SiO2与超液化碘油联合诱导的小鼠肝脏纤维化模型 被引量：6

1

作者 张文斌 姜海平 +2 位作者 张海伟 郭国庆 马秀君 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期622-624,共3页

目的:探讨建立小鼠肝脏局部纤维化动物模型的方法及其可能机制。方法:C57BL/6 J小鼠24只随机分成3组:实验对照组(生理盐水)、碘油组(超液化碘油)、混和液组[超液化碘油+二氧化硅(S iO2)],分别用生理盐水、超液化碘油及混和液各0.2 mL局... 目的:探讨建立小鼠肝脏局部纤维化动物模型的方法及其可能机制。方法:C57BL/6 J小鼠24只随机分成3组:实验对照组(生理盐水)、碘油组(超液化碘油)、混和液组[超液化碘油+二氧化硅(S iO2)],分别用生理盐水、超液化碘油及混和液各0.2 mL局部注射小鼠右肝,3个月后观察注射局部病理变化,并比较变性坏死、纤维化及细胞和纤维化结节的面积差异,测量血清免疫球蛋白M(IgM)的变化。结果:3组注射局部肉眼观察无明显差别;HE染色镜下观察,3组小鼠注射局部变性坏死面积不同,其中混和液组引起局部变性坏死面积最大(P<0.01);混和液组与碘油组两两比较变性坏死面积无显著差异(P>0.05);在混和液组可见肝脏组织局部的巨噬细胞结节和纤维细胞增生,局部纤维细胞增生较碘油组有显著差异(P<0.05);M asson染色法观察,在混合液组局部胶原纤维形成显著增多,占观察局部面积的10.8%±1.7%(P<0.01);而碘油组和对照组分别为4.8%±1.1%、2.3%±0.7%;3组小鼠血清IgM水平有差异(P<0.01),其中,混合液组最高[(314.7±10.7)mg/L]。结论:S iO2与超液化碘油联合应用可以选择性诱导小鼠肝脏纤维化,同时伴发体液免疫因子IgM的显著升高。 展开更多

关键词 二氧化硅 肝硬化 碘化油 小鼠 免疫球蛋白M 模型 动物

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Jagged1在树突状细胞介导淋巴细胞诱导皮肤移植免疫耐受中的作用

2

作者 陈玲 邢飞跃 +2 位作者 狄静芳 陈笛 廖继东 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期147-151,共5页

目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmI... 目的:探讨Jagged1在树突状细胞(DC)介导淋巴细胞诱导同种异基因皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:C57BL/6小鼠为供体,BALB/c小鼠为受体行皮肤移植术,受体小鼠分为对照组,Jagged1+DAPT处理组和Jagged1处理组。取供体小鼠淋巴细胞加入经rmIL-4和rmGM-CSF处理9 d的供体骨髓细胞中,当日和隔日分别加入Jagged1和DAPT。2 d后取淋巴细胞,于皮肤移植第0天、第2天和第4天,经尾静脉注入受体小鼠。观察皮肤移植物存活时间和移植物病理变化,并检测受体小鼠混合淋巴细胞反应和迟发型超敏反应。结果:Jagged1处理组的皮肤移植物平均存活83.6 d,显著长于其它各组(P<0.01);Jagged1处理组移植皮片内浸润的炎细胞数量明显减少;在混合淋巴细胞反应中,Jagged1处理组小鼠对供体小鼠呈现低反应性(P<0.01),而对第三方无关供体KM小鼠表现强烈的增殖反应,Jagged1处理组小鼠在迟发型超敏反应中也表现出显著的低反应性(P<0.01)。结论:输注Jagged1联合DC处理的淋巴细胞诱导受体获得供体抗原特异性的免疫耐受。 展开更多

关键词 JAGGED1 树突状细胞 淋巴细胞 骨髓细胞 皮肤移植

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血清miR-21联合尿微量白蛋白、尿微量白蛋白与尿肌酐比值诊断糖尿病肾病的价值 被引量：23

3

作者 朱炳铭 吴勇 +1 位作者 余权 温旺荣 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期318-323,共6页

