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miR-125b通过下调MCL-1的表达提高肝癌肿瘤干细胞对多柔比星的敏感性 被引量:1
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作者 洪东承 张本宏 龚彬彬 《检验医学》 CAS 2016年第11期981-986,共6页
目的探讨微小RNA-125b(miR-125b)是否能增强多柔比星对肝癌HepG2细胞系肿瘤干细胞(简称HepG2肿瘤干细胞)的杀伤活性并研究其机制。方法将HepG2细胞用miR-125b、多柔比星及髓细胞白血病-1(MCL-1)质粒作不同处理。采用流式细胞术检测HepG... 目的探讨微小RNA-125b(miR-125b)是否能增强多柔比星对肝癌HepG2细胞系肿瘤干细胞(简称HepG2肿瘤干细胞)的杀伤活性并研究其机制。方法将HepG2细胞用miR-125b、多柔比星及髓细胞白血病-1(MCL-1)质粒作不同处理。采用流式细胞术检测HepG2肿瘤干细胞比例,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,采用Annexin V染色法检测细胞凋亡率,采用JC-1染色法测定细胞线粒体膜电位,采用免疫印迹法检测目标蛋白[MCL-1、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)]的表达。结果多柔比星单独使用能提高HepG2细胞系中肿瘤干细胞的比例,联用miR-125b后HepG2肿瘤干细胞的比例显著下降。MTT法和流式细胞术结果表明miR-125b可显著增强多柔比星对HepG2肿瘤干细胞的杀伤活性和凋亡诱导活性。JC-1染色实验结果表明miR-125b可显著增强多柔比星对HepG2肿瘤干细胞线粒体的损伤。免疫印迹法结果表明miR-125b可显著增强多柔比星依赖的caspase-9和caspase-3的活化。MCL-1质粒能明显抑制miR-125b对多柔比星的协同作用,降低二者联合作用对HepG2肿瘤干细胞活力的抑制和凋亡的诱导。结论miR-125b通过下调MCL-1的表达能提高HepG2肿瘤干细胞对多柔比星的敏感性。 展开更多
关键词 微小RNA-125b 多柔比星 肝癌 肿瘤干细胞 髓细胞白血病基因1 细胞凋亡
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蛇床子素联合顺铂对人肺癌细胞的杀伤效应及机制 被引量:2
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作者 程丽霞 张本宏 《检验医学》 CAS 2015年第6期631-634,共4页
目的探讨蛇床子素联合顺铂对人肺癌细胞NCI-H460的杀伤效应及机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测蛇床子素(50、100、200μmol/L)、顺铂(1.5、3.0、6.0μmol/L)及两者联合(50μmol/L蛇床子素+1.5μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞增殖的影响。采... 目的探讨蛇床子素联合顺铂对人肺癌细胞NCI-H460的杀伤效应及机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测蛇床子素(50、100、200μmol/L)、顺铂(1.5、3.0、6.0μmol/L)及两者联合(50μmol/L蛇床子素+1.5μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞增殖的影响。采用膜联蛋白(AnnexinⅤ)/碘化丙啶(PI)染色法、二氢乙啶(DHE)染色法检测蛇床子素(50μmol/L)、顺铂(1.5μmol/L)及两者联合(50μmol/L蛇床子素+1.5μmol/L顺铂)对NCI-H460细胞凋亡及活性氧簇(ROS)的影响。用ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)进行预处理,然后检测蛇床子素(50μmol/L)、顺铂(1.5μmol/L)及两者联合(50μmol/L蛇床子素+1.5μmol/L顺铂)对NCIH460细胞的凋亡诱导能力。以未加药物的NCI-H460细胞作为对照组。结果蛇床子素和顺铂均呈剂量依赖性地抑制NCI-H460细胞的增殖。50μmol/L蛇床子素联合1.5μmol/L顺铂可明显抑制NCI-H460细胞的增殖并诱导其发生凋亡。与蛇床子素及顺铂单独作用比较,二者联合作用后ROS阳性细胞明显增加(P<0.05)。与对照组(未用NAC预处理)比较,用NAC预处理过的NCI-H460细胞在用蛇床子素联合顺铂作用后产生的ROS明显降低(P<0.05),且凋亡率和对细胞增殖的抑制作用也同样明显降低(P<0.05)。结论蛇床子素联合顺铂可通过诱导ROS的产生,引起人肺癌细胞NCI-H460发生凋亡。 展开更多
关键词 蛇床子素 顺铂 凋亡 活性氧簇 人肺癌细胞NCI-H460
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