过表达Krüppel样因子2(Krüppel like factor 2,Klf2)或Klf7可抑制脂肪细胞形成,但是在脂肪组织中Klf2是否调控klf7表达还不清楚。本研究采用油红O染色和蛋白质印迹法技术研究了过表达Klf2对鸡前脂肪细胞分化的影响,结果显示...过表达Krüppel样因子2(Krüppel like factor 2,Klf2)或Klf7可抑制脂肪细胞形成,但是在脂肪组织中Klf2是否调控klf7表达还不清楚。本研究采用油红O染色和蛋白质印迹法技术研究了过表达Klf2对鸡前脂肪细胞分化的影响,结果显示过表达Klf2抑制油酸诱导的前脂肪细胞分化和pparγ表达,同时促进klf7表达(P<0.05)。利用Spearman相关性分析研究人和鸡脂肪组织中klf2和klf7的表达数据之间的关系,发现klf2和klf7的表达数据存在明显的正相关(r>0.1)。荧光素酶报告基因分析显示,在鸡前脂肪细胞中过表达Klf2促进鸡klf7启动子(–241/–91、–521/–91、–1845/–91、–2286/–91和–1215/–91)的活性(P<0.05);此外,在鸡前脂肪细胞中,klf7启动子(–241/–91)报告基因活性与共转染的klf2过表达质粒的浓度正相关(Tau=0.91766,P=1.074×10–7),过表达Klf2显著促进klf7的mRNA表达水平。综上所述,促进klf7表达可能是Klf2抑制鸡脂肪细胞形成的作用途径之一,鸡klf7翻译起始位点上游–241 bp/–91 bp序列可能介导转录因子Klf2对klf7表达的转录调控作用。展开更多
基金supported by the National Natural Science Foundation of China(No.3090049030960417+7 种基金31100829and81000411)the Doctor Foundation of the Xinjiang Production and Construction Corps of China(No.2010GC162010GG34)the Doctor Foundation of Shihezi UniversityChina(No.RCZX200921)the Science and Technology Innovation Foundation of Shihezi UniversityChina(No.ZRKX2009ZD03ZRKK2009YB24)
基金supported by the National Natural Science Foundation of China(No.3090049030960417+7 种基金31100829and81000411)the Doctor Foundation of the Xinjiang Production and Construction Corps of China(No.2010GC162010GG33)the Doctor Foundation of Shihezi UniversityChina(No.RCZX200921)the Science and Technology Innovation Foundation of Shihezi UniversityChina(No.ZRKX2009ZD03ZRKK2009YB24)
文摘目的研究氯化钴(CoCl_2)诱导的低氧条件下,脂连蛋白(APN)对RAW264. 7巨噬细胞凋亡的保护作用及其机制。方法巨噬细胞分为CoCl_2处理组和APN预处理组,前者给予100μmol/L CoCl_2,后者先用(0. 5、1、2)μg/m L APN预处理2 h,再给予100μmol/L的CoCl_2处理。CCK-8法检测各组细胞活力;免疫荧光法观察细胞胱天蛋白酶3(caspase-3)的分布及CoCl_2和APN对其表达的影响;流式细胞术检测各组细胞的凋亡比例;分光光度计法检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量; Western blot法检测各组细胞B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、BAX、裂解型caspase-3(c-caspase-3)及低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白水平。结果与CoCl_2组相比,APN预处理能提高细胞活力,减少细胞凋亡并升高SOD含量、降低MDA含量;Caspase-3主要分布在细胞膜上,与CoCl_2组相比,APN预处理能上调Bcl2的表达,下调BAX、c-caspase-3及HIF-1α的表达。结论 APN可减少CoCl_2诱导的巨噬细胞凋亡,可能是通过增强细胞内抗氧化活性,以及上调Bcl2、下调BAX、c-caspase-3及HIF-1α的表达来实现的。
