灯盏花乙素对J774A.1巨噬细胞中ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响 被引量：29

1

作者 景艳芸 李陈广 +4 位作者 颜亮 徐丽慧 白文静 欧阳东云 何贤辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期174-180,共7页

目的以LPS致敏的小鼠巨噬细胞J774A.1作为炎症细胞模型,研究灯盏花乙素对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法利用碘化丙锭(PI)染色法检测LPS+ATP诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞发生细胞焦亡的情况;免疫印迹法检测细胞裂... 目的以LPS致敏的小鼠巨噬细胞J774A.1作为炎症细胞模型,研究灯盏花乙素对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法利用碘化丙锭(PI)染色法检测LPS+ATP诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞发生细胞焦亡的情况;免疫印迹法检测细胞裂解液和上清中IL-1β、caspase-1、HMGB1等蛋白的表达水平;基于微珠的免疫测定法(CBA)检测细胞上清中IL-1β的分泌水平。结果 ATP能够明显诱导LPS致敏的J774A.1巨噬细胞中caspase-1活化、成熟IL-1β(17 ku)和HMGB1释放至培养上清中,并诱导细胞焦亡;而灯盏花乙素预处理能够剂量依赖性地抑制ATP诱导的caspase-1活化以及成熟IL-1β、HMGB1的释放,并抑制细胞焦亡;同时,经腺苷酸环化酶抑制剂MDL12330A和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理,可以逆转灯盏花乙素对ATP诱导的细胞焦亡的抑制作用。结论灯盏花乙素通过调节PKA活性,抑制NLRP3炎症小体的活化与细胞焦亡,从而发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 灯盏花乙素 细胞焦亡 巨噬细胞 NLRP3炎症小体 蛋白激酶A ATP

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黄芩苷对NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的抑制作用及其机制研究 被引量：27

2

作者 颜亮 李陈广 +4 位作者 徐丽慧 景艳芸 白文静 欧阳东云 何贤辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期93-100,114,共9页

目的以LPS致敏的小鼠巨噬细胞(J774A.1或者腹腔巨噬细胞)作为细胞模型,探讨黄芩苷对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法 C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L-1巯基乙酸盐培养基诱导大量腹腔巨噬细胞产生;利用LPS致敏巨... 目的以LPS致敏的小鼠巨噬细胞(J774A.1或者腹腔巨噬细胞)作为细胞模型,探讨黄芩苷对ATP诱导的炎症小体活化和细胞焦亡的影响及其机制。方法 C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L-1巯基乙酸盐培养基诱导大量腹腔巨噬细胞产生;利用LPS致敏巨噬细胞,再以ATP激活NLRP3炎症小体;采用免疫印迹法检测细胞裂解物和培养上清液中IL-1β、caspase-1、HMGB1等蛋白的表达水平;以基于微球的免疫测定法(CBA)检测细胞培养上清液中IL-1β的水平;碘化丙锭(PI)染色法检测黄芩苷对LPS+ATP诱导的细胞焦亡的影响。结果黄芩苷处理能剂量依赖性地抑制LPS+ATP刺激下巨噬细胞中caspase-1的活化,成熟IL-1β(Mr17 000)和HMGB1的释放;同时,黄芩苷也能明显抑制LPS+ATP诱导的小鼠巨噬细胞发生焦亡。腺苷酸环化酶抑制剂MDL12330A和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89可以明显逆转黄芩苷对ATP诱导的细胞焦亡的抑制作用。结论黄芩苷可能通过影响巨噬细胞中PKA的活性,进而抑制NLRP3炎症小体活化与细胞焦亡。 展开更多

关键词 黄芩苷 炎症小体 细胞焦亡 巨噬细胞 蛋白激酶A

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雪胆素乙对小鼠淋巴细胞体外活化及增殖的影响 被引量：15

3

作者 王遥 刘坤鹏 +4 位作者 宋方茗 潘浩 徐丽慧 欧阳东云 何贤辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期190-194,共5页

