=12．8506、q50=11．4351、q150=12．8896、q200=13．8831，P＜0．01）。结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性，其作用的最适质量浓度为100mg/L。 展开更多
关键词 雄虫抽提物 血吸虫日本 卵黄细胞 核仁组织区相关嗜银蛋白 乳酸脱氢酶
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