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莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制研究 被引量：4
1
作者 周璐炜 王娟 陈旭 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第5期548-554,共7页
目的研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇(12.5、25、50、100μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜... 目的研究莪术醇抗T47D乳腺癌细胞增殖的作用机制。方法采用MTT法检测不同剂量莪术醇(0、6.25、12.5、25、50、100μg/mL)对T47D乳腺癌细胞增殖的抑制作用。以莪术醇(12.5、25、50、100μg/mL)干预T47D乳腺癌细胞后,采用倒置相差显微镜观察细胞形态;采用流式细胞仪检测细胞周期及活性氧(ROS)水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期调控因子p21和细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)的mRNA表达水平;采用Westernblot法检测CDK2、CDK6、细胞周期蛋白D(Cyclin D)、PCNA、核转录因子E2-相关因子(Nrf2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)的蛋白表达水平。另将细胞分为2组,其中一组加入不同剂量莪术醇,另外一组加入33μg/mL莪术醇干预6、12、24、48 h,根据以上2组结果确定最佳氧化时间和给药浓度后,另设空白对照组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组(单用ROS抗氧化剂NAC)、莪术醇组(单用莪术醇)、莪术醇联合NAC组(采用ROS抗氧化剂NAC预处理,再加入莪术醇),检测细胞周期及ROS荧光强度。结果莪术醇能使T47D乳腺癌细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05或P<0.01),并呈一定的剂量和时间依赖趋势。莪术醇能将T47D乳腺癌细胞周期阻滞于G1期,并使ROS水平显著增加(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇的上述诱导作用(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,莪术醇能下调PCNA和CDK2 mRNA的表达,并上调p21 mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。Westernblot结果显示,莪术醇能显著下调Keap1、Nrf2、CDK2、CDK6和Cyclin D的蛋白表达(P<0.05或P<0.01);ROS抗氧化剂NAC能够逆转莪术醇对上述蛋白表达的下调作用(P<0.05或P<0.01)。结论莪术醇可能通过诱导氧化应激和细胞周期阻滞,发挥抑制T47D乳腺癌细胞增殖的作用。 展开更多
关键词 莪术醇 T47D乳腺癌细胞 细胞周期阻滞 细胞增殖 氧化应激 作用机制
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莪术醇片剂的制备及大鼠在体肠吸收研究
2
作者 李林峻 刘国翔 +3 位作者 刘张驰 王炎 张玮 王娟 《中南药学》 2023年第10期2654-2658,共5页
目的探索莪术醇片剂的处方及其在大鼠体内的小肠动力学特征。方法采用湿法制粒压片法制备莪术醇片剂,通过单因素实验筛选处方,并测定体外累计溶出度,考察药物释放情况;通过大鼠在体肠循环实验,比较莪术醇原料药和片剂在大鼠小肠中的吸... 目的探索莪术醇片剂的处方及其在大鼠体内的小肠动力学特征。方法采用湿法制粒压片法制备莪术醇片剂,通过单因素实验筛选处方,并测定体外累计溶出度,考察药物释放情况;通过大鼠在体肠循环实验,比较莪术醇原料药和片剂在大鼠小肠中的吸收情况。结果筛选出莪术醇片剂的适宜处方为莪术醇2 g、羟丙甲纤维素0.225 g、玉米淀粉1.5 g、硬脂酸镁0.225 g、一水合乳糖11.05 g。片剂在溶出介质中60 min的溶出度大于80%。莪术醇片剂在大鼠小肠中的吸收速率高于莪术醇原料药。结论莪术醇片剂组成合理,工艺简单,体外累计溶出速率符合要求。与莪术醇原料药相比,莪术醇片剂能改善大鼠的小肠吸收。 展开更多
关键词 莪术醇 片剂 单因素实验 溶出度 在体肠循环