目的分析雪胆素乙(Cucurbitacin IIb,CuIIb)对丝裂原刺激的小鼠淋巴细胞体外活化、增殖及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法以WST法检测CuIIb对刀豆蛋白A(Con A)刺激的淋巴细胞增殖的作用,利用流式细胞术分析小... 目的分析雪胆素乙(Cucurbitacin IIb,CuIIb)对丝裂原刺激的小鼠淋巴细胞体外活化、增殖及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法以WST法检测CuIIb对刀豆蛋白A(Con A)刺激的淋巴细胞增殖的作用,利用流式细胞术分析小鼠淋巴细胞活化抗原CD69和CD25以及促炎因子肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)表达的影响。结果 CuIIb能明显抑制Con A刺激引起的淋巴细胞的增殖作用,并呈现剂量依赖性;经CuIIb处理后,T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达受到明显抑制;同时,CuIIb以剂量依赖方式抑制Con A诱导的促炎因子TNF-α和IL-6在CD3+T细胞中的表达。结论 CuIIb对小鼠淋巴细胞的活化、增殖均具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应。 展开更多

关键词 雪胆素乙 淋巴细胞 CD69 刀豆蛋白A 促炎因子

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二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化 被引量：9

4

作者 魏红霞 李陈广 +4 位作者 梁译丹 徐丽慧 潘浩 何贤辉 欧阳东云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期474-479,共6页

目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L^(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔... 目的以脂多糖(LPS)激活的腹腔巨噬细胞为炎症细胞模型,探讨糖尿病常用药物二甲双胍对胞外ATP诱导炎症小体活化并释放白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的影响。方法C57BL/6小鼠腹腔注射30 g·L^(-1)巯基乙酸盐(thioglycollate,TG)诱导腹腔巨噬细胞大量产生;利用LPS+ATP处理激活炎症小体,采用碘化丙锭(PI)染色法检测二甲双胍对LPS+ATP诱导的腹腔巨噬细胞焦亡的影响,免疫印迹法检测该细胞胞内及上清中IL^(-1)β和caspase-1的表达水平;免疫荧光技术检测巨噬细胞P_2X_7嘌呤能ATP受体7(P_2X_7R)的亚细胞分布及荧光强度。结果单独二甲双胍不会导致LPS激活细胞发生焦亡,但二甲双胍呈剂量依赖性促进LPS+ATP诱导的细胞焦亡;免疫印迹法显示,在蛋白水平上,单独LPS(或LPS+二甲双胍)刺激不能诱导细胞释放成熟IL^(-1)β(17 ku)到细胞外;当加入ATP刺激后,成熟IL^(-1)β和活化caspase-1(10 ku)释放到胞外;而二甲双胍可以剂量依赖性地促进LPS激活、ATP刺激下腹腔巨噬细胞释放成熟IL^(-1)β和活化caspase-1的水平。结论二甲双胍增强LPS激活的腹腔巨噬细胞在ATP刺激下的炎症小体活化,提高caspase-1活化和成熟IL^(-1)β释放,促进炎症反应。 展开更多

关键词 二甲双胍 细胞焦亡 腹腔巨噬细胞 白细胞介素-1Β 半胱氨酸天冬氨酸酶-1 炎症小体

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柯里拉京抑制LPS和ATP激活的NLRP3炎症小体和巨噬细胞焦亡 被引量：5

5

作者 罗甜裕 周小艺 +3 位作者 秦敏燕 张莹 潘浩 黄晓迪 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期296-304,共9页

目的探讨柯里拉京对细菌脂多糖(LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的调控作用和机制。方法采用CCK8试剂检测不同浓度柯里拉京对J774A.1细胞活力的影响;碘化丙啶(PI)染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放... 目的探讨柯里拉京对细菌脂多糖(LPS)联合腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的调控作用和机制。方法采用CCK8试剂检测不同浓度柯里拉京对J774A.1细胞活力的影响;碘化丙啶(PI)染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放检测柯里拉京对LPS+ATP诱导的细胞死亡的影响。Western blot法检测细胞上清液中炎症小体活化标志物caspase-1 p20(Mr20000)和成熟IL-1β(Mr17000)的表达水平,以及检测细胞内NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β前体(pro-IL-1β)和焦亡执行蛋白GSDMD的表达。ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β的水平。活性氧(ROS)荧光探针H2DCFDA染色观察柯里拉京对ROS产生的影响。结果柯里拉京浓度小于40μmol·L-1时对细胞活性影响较小。柯里拉京减少LPS+ATP刺激的细胞内PI阳性细胞的比例和LDH的释放。柯里拉京抑制LPS+ATP刺激的巨噬细胞内GSDMD蛋白N末端(GSDMD-NT)的表达,以及减少细胞释放caspase-1 p20和成熟IL-1β到培养上清。柯里拉京抑制细胞分泌炎症因子IL-1β和减少ROS的产生。然而ROS的诱导剂鱼藤酮能拮抗柯里拉京抑制NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡的作用。结论柯里拉京抑制LPS+ATP诱导的巨噬细胞内NLRP3炎症小体活化和细胞焦亡依赖于抗氧化作用。 展开更多

