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云南337名非综合征型聋患者GJB3基因C538T和G547A突变分析 被引量：8
1
作者 李彦琼 刘德胜 +4 位作者 吕超绍 李丽 郑永钦 左荣霞 撒亚莲 《中国实验诊断学》 2016年第12期2024-2026,共3页
目的探讨云南省部分特教学校聋生携带GJB3基因C538T和G547A的突变率。方法采集337名非综合征型耳聋学生及150名健康人群的外周静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增含GJB3基因C538T和G547A的基因片段,扩增产物经直接测序进行基因突变位点的检... 目的探讨云南省部分特教学校聋生携带GJB3基因C538T和G547A的突变率。方法采集337名非综合征型耳聋学生及150名健康人群的外周静脉血,提取基因组DNA,PCR扩增含GJB3基因C538T和G547A的基因片段,扩增产物经直接测序进行基因突变位点的检测及鉴定。结果在337名耳聋学生和150名健康人群中未检测到GJB3基因C538T和G547A的突变。结论 GJB3基因C538T和G547A可能不是该地区非综合征型耳聋患者的突变热点,为进一步开展耳聋基因的筛查研究提供重要信息。 展开更多
关键词 聋 GJB3基因 突变 测序
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外泌体源miRNA在白血病发病机制中的作用 被引量：6
2
作者 张娟娟 李瑞玮 +1 位作者 贺继刚 撒亚莲 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2776-2781,共6页
背景:外泌体是穿梭在细胞间的物质传递与信息交流载体,是活细胞分泌到胞外的一种膜包被的纳米级囊泡。外泌体携载有亲本细胞来源的核酸(DNA、m RNA、microRNA等)、蛋白质、脂质等生物大分子,经体液流动远距离调控靶细胞的功能。白血病... 背景:外泌体是穿梭在细胞间的物质传递与信息交流载体,是活细胞分泌到胞外的一种膜包被的纳米级囊泡。外泌体携载有亲本细胞来源的核酸(DNA、m RNA、microRNA等)、蛋白质、脂质等生物大分子,经体液流动远距离调控靶细胞的功能。白血病是一类造血系统的恶性肿瘤,大部分患者难以治愈。已有研究表明,外泌体源miRNA受脂质保护不易被RNase水解,介导白血病细胞的浸润、转移等恶性生物学行为。目的:对外泌体源miRNA在白血病中的作用进行综述,为探索白血病的分子发病机制以及挖掘诊治靶点提供重要信息。方法:以"外泌体、白血病、miRNAs"为中文检索词,以"Exosome,Leukemia,miRNAs"为英文检索词,通过计算机检索PubMed数据库与万方医学网;检索时限:2003年11月至2018年5月,最终纳入48篇文献进行结果分析。结果与结论:外泌体源miRNA通过驯化造血微环境,使白血病细胞的存活、增殖和迁移浸润等恶性生物学行为得到加强。通过干预外泌体源miRNA的产生和释放,阻断受体细胞摄取外泌体源miRNA以及干涉其调控的靶基因等可能会拓展白血病的治疗理念。通过深入探讨外泌体源miRNA在白血病中的作用,为挖掘诊治靶点提供重要信息。 展开更多
关键词 白血病 外泌体 MIRNA 造血微环境 靶基因 生物标记物 国家自然科学基金
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白血病细胞源外泌体的作用研究进展 被引量：4
3
作者 张娟娟 李瑞玮 +2 位作者 贺继刚 欧阳红梅 撒亚莲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2287-2292,共6页
白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子... 白血病（leukemia）是一类造血干/祖细胞恶性克隆性疾病。外泌体是活细胞分泌到胞外的一种纳米级的微囊泡,是细胞间对话的信息和物质载体^（[1]）。外泌体携带亲本细胞来源的蛋白质、核酸（mRNA、microRNA和DNA等）及脂质等生物信息分子,可近距离和/或经体液流动远距离、特异性调控靶细胞的生理和病理活动^（[2-3]）。靶细胞摄取外泌体的途径主要有网格蛋白介导的内吞途径、 展开更多
关键词 白血病细胞 外泌体 生物学功能 分子机制
