南疆部分地区绵羊捻转血矛线虫苯并咪唑抗性相关分子Ⅰ型β-微管蛋白基因的多态性分析

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作者 张颖 瓦热斯·吐尔松 +7 位作者 辛连喜 热依兰木·吐尔洪 卡力比夏提·艾木拉江 阿得力江·吾斯曼 胡敏 巴音查汗·盖力克 郭庆勇 赛福丁·阿不拉 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第10期49-56,共8页

为了解南疆地区绵羊捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗性相关分子β-微管蛋白基因的多态性,本研究对克州及喀什的183条捻转血矛线虫成虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定后,对抗药相关的Ⅰ型β-微管蛋白基因进行了扩增和测序,并对该抗药基因... 为了解南疆地区绵羊捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗性相关分子β-微管蛋白基因的多态性,本研究对克州及喀什的183条捻转血矛线虫成虫进行ITS-2基因特异性PCR鉴定后,对抗药相关的Ⅰ型β-微管蛋白基因进行了扩增和测序,并对该抗药基因的单核苷酸多态性(SNP)167、198和200位点进行了分析。结果:在2个地区种群中,198位点及200位点均发生不同程度突变,且以198位点突变为主,暂未在167位点发生突变;两地共发现了5种基因型,其中198位点纯合敏感型及200位点纯合抗药型(喀什12条占12.37%,克州2条占2.33%),198位点纯合抗药型及200位点纯合敏感型(喀什23条占23.71%,克州7条占8.14%)两地均存在,提示这2个种群都存在抗药性。本研究首次报道了南疆部分地区捻转血矛线虫种群Ⅰ型β-微管蛋白基因存在苯并咪唑类药物抗药性突变,为新疆地区捻转血矛线虫病的有效防控及抗药性研究提供理论依据。 展开更多

关键词 抗药性 苯并咪唑 捻转血矛线虫 Ⅰ型β微管蛋白基因 单核苷酸多态性 新疆南疆

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体外不同培养条件对多房棘球蚴活力的影响研究

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作者 何小龙 木克西娜·木拉提 +8 位作者 高瑾 石晶 杨宁 楚瑨 李亮 张雪 刘辉 林仁勇 毕晓娟 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第8期923-926,共4页

目的为了使多房棘球蚴在非寄生离体的情况下保持活力,利于移植,需要多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)在体外不同影响因素下的最佳培养条件。方法选择不同的培养条件:生理盐水培养组、无钙镁PBS培养组、血清培养组、无血清培... 目的为了使多房棘球蚴在非寄生离体的情况下保持活力,利于移植,需要多房棘球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)在体外不同影响因素下的最佳培养条件。方法选择不同的培养条件:生理盐水培养组、无钙镁PBS培养组、血清培养组、无血清培养组,在两种温度(37℃,4℃)下培养多房棘球蚴,每组1×10~4个虫体,连续培养5 d,以经典的染色方法:台盼蓝染色法、亚甲基蓝染色法、伊红染色法、Dil染色法对虫株进行活力染色并计数。第一组小鼠注射新鲜离体虫株、第二组小鼠注射4℃生理盐水处理24 h的虫株,一月后观察两处理组小鼠肝脏变化。结果随培养时间延长,台盼蓝染色结果显示,第1~5 d离体虫株生存率平均值分别为86.575%、94.600%、63.387%、51.225%、32.775%。差异有统计学意义(P<0.05)。生理盐水组、无钙镁PBS组、血清组、无血清组5 d体外培养平均生存率为50.95%、64.78%、72.50%、74.62%。台盼蓝染色结果显示,无血清组在4℃、37℃时平均生存率分别为56.475%、87.995%,两组间有统计学差异(P<0.05)。无血清组四种染色方法间无统计学差异(P>0.05)。离体虫株4℃静置24 h,生理盐水混悬注射组较新鲜离体虫株生理盐水混悬注射组小鼠动物造模感染程度低。结论37℃无血清培养的多房棘球蚴绦虫,较其余三组培养条件的体外生存率更高。进行多房棘球蚴体外移植时效果更佳,为实验室提高泡球蚴动物造模成功率,延长虫体体外生存周期奠定了基础。 展开更多

关键词 多房棘球蚴 体外培养 培养条件 染色方法

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MCP-1介导单核细胞浸润在泡型包虫病肝纤维化中的作用 被引量：1