关键词 柯里拉京 巨噬细胞 NLRP3炎症小体 细胞焦亡 抗氧化

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雪胆素甲通过破坏微丝结构诱导LPS活化的RAW264.7细胞凋亡 被引量：8

6

作者 何健 徐丽慧 +2 位作者 乔静 欧阳东云 何贤辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期553-557,共5页

目的分析雪胆素甲(CuIIa)对脂多糖(LPS)活化的RAW264.7巨噬细胞的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法MTS法检测CuIIa对RAW264.7细胞增殖的作用,相差显微镜观察CuIIa对LPS活化的细胞形态的影响,荧光显微镜观察CuIIa对细胞骨架的... 目的分析雪胆素甲(CuIIa)对脂多糖(LPS)活化的RAW264.7巨噬细胞的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制。方法MTS法检测CuIIa对RAW264.7细胞增殖的作用,相差显微镜观察CuIIa对LPS活化的细胞形态的影响,荧光显微镜观察CuIIa对细胞骨架的影响,流式细胞仪检测亚二倍体(凋亡)峰的变化,免疫印迹检测Cleaved caspase-3、生存素以及G-actin与F-actin的变化。结果 CuIIa能明显抑制RAW264.7细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,但单独CuIIa不能有效诱导细胞凋亡。CuIIa使LPS活化的伸展细胞收缩变圆,伪足突起消失,G-actin水平下降,细胞内发生严重的Actin聚集,说明微丝结构被破坏。随着CuIIa浓度的增加,其诱导LPS活化的RAW264.7细胞处于sub-G0/G1(凋亡峰)的数量明显增加。免疫印迹分析显示CuIIa使Caspase-3明显活化,生存素急剧下降。结论 CuIIa可能通过引起Actin聚集而破坏微丝细胞骨架,诱导LPS活化的RAW264.7细胞发生凋亡,从而发挥其抗炎效应。 展开更多

关键词 雪胆素甲 RAW264.7 细胞凋亡 生存素 微丝

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葫芦素E对脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响及作用机制 被引量：8

7

作者 乔静 徐丽慧 +2 位作者 何健 欧阳东云 何贤辉 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期327-332,共6页

分析葫芦素E(CuE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响,研究其抗炎作用的分子机制。采用改良MTT法检测RAW264.7细胞的增殖;以碘化丙锭染色检测CuE对细胞周期的影响;采用细胞内细胞因子染色法分析肿瘤坏死因子(TNF-α... 分析葫芦素E(CuE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响,研究其抗炎作用的分子机制。采用改良MTT法检测RAW264.7细胞的增殖;以碘化丙锭染色检测CuE对细胞周期的影响;采用细胞内细胞因子染色法分析肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达;免疫荧光染色分析胞内Actin的结构;应用免疫印迹法检测CuE对G-肌动蛋白(G-ac-tin)及核转录因子NF-κB核转位的影响。实验结果显示CuE对RAW264.7细胞的增殖具有剂量依赖性抑制作用,并降低细胞内G-actin的水平;CuE明显阻止LPS诱导的细胞伸展和伪足形成,使细胞周期阻滞于G2/M期。同时,CuE还明显抑制LPS活化的RAW264.7细胞表达促炎因子TNF-α,并显著降低LPS诱导的转录因子NF-κB的核转位作用。这些结果表明,CuE通过破坏RAW264.7巨噬细胞的肌动蛋白细胞骨架,引起细胞周期阻滞,并抑制LPS诱导的NF-κB核转位以及TNF-α的表达,从而发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 葫芦素E RAW264.7细胞 脂多糖 肌动蛋白细胞骨架 核转录因子(NF-κB)

原文传递

胡椒碱与棉酚联用对前列腺癌DU145细胞生长抑制的协同作用 被引量：5

8

作者 曾龙辉 徐丽慧 +3 位作者 何贤辉 欧阳东云 张延亭 任帅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1101-1105,共5页