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外泌体在白血病细胞增殖中的作用 被引量：1
4
作者 李瑞玮 张娟娟 +2 位作者 杨同华 贺继刚 撒亚莲 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第19期4955-4956,共2页
外泌体又被称为胞外体,是活细胞分泌在体液中的一种纳米级的、膜包被小泡,直径约为3-120 nm,表面富含胆固醇、神经鞘磷脂、神经酰胺等脂类物质,携带亲本细胞来源的蛋白质、mRNA、microRNA、DNA等分子信息,是细胞间信息交流与的物质传递... 外泌体又被称为胞外体,是活细胞分泌在体液中的一种纳米级的、膜包被小泡,直径约为3-120 nm,表面富含胆固醇、神经鞘磷脂、神经酰胺等脂类物质,携带亲本细胞来源的蛋白质、mRNA、microRNA、DNA等分子信息,是细胞间信息交流与的物质传递的载体。外泌体来源于活细胞胞质内、晚期内吞体的膜性囊泡,其融合为多囊体后与细胞质膜融合释放到细胞外。外泌体广泛存在于血液、唾液、尿液、脑脊液以及胸水、腹水等体液中, 展开更多
关键词 白血病 增殖 血管形成 骨髓微环境 外泌体
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外泌体在白血病免疫调节中的作用 被引量：1
5
作者 李瑞玮 张娟娟 +1 位作者 欧阳红梅 撒亚莲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第8期872-877,共6页
外泌体是活细胞分泌至胞外的一种微囊泡结构,携带有亲本细胞来源的核酸、蛋白质和脂质等生物大分子信息,是细胞间的通讯载体。外泌体与肿瘤细胞的免疫逃逸、增殖、迁移与血管生成等恶性生物学行为有关,促使白血病细胞对化疗药物产生耐... 外泌体是活细胞分泌至胞外的一种微囊泡结构,携带有亲本细胞来源的核酸、蛋白质和脂质等生物大分子信息,是细胞间的通讯载体。外泌体与肿瘤细胞的免疫逃逸、增殖、迁移与血管生成等恶性生物学行为有关,促使白血病细胞对化疗药物产生耐药以及诱导T细胞凋亡。外泌体促进免疫系统激活,是一种潜在的白血病免疫治疗疫苗。另外,外泌体是发现白血病诊断和治疗生物标记物的一个窗口。本文就外泌体的生物学特性及其在白血病免疫调节中的作用作一综述。 展开更多
关键词 外泌体 白血病细胞 生物学特性 免疫调节
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构建基于CRISPR/Cas9技术敲除ALOX5的质粒
6
作者 梅芬 李瑞玮 +4 位作者 张娟娟 左荣霞 邹云莲 沈涛 撒亚莲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期110-114,共5页
旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α... 旨在利用CRISPR/Cas9技术构建敲除花生四烯5-脂氧合酶基因(Arachidonate 5-lipoxygenase gene,ALOX5)的重组质粒。设计合成3对靶向敲除ALOX5第六外显子的sgRNA,将其分别插入到CRISPR/Cas9质粒骨架pX458载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α后挑取克隆,通过测序评估重组质粒是否构建成功。将构建好的重组质粒转染293T细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,挑取转染成功的细胞,用试剂盒提取转染细胞基因组DNA,PCR扩增含敲除位点的DNA片段,用测序技术获得核苷酸序列,用DNAStar软件分析转染细胞中ALOX5基因敲除情况。测序结果表明2对双链sgRNA寡核苷酸已插入质粒,且序列正确,靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5构建成功。其在293T细胞中的转染效率约为50%,用一代测序法未检测到sgRNAs的切割效果。初步表明利用CRISPR/Cas9技术成功构建靶向ALOX5基因的重组质粒pX458-sgRNAs-ALOX5。 展开更多
关键词 ALOX5 CRISPR/Cas9 基因敲除 构建 质粒
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