小鼠外周血单个核细胞对囊胚的免疫应答反应探究

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作者 滕亚迪 刘子涵 +1 位作者 马梅香 安礼友 《南京师范大学学报（工程技术版）》 CAS 2024年第2期59-66,共8页

精卵结合形成受精卵,胚胎经过发育形成囊胚,囊胚孵化后与子宫互作引发着床.已有研究显示胚胎着床是一个炎性过程,基因上的异质性决定了胚胎会引发子宫的免疫反应.但是,目前对胚胎的免疫特性的了解还很少.为解析胚胎与免疫细胞可能发生... 精卵结合形成受精卵,胚胎经过发育形成囊胚,囊胚孵化后与子宫互作引发着床.已有研究显示胚胎着床是一个炎性过程,基因上的异质性决定了胚胎会引发子宫的免疫反应.但是,目前对胚胎的免疫特性的了解还很少.为解析胚胎与免疫细胞可能发生的免疫互作,本研究以外周血单个核细胞(PBMC)为细胞模型,评价小鼠囊胚对白细胞的免疫学作用.分别将10、20枚小鼠囊胚与PBMC共培养24 h,同时以脂多糖(LPS)处理为对照.研究结果显示,胚胎可诱导PBMC增殖,并显著降低T细胞亚群比例(P<0.05);LPS处理PBMC引发先天免疫细胞NK、单核细胞增殖,胚胎的加入进一步增加了NK、单核细胞增殖(P<0.05).对培养液中的细胞因子检测发现,PBMC与胚胎共培养后,促炎性分子IL-6和抑炎分子IL-10均显著增加(P<0.05);值得注意的是胚胎能下调LPS诱导的TNF-α表达(P<0.05).结果表明,囊胚对PBMC亚群具有调控作用,能增强LPS引发的先天免疫反应,可以调控细胞因子IL-6、TNF-α和IL-10的分泌.研究结果提示小鼠囊胚可能不仅能引起子宫内膜发生炎性反应,而且能对子宫免疫细胞功能进行动态调节.研究为进一步解析着床过程中的母胎免疫识别提供了数据参考. 展开更多

关键词 囊胚 单个核细胞 共培养 免疫应答 细胞因子

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棉铃虫Ⅰ型几丁质酶的表达 被引量：2

2

作者 古新蓉 麦麦提艾力·阿卜杜纳斯尔 +4 位作者 李梦鸽 王新 随慧 包静 刘小宁 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期1076-1082,共7页

昆虫几丁质酶主要参与昆虫蜕皮、围食膜降解、细胞增殖、机体免疫防御、生长因子等重要生理生长发育过程。在本研究中,从NCBI下载棉铃虫几丁质酶序列,并克隆验证正确,构建的系统发育树表明属于Ⅰ型几丁质酶。将不包含信号肽的开放阅读... 昆虫几丁质酶主要参与昆虫蜕皮、围食膜降解、细胞增殖、机体免疫防御、生长因子等重要生理生长发育过程。在本研究中,从NCBI下载棉铃虫几丁质酶序列,并克隆验证正确,构建的系统发育树表明属于Ⅰ型几丁质酶。将不包含信号肽的开放阅读框序列(1 707 bp)与pET28a载体连接,转化至大肠杆菌transetta(DE3)中进行诱导表达,Western blot进一步验证融合蛋白His-HaCHT。用镍柱子纯化融合蛋白,纯化获得的融合蛋白对胶体几丁质有降解活性,其酶活力为0.023 μg/mL·s ^-1 。不同龄期的qPCR结果显示,该基因在棉铃幼虫的 6个幼虫期以及预蛹蜕皮后均有表达,但 HaCHTI 在4龄和6龄幼虫阶段表达相对较高,而在1龄、 2龄、3龄、5龄幼虫和预蛹表达量较低。这些结果表明,异源表达的棉铃虫的I型几丁质酶对胶体几丁质具有降解活性,可能对棉铃虫正常蜕皮有着重要的作用。 展开更多

关键词 棉铃虫 几丁质酶 表达纯化 酶活性

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新疆家蚕抗菌肽对雏鸡生长性能及血清激素、理化指标的影响 被引量：10

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作者 刘忠渊 徐涛 +2 位作者 王启贵 孙峰 张富春 《中国家禽》 北大核心 2007年第22期16-19,共4页