目的通过分析血清miR-21（SmiR-21）联合尿微量白蛋白（UmAlb）和尿微量白蛋白与尿肌酐比值（UmAlb/Ucr）的受试者工作曲线（ROC）及逐步Logistic回归拟合曲线,探讨3项指标对糖尿病肾病的联合诊断价值.方法：对25例糖尿病肾病患者、25... 目的通过分析血清miR-21（SmiR-21）联合尿微量白蛋白（UmAlb）和尿微量白蛋白与尿肌酐比值（UmAlb/Ucr）的受试者工作曲线（ROC）及逐步Logistic回归拟合曲线,探讨3项指标对糖尿病肾病的联合诊断价值.方法：对25例糖尿病肾病患者、25例II型糖尿病患者A（UmAlb〈14.29 μg/mL）、25例II型糖尿病患者B（UmAlb〉14.29 μg/mL）及25例正常对照组的血清进行实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）、生化检测,尿标本进行化学发光检测,获得SmiR-21、尿肌酐、尿微量白蛋白的水平,通过ROC曲线分析和逐步Logistic回归结果的受试者工作曲线下面积（AUC）,对3项指标的单一及联合方式的敏感性、特异性进行比较分析. 结果SmiR-21、UmAlb和UmAlb/Ucr在糖尿病肾病组的水平与糖尿病A、B组及正常对照组差异显著（均P〈0.05）.逐步Logistic回归曲线联合3项指标预测概率的AUC为0.846 （95%CI：0.754~0.937）均高于单一指标的AUC,敏感性为80%. 结论基于Logistic回归的ROC曲线分析可以进一步增强诊断的准确性（81.3%）.miR-21、UmAlb和UmAlb/Ucr 3者联合检测是更具优势的诊断糖尿病肾病的组合. 展开更多

关键词 血清miR-21 尿微量白蛋白 尿肌酐 糖尿病肾病 联合诊断

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GHRL及其受体GHSR基因多态性与鸭生长及屠体性状的关联性 被引量：16

4

作者 方梅霞 李莹 +5 位作者 徐海平 谢亮 廖新俤 梁敏 聂庆华 张细权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期18-24,共7页

本研究旨在分析GHRL和GHSR基因部分SNP和单倍型与鸭生长和屠体性状的关联性。试验以三水白鸭为材料,利用PCR-RFLP方法检测GHRL基因C-729T、T+985C和GHSR基因T404C、G3427A共4个SNPs位点的多态性,构建单倍型,进行方差分析。结果表明,C-7... 本研究旨在分析GHRL和GHSR基因部分SNP和单倍型与鸭生长和屠体性状的关联性。试验以三水白鸭为材料,利用PCR-RFLP方法检测GHRL基因C-729T、T+985C和GHSR基因T404C、G3427A共4个SNPs位点的多态性,构建单倍型,进行方差分析。结果表明,C-792T与21、28、35和49日龄体质量、全净膛质量、胸腺质量显著相关(P<0.05),CT基因型杂合子优势明显;T404C与腿肌和脾脏质量显著相关(P<0.05),TT基因型个体均值显著高于CC和TC型个体;G3427A与35日龄体质量、49日龄体质量、屠体质量、半净膛质量、全净膛质量和翅质量显著相关(P<0.05),AA基因型是较为优势的基因型;T+985C与各生长、屠体性状都不相关(P>0.05)。所构建的单倍型与单个SNP的分析结果较为一致,表明这3个SNPs是鸭生长和屠体性状的重要分子标记。 展开更多

关键词 鸭 GHRELIN GHSR 生长性状 屠体性状 关联分析

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疏肝健脾方对NASH大鼠肝组织IKKβmRNA和蛋白表达的影响 被引量：8

5

作者 魏波 杨钦河 +11 位作者 王文晶 胡巢凤 方梅霞 刑会杰 张玉佩 程少冰 王彦平 冯高飞 何秀敏 徐拥建 闫海震 黄进 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1448-1454,共7页