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作者 闵宏悦 田凤鸣 +7 位作者 张靖仪 齐新伟 姜涛 李佳峻 张雪 施宁 刘玉梅 马秀敏 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期400-405,410,共7页

目的探讨肝泡型包虫病患者肝组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平与单核细胞来源巨噬细胞浸润程度、炎症及纤维化的相关性。方法采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色评估病理炎症改变和纤维化程度,采用免疫组织化学方法检测... 目的探讨肝泡型包虫病患者肝组织中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达水平与单核细胞来源巨噬细胞浸润程度、炎症及纤维化的相关性。方法采用苏木素-伊红(H&E)染色和Masson染色评估病理炎症改变和纤维化程度,采用免疫组织化学方法检测肝组织中CD68^(+)巨噬细胞和MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞浸润情况及MCP-1表达情况,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝脏组织中MCP-1的基因表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中MCP-1水平,并分析MCP-1与MAC387^(+)单核细胞来源巨噬细胞浸润的相关性,以及与肝组织炎症和纤维化的关系。结果H&E染色显示,与灶旁肝脏组织相比近端病灶组织肝小叶结构被破坏,病变周围可见炎症细胞浸润。Masson染色显示近端病灶组织门静脉区域纤维结缔组织增生,肝小叶纤维化,而灶旁肝脏组织未见明显病理改变。免疫组织化学检测显示,与灶旁肝脏组织相比近端病灶组织中CD68^(+)巨噬细胞和MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞均显著增加(均P<0.01),灶旁肝脏组织中MCP-1表达较少,而近端病灶组织MCP-1高表达(P<0.01)。相关性分析显示,肝脏组织中MCP-1的表达与MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞表达水平呈显著正相关(R=0.814,P<0.01),与肝脏炎症的严重程度呈正相关(R=0.813,P<0.01),与纤维化评分呈正相关(R=0.719,P<0.01)。qRT-PCR检测显示,近端病灶组织中MCP-1mRNA表达水平显著高于灶旁肝脏组织(P<0.05)。ELISA检测显示,与健康体检者相比肝泡型包虫病患者外周血中MCP-1水平显著升高(P<0.01)。结论MCP-1与肝泡型包虫病导致的肝脏炎症和纤维化程度呈正相关,与MAC387^(+)单核细胞来源的巨噬细胞数量呈正相关,提示MCP-1可能介导肝组织中单核细胞的浸润。因此推测MCP-1在肝泡型包虫病肝纤维化中具有重要作用。 展开更多

关键词 肝泡型包虫 巨噬细胞 MCP-1

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胆汁酸诱导的细粒棘球绦虫分化基因的转录组学分析 被引量：5

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作者 杨梅 王甜 +4 位作者 吴军 代雨岑 宗李红 李军 张文宝 《职业与健康》 CAS 2020年第10期1316-1323,共8页

目的探究细粒棘球绦虫(E.g)原头蚴向成虫早期发育的分子机制以及成虫体外培养时犬胆汁的作用,与平行无犬胆汁的包囊方向培养的样本相比较,发现成虫早期发育的差异表达基因。方法通过对有无犬胆汁培养的E.g原头蚴发育早期的21个样本进行... 目的探究细粒棘球绦虫(E.g)原头蚴向成虫早期发育的分子机制以及成虫体外培养时犬胆汁的作用,与平行无犬胆汁的包囊方向培养的样本相比较,发现成虫早期发育的差异表达基因。方法通过对有无犬胆汁培养的E.g原头蚴发育早期的21个样本进行转录组测序;对测序得到的原始序列(raw reads)经过质控(QC)检测,再与参考序列比对;进行比对率和序列在参考序列上分布的统计来判断结果是否适合进一步分析。若通过,则进行差异表达基因(DEG)筛选,对筛选出的组间差异表达基因,进行基因本体(GO)功能分析。结果DEG显示,在有无0.05%犬胆汁平行培养相同时间的两组样本中,AW0.5h-vs-AWB0.5h.DEseq2检测中,上调的DEG数目为65个,下调的DEG数目为9个;而AW3h-vs-AWB3h.DEseq2和AW72h-vs-AWB72h.DEseq2两组差异检测中,上调的DEG数目均为0个,下调的DEG数目分别为0和1个。AW0.5hvs-AWB0.5h.DEG GO功能分析显示在细胞组分中,表达产物位于膜。除膜部分的差异基因表达有下调以外,其余细胞组分中的差异基因都上调,而且表达产物位于膜的差异基因数目最多,为5个,其中基因EgrG000127200和EgrG000328500下调,基因EgrG000501300、EgrG001127500和EgrG000827500上调。结论基因EgrG000501300、EgrG001127500和EgrG000827500可能为研制犬抗细粒棘球绦虫感染疫苗及药物提供候选基因。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 胆汁酸 转录组 差异表达基因 GO功能分类