将240只1日龄南宁麻花鸡随机分成4组。对照组饮用自来水,3个试验组的饮水中分别添加0.5、1.5、3.5mL/L抗菌肽。试验期为56d。结果表明:与对照组相比,1.5、3.5mL/L添加量的试验组雏鸡增重效果显著(P<0.05),试验组血清总蛋白浓度差异... 将240只1日龄南宁麻花鸡随机分成4组。对照组饮用自来水,3个试验组的饮水中分别添加0.5、1.5、3.5mL/L抗菌肽。试验期为56d。结果表明:与对照组相比,1.5、3.5mL/L添加量的试验组雏鸡增重效果显著(P<0.05),试验组血清总蛋白浓度差异不显著(P>0.05),尿素氮水平下降显著(P<0.05),血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平显著升高。在28日龄,试验组的三碘甲状腺原氨酸(T3)浓度高于对照组,差异不显著(P>0.05),甲状腺素(T4)水平下降显著(P<0.05);在56日龄,试验组的T3水平显著降低(P<0.05),但T4水平高于对照组,差异显著(P<0.05)。 展开更多

关键词 新疆家蚕抗菌肽 雏鸡 生长性能 激素 生理生化指标

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一种有效促进红花种子萌发的方法 被引量：1

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作者 王艳 高燕 +4 位作者 贺宾 陈友强 易丽娟 曾幼玲 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2005年第3期195-197,共3页

对几种提高种子萌发率的方法进行了比较研究,研究表明1.0～2.0mg/L赤霉酸(GA3)浓度能够促进红花种子的萌发速度,提高红花种子的萌发率,并较其它几种方法萌发速度快、萌发率高。

关键词 红花 赤霉酸(GA3) 种子 萌发率

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维吾尔族mtDNA及Y-STR遗传多样性研究进展

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作者 阿布都热合曼.阿布力米提 马正海 郑秀芬 《中国优生与遗传杂志》 2012年第3期1-3,共3页

维吾尔族是新疆主要少数民族,人类历史上诸多民族及部落对现代维吾尔族的生成都有贡献,甚至可以说他们已经融合入现代的维吾尔族人群中。现有的历史记载和考古学资料难于解释历史较近的人群动态,故需要运用其他方法手段。以PCR扩增为基... 维吾尔族是新疆主要少数民族,人类历史上诸多民族及部落对现代维吾尔族的生成都有贡献,甚至可以说他们已经融合入现代的维吾尔族人群中。现有的历史记载和考古学资料难于解释历史较近的人群动态,故需要运用其他方法手段。以PCR扩增为基础的分子遗传学方法已成为探讨人群、种族迁演乃至人类的起源和进化的主导技术。本文主要对维吾尔族mtDNA及Y-STR遗传多样性研究进展做一综述。 展开更多

关键词 维吾尔族 遗传多样性 MTDNA Y-STR

原文传递

水动力转染鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达

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作者 王启贵 王娉 +3 位作者 庄淑珍 郑耀虎 李辉 张富春 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期26-29,共4页

采用水动力转染技术将含有家鸡PPARγ基因的真核表达质粒、表达该基因siRNA的干扰质粒注射到小鼠体内,并利用RT-PCR方法检测PPARγ基因在小鼠脏器中的表达情况,以建立检测重组质粒瞬时表达和筛选siRNA序列的有效方法。结果表明:注射重... 采用水动力转染技术将含有家鸡PPARγ基因的真核表达质粒、表达该基因siRNA的干扰质粒注射到小鼠体内,并利用RT-PCR方法检测PPARγ基因在小鼠脏器中的表达情况,以建立检测重组质粒瞬时表达和筛选siRNA序列的有效方法。结果表明:注射重组质粒pcDNA3/PPARγ后家鸡PPARγ基因在小鼠的肝脏中高效表达;同时注射重组质粒pcDNA3/PPARγ和表达该基因siRNA序列的干扰质粒pGenesil-1/PPARγshRNA1后,家鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达明显地受到抑制。与传统的真核细胞转染技术相比,水动力转染技术具有快速、简单、方便、高效、安全、成本低等优点,可作为外源重组DNA表达的检测和siRNA的筛选等一种有效的方法。 展开更多

关键词 小鼠 PPARΓ基因 水动力转染 表达

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多异瓢虫生物生态学特性及保育利用研究进展 被引量：11

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作者 姜岩 修春丽 +3 位作者 王冬梅 刘建 潘洪生 刘小宁 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2022年第1期50-62,共13页