目的:探讨疏肝健脾方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子κB(NF-κB)抑制蛋白激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠实验模型,在施以造模因素的同时各药物干预组大鼠分别灌服疏肝方(柴胡疏肝... 目的:探讨疏肝健脾方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝组织核因子κB(NF-κB)抑制蛋白激酶β(IKKβ)mRNA和蛋白表达的影响。方法:采用高脂饲料喂养建立NASH大鼠实验模型,在施以造模因素的同时各药物干预组大鼠分别灌服疏肝方(柴胡疏肝散)、健脾方(参苓白术散)和综合方(柴胡疏肝散和参苓白术散的合方)的高、低剂量进行干预,16周后各组大鼠腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及肝组织TC、TG的含量;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及白细胞介素1(IL-1)的水平;HE染色观察肝组织病理变化;实时荧光定量RT-PCR检测肝组织IKKβmRNA的表达水平;Western blotting检测肝组织IKKβ蛋白磷酸化水平的变化。结果:肝组织病理染色提示大鼠NASH造模成功,与正常组比较,模型组大鼠血清TC、LDL-C、肝组织TC、TG及炎症细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6水平均显著升高(P<0.01,P<0.05),肝组织IKKβmRNA及其磷酸化蛋白的表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,肝组织TC、TG含量及血清TNF-α的含量以综合方高、低剂量组、健脾方高剂量组及疏肝方高剂量组下降显著(P<0.01,P<0.05);IL-1和IL-6含量均以综合方高剂量组降低显著(P<0.05),IKKβmRNA的表达水平以综合方高组及健脾方高组下调明显(P<0.05),磷酸化IKKβ蛋白的表达水平以健脾方高剂量组及综合方高、低剂量组下降最为显著(P<0.01,P<0.05)。结论:血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1和IL-6水平的显著升高、肝组织IKKβmRNA及其磷酸化蛋白的高表达可能参与NASH的发病。降低相关炎症细胞因子的含量、抑制IKKβmRNA及蛋白磷酸化可能是疏肝健脾方抗NASH的重要机制之一。 展开更多

关键词 非酒精性脂肪性肝炎 疏肝健脾方 IΚB激酶 大鼠

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DRD2基因14个多态位点与鸡产蛋性状的相关性 被引量：9

6

作者 徐海平 周敏 +4 位作者 方梅霞 曾华 聂庆华 张德祥 张细权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期944-950,共7页

本研究旨在分析DRD2基因与鸡产蛋性状的相关性,寻找可作为鸡产蛋性状的重要标记。在该基因上选取了14个多态位点,采用PCR-RFLP及PCR测序等方法在宁都三黄鸡母系644个个体中进行了鸡产蛋性状的关联分析。结果表明:位于该基因5′调控区的... 本研究旨在分析DRD2基因与鸡产蛋性状的相关性,寻找可作为鸡产蛋性状的重要标记。在该基因上选取了14个多态位点,采用PCR-RFLP及PCR测序等方法在宁都三黄鸡母系644个个体中进行了鸡产蛋性状的关联分析。结果表明:位于该基因5′调控区的4个突变位点G-38560C、T-38326G、T-32751C和A-16105G与鸡的开产日龄显著或极显著(P<0.05或P<0.01)相关,位点A-16105G还与300日龄总产蛋数显著相关(P<0.05);由G-38560C、G-38544A、I-38463D与T-38326G这4个位点组成的单倍型块与开产日龄呈极显著相关(P=0.006 5<0.01)。研究结果提示:G-38560C、T-38326G、T-32751C和A-16105G这4个突变位点以及由G-38560C、G-38544A、I-38463D与T-38326G组成的单倍型块可作为产蛋性状标记辅助选择的有效分子标记。 展开更多

关键词 DRD2基因 多态位点 单倍型 产蛋性状

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应用脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究 被引量：7

7

作者 黄华梅 谢德明 罗洁芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期792-796,共5页

目的:采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料,接种人脐带血管内皮细胞,构建组织工程血管。方法:以新鲜猪胸主动脉为原材料,1% Triton X-100为脱细胞试剂,制备脱细胞血管基质;采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性... 目的:采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料,接种人脐带血管内皮细胞,构建组织工程血管。方法:以新鲜猪胸主动脉为原材料,1% Triton X-100为脱细胞试剂,制备脱细胞血管基质;采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性,并进行组织学观察及力学性能测定。用人脐带内皮细胞经培养和扩增后,再与所制备的脱细胞血管基质进行复合培养,光学显微镜及扫描电镜观察内皮细胞生长状况。结果:1%TritonX-100处理84h的猪胸主动脉,既能完全脱除血管中细胞,同时又完整保留血管基质的三维结构;对脱细胞血管基质冷冻干燥24h,120℃下热交联12h,能有效提高材料的机械强度,断裂强度可达到1.70MPa。扫描电镜下可见,脱细胞血管基质与内皮细胞复合培养7d,已形成典型血管内膜样结构。结论:经改性后的脱细胞血管基质与内皮细胞具有良好的相容性,用其作为支架材料与内皮细胞复合培养,有望应用于构建组织工程化血管。 展开更多

