干扰肿瘤相关巨噬细胞的P2X4受体表达可抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭 被引量：3

1

作者 杨学智 沈红 +7 位作者 李群 代自超 杨荣强 黄国宾 陈蕊 王芳 宋精玲 华海蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期658-664,共7页

目的研究P2X4受体在小鼠胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响及分子机制。方法将16只健康C57BL/6小鼠随机分为肿瘤组、对照组(8只/组),利用小鼠胶质瘤GL261细胞接种于小鼠大脑尾状核,建立小鼠脑胶质瘤模型... 目的研究P2X4受体在小鼠胶质瘤中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的表达对胶质瘤细胞侵袭迁移的影响及分子机制。方法将16只健康C57BL/6小鼠随机分为肿瘤组、对照组(8只/组),利用小鼠胶质瘤GL261细胞接种于小鼠大脑尾状核,建立小鼠脑胶质瘤模型。术后第21天处死小鼠,取荷瘤小鼠及正常小鼠脑组织,采用HE染色观察小鼠胶质瘤形态,利用免疫荧光检测Iba-1、P2X4受体的表达情况;应用GL261条件培养基将RAW264.7细胞诱导为TAMs,采用RT-qPCR检测巨噬细胞极化相关标志物及P2X4受体在TAMs的mRNA表达情况;采用Westernblot检测P2X4受体在TAMs的蛋白表达情况;采用siRNA P2X4,下调TAMs中P2X4受体的蛋白表达,RT-qPCR、Westernblot检测siRNA P2X4转染后TAMs中IL-1β、IL-18的mRNA及蛋白表达;利用transwell侵袭及迁移实验检测siRNA P2X4转染后TAMs对GL261细胞侵袭迁移能力的影响。结果与对照组相比,荷瘤小鼠脑胶质瘤组织中有较高数量的Iba-1阳性细胞(P<0.0001),且P2X4受体在Iba-1阳性细胞中的表达增高(P=0.001);使用GL261条件培养基刺激RAW264.7细胞转化为TAMs后,M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调(P=0.0001、0.001),M1型巨噬细胞标志基因iNOS、TNF-α表达也上调(P=0.006、0.001),但以M2型巨噬细胞标志基因Arg-1、IL-10表达上调更为显著,同时TAMs中P2X4受体蛋白表达水平及mRNA水平均增高(P=0.005、0.014)。干扰TAMs中P2X4受体表达引起其IL-1β、IL-18的mRNA(P<0.01)及蛋白表达水平(P<0.01,P<0.05)降低,并抑制TAMs促进胶质瘤细胞侵袭和迁移的能力(P=0.004、0.017)。结论降低肿瘤相关巨噬细胞P2X4受体表达可能通过IL-1β、IL-18影响胶质瘤细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 胶质瘤 P2X4受体 肿瘤相关巨噬细胞 侵袭 迁移

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烟尘慢性染毒致肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化离体实验研究 被引量：2

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作者 唐莹 边莉 +3 位作者 孟庆印 金克炜 高倩 阮永华 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2014年第1期20-25,共6页

目的建立模仿肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)暴露于云锡炼厂烟尘环境的离体研究模型。方法以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高、低剂量染毒组和空白对照组。前2组分别使用终浓度为200、50 mg/L的烟尘悬浊液在第1、3、5、7、9代对细... 目的建立模仿肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)暴露于云锡炼厂烟尘环境的离体研究模型。方法以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高、低剂量染毒组和空白对照组。前2组分别使用终浓度为200、50 mg/L的烟尘悬浊液在第1、3、5、7、9代对细胞染毒,同代对照组不加烟尘悬浊液同步培养。从第10代起,高、低剂量染毒组常规传代直至软琼脂克隆形成检测实验呈阳性。采用透视电镜观察细胞超微结构,流式细胞术观察细胞周期,免疫印迹法及免疫组织化学观察各组细胞肺表面活性蛋白(SP)-B、SP-C、鼠双微体2(MDM2)蛋白、脆性组氨酸三联体(FHIT)蛋白的改变。结果染毒24 h后即可观察到烟尘对RLE-6TN细胞超微结构造成损伤,主要表现为板层小体变性且数量减少,以及细胞凋亡和坏死;转化后的细胞由圆形或类圆形铺路石样生长变为长梭形。高、低剂量染毒组细胞培养至25代时软琼脂克隆形成检测实验均呈阳性,克隆形成率分别为3.33‰和1.67‰;继续培养至35代观察高、低剂量染毒组克隆形成率分别为12.50‰和10.00‰,空白对照组始终没有克隆形成。高、低剂量染毒组克隆形成率与染毒培养代数相关性有统计学意义(P<0.01),但与烟尘染毒剂量相关性无统计学意义(P>0.05)。流式细胞仪检测示高、低剂量染毒组G2/M期+S期的比例较空白对照组增高。高、低剂量染毒组第25、30代细胞MDM2蛋白阳性、SP-B及FHIT蛋白阴性,而空白对照组同代细胞MDM2蛋白阴性、SP-B及FHIT蛋白阳性。高、低剂量染毒组第25、30、35代细胞示SP-C失表达,空白对照组SP-C有表达。结论 ATⅡ长期暴露于云锡炼厂烟尘中可导致其恶性转化。ATⅡ特异性蛋白SP-B、SP-C、FHIT失表达,MDM2阳性表达可作为RLE-6TN细胞转化的参考指标。 展开更多