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AE患者肝细胞CD155分子表达变化及其作用研究 被引量：1

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作者 张雪 毕晓娟 +6 位作者 李亮 杨宁 刘辉 房彬彬 孙立 吕国栋 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第11期1279-1283,1290,共6页

目的探讨CD155(脊髓灰质炎病毒受体,PVR)分子表达变化在泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)感染所致T细胞免疫耗竭中的作用及其临床意义。方法对新疆医科大学第一附属医院收治的29例接受手术切除的AE患者,分别收集泡球蚴病灶近旁(C... 目的探讨CD155(脊髓灰质炎病毒受体,PVR)分子表达变化在泡球蚴(Echinococcus multilocularis,Em)感染所致T细胞免疫耗竭中的作用及其临床意义。方法对新疆医科大学第一附属医院收治的29例接受手术切除的AE患者,分别收集泡球蚴病灶近旁(CLT)和远端(DLT)肝组织进行免疫组织化学染色检查,比较病灶近旁和远端的组织病变及CD155表达情况,分析AE患者近旁/远端CD155^(+)肝细胞比率(CLT/DLT)与血清丙氨酸转氨酶/天冬氨酸转氨酶比值(AST/ALT)的相关性。用泡球蚴蛋白(Em protein,EmP)体外刺激7702肝细胞系,采用流式细胞术及qPCR法检测CD155及其mRNA的表达;分别用过表达CD155的慢病毒LV-CD155^(H)和敲低CD155表达的慢病毒LV-CD155^(L)转染7702肝细胞系,构建CD155过表达(CD155-H)和CD155敲低(CD155-L)7702肝细胞系,并与CD4^(+)CD8^(+)T淋巴细胞共培养,观察其对效应因子IFN-γ表达变化的影响。结果免疫组化染色检查CD155在AE患者病灶旁肝组织高表达,且表达量近旁高于远端(P<0.01)。相关性分析显示,CD155^(+)肝细胞表达比率(CLT/DLT)和AST/ALT比值呈正相关(r=0.4178,P<0.05);流式细胞术及qPCR检测显示,Emp可使7702肝细胞系CD155及其mRNA表达上调,CD155表达水平变化与Emp蛋白浓度呈正相关(P<0.05);ELISA检测显示,与正常对照组相比慢病毒LV-CD155^(H)转染共培养组CD4^(+)CD8^(+)T细胞分泌效应因子干扰素γ(IFN-γ)能力降低,慢病毒LV-CD155^(L)转染共培养组CD4^(+)CD8^(+)T细胞分泌IFN-γ能力升高(均P<0.01)。结论泡球蚴感染可致AE患者肝脏CD155高表达,靶向调控CD155可恢复CD4^(+)CD8^(+)T细胞功能。 展开更多

关键词 多房棘球绦虫 CD155 T细胞免疫耗竭

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二肽基肽酶-4在泡球蚴感染致肝纤维化中的作用研究 被引量：1

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作者 努尔拜提·库苏曼 木克西娜·木拉提 +9 位作者 毕晓娟 杨宁 楚瑨 刘辉 房彬彬 吕国栋 李亮 张雪 孙立 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2023年第1期47-51,共5页