关键词 脱细胞基质 内皮细胞 组织工程 血管

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下丘脑-垂体-性腺轴上基因多态性与鸡冠高和体重的相关性分析 被引量：8

8

作者 徐海平 曾华 +3 位作者 周敏 方梅霞 沈栩 张细权 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期4-7,共4页

鸡冠高及体重是优质鸡早熟性选育过程中重要的参考指标,通过研究鸡多个侯选基因上突变位点与冠高和体重的相关性,寻找可作为该性状标记辅助选择的重要标记。在GnRH-I、GnRHR、NPY、DRD2、VIP、VIPR-1和PRL这7个侯选基因上共选取了10个... 鸡冠高及体重是优质鸡早熟性选育过程中重要的参考指标,通过研究鸡多个侯选基因上突变位点与冠高和体重的相关性,寻找可作为该性状标记辅助选择的重要标记。在GnRH-I、GnRHR、NPY、DRD2、VIP、VIPR-1和PRL这7个侯选基因上共选取了10个多态位点,采用PCR-RFLP方法对1 310只宁都三黄鸡进行了基因型检测,并对各位点与77、84、91日龄冠高和体重性状的相关性进行了分析。结果表明:NPY基因上的2个位点I31391359D及C31394761T可作为91日龄体重标记辅助选择的有效分子标记;VIPR-1基因上的位点A1661691G可作为77、84日龄冠高的有效分子标记。 展开更多

关键词 鸡 候选基因 多态位点 冠高 体重

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巨噬细胞毒素用于降低CBA/J×DBA/2小鼠胚胎吸收率 被引量：4

9

作者 林羿 曾耀英 +4 位作者 曾山 狄静芳 詹美意 关洁宾 全世明 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2002年第1期93-98,共6页

目的 :研究巨噬细胞毒素降低反复自然流产模型CBA/J×DBA/ 2小鼠胚胎吸收率的免疫机制 .方法 :在小鼠交配前腹腔注射变性蛋白质包被的二氧化硅颗粒 ,做为巨噬细胞毒素以去除巨噬细胞 ,观察胚胎吸收率和淋巴细胞亚群变化 ,进而分析... 目的 :研究巨噬细胞毒素降低反复自然流产模型CBA/J×DBA/ 2小鼠胚胎吸收率的免疫机制 .方法 :在小鼠交配前腹腔注射变性蛋白质包被的二氧化硅颗粒 ,做为巨噬细胞毒素以去除巨噬细胞 ,观察胚胎吸收率和淋巴细胞亚群变化 ,进而分析淋巴细胞浸润与妊娠结局的关系 .结果 :二氧化硅预处理组平均每窝活胎数显著增多 (6 3± 1 5vs 3 5± 1 0 ,P <0 0 1) ,胚胎吸收率则显著下降 (18 2 %vs .38 2 %,P <0 0 5 ) .与此相应 ,CD3+ CD6 9+ 、CD3+ CD71+ 细胞比率和CD4 5 +MHC -II+ 、CD80 + MHC -II+ 细胞比率均显著降低 .结论 :体内注射巨噬细胞毒素可以显著降低CBA/J×DBA/ 2小鼠母胎交界面活化型T细胞和某些巨噬细胞亚型的比率 ,并且这种变化与胚胎吸收率的下降相联系 . 展开更多

关键词 巨噬细胞毒素 BA/J×DBA/2小鼠 胚胎吸收率 反复自然流产 淋巴细胞亚群 母胎交界面 动物模型 免疫机制

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关于生物安全三级实验室管理体系构建的思考 被引量：3

10

作者 李勇 鲁凤民 +5 位作者 张凤民 傅江南 赖小敏 樊为民 邢文革 王建华 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第6期467-468,共2页