关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 RLE-6TN 云锡烟尘 恶性转化 肺表面活性蛋白 鼠双微体2 脆性组氨酸三联体 软琼脂克隆

原文传递

Vimentin,CTGF和AQP5在烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化模型中的表达

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作者 唐莹 徐天勇 +3 位作者 边莉 孟庆印 金克炜 阮永华 《昆明医科大学学报》 CAS 2015年第8期1-5,共5页

目的观察波形蛋白(Vimentin)、结缔组织生长因子(conective tissue growth factor,CTGF)和水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)在烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)恶性转化模型中的表达.方法以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高剂量... 目的观察波形蛋白(Vimentin)、结缔组织生长因子(conective tissue growth factor,CTGF)和水通道蛋白5(Aquaporin5,AQP5)在烟尘诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)恶性转化模型中的表达.方法以永生化ATⅡ(RLE-6TN细胞株)为实验对象,分为高剂量染毒组、低剂量染毒组和空白对照组.高、低剂量染毒组分别使用终浓度为200、50 mg/L的烟尘悬浊液在第1、3、5、7、9代对细胞染毒,同代对照组不加烟尘悬浊液同步培养.从第10代起,高、低剂量染毒组常规传代直至软琼脂克隆形成检测实验呈阳性.采用透射电镜观察细胞超微结构,以免疫印迹法及免疫组织化学法观察各组细胞肺表面活性蛋白SP(-B)、SP-C、波形蛋白(Vimentin)、结缔组织生长因子(CTGF)、水通道蛋白5(AQP5)表达.结果从形态改变、软琼脂克隆形成实验及肺泡表面活性蛋白(SP)-B、SP-C的表达上发现经烟尘诱导,RLE-6TN细胞超微结构会发生改变,且高、低剂量染毒组克隆形成率与染毒培养代数相关性有统计学意义(P<0.01),但与烟尘染毒水平相关性无统计学意义(P>0.05).免疫组织化学显示高、低剂量染毒组第30代细胞CTGF阳性、SP-B阴性,空白对照组CTGF阴性、SP-B阳性.Western blot示高、低剂量染毒组第25、30、35代细胞及空白对照组Vimentin和AQP5均为阴性.结论云锡炼厂烟尘导致ATⅡ恶性转化模型中CTGF表达阳性,但Vimintin及AQP5的表达呈阴性. 展开更多

关键词 肺泡Ⅱ型上皮细胞 RLE-6TN 云锡烟尘 恶性转化 肺表面活性蛋白 结缔组织生长因子 波形蛋白 水通道蛋白5

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脂蛋白肾小球病的诊断(附4例报告) 被引量：1

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作者 罗惠民 陈飞 +3 位作者 周艳 刘霏霏 宋精玲 刘爱武 《中国继续医学教育》 2016年第17期43-45,共3页