目的 明确二肽基肽酶-4(DPP4)在泡球蚴感染所致肝纤维化中的作用。方法 取泡球蚴不同感染时期(1、3、6个月)小鼠肝脏组织,HE染色检查肝脏组织病理学变化,天狼星红染色法检测肝纤维化程度,免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和... 目的 明确二肽基肽酶-4(DPP4)在泡球蚴感染所致肝纤维化中的作用。方法 取泡球蚴不同感染时期(1、3、6个月)小鼠肝脏组织,HE染色检查肝脏组织病理学变化,天狼星红染色法检测肝纤维化程度,免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和DPP4的表达,采用相关分析法分析DPP4蛋白表达水平与肝纤维化的相关性。小鼠肝星状细胞(JS1),经60μg/ml泡球蚴蛋白(EmP)刺激后采用实时荧光定量PCR检测DPP4、α-SMA、COL1A1、TIMP1、MMP2的mRNA表达水平。结果 与对照组比较组,模型组小鼠感染泡球蚴后1、3、6个月α-SMA表达上调(阳性面积分别为3.521±0.8862、7.846±0.9873、15.34±0.6263)(均P<0.05),且呈时间依赖;天狼星红染色病灶旁纤维组织阳性面积增加(阳性面积分别为56979±9550、69844±763.8、82687±13774)(均P<0.05),且呈时间依赖;DPP4表达上调(阳性面积分别为5038±201.2、6110±174.4、9021±697.4)(均P<0.05),且呈时间依赖。泡球蚴感染小鼠DPP4表达水平与α-SMA相对表达量呈正相关(R^(2)=0.9166,P<0.05),与天狼星红阳性区域面积呈正相关(R^(2)=0.5368,P<0.05)。泡球蚴蛋白刺激小鼠肝星状细胞系JS1,肝星状细胞活化标志物α-SMA、COL1a1、TIMP1、MMP2 mRNA表达上调,DPP4的mRNA也随之上调(均P<0.05)。结论 DPP4参与泡球蚴感染所致肝纤维化过程并随纤维化加重表达上调,为阐明泡型棘球蚴病的致病机制和寻找新的治疗靶点奠定了基础。 展开更多

关键词 多房棘球蚴 二肽基肽酶-4 肝纤维化

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单核细胞源性巨噬细胞MAC387对肝泡型包虫病患者肝脏炎症与纤维化的作用 被引量：1

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作者 张靖仪 田凤鸣 +7 位作者 姜涛 齐新伟 李佳峻 闵宏悦 麦迪乃姆·艾比布拉 周璇 刘玉梅 马秀敏 《新发传染病电子杂志》 2023年第1期19-25,共7页

目的通过检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织(CLT组)与远端对照肝组织(DLT... 目的通过检测肝泡型包虫病(AE)患者肝组织中MAC387的表达水平,探讨其在肝脏炎症和纤维化中的作用。方法收集新疆医科大学第一附属医院2020年6月至2022年3月收治的32例AE患者肝脏组织标本,分为病灶近旁肝组织(CLT组)与远端对照肝组织(DLT组)。通过HE染色和天狼星红染色分别评估患者肝组织病理学炎症改变及胶原沉积,并对CLT组进行炎症分级评分和纤维化分期评分;用免疫组织化学实验分别检测CLT组和DLT组MAC387的阳性表达,并将AE患者分为MAC387高水平组和MAC387低水平组,分析临床主要肝功能生化指标的相关性及手术前后各指标的变化;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测两组肝组织MAC387mRNA的表达。结果与DLT组相比,CLT组肝脏中MAC387显著增加(P<0.001)。此外,与炎症分级评分和纤维化分期评分较低的患者相比,炎症分级评分和纤维化分期评分较高的患者肝脏中MAC387浸润更多(P<0.001),且MAC387高水平组与ALT、AST呈正相关(ALT:r=0.523,P=0.013;AST:r=0.503,P=0.017),与GGT、ALP、Alb无显著相关性(均P>0.05),MAC387低水平组与ALT、AST、GGT、ALP、Alb均无相关性(均P>0.05)。术后第9天,MAC387低水平组的GGT水平高于MAC387高水平组,且差异有统计学意义(P<0.05)。CLT组MAC387mRNA表达显著高于DLT组(P<0.05)。结论MAC387在肝泡型包虫病患者肝组织中高表达,并且在炎症分级评分和纤维化分期评分较高患者中浸润增加,提示可能在加重AE的肝脏炎症和纤维化中发挥作用。 展开更多

关键词 肝泡型包虫病 单核细胞源性巨噬细胞MAC387 肝脏炎症和纤维化

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前列腺素E2的代谢和转运途径及其在肝再生中的作用 被引量：4

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作者 杨宁 吕国栋 温浩 《中华肝脏病杂志》 CSCD 北大核心 2021年第2期183-187,共5页

