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PI3Kγ调控肿瘤相关巨噬细胞表型影响胆管癌细胞EMT进程与干性特征
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作者 唐津天 唐润娟 +1 位作者 薛峰 黎旺红 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第2期190-196,共7页
目的探究磷酸肌醇3-激酶γ(phosphatidylinositide 3-kinaseγ,PI3Kγ)调控肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)表型影响胆管癌细胞EMT进程及干性特征的作用。方法利用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和IL-... 目的探究磷酸肌醇3-激酶γ(phosphatidylinositide 3-kinaseγ,PI3Kγ)调控肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)表型影响胆管癌细胞EMT进程及干性特征的作用。方法利用佛波酯(Phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和IL-4诱导建立M2型TAM,并使用PI3Kγ抑制剂AS605240进行干预,观察细胞形态变化,免疫细胞荧光染色检测细胞表面M2特异性表型标志物CD163表达情况。建立M2型TAM与人胆管癌细胞系QBC-939共培养体系,分组为对照组、M2组、PI3Kγ抑制剂组,进行对应处理后收集QBC-939细胞,Transwell实验检测细胞迁移与侵袭能力,免疫细胞荧光染色观察细胞内E-cadherin与Vimentin表达,Western blotting检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、MMP2及MMP9蛋白表达,肿瘤细胞成球实验检测细胞干性,Western blotting检测细胞中肿瘤干细胞相关蛋白CD133、OCT4及SOX2蛋白表达。结果经PMA和IL-4诱导后,细胞呈典型M2型形态,CD163荧光强度明显增加,但经PI3Kγ抑制剂干预后,M2型细胞数目明显减少,CD163荧光强度减弱。与M2组比较,PI3Kγ抑制剂组细胞迁移数目与侵袭数目均减少(P<0.05),E-cadherin荧光密度值升高、Vimentin荧光密度值降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平上调而N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9蛋白表达水平均下调(P<0.05),同时,肿瘤细胞成球数量减少(P<0.05),CD133、OCT4及SOX2蛋白表达水平均下调(P<0.05)。结论抑制PI3Kγ能够抑制M2型TAM表型转化,从而抑制胆管癌细胞的EMT进程及肿瘤干性特征,发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 胆管癌 磷酸肌醇3-激酶γ 肿瘤相关巨噬细胞 上皮-间质转化 干性
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抑制核转录因子E2相关因子2途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及免疫逃逸因子表达的调节作用
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作者 唐津天 唐润娟 +1 位作者 薛峰 黎旺红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1883-1888,共6页
目的:探究抑制核转录因子E2相关因子2(Nrf2)途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及分泌免疫逃逸因子水平的影响。方法:培养人胰腺癌细胞株Panc-1,采用5.5、10、25、50 mmol/L葡萄糖处理细胞,分别于12 h、24 h、48 h通过MTT检测细胞增殖率,2... 目的:探究抑制核转录因子E2相关因子2(Nrf2)途径对高糖状态下胰腺癌细胞转移及分泌免疫逃逸因子水平的影响。