目的研究胡椒碱与棉酚联合用药对激素非依赖型前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用及其机制。方法 MTS比色法检测细胞活性;流式细胞术分析细胞周期;免疫印迹法检测细胞周期相关蛋白以及CYP3A4的表达。结果胡椒碱本身的细胞毒性较小,但与棉... 目的研究胡椒碱与棉酚联合用药对激素非依赖型前列腺癌DU145细胞生长的抑制作用及其机制。方法 MTS比色法检测细胞活性;流式细胞术分析细胞周期;免疫印迹法检测细胞周期相关蛋白以及CYP3A4的表达。结果胡椒碱本身的细胞毒性较小,但与棉酚联用时,表现出协同作用。棉酚对细胞的半数抑制浓度IC50由单用时的21.00μmol·L-1下降到联合用药时的8.07μmol·L-1;两药相互作用指数CDI<1。胡椒碱与棉酚联合用药,可引起细胞G0/G1期阻滞和亚二倍体峰(凋亡峰)增加;同时上调细胞周期抑制蛋白p21Cip1的表达,并下调Cyclin D1、Cyclin A、CyclinB1以及药物代谢酶CYP3A4的表达。结论胡椒碱与棉酚联用,可能是通过诱导细胞周期阻滞,增强凋亡以及抑制CYP3A4药物代谢酶活性,发挥其协同抗前列腺癌作用。 展开更多

关键词 胡椒碱 棉酚 前列腺癌细胞DU145 协同作用 细胞周期 CYP3A4

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葫芦素E抑制HeLa细胞mTORC1的活性并诱导细胞自噬 被引量：3

9

作者 张晓钰 徐丽慧 +4 位作者 赵高翔 潘浩 周单 欧阳东云 何贤辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期807-811,共5页

目的研究葫芦素E诱导HeLa细胞发生细胞自噬的作用机制。方法改良MTT法测定葫芦素E对HeLa细胞增殖的影响,免疫印迹法检测mTORC1下游信号蛋白的磷酸化以及自噬相关蛋白的表达。结果葫芦素E对HeLa细胞增殖有剂量依赖性抑制作用,其24 h的IC5... 目的研究葫芦素E诱导HeLa细胞发生细胞自噬的作用机制。方法改良MTT法测定葫芦素E对HeLa细胞增殖的影响,免疫印迹法检测mTORC1下游信号蛋白的磷酸化以及自噬相关蛋白的表达。结果葫芦素E对HeLa细胞增殖有剂量依赖性抑制作用,其24 h的IC50为4.01μmol·L-1。通过对mTORC1底物磷酸化水平的检测发现,葫芦素E对p70S6K的磷酸化(活化)作用有明显的剂量和时间依赖性抑制作用。同时,葫芦素E增加自噬小体标志物LC3-Ⅱ的表达,氯喹能进一步提高其水平;葫芦素E还能降低p62/SQSTM1的水平,表明诱导了完整的细胞自噬过程。细胞自噬的诱导与mTORC1下游底物ULK1S757磷酸化水平的下降有正相关性。结论葫芦素E可能通过抑制mTORC1活性而诱导细胞发生自噬作用。 展开更多

关键词 葫芦素E mTORC1 LC3-Ⅱ P70S6K HELA细胞 细胞自噬

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胡椒碱抑制LPS活化的人结肠腺癌细胞SW480表达IL-8的作用机制研究 被引量：2

10

作者 侯小凤 潘浩 +3 位作者 徐丽慧 查庆兵 何贤辉 欧阳东云 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期957-961,共5页