目的分析、总结脂蛋白肾小球病的临床病理特点。方法回顾性分析2007年4月~2013年4月我院收治4例临床表现为蛋白尿或肾病综合征行经皮穿刺肾活检患者,肾组织除免疫荧光及光镜检查外,行冰冻切片行油红O染色及透射电子显微镜检查诊断脂蛋... 目的分析、总结脂蛋白肾小球病的临床病理特点。方法回顾性分析2007年4月~2013年4月我院收治4例临床表现为蛋白尿或肾病综合征行经皮穿刺肾活检患者,肾组织除免疫荧光及光镜检查外,行冰冻切片行油红O染色及透射电子显微镜检查诊断脂蛋白肾小球病。结果 4例脂蛋白肾小球病患者血清总胆固醇及甘油三酯升高。肾组织免疫荧光检查肾小球血管襻、系膜区Ig G、Ig M微弱阳性表达;光学显微镜检可见肾小球体积增大,毛细血管襻不同程度扩张,襻内可见层状改变的大小不同、多少不等的栓子。油红O染色显示血管襻内沉积物为脂蛋白沉积或血栓;电子显微镜超微结构观察为内含颗粒状嗜锇酸脂质空泡。结论脂蛋白肾小球病属少见的肾小球病变,肾小球毛细血管襻内脂蛋白沉积或形成栓子是脂蛋白肾小球病特征性的形态学改变。 展开更多

关键词 脂蛋白肾小球病 临床病理 油红O染色

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三氯苯达唑、吡喹酮治疗大鼠感染斯氏狸殖吸虫的实验研究

5

作者 严亚军 王文林 +1 位作者 宋精玲 雷霖 《湖南中医药大学学报》 CAS 2016年第A02期770-771,共2页

目的观察三氯苯达唑、吡喹酮治疗大鼠感染斯氏狸殖吸虫的效果及药物对虫体作用后的超微结构改变.方法将15只SD大鼠随机分成三氯苯达唑治疗组、吡喹酮治疗组和对照组,每组5只大鼠.将斯氏狸殖吸虫囊蚴经腹腔注射感染各组大鼠,每只大鼠注... 目的观察三氯苯达唑、吡喹酮治疗大鼠感染斯氏狸殖吸虫的效果及药物对虫体作用后的超微结构改变.方法将15只SD大鼠随机分成三氯苯达唑治疗组、吡喹酮治疗组和对照组,每组5只大鼠.将斯氏狸殖吸虫囊蚴经腹腔注射感染各组大鼠,每只大鼠注射15个囊蚴.于感染后60d,两治疗组粪检阳性鼠分别给予三氯苯达唑和吡喹酮治疗,对照组不作治疗.用药后第3d剖杀各组大鼠,回收虫体,计数虫体回收数和虫囊数,计算检虫率及减虫率,并与对照组比较;另外,检获虫体作透射电镜观察.结果三氯苯达唑治疗组和吡喹酮治疗组检虫率分别为（2.69±5.95）%和（22.60±8.95）%,与对照组（53.33±9.43）%比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;三氯苯达唑治疗组和吡喹酮治疗组减虫率分别为87.50%和57.50%,差异有统计学意义（P〈0.05）.透射电镜观察：三氯苯达唑治疗组的虫体皮层消失,基质膜受破坏,肌肉层坏死;吡喹酮治疗组虫体皮层外质膜及基质层消失,肌层存在但较紊乱;对照组虫体体壁结构完整.结论三氯苯达唑治疗大鼠感染斯氏狸殖吸虫效果优于吡喹酮,而且三氯苯达唑引起斯氏狸殖吸虫体壁损伤程度比吡喹酮更严重. 展开更多

关键词 三氯苯达唑 吡喹酮 斯氏狸殖吸虫 超微结构

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三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫体壁超微结构的影响

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作者 严亚军 王文林 +2 位作者 宋精玲 雷霖 马智勇 《医学动物防制》 2018年第3期262-263,267,共3页

目的观察三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫作用后体壁超微结构的改变。方法将20只大鼠随机分成实验组和对照组,感染60 d后,实验组给予三氯苯达唑治疗,对照组不作治疗。用药3 d后剖杀两组大鼠,回收虫体,作透射电镜观察。结果实验组的虫体皮层消... 目的观察三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫作用后体壁超微结构的改变。方法将20只大鼠随机分成实验组和对照组,感染60 d后,实验组给予三氯苯达唑治疗,对照组不作治疗。用药3 d后剖杀两组大鼠,回收虫体,作透射电镜观察。结果实验组的虫体皮层消失,基质膜破坏;肌层坏死;细胞质线粒体变性,内质网扩张。对照组虫体体壁由外至内由皮层、外环肌、内纵肌及其皮层细胞组成;皮层从外至内由外质膜、基质及基质膜组成;肌层的肌纤维丝清晰,皮层细胞大,细胞核及细胞膜均清晰。结论三氯苯达唑造成斯氏狸殖吸虫体壁超微结构损伤。 展开更多