方法:培养人胰腺癌细胞株Panc-1,采用5.5、10、25、50 mmol/L葡萄糖处理细胞,分别于12 h、24 h、48 h通过MTT检测细胞增殖率,24 h时通过RT-qPCR和Western blot检测细胞内Nrf2表达变化;实验分为:对照组、高糖(HG)组、Nrf2抑制剂ML385+高糖(ML385+HG)组,MTT检测细胞增殖率,细胞克隆形成实验检测细胞集落形成数,Transwell检测细胞迁移数与侵袭数,体外划痕实验检测细胞划痕愈合情况,ELISA测定细胞培养液上清中血管内皮生长因子(VEGF)、IFN-γ、转化生长因子-β1(TGF-β1)和IL-6含量,细胞免疫荧光染色观察细胞内Nrf2分布,Western blot测定细胞中Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果:相较于5.5 mmol/L葡萄糖组,10、25、50 mmol/L葡萄糖处理12 h和24 h时Panc-1细胞增殖率升高,Nrf2 mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05);与对照组比较,HG组细胞增殖率升高,集落形成数增加,迁移数与侵袭数均增加,划痕愈合率升高,细胞培养上清中VEGF、IFN-γ、TGF-β1和IL-6含量均增加,Nrf2荧光染色明显增强,细胞核内Nrf2表达增加,Nrf2和HO-1蛋白表达上调(P<0.05);与HG组比较,ML385+HG组细胞增殖率降低,集落形成数、迁移数与侵袭数均减少,划痕愈合率下降,培养上清中VEGF、IFN-γ、TGF-β1和IL-6含量均减少,细胞内Nrf2荧光染色较弱,Nrf2和HO-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论:高糖状态下胰腺癌细胞中Nrf2高表达,抑制Nrf2途径能够抑制高糖促进的胰腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,并减少免疫逃逸因子分泌。 展开更多
关键词 胰腺癌 高糖 核转录因子E2相关因子2 免疫逃逸因子
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胆管细胞性肝癌组织CSNK1α1的表达及其与肿瘤转移和血管生成的关系 被引量:1
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作者 唐津天 唐润娟 +1 位作者 薛峰 黎旺红 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2023年第1期40-48,共9页
目的:探究酪蛋白激酶1α1(caseinkinase1alpha1,CSNK1α1)在胆管细胞性肝癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC)组织中的表达,及其对肿瘤细胞转移及血管生成的影响。方法:收集新疆医科大学附属肿瘤医院50例ICC组织及癌旁组织样本,... 目的:探究酪蛋白激酶1α1(caseinkinase1alpha1,CSNK1α1)在胆管细胞性肝癌(intrahepatic cholangiocarcinoma, ICC)组织中的表达,及其对肿瘤细胞转移及血管生成的影响。方法:收集新疆医科大学附属肿瘤医院50例ICC组织及癌旁组织样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和免疫组化染色法检测CSNK1α1表达水平;将ICC细胞系HUCCT-1培养后随机分为对照组、si-NC组、si-CSNK1α1组,通过脂质体介导法将靶向CSNK1α1基因的短发夹RNA序列转染至HUCCT-1细胞,qRT-PCR和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)测定细胞内CSNK1α1mRNA与蛋白的表达变化,以鉴定转染效果;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移与侵袭能力变化,细胞免疫荧光染色观察细胞内上皮间质转化标志物钙黏附蛋白E(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达强度,血管生成实验检测肿瘤血管生成情况,Western blotting检测细胞中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase, MMP)2(MMP-2)及MMP-9的蛋白表达变化。结果:ICC组织CSNK1α1 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织,且ICC组织CSNK1α1阳性率也显著高于癌旁组织(P<0.01);与对照组和si-NC组比较,si-CSNK1α1组HUCCT-1细胞中CSNK1α1 mRNA相对表达量和蛋白相对表达量均下调,细胞划痕愈合率降低,细胞迁移与侵袭数目均减少,E-cadherin荧光密度值下降而Vimentin荧光密度值升高,细胞管样形成数目减少,细胞内VEGF、MMP-2及MMP-9的蛋白相对表达量均显著下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:CSNK1α1在ICC组织内呈高表达,靶向下调ICC细胞CSNK1α1表达后可抑制细胞迁移、侵袭及上皮间质转化过程,并减少血管生成,从而控制肿瘤进展。 展开更多
关键词 胆管细胞性肝癌 酪蛋白激酶1α1 转移 血管生成