肝脏是具有再生能力的器官,对于机体稳态的维持至关重要。在病理情况下,例如慢性肝炎、肝硬化等,肝脏再生能力的受损会导致患者肝功能不足甚至肝衰竭,促进肝脏的再生可以改善患者预后。前列腺素E2是一种有生理活性的激素样信使,具有促... 肝脏是具有再生能力的器官,对于机体稳态的维持至关重要。在病理情况下,例如慢性肝炎、肝硬化等,肝脏再生能力的受损会导致患者肝功能不足甚至肝衰竭,促进肝脏的再生可以改善患者预后。前列腺素E2是一种有生理活性的激素样信使,具有促进组织再生的作用。现针对前列腺素E2的代谢和转运途径及其在肝脏组织再生中的作用机制进行综述,并提出前列腺素E2是参与肝再生过程的重要细胞因子,具有潜在治疗肝损伤的临床应用前景。 展开更多

关键词 前列腺素E2 肝再生 代谢途径 信号通路

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细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞免疫功能的影响 被引量：3

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作者 尚琳琳 李玲慧 +3 位作者 李静 李亮 林仁勇 张传山 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第8期902-908,共7页

目的探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响。方法经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水。感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD... 目的探讨不同剂量细粒棘球蚴感染对小鼠脾脏NKT细胞(natural killer T cells)免疫功能的影响。方法经肝门静脉注射细粒棘球蚴建立C57BL/6小鼠感染模型,对照组注射生理盐水。感染组分为低剂量组(50个原头蚴,LD)、中剂量组(500个原头蚴,MD)和高剂量组(2 000个原头蚴,HD)。于造模后12周采集小鼠肝脏和脾脏标本,采用HE及Masson染色检查肝脏病灶和纤维化程度;采用流式细胞术检测小鼠脾脏NKT细胞表型、不同NKT亚群比例,以及相关细胞因子(IFN-γ、IL-4、IL-10及IL-17A)的表达情况。结果不同剂量细粒棘球蚴感染组小鼠肝脏均可见囊泡结构样病灶,病灶周围出现胶原沉积,对照组肝脏仅汇管区可见少量胶原沉积。中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT细胞比例分别为(1.34±0.27)%和(1.33±0.21)%,与对照组(2.54±0.43)%和低剂量组(2.41±0.53)%比较差异有统计学意义(F=16.451,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)CD4^(+) NKT细胞比例分别为(15.6±2.00)%和(17.5±3.98)%,与对照组(11.1±2.82)%和低剂量组(11.1±1.31)%比较差异有统计学意义(F=8.130,P<0.05)。高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)CD8^(+) NKT细胞比例为(70.1±7.52)%,与对照组(85.3±2.68)%和低剂量组(83.1±3.90)%比较差异有统计学意义(F=12.42,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏CD69^(+)DN NKT细胞比例分别为(29.3±2.02)%和(27.2±5.20)%,与对照组(35.6±4.26)%比较差异有统计学意义(F=3.277,P<0.05)。中、高剂量感染组小鼠脾脏NKT1型细胞分泌IFN-γ比例低于对照组和低剂量组(F=40.00,P<0.01)。高剂量感染组小鼠脾脏NKT2型细胞分泌IL-4比例高于对照组、低剂量组和高剂量组(F=10.54,P<0.001)。中、高剂量感染组脾脏NKT17型细胞分泌IL-17A比例低于对照组和低剂量组(F=13.00,P<0.01)。低、中、高剂量感染组脾脏NKT10型细胞分泌IL-10比例高于对照组(F=45.59,P<0.01)。中、高剂量感染组脾脏CD4^(+)NKT1型细胞分泌IFN-γ� 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 细粒棘球蚴病 脾脏 自然杀伤T细胞

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AMPK信号通路及其在感染性疾病中的研究进展 被引量：3

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作者 颜明智 赵军 +2 位作者 刘辉 毕晓娟 吕国栋 《热带病与寄生虫学》 2021年第1期47-51,共5页

腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是一种AMP依赖性的蛋白激酶,负责调节细胞能量的合成与分解,是细胞生长、繁殖和自噬的关键调节剂。AMPK及其信号通路在病毒、细菌和寄生虫等感染中发挥了重要作用,有望成为一种... 腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)是一种AMP依赖性的蛋白激酶,负责调节细胞能量的合成与分解,是细胞生长、繁殖和自噬的关键调节剂。AMPK及其信号通路在病毒、细菌和寄生虫等感染中发挥了重要作用,有望成为一种药物新靶点。本文将对近年来AMPK信号通路在感染性疾病中的研究展开综述。 展开更多

