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提高石蜡包埋组织中提取DNA质量的实验研究 被引量：19
1
作者 盖宝东 房学东 +2 位作者 金仲田 张德恒 郑泽霖 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期115-118,共4页
目的 :确定从石蜡包埋组织中提取 DNA的最佳条件。方法 :改变石蜡切片厚度、组织脱蜡时间、消化液蛋白酶 K浓度、组织消化时间等参数 ,组合出 96种不同提取 DNA的条件 ,比较各种条件下所提取 DNA的数量和质量。结果 :各种条件均可以提... 目的 :确定从石蜡包埋组织中提取 DNA的最佳条件。方法 :改变石蜡切片厚度、组织脱蜡时间、消化液蛋白酶 K浓度、组织消化时间等参数 ,组合出 96种不同提取 DNA的条件 ,比较各种条件下所提取 DNA的数量和质量。结果 :各种条件均可以提取出一定数量的 DNA,但有些条件所提取的 DNA不适合于做 PCR及 DNA序列测定。结论 :从石蜡包埋组织中提取 DNA的最佳条件为 ,1 0 .0 μm组织切片 ;切片脱蜡 2次 ,脱蜡时间分别为 2 h和 1 2 h;消化液中蛋白酶 K浓度5 0 0 mg· L-1;组织消化 1 2 展开更多
关键词 石蜡包埋 DNA 分离 提纯 聚合酶链反应 序列分析 DNA
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散发型甲状腺髓样癌RET基因第11外显子序列分析 被引量：1
2
作者 赵吉生 盖宝东 +5 位作者 张学文 森隆弘 滕盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第12期736-737,共2页
目的分析散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子碱基序列 ,明确RET基因突变与散发型甲状腺髓样癌的关系。方法提取 17例散发型甲状腺髓样癌基因组DNA ,PCR扩增RET基因第 11外显子 ,PCR产物经纯化后直接测序。结果分析测序图发现 1例病... 目的分析散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子碱基序列 ,明确RET基因突变与散发型甲状腺髓样癌的关系。方法提取 17例散发型甲状腺髓样癌基因组DNA ,PCR扩增RET基因第 11外显子 ,PCR产物经纯化后直接测序。结果分析测序图发现 1例病例在该基因第15 16 5位碱基处G→A突变 ,导致丝氨酸691→赖氨酸错意突变。结论散发型甲状腺髓样癌RET基因第 11外显子基因突变率较低 ;散发型甲状腺髓样癌致病的关键基因可能位于该基因的其他外显子或其他基因上。 展开更多
关键词 散发型甲状腺髓样癌 RET基因 第11外显子 序列分析
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散发型甲状腺髓样癌及正常甲状腺组织RET基因第13外显子碱基序列分析 被引量：1
3
作者 盖保东 森隆弘 +5 位作者 滕盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 郑泽霖 刘晶 《内分泌外科杂志》 2008年第5期292-294,共3页
目的研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因（RET）第13外显子的突变情况。方法提取17例散发型甲状腺髓样癌和4例正常甲状腺组织基因组的DNA,PCR扩增该基因第13外显子全部序列,纯化目的基因DNA后直接序列测定。结果与Genebank比较... 目的研究散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因（RET）第13外显子的突变情况。方法提取17例散发型甲状腺髓样癌和4例正常甲状腺组织基因组的DNA,PCR扩增该基因第13外显子全部序列,纯化目的基因DNA后直接序列测定。结果与Genebank比较全部散发型甲状腺髓样癌和正常甲状腺组织在RET基因第18973和18974位点之间均有一个鸟嘌呤插入,插入点位于该基因的第13外显子和第13内含子之间。结论该位点处鸟嘌呤插入不是基因突变,可能为不同人种间基因组差异或Genebank存在错误。 展开更多
关键词 散发型甲状腺髓样癌 酪氨酸激酶受体基因 基因突变 GENEBANK
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散发型甲状腺髓样癌酪氨酸激酶受体基因第918位点基因突变及意义 被引量：1
4
作者 盖宝东 森隆弘 +4 位作者 膝盛启成 大内宪名 里见进 张德恒 郑泽霖 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期319-321,共3页
目的研究不同人种散发型甲状腺髓样癌(sMTC)酪氨酸激酶受体基因(RET)第 918位点基因突变及意义。方法提取17例中国人sMTC基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增 RET基因第16外显子,PCR产物经纯化后直接测序,分析中国人sMTC RET基因第918位点... 目的研究不同人种散发型甲状腺髓样癌(sMTC)酪氨酸激酶受体基因(RET)第 918位点基因突变及意义。方法提取17例中国人sMTC基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增 RET基因第16外显子,PCR产物经纯化后直接测序,分析中国人sMTC RET基因第918位点处基因突变,并与文献报道的其他人种sMTC该位点处基因突变比较。结果中国人sMTC此位点处未发现基因突变;黄种人、白种人、棕种人此位点处基因突变率分别为:7．1％、33．5％、50．0％,基因突变形式均为ATG→ACG点突变。白种人与黄种人,棕种人与黄种人间比较均差异有统计学意义 (P<0．05)。结论中国人sMTC发病与RET基因第918位点处基因突变无关;不同人种sMTC此位点处基因突变率有差异;不同人种sMTC发病的基因基础可能不同。 展开更多
关键词 甲状腺癌 基因突变
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利用FISH及PCR法研究肝和肾移植受者的血液嵌合性 被引量：1
5
作者 张志宏 大河内信宏 +1 位作者 岗崎肇 郭应禄 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期357-359,共3页
目的　证实肝、肾移植受者末稍血中存在供者细胞 ,证明血液嵌合性的成立。方法　女性活体肝移植受者 9例、肾移植受者 3 8例。供者均为男性。利用FISH法检测Y染色体 ;利用PCR及nestedPCR法检测Y染色体上特异的基因片断SRY和DYZ 1。结果... 目的　证实肝、肾移植受者末稍血中存在供者细胞 ,证明血液嵌合性的成立。方法　女性活体肝移植受者 9例、肾移植受者 3 8例。供者均为男性。利用FISH法检测Y染色体 ;利用PCR及nestedPCR法检测Y染色体上特异的基因片断SRY和DYZ 1。结果　使用FISH法 ,肝、肾移植受者均未发现Y染色体的存在。利用PCR法检测 ,9例肝移植受者Y染色体特异的基因片断SRY和DYZ 1均为阳性。肾移植受者SRY阳性 3 2例 (84.2 % ) ,阴性 6例 (15 .8% ) ;DYZ 1阳性 3 5例(92 .1% ) ,阴性 3例 (7.9% )。结论　长期存活的肝、肾移植受者 ,血液嵌合性是成立的 ,且出现频率差异无显著性。FISH法检测末稍血中的Y染色体是困难的 。 展开更多
关键词 移植嵌合体 肝移植 肾移植 血液嵌合性 FISH PCP法
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