多异瓢虫Hippodamia variegata (Goeze)是蚜虫等多种害虫的重要捕食性天敌,具有发生早、数量大、食性广、食量大等特点。全面了解多异瓢虫生物生态学特性,是科学利用其生物防治潜力的重要前提。本文系统总结了多异瓢虫的研究进展,重点... 多异瓢虫Hippodamia variegata (Goeze)是蚜虫等多种害虫的重要捕食性天敌,具有发生早、数量大、食性广、食量大等特点。全面了解多异瓢虫生物生态学特性,是科学利用其生物防治潜力的重要前提。本文系统总结了多异瓢虫的研究进展,重点关注多异瓢虫世代个体发育、生活习性和捕食能力,以及保育措施与释放应用等方面,这将为今后多异瓢虫的保育及进一步推动其用于生物防治奠定坚实的理论基础。 展开更多

关键词 鞘翅目 瓢虫科 多异瓢虫 生物学特性 生态学习性

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苗期盐穗木在不同盐浓度处理下的渗调和抗氧化系统 被引量：5

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作者 冯肖莉 樊寿德 +2 位作者 周莲洁 张富春 王艳 《干旱区研究》 CSCD 北大核心 2018年第5期1118-1128,共11页

拟通过对盐穗木2月龄幼苗和6月龄成苗在不同Na Cl浓度（0、100、300 mmol·L^（-1）和500 mmol·L^（-1））处理15 d后的相对含水量、脂质过氧化物（MDA）、无机（Na＋、K＋和Ca^（2＋））和有机渗透调节物质（脯氨酸和甜菜碱... 拟通过对盐穗木2月龄幼苗和6月龄成苗在不同Na Cl浓度（0、100、300 mmol·L^（-1）和500 mmol·L^（-1））处理15 d后的相对含水量、脂质过氧化物（MDA）、无机（Na＋、K＋和Ca^（2＋））和有机渗透调节物质（脯氨酸和甜菜碱）及抗氧化指标（SOD、CAT、APX、POD、As A和GSH）的检测,分析并比较盐穗木不同发育阶段应对不同盐浓度的渗透调节和抗氧化防御系统,为盐穗木的研究与开发利用以及新疆生态环境的治理提供依据。结果表明：500 mmol·L^（-1）高盐胁迫下,盐穗木幼苗和成苗相对含水量与对照组相比均显著下降;结合相对含水量和MDA含量显示,100mmol·L^（-1）和300 mmol·L^（-1）Na Cl均未对盐穗木造成胁迫;渗透调节系统中,无机离子Na＋和有机物质甜菜碱（GB）分别在盐穗木幼苗和成苗的渗透调节中发挥主导作用;抗氧化系统中,除盐穗木成苗在500 mmol·L^（-1）处理下抗坏血酸（As A）含量升高外,超氧化物歧化酶（SOD）和CAT活性及谷胱甘肽（GSH）含量随盐浓度的增加一直保持较高水平且变化很小;相关系数分析显示As A和SOD分别在盐穗木幼苗和成苗中发挥了重要的抗氧化作用。由此可见,新疆牧草盐穗木在苗期的不同生长阶段采用不同的渗透调节和抗氧化策略应对盐渍生境。 展开更多

关键词 盐穗木 NACL处理 渗透调节 抗氧化系统 耐盐机制

原文传递

基于金掺杂的锆基金属有机框架电化学适配体传感器检测玉米中黄曲霉毒素B1

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作者 李宗达 陆康 +4 位作者 裴强 李新博 刘文平 毛亚琪 张民伟 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第21期132-140,共9页

目的建立基于金掺杂的锆基金属有机框架(gold-doped zirconium-based metal-organic framework,Au@Zr-MOF)的电化学适配体传感器检测玉米中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。方法利用具有高比表面积、介孔结构的Zr-MOF作为骨架,... 目的建立基于金掺杂的锆基金属有机框架(gold-doped zirconium-based metal-organic framework,Au@Zr-MOF)的电化学适配体传感器检测玉米中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)的方法。方法利用具有高比表面积、介孔结构的Zr-MOF作为骨架,通过原位还原生长的方法掺杂金纳米粒子,得到导电性良好、分散均匀的Au@Zr-MOF。并基于Au-S键共价结合AFB1适配体,构建电化学阻抗型适配体传感器,当AFB1存在时,适配体对其进行识别结合,引起电极表面电化学传质电阻增加,随着AFB1浓度的增大,阻抗值也随之增加,并根据阻抗值的变化实现对AFB1的定量检测。结果在最佳的实验条件下,该传感器对AFB1检测的线性范围为10-4~101ng/mL,检出限为0.19 pg/mL,对玉米样品的回收率为96%~112%。结论本研究建立的电化学适配体传感器可以实现对AFB1的定量检测,且具有良好的特异性和重现性,为准确、快速检测食品中的AFB1提供思路。 展开更多

