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干扰素-α诱导HepG2 2.2.15细胞APOBEC3G的表达及其机制
1
作者 王鲁文 陈辉 +2 位作者 褚小刚 严少南 龚作炯 《中国感染控制杂志》 CAS 2009年第3期155-159,共5页
目的探讨干扰素（IFN）-α刺激HepG2 2．2．15细胞后，对载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G（apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G，APOBEC3G）表达的影响，以及初步探讨Janus激酶-信号传导和转录激活子... 目的探讨干扰素（IFN）-α刺激HepG2 2．2．15细胞后，对载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样3G（apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic polypeptide-like 3G，APOBEC3G）表达的影响，以及初步探讨Janus激酶-信号传导和转录激活子OAK—STAT）信号通道是否参与APOBEC3G基因转录调控。方法对HepG2 2．2．15细胞给予不同剂量（0、1、10^1、10^2、10^3、10^4 U／mL）IFN-α刺激8h时，以及10^3 U／mL IFN-α刺激2、4、6、8、10、12h时，收集细胞或培养上清液。应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot检测HepG22．2．15细胞APOBEC3G、STAT-1 mRNA及蛋白的表达水平。应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原与e抗原（HBsAg与HBeAg）水平，应用实时荧光定量PCR及RT-PCR分别检测上清液中HBVDNA水平以及细胞中HBVmRNA水平。结果无IFN-α（0 U／mL）刺激时，HepGa2．2．15细胞APOBEC3G表达水平很低。随着IFN-a浓度的升高，APOBEC3GmRNA及蛋白水平逐步升高，IFN-α浓度为10^4 U／mL时，APOBEC3G表达量最高，并且STAT-1分子mRNA及蛋白的表达量亦逐步升高，与APOBEC3G表达量呈现平行相关。随着IFN-a刺激时间的延长，APOBEC3G表达量明显升高，8h时达到最高，其后逐渐下降。10^4 U／mL IFN-α刺激8h时，HepG2 2．2．15细胞培养上清液中HBsAg、HBeAg、HBVDNA及细胞中HBVmR-NA水平均明显低于无IFN-α刺激的HepG22．2．15细胞。结论WN-a能诱导HepG22．2．15细胞表达APO—BEC3G，在一定范围内，APOBEC3G的表达与IFN—d的剂量、作用时间呈正相关；IFN-α诱导APOBEC3G的表达可能是其发挥抗病毒作用的机制之一；IFN-α是否经JAK-STAT信号通道刺激APOBEC3G的表达，二者之间的关系及其机制尚待进一步研究。 展开更多
关键词 载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样3G 干扰素-Α HEPG2 2.2.15细胞 STAT-1 肝炎 乙型
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HBV基因型与阿德福韦酯抗病毒疗效的关系 被引量：4
2
作者 任巧晶 王鲁文 龚作炯 《临床内科杂志》 CAS 2008年第8期531-533,共3页
目的探讨HBV不同基因型对阿德福韦酯抗病毒疗效的影响。方法选取42例应用阿德福韦酯治疗的慢性乙肝患者作为研究对象,观察治疗24周及48周时抗病毒疗效。采用型特异性引物进行巢式PCR,对患者血清中的HBV进行基因分型,采用荧光定量PCR检... 目的探讨HBV不同基因型对阿德福韦酯抗病毒疗效的影响。方法选取42例应用阿德福韦酯治疗的慢性乙肝患者作为研究对象,观察治疗24周及48周时抗病毒疗效。采用型特异性引物进行巢式PCR,对患者血清中的HBV进行基因分型,采用荧光定量PCR检测患者血清HBV DNA复制水平,HBV血清病毒标志物采用双抗体夹心ELISA法检测。结果42例慢性乙肝患者的HBV基因型分布为:B型23例,C型10例,B+C混合型9例,未发现A、D、E、F基因型。不同基因型患者治疗前HBV DNA水平无统计学差异(P>0.05)。HBV基因型B型、C型和B+C混合型患者治疗24周及48周时HBV DNA载量的变化、丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常及HBeAg血清转换均无统计学差异(P>0.05)。结论HBV基因型B型或C型对阿德福韦酯治疗的病毒学应答和生化应答相当,提示HBV基因型可能对阿德福韦酯的疗效无影响。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因型 阿德福韦酯 抗病毒治疗
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内质网分子伴侣糖调节蛋白94在大鼠酒精性肝损伤中的高表达和意义 被引量：3
3
作者 龚作炯 王鲁文 +1 位作者 陈瑞 张频 《肝脏》 2006年第3期167-169,共3页
目的检测酒精性肝损伤大鼠肝组织内质网分子伴侣糖调节蛋白94的表达情况,探讨酒精性肝损伤的发病机制。方法24只SD雌性大鼠分成对照组和模型组。模型组大鼠给予乙醇加鱼油灌胃配合高脂饮食8周,建立酒精性肝损伤模型,应用半定量逆转录聚... 目的检测酒精性肝损伤大鼠肝组织内质网分子伴侣糖调节蛋白94的表达情况,探讨酒精性肝损伤的发病机制。方法24只SD雌性大鼠分成对照组和模型组。模型组大鼠给予乙醇加鱼油灌胃配合高脂饮食8周,建立酒精性肝损伤模型,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法检测大鼠肝组织内质网分子伴侣糖调节蛋白94mRNA和蛋白水平。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织糖调节蛋白94mRNA和蛋白表达明显增强(P<0.01)。结论酒精性肝损伤大鼠存在糖调节蛋白94高表达,这可能是该病的发病机制之一。 展开更多
关键词 内质网分子伴侣 内质网应激 糖调节蛋白94 酒精性肝损伤
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大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植的实验研究 被引量：1
4
作者 方立 张杰 +3 位作者 彭建平 李又空 杜贤进 韦梅红 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期357-361,共5页
目的探讨大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植治疗肾上腺功能不全的可行性。方法分离SD大鼠（出生3d内的乳鼠）的肾上腺细胞，置于自制鼠尾Ⅰ型胶原凝胶中培养，1周后移植到双侧肾上腺切除的成年雄性SD大鼠肾被膜下。术后... 目的探讨大鼠肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后进行同种移植治疗肾上腺功能不全的可行性。方法分离SD大鼠（出生3d内的乳鼠）的肾上腺细胞，置于自制鼠尾Ⅰ型胶原凝胶中培养，1周后移植到双侧肾上腺切除的成年雄性SD大鼠肾被膜下。术后每周取血1次，测量血浆皮质酮和醛固酮的水平；移植8周后处死大鼠，观察移植物的组织学特点；肾上腺细胞的增殖情况及CYP11B1和CYP11B2蛋白的表达情况；并与单纯肾上腺细胞移植组和正常对照组相比较。结果大鼠移植经胶原凝胶三维培养的肾上腺细胞后，80％（12／15）存活达8周；手术后血浆皮质酮水平显著高于同期单纯肾上腺细胞移植组，移植6～8周时，与正常对照组已无显著性差异；其醛固酮水平术后恢复缓慢，与单纯肾上腺细胞移植组的差异无统计学意义；移植后肾上腺细胞在胶原内生长良好，增殖率高，95％为束状带细胞，表达CYP11B1，而表达CYP11B2的球状带细胞仅占5％，未见炎症细胞浸润。结论肾上腺细胞经胶原凝胶三维培养后移植能形成有功能的血管化肾上腺组织，长期效果理想，有望成为临床治疗肾上腺功能不全的有效方法。 展开更多
关键词 肾上腺 移植 同种 大鼠 胶原
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