关键词 三氯苯达唑 斯氏狸殖吸虫 体壁 超微结构

原文传递

三氯苯达唑、吡喹酮治疗大鼠感染斯氏狸殖吸虫的实验研究

7

作者 严亚军 王文林 +2 位作者 宋精玲 雷霖 马智勇 《医学动物防制》 2017年第12期1269-1271,F0004,共4页

目的观察三氯苯达唑、吡喹酮杀灭斯氏狸殖吸虫的疗效及对虫体体壁超微的结构改变。方法 15只大鼠随机分成三氯苯达唑组、吡喹酮组和对照组。经腹腔注射斯氏狸殖吸虫囊蚴感染大鼠。感染60 d后两治疗组治疗、对照组不作治疗。用药3 d后剖... 目的观察三氯苯达唑、吡喹酮杀灭斯氏狸殖吸虫的疗效及对虫体体壁超微的结构改变。方法 15只大鼠随机分成三氯苯达唑组、吡喹酮组和对照组。经腹腔注射斯氏狸殖吸虫囊蚴感染大鼠。感染60 d后两治疗组治疗、对照组不作治疗。用药3 d后剖杀大鼠,计数虫体回收数,计算检虫率及减虫率,并与对照组比较;另外,检获虫体作透射电镜观察。结果三氯苯达唑组和吡喹酮组检虫率分别为(6.69±5.95)%和(22.60±8.95)%,与对照组(53.33±9.43)%比较,差异有统计学意义(P=0.000);三氯苯达唑组和吡喹酮组减虫率分别为87.50%和57.50%,差异有统计学意义(P=0.003)。透射电镜观察:三氯苯达唑组虫体皮层消失,基质膜破坏,肌层坏死;吡喹酮组虫体皮层受损,肌层紊乱;对照组体壁结构完整。结论三氯苯达唑杀灭斯氏狸殖吸虫效果优于吡喹酮,而且三氯苯达唑对虫体体壁造成损伤程度比吡喹酮严重。 展开更多

关键词 三氯苯达唑 吡喹酮 斯氏狸殖吸虫 超微结构

原文传递

电镜技术与细胞超微结构课程教学的改革探索

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作者 周莹 戴睿 +3 位作者 唐莹 林萍 孙威 詹东 《办公自动化》 2024年第24期35-37,68,共4页

电镜技术与细胞超微结构是针对研究生开设的一门基础性实验课,课程内容分两部分:以细胞超微结构为基础的理论课程和以技术操作为主的实验技术课程。课程内容多,范围广,涉及解剖、组培、生理、病理等在内的各项医学基础课程。课程教学质... 电镜技术与细胞超微结构是针对研究生开设的一门基础性实验课,课程内容分两部分:以细胞超微结构为基础的理论课程和以技术操作为主的实验技术课程。课程内容多,范围广,涉及解剖、组培、生理、病理等在内的各项医学基础课程。课程教学质量不仅关乎学生的实验技术能力,对培养学生的科研思维也具有重要意义。现结合昆明医科大学电镜技术与细胞超微结构课程的教学现状,对教学内容、课时设置、教学模式和考核方式等环节进行改革和创新,文章不仅让学生更快更好地掌握透射电镜实验操作技能,提高课程的教学质量和水平,同时,也为专业实验教学改革提供有益的线索。 展开更多

关键词 透射电镜 实验教学 教学改革 人才培养

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砂鱼蜥体表鳞片超微结构的扫描电镜观察 被引量：3

9

作者 张智泓 李莹 +3 位作者 佟金 赖庆辉 高旭航 唐莹 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期298-304,共7页

使用扫描电子显微镜对砂鱼蜥(Scincus scincus)体表鳞片的表面形态及其超微结构进行了观察。结果表明,砂鱼蜥体表鳞片分为表皮层和真皮层两部分,其中表皮层由4层组成,由内向外依次为发生层、生活细胞层、带有生物柔性的α-角质层和较硬... 使用扫描电子显微镜对砂鱼蜥(Scincus scincus)体表鳞片的表面形态及其超微结构进行了观察。结果表明,砂鱼蜥体表鳞片分为表皮层和真皮层两部分,其中表皮层由4层组成,由内向外依次为发生层、生活细胞层、带有生物柔性的α-角质层和较硬的β-角质层;生活层与角质层之间称为中介层。扫描电镜下体表鳞片的形状为扇形或椭圆形,鳞片间紧密排列,形如覆瓦状。此外,体表鳞片分为背部体表鳞片和腹部体表鳞片,两者分布的条纹纹路有深有浅,宽窄不等,条纹纹路上分布有极小的微刺。体表鳞片的部位不同,微刺的高度、间距宽度、数量都不一样。砂鱼蜥背部体表鳞片不仅受到沙粒磨料磨损的损伤,而且还受到风沙冲蚀磨损的损伤。相比之下,背部体表鳞片的微刺较为尖锐,数量也较多。 展开更多