目的研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)活化的人结肠腺癌细胞SW480表达炎症因子的调节效应及可能的作用机制。方法采用WST-1法检测PIP对SW480细胞增殖的作用,利用流式微球捕获蛋白定量技术(cytometric beads array,CBA)检测炎症因... 目的研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)活化的人结肠腺癌细胞SW480表达炎症因子的调节效应及可能的作用机制。方法采用WST-1法检测PIP对SW480细胞增殖的作用,利用流式微球捕获蛋白定量技术(cytometric beads array,CBA)检测炎症因子的蛋白表达水平,以实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子mRNA的表达水平,免疫印迹法检测p38MAPK信号通路和JNK信号通路的活化水平。结果 PIP处理可剂量依赖性地抑制SW480细胞的增殖,但PIP对细胞的毒性较小;CBA检测结果显示PIP以剂量依赖性方式抑制LPS诱导的SW480细胞中IL-8的分泌;实时定量RT-PCR检测显示,LPS+PIP处理组与LPS刺激组相比,IL-8的mRNA表达水平明显下降;免疫印迹分析表明,PIP可抑制LPS诱导的p38和JNK MAPK信号通路的活化水平。结论 PIP能够抑制LPS激活的人结肠腺癌细胞SW480中IL-8的分泌从而发挥抗炎作用,其机制可能与抑制p38和JNK MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 胡椒碱 SW480细胞 LPS IL-8 MAPK信号通路

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伊立替康对RAW264．7巨噬细胞增殖和细胞凋亡的影响 被引量：2

11

作者 黄美云 潘浩 +5 位作者 徐丽慧 侯小凤 查庆兵 施资坚 何贤辉 欧阳东云 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期776-780,共5页

目的分析抗肿瘤药伊立替康(CPT-11)对RAW 264.7巨噬细胞增殖及细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法WST-1法检测CPT-11对RAW 264.7细胞增殖的作用,倒置显微镜观察CPT-11对RAW 264.7细胞形态的影响,Hoechst33342染细胞核观察RAW 264.7... 目的分析抗肿瘤药伊立替康(CPT-11)对RAW 264.7巨噬细胞增殖及细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法WST-1法检测CPT-11对RAW 264.7细胞增殖的作用,倒置显微镜观察CPT-11对RAW 264.7细胞形态的影响,Hoechst33342染细胞核观察RAW 264.7细胞的核形态,流式细胞术检测亚二倍体(凋亡峰)的变化,免疫印迹法检测Caspase-3活化、PARP及细胞周期相关蛋白的变化。结果 CPT-11能明显抑制RAW 264.7细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性。在CPT-11作用下RAW 264.7细胞体积增大,细胞核增大,部分细胞发生核碎裂(细胞凋亡),并且原本贴壁生长、具有伪足的细胞变圆脱落。流式细胞术结果也显示,CPT-11可诱导RAW 264.7细胞产生亚二倍体峰(凋亡细胞),且细胞凋亡率呈浓度依赖性上升。同时,处于G2/M期细胞也明显增多,且呈浓度依赖性。免疫印迹分析显示,CPT-11可活化Caspase-3,使PARP水平下降,同时上调细胞周期蛋白Cyclin B1,下调Cyclin D1的表达。结论伊立替康通过诱导细胞周期阻滞而抑制RAW 264.7细胞增殖,通过激活Caspase-3通路诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 伊立替康 RAW 264.7 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡

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雷帕霉素对LPS刺激RAW264.7细胞炎症因子TNF-α和IL-1β表达的影响 被引量：1

12

作者 潘浩 徐丽慧 +4 位作者 宋方茗 王遥 曾龙辉 何贤辉 欧阳东云 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期387-392,共6页

探讨雷帕霉素(RAPA)对LPS诱导的小鼠RAW 264.7巨噬细胞炎症因子表达的调节效应及可能机制。采用胞内细胞因子染色法检测炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,以RT-PCR检测细胞因子mRNA水平,免疫印迹法检测mTOR底物(4E-BP1、p70S6K和AKT)及NF-... 探讨雷帕霉素(RAPA)对LPS诱导的小鼠RAW 264.7巨噬细胞炎症因子表达的调节效应及可能机制。采用胞内细胞因子染色法检测炎症因子TNF-α和IL-1β的表达,以RT-PCR检测细胞因子mRNA水平,免疫印迹法检测mTOR底物(4E-BP1、p70S6K和AKT)及NF-κB的活化水平。结果显示,RAPA上调LPS诱导的细胞内TNF-α和IL-1β蛋白的表达,低浓度RAPA时上调效应更为显著。在mRNA水平,LPS+RAPA处理组与LPS刺激组相比,在LPS刺激1h和6h时,TNF-α和IL-1β的mRNA表达水平没有显著差异,低浓度RAPA预处理组与高浓度RAPA预处理组之间也没有明显差异。同时,LPS激活细胞内mTOR信号通路,RAPA处理可完全抑制p70S6K的活化(磷酸化),却上调4E-BP1和AKT的磷酸化,且低浓度RAPA的上调效应显著高于高浓度RAPA。此外,低浓度RAPA还上调LPS诱导NF-κB(p65)的活性。结果表明,RAPA浓度依赖性上调LPS激活的炎症因子表达可能与其差异调控mTOR下游底物和NF-κB信号通路有关。 展开更多