　　自2003年暴发SARS疫情以来,我国政府以及相关职能部门对境内病原微生物实验室的管理给予了高度重视,陆续从政府层面上出台了一系列法律、法规和相关标准,国务院各相关职能部门层面上提出了有关具体要求,明确了生物安全三级、四级实... 　　自2003年暴发SARS疫情以来,我国政府以及相关职能部门对境内病原微生物实验室的管理给予了高度重视,陆续从政府层面上出台了一系列法律、法规和相关标准,国务院各相关职能部门层面上提出了有关具体要求,明确了生物安全三级、四级实验室必须通过中国合格评定国家认可委员会的认可后方可使用的严格政策.…… 展开更多

关键词 生物安全 三级实验室 病原微生物 管理体系构建 国家认可 四级 体系规范 卫生系统 认可委员会 高压灭菌器

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多媒体技术对医学形态学科实验教学的影响 被引量：5

11

作者 黄华梅 曾靖容 《山西医科大学学报（基础医学教育版）》 2007年第4期463-464,共2页

随着计算机信息技术的迅猛发展,必然促使计算机多媒体技术在医学形态学科实验教学中的应用和发展。介绍了实验中心利用TIGER多媒体教学系统对相关医学形态学科的影响探讨。

关键词 形态学教学 多媒体技术 影响

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沙皮犬MC1R基因的克隆与序列分析 被引量：4

12

作者 刘满清 刘清神 +2 位作者 方梅霞 谢亮 聂庆华 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期127-130,共4页

黑素皮质素1型受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因在哺乳动物中具有调节细胞黑色素形成的作用,被认为是影响犬毛色的重要候选基因.用PCR技术对沙皮犬MC1R基因序列进行扩增,获得沙皮犬MC1R基因序列1 333 bp,包含完整的MC1R基因开... 黑素皮质素1型受体（melanocortin 1 receptor,MC1R）基因在哺乳动物中具有调节细胞黑色素形成的作用,被认为是影响犬毛色的重要候选基因.用PCR技术对沙皮犬MC1R基因序列进行扩增,获得沙皮犬MC1R基因序列1 333 bp,包含完整的MC1R基因开放阅读框954 bp,编码317个氨基酸.该序列与鸡、鼠、犬、人等6种动物MC1R基因CDS序列有70.1％～98.3％的同源性,相应氨基酸序列的同源性达61.1％～96.9％.系统发育树分析结果表明,沙皮犬与已报道的黄金猎犬亲缘最近,与鸡的亲缘关系最远。 展开更多

关键词 沙皮犬 黑素皮质素1型受体(MC1R)基因 序列分析

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应用猪主动脉脱细胞基质制备新型组织工程血管支架：生物相容性及力学性能评价(英文) 被引量：3

13

作者 吕玉明 黄华梅 +1 位作者 王秋玲 谢德明 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第47期8921-8926,共6页

背景:组织工程血管构建的关键依赖于理想的支架。猪血管作为组织工程血管构建材料已有广泛应用,但其较高的免疫原性及较差的力学强度限制了该材料作为组织工程支架的应用。目的:应用猪主动脉脱细胞基质制备一种新的具有良好机械性能及... 背景:组织工程血管构建的关键依赖于理想的支架。猪血管作为组织工程血管构建材料已有广泛应用,但其较高的免疫原性及较差的力学强度限制了该材料作为组织工程支架的应用。目的:应用猪主动脉脱细胞基质制备一种新的具有良好机械性能及生物相容性的组织工程血管支架。方法:对猪主动脉进行脱细胞处理和热交联改性制备脱细胞血管基质支架,采用苏木精-伊红染色及生物力学分析评估其脱细胞效果及血管基质的力学性能。将人脐静脉血管内皮细胞接种于脱细胞血管基质支架中进行体外培养,评估其生物相容性。结果与结论:用1%的TritonX-100溶液处理猪主动脉84h可完全脱除血管细胞,同时不破坏血管基质结构;经真空下120℃热交联处理12h,脱细胞基质的拉伸断裂强度得到明显提高,达到1.70MPa。在该改性血管基质支架上接种人脐带静脉内皮细胞体外培养7d,扫描电镜显示内皮细胞呈现典型的血管内皮层状结构。表明猪主动脉经过脱细胞处理能够维持血管基质完整,冷冻干燥和真空热交联处理可有效提高其拉伸强度,且对血管内皮细胞具有良好的相容性。 展开更多