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罗汉果粗提物抑制H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞的ROS生成及凋亡 被引量：1
3
作者 李肖娟 李玉雪 +1 位作者 周璐炜 王娟 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2022年第7期11-18,共8页
探讨罗汉果粗提物(Momordica grosvenorii extract,MGE)对H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞凋亡及氧化损伤的保护作用及机制。以不同浓度的H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞建立氧化损伤模型,根据细胞活力选择最适的诱导浓度。采用MTT法检测细胞活力;流式... 探讨罗汉果粗提物(Momordica grosvenorii extract,MGE)对H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞凋亡及氧化损伤的保护作用及机制。以不同浓度的H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞建立氧化损伤模型,根据细胞活力选择最适的诱导浓度。采用MTT法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞活性氧ROS水平和细胞凋亡率;Western blot方法对凋亡相关因子进行检测。结果表明,罗汉果粗提物(0~200μg/mL)对MIN6细胞活性几乎无影响,因此选取200μg/mL罗汉果粗提物进行后续实验。200μg/mL罗汉果粗提物能显著逆转过氧化氢导致的细胞活力降低(p<0.05)。流式细胞术结果显示,与单用H_(2)O_(2)相比,罗汉果粗提物可以显著下调H_(2)O_(2)导致的ROS水平升高(p<0.05),且抑制H_(2)O_(2)诱导的MIN6细胞的凋亡。Western blot结果也表明罗汉果粗提物能部分逆转H_(2)O_(2)引起的PCNA表达降低,Bax表达增高(p<0.05)。综上所述,罗汉果粗提物可以抑制H_(2)O_(2)诱导MIN6细胞的ROS生成及细胞凋亡,该研究结果可为将罗汉果开发为防治糖尿病功能食品提供实验依据。 展开更多
关键词 罗汉果粗提物 ROS 凋亡 MIN6细胞
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转录组学结合蛋白质组学筛选罗汉果皂苷V缓解OVA诱导哮喘小鼠的关键通路 被引量：2
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作者 窦童 王娟 +2 位作者 刘以撒 贾建钢 陈旭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1809-1816,共8页
目的基于转录组学和蛋白质组学,探讨罗汉果皂苷V缓解哮喘小鼠肺部炎症的潜在关键机制。方法采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导雌性BALB/C小鼠哮喘,给予罗汉果皂苷V,观察肺部组织及其病理变化。选择空白组、模型组和罗汉果皂苷V给药组,分... 目的基于转录组学和蛋白质组学,探讨罗汉果皂苷V缓解哮喘小鼠肺部炎症的潜在关键机制。方法采用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导雌性BALB/C小鼠哮喘,给予罗汉果皂苷V,观察肺部组织及其病理变化。选择空白组、模型组和罗汉果皂苷V给药组,分别每组3个样本进行转录组学和蛋白质组学分析,筛选出差异基因和差异蛋白,对其进行趋势分析,再对所有趋势基因和趋势蛋白进行KEGG富集分析。结果肺组织形态学和HE染色结果显示,罗汉果皂苷V缓解OVA诱导的肺部炎症。基于组学分析发现,在1122个趋势基因中,空白与模型组比较上调且模型与给药组比较下调的基因有454个,反之,有111个;在497个趋势蛋白中,空白与模型组比较上调且模型与给药组比较下调的差异表达基因有238个,反之,有91个。基于转录组和蛋白质组趋势分析其KEGG富集到PI3K/Akt信号通路,经分子生物学方法验证其关键因子Igha、Ighg1、PI3K及Akt在模型组升高且在给药组降低。结论基于转录组学和蛋白质组学的方法揭示罗汉果皂苷V可能通过抑制PI3K/Akt信号通路的激活,改善哮喘小鼠肺部炎症,发挥润肺止咳的作用,本研究为治疗哮喘的药物开发提供实验参考。 展开更多
关键词 罗汉果皂苷V 转录组学 蛋白质组学 哮喘 肺部炎症 靶标通路
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