关键词 黄曲霉毒素B1 金掺杂的锆基金属有机框架 适配体 阻抗型传感器 玉米

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棉铃虫乙醇脱氢酶的表达规律 被引量：2

10

作者 赵洁 任苏伟 +1 位作者 马纪 刘小宁 《新疆大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第3期267-272,352,共7页

乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)是一种在醇类代谢途径中起重要作用的脱氢还原酶.为了深入了解ADH对棉铃虫CYP6B6的调控,基于酵母单杂交的实验结果,采用RT-PCR的方法从六龄幼虫的中肠cDNA中扩增得到棉铃虫乙醇脱氢酶5(HaADH5),... 乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase,ADH)是一种在醇类代谢途径中起重要作用的脱氢还原酶.为了深入了解ADH对棉铃虫CYP6B6的调控,基于酵母单杂交的实验结果,采用RT-PCR的方法从六龄幼虫的中肠cDNA中扩增得到棉铃虫乙醇脱氢酶5(HaADH5),构建重组菌株BL21-p ET32a-HaADH5,IPTG诱导表达后通过镍柱纯化获得目的蛋白,Western blot检测目的蛋白的表达和纯化结果,实时定量PCR检测棉铃虫不同发育阶段和组织中HaADH5的表达规律,最后检测2-十三烷酮处理下六龄幼虫中肠组织内HaADH5的变化规律.结果表明,克隆得到的HaADH5大小为1 002 bp,编码334个氨基酸,预测的蛋白质分子量和等电点分别是36.5k D和6.55.氨基酸序列分析表明HaADH5蛋白不含信号肽和跨膜结构域.HaADH5在大肠杆菌BL21中主要以可溶蛋白形式存在,Western blot结果显示融合蛋白His-HaADH5的大小与预期一致且纯度较高.HaADH5在棉铃虫的所有组织中都表达且中肠内表达量最高,在幼虫的所有龄期都表达且预蛹期的表达量最高.2-十三烷酮处理后HaADH5的表达量降低,且10 mg/g处理组中HaADH5和CYP6B6随着时间的延长表达规律相一致.本文将为后续利用HaADH5作为分子标记来研究棉铃虫蜕皮和变态发育过程奠定基础. 展开更多

关键词 乙醇脱氢酶 棉铃虫 表达纯化 2-十三烷酮

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棉铃虫乙醇脱氢酶5的原核表达和活性分析及其抗血清的制备

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作者 古新蓉 罗生慧 +2 位作者 魏林昱 姜岩 刘小宁 《新疆大学学报（自然科学版）（中英文）》 2021年第2期197-203,212,共8页

本课题组前期基于酵母单杂交技术筛选出响应2-十三烷酮诱导CYP6B6过表达的6个调控因子,乙醇脱氢酶5(HaADH5)是其中之一,乙醇脱氢酶是一种代谢乙醇的重要酶类,在哺乳动物中的研究很多,但在昆虫中的研究很少.为了进一步探究HaADH5是否参与... 本课题组前期基于酵母单杂交技术筛选出响应2-十三烷酮诱导CYP6B6过表达的6个调控因子,乙醇脱氢酶5(HaADH5)是其中之一,乙醇脱氢酶是一种代谢乙醇的重要酶类,在哺乳动物中的研究很多,但在昆虫中的研究很少.为了进一步探究HaADH5是否参与P450 CYP6B6的过表达,进而参与棉铃虫对包括杀虫剂在内的外界有毒物质的代谢.本实验将pET32a-HaADH5转化至大肠杆菌Transetta中进行诱导表达,Western blot进一步验证融合蛋白HisHaADH5的表达,通过镍柱纯化获得融合蛋白His-HaADH5,且测定了酶活.用蛋白免疫法制备了鼠抗His-HaADH5的血清,Western blot分析了该抗血清的免疫特异性,继而用此抗体检测了HaADH5在不同组织中的表达.活性分析表明,在NAD+的存在下,融合蛋白可以对不同醇类和甲醛进行脱氢,尤其对异戊醇的脱氢活性最高,活性为1333 U/mg.制备的抗血清效价为1∶409600.Western blot结果表明,该抗血清既能与融合蛋白His-HaADH5结合,也能与棉铃虫体内的HaADH5结合,还发现HaADH5在脂肪体中的表达量最高.原核表达的融合蛋白能代谢异戊醇,制备的抗血清具有较好的免疫特性,这些结果为HaADH5蛋白水平的鉴定以及功能研究提供了重要的检测工具,也有助于我们更好地探索棉铃虫乙醇脱氢酶5的功能. 展开更多

关键词 棉铃虫 乙醇脱氢酶5 原核表达 活性分析 抗血清制备

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