关键词 猪主动脉 脱细胞基质 热交联 血管内皮细胞 组织工程血管

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GHRL基因5'侧翼区多态性对鸡生长和屠体性状的影响 被引量：4

14

作者 方梅霞 徐海平 +5 位作者 谢亮 梁伟涛 赖泽颖 张德祥 聂庆华 张细权 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2567-2574,共8页

【目的】分析GHRL基因5′侧翼区变异与鸡生长和屠体性状的相关性。【方法】以杏花鸡×隐性白洛克鸡F2代资源群体和2个随机群体为材料,利用PCR产物直接测序方法鉴别GHRL基因5′侧翼区包括A-2220C位点在内的6个SNPs在群体中的多态性,... 【目的】分析GHRL基因5′侧翼区变异与鸡生长和屠体性状的相关性。【方法】以杏花鸡×隐性白洛克鸡F2代资源群体和2个随机群体为材料,利用PCR产物直接测序方法鉴别GHRL基因5′侧翼区包括A-2220C位点在内的6个SNPs在群体中的多态性,构建单倍型,分析各SNP基因型和单倍型与鸡生长、屠体性状,以及与腺胃GHRL基因mRNA表达量和血浆GHRL活性蛋白含量的相关性,对鸡GHRL基因5′侧翼区的A-2220C位点进行凝胶阻滞电泳,以探讨该区段对基因转录的作用。【结果】标记-性状关联分析表明A-2220C仅与初生重显著相关(P<0.05),AA基因型个体初生重大于CC和AC基因型个体,差异显著(P<0.05);C-2399Del与56日龄体重、0—4周日增重、胸肌重、翅重显著相关(P<0.05),C Del基因型杂合子优势明显,与其它基因型差异显著(P<0.05)。构建单倍型分析表明单倍型分别与42日龄体重、70日龄体重、0—4周日增重、4—8周日增重、屠体重、半净膛重、全净膛重和胸肉重显著相关(P<0.05);与初生重、21日体重、28日体重、35日体重、49日龄体重、56日龄体重、宰前活重等极显著相关(P<0.01),单倍型组合H3H4(CCAAAC\CCAACDel)是各个显著相关性状中均值最高的优势单倍型组合。EMSA电泳发现含A等位基因的DNA片段能与转录因子特异的结合,初步证实本试验扩增片段对基因的转录存在一定作用。【结论】GHRL基因与鸡生长和屠体性状存在显著相关性。 展开更多

关键词 鸡 GHRELIN基因 生长性状 屠体性状 关联分析

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猪繁殖候选基因ERK2的电子克隆与生物信息学分析 被引量：3

15

作者 方梅霞 周晓宁 +3 位作者 沈栩 王亚军 聂庆华 张细权 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期11-15,22,共6页

利用生物信息学和比较基因组学方法对猪细胞外信号调节激酶2(Extracellular signal-regulated kinase 2,ERK2)基因的结构、表达和功能进行了分析,结果表明:(1)电子克隆获得的猪ERK2基因cDNA全长1 803 bp,包括1 080bp的编码区和200 bp 5&... 利用生物信息学和比较基因组学方法对猪细胞外信号调节激酶2(Extracellular signal-regulated kinase 2,ERK2)基因的结构、表达和功能进行了分析,结果表明:(1)电子克隆获得的猪ERK2基因cDNA全长1 803 bp,包括1 080bp的编码区和200 bp 5'UTR、523 bp 3'UTR,编码合成359个氨基酸的多肽;(2)猪ERK2基因CDS序列与人、小鼠和大鼠的同源性分别为94.6%、91.6%和91.3%,编码合成的猪ERK2与人、小鼠和大鼠之间的同源性也高达99.4%、98.9%和98.9%;(3)猪ERK2蛋白的相对分子质量为41 303.69 Da,不含信号肽,具有ATP结合位点、MAP激酶保守位点和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶活性位点等结构域;(4)基于cDNA及EST数据库的检索显示,猪ERK2基因在卵巢、睾丸、肾上腺、眼、肺、淋巴、关节囊、副乳、未成熟的树突状细胞和脂肪细胞等组织和细胞中表达。 展开更多