关键词 雷帕霉素 细菌脂多糖 RAW 264 7细胞 细胞因子 免疫调节

原文传递

葫芦素E对人外周血单个核细胞体外活化及细胞因子表达的影响 被引量：1

13

作者 王力先 张晓钰 +3 位作者 潘浩 徐丽慧 欧阳东云 何贤辉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期368-373,共6页

目的:分析葫芦素E(Cuc E)对二丁酸佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激的人外周血单个核细胞(PBMC)活化及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制.方法:利用流式细胞术分析人外周血PBMC活化抗原CD69和CD25表达,用流式微球陈... 目的:分析葫芦素E(Cuc E)对二丁酸佛波醇酯(PDB)和离子霉素(Ion)刺激的人外周血单个核细胞(PBMC)活化及促炎因子表达的影响,探讨其潜在的抗炎效应及作用机制.方法:利用流式细胞术分析人外周血PBMC活化抗原CD69和CD25表达,用流式微球陈列检测白介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(IFN-γ)表达的变化.结果:Cuc E能明显抑制PDB和Ion刺激引起的CD3+T细胞早期活化标志分子CD69和中期活化分子CD25的表达;同时,Cuc E以剂量依赖方式抑制PDB和Ion诱导的IL-2、TNF-α和IFN-γ的表达.结论:Cuc E对人外周血CD3+T细胞的活化具有明显抑制作用,同时减少炎症相关细胞因子的表达,提示其通过对适应性免疫的调控发挥抗炎效应. 展开更多

关键词 葫芦素E 人外周血单个核细胞 CD69 CD25 细胞因子

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氯化钴对人的eNOS基因启动子SP1改构体转录活性的影响 被引量：3

14

作者 杨云华 樊振华 邢飞跃 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期124-129,共6页

目的:构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子,利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性的变化.方法:用不同剂量的氯化钴体外处理细胞复制缺氧模型,PCR点突变技术构建突变启动子pGL2-eNOS-... 目的:构建改造的人血管内皮细胞一氧化氮合酶(eNOS)基因启动子,利用氯化钴诱导的人脐静脉血管内皮细胞-12缺氧模型研究其基因启动子活性的变化.方法:用不同剂量的氯化钴体外处理细胞复制缺氧模型,PCR点突变技术构建突变启动子pGL2-eNOS-insSP1,分别将pGL2-eNOS-insSP1和pGL2-eNOS-p载体导入HUVEC-12细胞,双荧光素酶报告基因技术用于检测启动子转录活性的变化.结果:DNA测序显示人的eNOS基因启动子SP1改构体的序列正确;改构体eNOS启动子活性在一定范围内随氯化钴刺激剂量的增加而升高.结论:SP1插入改造的方法显著提高了eNOS基因启动子的转录活性. 展开更多

关键词 HUVEC-12 细胞 氯化钴 一氧化氮合成酶 SP1

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胡椒碱对脂多糖和金黄色葡萄球菌抑制人结肠腺癌细胞系表达防御素的拮抗作用

15

作者 侯小凤 潘浩 +2 位作者 徐丽慧 何贤辉 欧阳东云 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期102-107,共6页

目的:研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)和灭活金黄色葡萄球菌(SAC)菌体抑制人结肠腺癌HT-29和Caco-2细胞表达防御素(Defensin)的影响.方法:WST-1法检测PIP对HT-29和Caco-2细胞增殖的作用;定量PCR(qRT-PCR)检测人α防御素DEFA5(HD5... 目的:研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)和灭活金黄色葡萄球菌(SAC)菌体抑制人结肠腺癌HT-29和Caco-2细胞表达防御素(Defensin)的影响.方法:WST-1法检测PIP对HT-29和Caco-2细胞增殖的作用;定量PCR(qRT-PCR)检测人α防御素DEFA5(HD5)和DEFA6(HD6),人β防御素HBD-1以及胰岛再生源蛋白(Reg)Reg IIIγ等mRNA的表达水平.结果:PIP处理可剂量依赖性地抑制HT-29和Caco-2细胞的增殖,半数抑制浓度IC50分别为328.5μmol/L和155.1μmol/L,表明PIP对细胞的毒性较小;定量PCR检测显示,PIP处理对LPS或SAC下调HT-29和Caco-2细胞DEFA5和DEFA6 mRNA表达水平具有显著的拮抗作用,对DEFB1和Reg IIIγmRNA的表达没有明显影响.结论:胡椒碱可能通过拮抗病原体诱导细胞表达防御素的抑制作用,进而发挥其抗肠炎作用. 展开更多