关键词 砂鱼蜥 体表鳞片 仿生表面 扫描电镜

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克氏原螯虾头胸部外骨骼的微观形态观察和力学性能分析 被引量：3

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作者 张智泓 张广凯 +4 位作者 佟金 赖庆辉 高旭航 唐莹 STEPHEN Carr 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期171-177,共7页

克氏原螯虾(Procambarus clarkii)栖息于中国南方潮湿、粘重的土壤中,体表具有优异的防粘脱附特性。为探索克氏原螯虾的体表防粘脱附机理,本研究用X-射线衍射仪、钨灯丝扫描电镜、扫描探针显微镜和X-射线荧光光谱仪分析观察了克氏原螯... 克氏原螯虾(Procambarus clarkii)栖息于中国南方潮湿、粘重的土壤中,体表具有优异的防粘脱附特性。为探索克氏原螯虾的体表防粘脱附机理,本研究用X-射线衍射仪、钨灯丝扫描电镜、扫描探针显微镜和X-射线荧光光谱仪分析观察了克氏原螯虾头胸部外骨骼的成分和表面微观结构;用场发射扫描电镜和透射电镜观察了克氏原螯虾头胸部外骨骼中间层和截面特征;用纳米压痕仪测量了克氏原螯虾头胸部外骨骼的硬度。结果表明:克氏原螯虾头胸部外骨骼均含有Ca、P、Na和Mg等元素,以非晶的矿物质相存在;在外骨骼的表面分布有凹坑和凸包结构,并且在凹坑和凸包的一侧有多尺度刚毛存在,在凸包、凹坑非光滑表层还具有细微的沟槽结构,现出特殊的非光滑表面。克氏原螯虾头胸部外骨骼分为上表皮、外表皮和内表皮,外表皮和内表皮由螺旋夹板层构成,在外表皮上靠近上表皮之处具堆叠钙盐层。纳米力学测试得出克氏原螯虾头胸部外骨骼坚硬,其硬度和弹性模量分别是0.503 GPa和18.019 GPa。本研究为水田作业机械触土部件表面的防粘减阻仿生设计提供参考和依据。 展开更多

关键词 克氏原螯虾 仿生材料 微观结构 力学性能 电子显微镜

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克氏原鳌虾头胸部外骨骼微观结构和摩擦磨损特性 被引量：2

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作者 张智泓 张广凯 +4 位作者 佟金 赖庆辉 高旭航 唐莹 Stephen Carr 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第7期52-58,共7页

为探索克氏原鳌虾(Procambarus clarkii)在泥浆中穿行的防黏耐磨机理,该文以克氏原鳌虾头胸部外骨骼作为研究对象,分析其无机元素含量和存在形态,观察其微观结构,并测量其硬度和弹性模量;对外骨骼进行摩擦磨损试验,考察其摩擦磨损特性,... 为探索克氏原鳌虾(Procambarus clarkii)在泥浆中穿行的防黏耐磨机理,该文以克氏原鳌虾头胸部外骨骼作为研究对象,分析其无机元素含量和存在形态,观察其微观结构,并测量其硬度和弹性模量;对外骨骼进行摩擦磨损试验,考察其摩擦磨损特性,并观察磨痕的磨损形貌。试验表明,克氏原螯虾头胸部外骨骼中含有大量的钙元素,其中大部分以非晶结构存在,并含有少量碳酸钙;外骨骼表面具有凹坑、凸包和刚毛微观结构;螺旋夹板层具有蜂房结构,钙盐以针簇状分布在螺旋夹板层中;外骨骼硬度为0.503 GPa、弹性模量为18.019 GPa;摩擦因数呈跳跃式变化,最小时不足0.1,最大时接近0.8,磨损类型属于磨粒磨损。研究结果为农业机械触土部件表面防黏、耐磨的仿生设计提供理论依据。 展开更多

关键词 微观结构 摩擦 硬度 外骨骼 微观结构 弹性模量 摩擦磨损

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