关键词 猪 ERK2基因 电子克隆 生物信息学

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GHSR基因三个SNP位点与鸡生产性状的关联性分析 被引量：2

16

作者 陈宇 方梅霞 +3 位作者 徐海平 谢亮 张德祥 聂庆华 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期9-12,共4页

根据已发表的鸡GHSR基因SNP位点,利用PCR-RFLP技术检测该基因C-1896A、C-1459T和A-1022C3个SNP位点在华南农业大学杏花鸡×隐性白洛克鸡全同胞F2代资源群体中的多态性,并构建单倍型,进行方差分析。结果表明,这3个SNP位点与其生长、... 根据已发表的鸡GHSR基因SNP位点,利用PCR-RFLP技术检测该基因C-1896A、C-1459T和A-1022C3个SNP位点在华南农业大学杏花鸡×隐性白洛克鸡全同胞F2代资源群体中的多态性,并构建单倍型,进行方差分析。结果表明,这3个SNP位点与其生长、屠体性状都不相关(P>0.05)。所构建的单倍型与单个SNP的分析结果一致,也与各生长、屠体性状都不相关(P>0.05)。表明这3个SNP不是鸡生长和屠体性状的重要分子标记。 展开更多

关键词 鸡 GHSR基因 生长性状 屠体性状 关联分析

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广东省家鹅mtDNA多样性及系统进化分析 被引量：3

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作者 何丹林 李伟民 +3 位作者 方梅霞 罗庆斌 张细权 聂庆华 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期177-180,共4页

以广东省5个家鹅品种36个样本为材料,对其线粒体细胞色素b基因的1 316 bp序列片段进行测序分析,研究5个家鹅品种的遗传多态性和起源。结果显示,在所有样本中,A、G、C、T碱基平均含量分别为28.84%、13.77%、34.23%、23.15%;共发现33个变... 以广东省5个家鹅品种36个样本为材料,对其线粒体细胞色素b基因的1 316 bp序列片段进行测序分析,研究5个家鹅品种的遗传多态性和起源。结果显示,在所有样本中,A、G、C、T碱基平均含量分别为28.84%、13.77%、34.23%、23.15%;共发现33个变异位点,变异类型为转换和颠换,未发现缺失与插入;确定了24种单倍型,H1为家鹅的主体单倍型,平均单倍型多样度为0.968,平均核苷酸多样度为0.01090;4个品种之间双参数遗传距离为0.0000～0.00146,其中马岗鹅与狮头鹅之间遗传距离最小,白沙鹅和马岗鹅、狮头鹅的遗传距离最大。结合NCBI上已发表的17个家鹅同源序列进行分析,共发现26种单倍型,单倍型聚类结果表明5个广东家鹅品种单一起源于鸿雁。 展开更多

关键词 鹅 细胞色素B基因 线粒体DNA 遗传多样性 进化

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Toll样受体的研究进展 被引量：1

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作者 师志海 曹宗喜 +3 位作者 邢会杰 张凯韩 曾敏 李守军 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第1期22-23,共2页

关键词 TOLL样受体 先天性免疫 免疫应答 模式识别 获得性免疫 炎症反应 免疫系统 病原体

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人脐带内皮细胞与平滑肌细胞的分离培养特征 被引量：1

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作者 黄华梅 罗洁芳 谢德明 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第37期7397-7400,共4页