关键词 胡椒碱 HT-29 细胞 CACO-2 细胞 LPS SAC 人防御素 抗菌肽

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氯喹对金黄色葡萄球菌激活的RAW264.7巨噬细胞表达TNF-α的影响

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作者 周单 徐丽慧 +3 位作者 潘浩 张晓钰 欧阳东云 何贤辉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期574-577,共4页

目的分析氯喹(CQ)对灭活金黄色葡萄球菌(SAC)刺激活化的RAW264.7巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,探讨其对革兰氏阳性菌引起的炎症反应的潜在作用及机制。方法采用细胞内细胞因子染色法分析胞内TNF-α的表达,利用流式微球阵... 目的分析氯喹(CQ)对灭活金黄色葡萄球菌(SAC)刺激活化的RAW264.7巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响,探讨其对革兰氏阳性菌引起的炎症反应的潜在作用及机制。方法采用细胞内细胞因子染色法分析胞内TNF-α的表达,利用流式微球阵列法检测细胞培养上清中TNF-α的表达,应用定量RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达水平,免疫印迹法分析NF-κB信号通路的活化以及TNF-α前体的表达。结果 CQ明显抑制SAC激活的RAW264.7巨噬细胞分泌可溶性TNF-α,而细胞内TNF-α表达水平提高。定量RT-PCR显示CQ对TNF-α的mRNA水平没有影响;与此相一致,CQ对调控其转录的关键信号通路NF-κB p65的磷酸化水平影响不大。然而,免疫印迹分析表明,CQ使SAC诱导的Mr26 000和28 000 TNF-α前体蛋白的表达水平显著升高。结论 CQ通过抑制TNF-α从膜结合的Mr26 000和28 000前体蛋白转变为可溶性成熟蛋白的加工过程而抑制该炎症细胞因子的分泌,从而发挥其抗炎效应。 展开更多

关键词 氯喹 RAW264 7 肿瘤坏死因子 金黄色葡萄球菌

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组蛋白去乙酰化酶6介导血清饥饿条件下LC3B-Ⅱ的去乙酰化作用

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作者 刘坤鹏 王遥 +3 位作者 徐丽慧 潘浩 欧阳东云 何贤辉 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期517-521,共5页

自噬是哺乳动物细胞内控制错误折叠蛋白和受损细胞器降解的重要机制,营养、氨基酸以及细胞因子的缺乏均能诱导自噬.在自噬的信号通路中,一些自噬蛋白已被证明受到乙酰化修饰的调控,进而影响其催化活性的发挥.但是没有研究证明微管结合蛋... 自噬是哺乳动物细胞内控制错误折叠蛋白和受损细胞器降解的重要机制,营养、氨基酸以及细胞因子的缺乏均能诱导自噬.在自噬的信号通路中,一些自噬蛋白已被证明受到乙酰化修饰的调控,进而影响其催化活性的发挥.但是没有研究证明微管结合蛋白1轻链3(LC3)是否受到乙酰化调控.该研究证明了在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ的乙酰化程度大幅降低.HDAC6特异性抑制剂tubacin处理细胞后,LC3B-Ⅱ的乙酰化修饰程度随之升高.同时,血清饥饿条件下,抑制HDAC6的催化活性降低了自噬通路的降解能力.该研究结果表明在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ发生去乙酰化,其去乙酰化调控蛋白可能是HDAC6,抑制HDAC6的催化活性会减少自噬途径蛋白的降解.HDAC6介导的LC3乙酰化修饰为自噬降解和自噬蛋白调控的研究提供了新思路. 展开更多

关键词 细胞自噬 LC3B—II 去乙酰化作用

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雪胆素乙诱导刀豆蛋白A刺激的小鼠淋巴细胞凋亡及其机制的研究 被引量：1