关键词 腺苷酸活化蛋白激酶信号通路 能量代谢 感染性疾病 病原体 药物靶点

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新疆维吾尔自治区昌吉州吉木萨尔县包虫病患者药物治疗现状及医防结合体系建设 被引量：2

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作者 孙立 房彬彬 +5 位作者 王军 黄爱芝 郭敏 刘红旭 李波霖 王慧 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期128-134,共7页

目的了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)包虫病流行地区昌吉州吉木萨尔县包虫病患者药物治疗状况,探索新疆包虫病医防结合体系建设,为包虫病医防结合工作模式的优化和推广提供依据.方法收集2009-2018年吉木萨尔县疾病预防控制(疾控)中心登... 目的了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)包虫病流行地区昌吉州吉木萨尔县包虫病患者药物治疗状况,探索新疆包虫病医防结合体系建设,为包虫病医防结合工作模式的优化和推广提供依据.方法收集2009-2018年吉木萨尔县疾病预防控制(疾控)中心登记在册的包虫病患者资料,通过双人录入原则进行患者病案资料和随访信息的整理,应用定量与定性相结合的研究方法,对患者防治体系进行基线调查(包括地区分布、文化程度、复发、随访服药情况等);对纳入医防结合模式的包虫病患者全程追踪随访,进行医防结合模式实施前后治疗情况对比分析,采用logistic回归模型分析影响随访效果的可能因素;采用半结构化问卷调查对现行包虫病医防结合模式实施效果进行评估.结果包虫病患者主要分布在乡村(81.48%,154/189),文化程度大多在高中及以下(94.18%,178/189),复发治疗占39.68%(75/189),随访服药不规范患者占68.25%(129/189).经多因素分析,无副反应、随访肝功异常、B超检查≥2次、多包囊的患者有效随访服药率更高(P<0.01或<0.05).吉木萨尔县实施医防结合模式后,对包虫病诊断分期不明比例下降60.18%,初步形成了以门诊、疾控、卫生院为主的医防结合包虫病管理模式.结论新疆包虫病流行区昌吉州吉木萨尔县包虫病患者复发比例高,有效随访服药患者比例低.对新疆包虫病医防结合模式进行了探索,形成了医疗机构同疾控机构联动的工作机制,提出了工作模式建议,可为医防结合模式的进一步推广及综合评价提供科学依据. 展开更多

关键词 棘球蚴病 药物治疗 医防结合 体系建设 效果评价

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细粒棘球绦虫腺苷酸活化蛋白激酶AMPKβ基因克隆及生物信息学分析 被引量：1

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作者 颜明智 库尔班尼沙·阿马洪 +1 位作者 周婧 吕国栋 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第1期65-70,共6页

目的克隆细粒棘球绦虫腺苷酸活化蛋白激酶β(AMP-activated protein kinaseβof Echinococcus granulosus sensu stricto,EgAMPKβ)基因全长序列,并进行生物信息学分析。方法提取细粒棘球绦虫原头蚴总RNA,利用PCR技术克隆EgAMPKβ基因... 目的克隆细粒棘球绦虫腺苷酸活化蛋白激酶β(AMP-activated protein kinaseβof Echinococcus granulosus sensu stricto,EgAMPKβ)基因全长序列,并进行生物信息学分析。方法提取细粒棘球绦虫原头蚴总RNA,利用PCR技术克隆EgAMPKβ基因全长序列,并采用生物信息学技术对该基因编码蛋白的理化性质、磷酸化位点、抗原表位、结构域、二级结构、三级结构、多序列分析和亲缘性比较等进行生物信息学分析。结果EgAMPKβ的cDNA全长981 bp,编码326个氨基酸,相对分子质量为35.23585×10^(3),属于亲水性蛋白,无信号肽序列和跨膜区,具有22个丝氨酸磷酸化位点,15个苏氨酸磷酸化位点,含有5个酪氨酸磷酸化位点;4个B细胞抗原表位,具有碳水化合物结合模块(Carbohydrate-binding module,CBM)和αγ亚单位相互作用域(αγ-subunits interaction domain,αγ-SID)。EgAMPKβ基因与多房棘球绦虫和人AMPKβ基因序列相似性分别为98.47%和39.57%,与多房棘球绦虫、微口膜壳绦虫同属于绦虫纲,与人、猩猩和小鼠等哺乳纲动物的进化关系较远。结论成功克隆了EgAMPKβ基因,生物信息学分析其编码蛋白具有保守的功能结构域,对细粒棘球绦虫的能量代谢具有调控作用,为进一步了解细粒棘球绦虫能量代谢机制及其新型抗包虫病药物靶点开发提供了研究基础。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 腺苷酸活化蛋白激酶β 基因克隆 生物信息学分析