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CSNK1α1通过介导p53泛素化降解途径影响胆管癌细胞周期阻滞及调亡水平的作用研究
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作者 唐津天 唐润娟 +1 位作者 易超 黎旺红 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2022年第8期558-564,共7页
目的:探究酪蛋白激酶1α1(CSNK1α1)在胆管癌细胞中的表达水平及其对肿瘤细胞周期和凋亡的影响及机制。方法:采用qRT-PCR法和Western blot法检测人胆管癌细胞系QBC939、FRH0201、RBE与正常肝内胆管上皮细胞系HIBE中CSNK1αl的表达差异;... 目的:探究酪蛋白激酶1α1(CSNK1α1)在胆管癌细胞中的表达水平及其对肿瘤细胞周期和凋亡的影响及机制。方法:采用qRT-PCR法和Western blot法检测人胆管癌细胞系QBC939、FRH0201、RBE与正常肝内胆管上皮细胞系HIBE中CSNK1αl的表达差异;将人胆管癌细胞系RBE随机分为对照组、sh-NC组、sh-CSNK1αl组,利用慢病毒感染RBE细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,qRT-PCR法和Westernblot法测定CSNK1α1表达,PI染色检测细胞各周期分布比例,流式细胞术和TUNEL染色观察细胞凋亡情况;RBE细胞转染sh-CSNK1αl慢病毒并给予蛋白酶体抑制剂MG132处理,Westernblot测定细胞内p53途径相关蛋白表达,免疫共沉淀实验分析CSNK1α1与p53结合情况及p53泛素化水平。结果:与人正常肝内胆管上皮细胞系HIBE比较,胆管癌细胞系QBC939、FRH0201、RBE中CSNK1αlmRNA相对表达量与蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与对照组和sh-NC组比较,sh-CSNK1αl组细胞中CSNK1αlmRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05),出现G2/M期阻滞(P<0.05),细胞凋亡率和TUNEL阳性率均增加(P<0.05)。与对照组比较,sh-CSNK1α1组和MG132组细胞中p53、MDM2、p21及BAX的蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与MG132组比较,sh-CSNK1αl+MG132组细胞中p53、MDM2、p21及BAX的蛋白相对表达量均进一步上调(P<0.05);CSNK1αl与p53能够形成复合物,且sh-CSNK1αl组细胞中p53蛋白泛素链明显低于对照组,p53蛋白表达则明显高于对照组。结论:CSNK1αl在人胆管癌细胞中高表达,靶向下调CSNK1αl能够使胆管癌细胞发生G2/M期阻滞,并促进细胞凋亡,该作用可能与其介导p53泛素化降解途径有关。 展开更多
关键词 胆管癌 酪蛋白激酶1α1 p53泛素化 细胞周期 凋亡
原文传递
基于翻转课堂教学模式在医学本科生外总外科手术学教学中的应用 被引量:3
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作者 晏冬 佟庆 +1 位作者 孔盼盼 张冰 《新疆医学》 2023年第9期1153-1156,共4页
随着科技和信息的发展,以翻转课堂、微课、慕课等为代表的新型在线课程和学习平台为医学高等教育教学的改革发展提供了新的机遇和挑战[1-3]。其中翻转课堂(Flipped classroom)也称“颠倒课堂”,于2007年由美国科罗拉多州“林地公园”高... 随着科技和信息的发展,以翻转课堂、微课、慕课等为代表的新型在线课程和学习平台为医学高等教育教学的改革发展提供了新的机遇和挑战[1-3]。其中翻转课堂(Flipped classroom)也称“颠倒课堂”,于2007年由美国科罗拉多州“林地公园”高中老师乔纳森·伯尔曼和亚伦·萨姆斯提出,并取得了很好的教学效果和社会反响[4]。其本质是将“教”与“学”进行了翻转. 展开更多
关键词 外科手术学 医学高等教育 医学本科生 在线课程 科罗拉多州 伯尔曼 学习平台 翻转课堂教学模式
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hsa_circ_0131457在胰腺癌组织中的表达变化及其过表达对癌细胞生物学行为的影响
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作者 孔盼盼 董永良 +1 位作者 刘慧芳 晏冬 《山东医药》 CAS 2023年第35期10-14,共5页