目的:如何便捷有效地获取种子细胞是构建组织工程皮肤、角膜、血管等成功与否的关键,实验对人胎儿脐带内皮细胞和平滑肌细胞的分离、纯化、培养扩增技术进行探讨。方法:实验于2006-11在暨南大学医学院完成。①实验材料:剖宫产正常胎儿... 目的:如何便捷有效地获取种子细胞是构建组织工程皮肤、角膜、血管等成功与否的关键,实验对人胎儿脐带内皮细胞和平滑肌细胞的分离、纯化、培养扩增技术进行探讨。方法:实验于2006-11在暨南大学医学院完成。①实验材料:剖宫产正常胎儿脐带由暨南大学第一临床学院提供,产妇均知情同意。②实验方法:配制培养液,A液为在M199培养液中加入20%胎牛血清、20mg/L肝素、10μg/L碱性成纤维细胞生长因子,B液为在M199培养基中加入10%胎牛血清、250mg/LG418。取脐带15～20cm,采用胶原酶"灌注消化法"获取脐带内皮细胞制成悬液,静置0.5h后利用成纤维细胞短时间内贴壁的特点,把尚未贴壁细胞吸出重新接种于含有A液的培养瓶,初步去除部分成纤维细胞,细胞贴壁24h后将培养液换为B液,继续培养3d,去除成纤维细胞,然后再用A液扩大培养。从消化完脐静脉内皮细胞的脐带中剥取脐动脉,刮除内皮细胞,将血管条剪成小块均匀贴于培养瓶底,培养瓶内加入含20%小牛血清的DMEM培养液2mL,缓慢竖直培养瓶,以培养液刚未浸没培养块为最佳,放入37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱内干涸8h后,将培养瓶轻轻翻转,使植块刚浸入培养液中,绝对静置3d,以后每3d换液1次,待植块周围生长晕的细胞融合成片时,即可传代,传代后DMEM培养液的血清浓度由原来的20%改为5%,且在培养液中加入0.2L肝素。③实验评估:通过倒置相差显微镜观察细胞生长情况,分别以第Ⅷ因子、α-肌动蛋白免疫组织化学染色法鉴定内皮细胞和平滑肌细胞。结果:①内皮细胞的生长观察:接种24h后,镜下可见刚贴壁的细胞呈圆形,逐渐转变为多角形或梭形,胞间可见有成纤维细胞混杂,加入B液3d后成纤维细胞逐渐死亡。传代细胞呈"铺路石"样,细胞周围特别是近胞核处可见明显光晕,为典型的内皮细胞生长特点。②内皮细胞第Ⅷ因子相关� 展开更多

关键词 内皮细胞 平滑肌细胞 优化培养 组织工程血管

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猪繁殖候选基因ERK2的克隆、表达及基因多态分析 被引量：1

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作者 方梅霞 张伟 +4 位作者 胡永胜 欧阳宏佳 贾新正 聂庆华 张细权 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期210-217,共8页

【目的】ERK2基因在细胞增殖和分化调控以及启动卵巢排卵的分子信号等过程中发挥重要作用,是影响猪繁殖性状的重要候选基因。本试验对猪ERK2基因序列、基因结构、基因多态性及其表达规律进行初步研究。【方法】以大白猪为材料,采用RT-PC... 【目的】ERK2基因在细胞增殖和分化调控以及启动卵巢排卵的分子信号等过程中发挥重要作用,是影响猪繁殖性状的重要候选基因。本试验对猪ERK2基因序列、基因结构、基因多态性及其表达规律进行初步研究。【方法】以大白猪为材料,采用RT-PCR方法克隆了猪ERK2基因,Real-Time PCR测定该基因在猪各组织器官中的分布,并对该基因的结构和多态性进行分析。【结果】从猪卵巢组织中克隆获得ERK2基因部分cDNA序列,长1 888 bp,包括一个1 080 bp的开放阅读框,编码359个氨基酸与预测的猪ERK2基因、已报道的人和小鼠等的ERK2基因高度相似;猪ERK2基因在各组织中表达广泛,其中脾脏是表达量最高的组织,在脂肪组织、前后腿肌中基本不表达;猪ERK2基因定位于14号染色体,全长在22 kb以上,包含9个外显子和8个内含子;对第2—9外显子及内含子外显子交界处的内含子序列进行序列突变检测,共检测到11个SNPs和1个插入缺失突变,但绝大部分的变异都是在内含子区域,仅有1个SNP发生于3′UTR区域。【结论】猪ERK2基因cDNA为1 888 bp,编码359个氨基酸残基;在猪各组织中广泛分布,以脾脏的表达量最高;该基因由9个外显子和8个内含子组成,基因保守性较高,共检测到11个SNP和1个插入缺失突变均不在编码区中。 展开更多

关键词 猪 ERK2基因 CDNA克隆 组织表达 SNP

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