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作者 胡波 施资坚 +3 位作者 王遥 刘坤鹏 潘浩 尹良红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期509-513,共5页

目的:分析雪胆素乙(CuIIb)对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴细胞体外凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:以Annexin V染色结合流式细胞术分析小鼠淋巴细胞凋亡情况;利用JC-1染色分析淋巴细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测凋... 目的:分析雪胆素乙(CuIIb)对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴细胞体外凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:以Annexin V染色结合流式细胞术分析小鼠淋巴细胞凋亡情况;利用JC-1染色分析淋巴细胞线粒体膜电位变化;Western blotting检测凋亡相关蛋白变化。结果:CuIIb处理后,早期和中期凋亡细胞比例明显增加,淋巴细胞线粒体膜电位降低。同时,CuIIb以剂量依赖方式激活caspase-3凋亡通路并明显降低抗凋亡蛋白survivin的表达。结论:CuIIb诱导淋巴细胞凋亡,其机制可能与其降低线粒体膜电位、激活caspase-3凋亡通路有关。 展开更多

关键词 雪胆素乙 淋巴细胞 刀豆蛋白A

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靶向作用G-四链体DNA的金属配合物的研究进展

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作者 夏钰 邢飞跃 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第3期300-304,共5页

富含鸟嘌呤(G)碱基DNA能够通过Hoogsteen氢键形成四螺旋结构,该结构被称为G-四链体。诱导端粒DNA形成G-四链体并稳定该结构能起到抑制端粒酶活性,从而达到促进肿瘤细胞凋亡的作用。近年来,G-四链体DNA已成为设计抗肿瘤药物的重要靶点,... 富含鸟嘌呤(G)碱基DNA能够通过Hoogsteen氢键形成四螺旋结构,该结构被称为G-四链体。诱导端粒DNA形成G-四链体并稳定该结构能起到抑制端粒酶活性,从而达到促进肿瘤细胞凋亡的作用。近年来,G-四链体DNA已成为设计抗肿瘤药物的重要靶点,文章综述铂(Ⅱ)配合物、钌(Ⅱ)配合物、镍(Ⅱ)配合物、铜(Ⅱ)配合物、锌(Ⅱ)配合物及其他金属配合物靶向作用G-四链体DNA的研究进展。 展开更多

关键词 G-四链体 端粒酶 抗肿瘤 金属配合物 铂 钌 镍 铜 锌

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脱细胞基质材料体外激活巨噬细胞的作用

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作者 徐斌 黄秀艳 +1 位作者 韦晓慧 曾耀英 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第47期7687-7692,共6页

背景:因巨噬细胞在机体炎症反应中有着举足轻重的作用,所以检测生物材料对巨噬细胞行为的影响,可评估材料的免疫原性。目的:分析脱细胞基质材料对巨噬细胞的激活作用。方法:获取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,分5组培养:对照组为单纯细胞培养... 背景:因巨噬细胞在机体炎症反应中有着举足轻重的作用,所以检测生物材料对巨噬细胞行为的影响,可评估材料的免疫原性。目的:分析脱细胞基质材料对巨噬细胞的激活作用。方法:获取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,分5组培养:对照组为单纯细胞培养组;实验1组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验2组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验3组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞间接接触培养,实验4组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞间接接触培养。培养48 h后,MTT法检测各组A值,判定毒性分级;培养24 h后,检测细胞培养上清中一氧化氮及细胞因子的分泌。结果与结论:实验1-4组毒性分别为2级、4级、0级及2级。实验1组、实验2组一氧化氮水平高于对照组(P<0.05),并且实验2组高于实验1组(P<0.05)。5组间白细胞介素2、白细胞介素4、干扰素γ、白细胞介素17A和白细胞介素10水平比较差异无显著性意义;实验2组白细胞介素6水平高于对照组(P<0.05);实验1组、实验2组、实验4组肿瘤坏死因子水平高于对照组(P<0.05),并且实验2组高于实验1组(P<0.05)、实验1组高于实验4组(P<0.05)。说明脱细胞基质材料可在直接接触时激活巨噬细胞。 展开更多

关键词 生物材料 材料相容性 细胞外基质 免疫原性 巨噬细胞 细胞因子 炎症

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