目的 观察环状RNA hsa_circ_0131457在胰腺癌组织和细胞中的表达变化,探讨hsa_circ_0131457过表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。方法 收集胰腺癌组织及配对癌旁正常组织各7例份,对数生长期的胰腺癌细胞PANC-1... 目的 观察环状RNA hsa_circ_0131457在胰腺癌组织和细胞中的表达变化,探讨hsa_circ_0131457过表达对胰腺癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。方法 收集胰腺癌组织及配对癌旁正常组织各7例份,对数生长期的胰腺癌细胞PANC-1、SW1990、CFPAC-1和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7,采用实时荧光定量PCR法检测hsa_circ_0131457表达。以hsa_circ_0131457表达最低的胰腺癌细胞为研究对象,分为过表达组和对照组,分别采用脂质体转染法转染hsa_circ_0131457过表达质粒及对照质粒。取转染后的两组细胞,采用CCK-8法检测两组培养0、24、48、72、96 h的OD值,TUNEL染色法检测细胞凋亡率,细胞划痕实验记录细胞迁移距离,Transwell小室实验记录穿膜细胞数,Western blotting法检测细胞凋亡相关蛋白细胞周期素D2(CCND2)和周期素依赖性激酶4(CDK4)蛋白相对表达量。结果 胰腺癌组织和癌旁正常组织hsa_circ_0131457相对表达量分别为0.011±0.017、2.084±2.287,二者比较P<0.05。胰腺癌PANC-1、SW1990、CFPAC-1细胞hsa_circ_0131457相对表达量分别为0.123±0.110、0.159±0.082、0.141±0.129,均低于正常胰腺导管上皮细胞的1.174±0.839(P均<0.05),以hsa_circ_0131457表达最低的胰腺癌PANC-1细胞用于后续研究。两组培养0、24 h的OD值比较差异均无统计学意义(P均>0.05),过表达组培养48、72、96 h的OD值均低于对照组(P均<0.05)。过表达组细胞凋亡率高于对照组,细胞迁移距离及穿膜细胞数均低于对照组(P均<0.05)。过表达组细胞CCND2、CDK4蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.05)。结论 hsa_circ_0131457在胰腺癌组织和细胞中表达均降低,过表达hsa_circ_0131457可抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过上调CCND2、CDK4表达促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭 胰腺癌
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自我效能干预对肺癌住院患者照护者心理弹性和社会功能的影响 被引量:4
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作者 韩记真 曹艳 +2 位作者 赵紫凝 刘文静 彭守华 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第6期854-857,862,共5页
目的 探讨自我效能干预模式对肺癌住院患者照护者心理弹性和社会功能的影响。方法 选取2021年1月-2022年3月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的86例肺癌患者照护者为研究对象,按随机数字表法分为观察组、对照组,每组43例。对照组以常规护... 目的 探讨自我效能干预模式对肺癌住院患者照护者心理弹性和社会功能的影响。方法 选取2021年1月-2022年3月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的86例肺癌患者照护者为研究对象,按随机数字表法分为观察组、对照组,每组43例。对照组以常规护理干预,观察组以自我效能干预。对两组心理弹性、应对能力、社会功能及对应患者的生活质量评分,并比较患者对两组的满意度。结果 干预后,观察组的心理弹性量表(CD-RISC)评分,包括坚韧性、力量、乐观性及总分均高于对照组(P<0.05)。干预后,观察组的医学应对问卷量表(MCMQ)评分,包括回避、面对、屈服评分均高于对照组(P<0.05)。干预后,观察组社会功能缺陷筛选表(SDSS)评分低于对照组,人际反应指数(IRI)、社会支持评定量表(SSRS)评分均高于对照组(P<0.05)。干预后,观察组照护对象的生理健康、心理健康、社会关系、周围环境评分均高于对照组照护对象(P<0.05)。干预后,观察组照护对象的总满意度高于对照组照护对象(P<0.05)。结论 自我效能干预模式对肺癌住院患者照护者有良好的干预效果,能够改善照护者的心理弹性和社会功能,提高照护者的应对能力,并可以改善肺癌患者的生活质量,加快肺癌患者的康复,提高患者对照护者的满意度。 展开更多
关键词 肺癌患者 照护者 自我效能干预 心理弹性 社会功能 康复
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