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细粒棘球绦虫Innexin-unc9基因在不同发育阶段的表达分析

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作者 黎飞海 吴军 +1 位作者 张文宝 杨梅 《新疆医科大学学报》 CAS 2022年第10期1085-1090,共6页

目的探究胆汁酸盐(胆盐)对细粒棘球绦虫(E.granulosus,E.g)发育分化的影响,分析E.gInnexin-unc9(EgInx)基因在体外有无胆盐-牛磺胆酸钠(Sodium taurocholate)培养的原头蚴(PSC)的表达水平,为研发犬抗E.g疫苗奠定基础。方法采用含与不含T... 目的探究胆汁酸盐(胆盐)对细粒棘球绦虫(E.granulosus,E.g)发育分化的影响,分析E.gInnexin-unc9(EgInx)基因在体外有无胆盐-牛磺胆酸钠(Sodium taurocholate)培养的原头蚴(PSC)的表达水平,为研发犬抗E.g疫苗奠定基础。方法采用含与不含T4009(牛磺胆酸钠的商品型号缩写)的单相培养基分别进行PSC培养,在不同培养时间点对比分析PSC外翻率和发育状态;利用反转录荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western Blotting检测不同培养点样本的EgInx相对表达量。结果不同时间点平行培养的原头蚴外翻情况不同,在培养30 min时和10 d以后,无T4009组的PSC外翻率急剧下降;RT-qPCR结果显示:与从体内刚采集的PSC相比,其EgInx的表达量在培养30 min的T4009组较高,且此时T4009组表达量高于平行无T4009组,且差异具有统计学意义(P<0.05),培养到17 d时,得到类似的结果;Western Blotting和RT-qPCR结果一致。结论提示在有牛磺胆酸钠的环境中,E.gInnexin-unc9在关键节点表达升高,可能参与调控细粒棘球绦虫的生长发育。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 牛磺胆酸钠 内联蛋白 表达

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细粒棘球绦虫TAK1基因ORF的克隆及其蛋白生物信息学分析

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作者 刘丽英 李军 +2 位作者 张文宝 吴军 杨梅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第12期1392-1398,共7页

目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用... 目的克隆细粒棘球绦虫(Eg)TAK1基因的开放阅读框(ORF)全长,预测其编码的蛋白EgTAK1的结构特点和生物学功能。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgTAK1-ORF全长,克隆至载体pMD20-T上并测序;从NCBI蛋白质数据库中下载EgTAK1的氨基酸序列,利用生物信息学分析软件分别对EgTAK1的理化性质、磷酸化位点、O-糖基化位点、N-糖基化位点、亲/疏水性、保守结构域、跨膜结构域、信号肽序列进行预测;采用MEGA 7.0软件对不同物种来源的TAK1蛋白进行多序列比对并构建系统进化树。采用实时荧光定量PCR检测细粒棘球绦虫在不同发育阶段TAK1基因mRNA的相对表达量。结果EgTAK1基因ORF全长1116 bp,编码371个氨基酸,理论等电点为5.97,不稳定指数为49.59,属于不稳定蛋白;脂肪系数为87.22,总平均亲水系数为-0.291,为亲水性蛋白;EgTAK1蛋白含有64个磷酸化位点,3个O-糖基化潜在位点,4个N-糖基化位点;EgTAK1蛋白属于蛋白激酶C类似(PKC-like)家族;无跨膜结构和信号肽,亚细胞可能定位于细胞膜、细胞质及细胞核内。该蛋白含有7个优势B细胞抗原表位,具有良好的免疫原性。二级结构包含34.77%的α-螺旋,5.12%的β-转角,40.97%的无规卷曲,19.14%的延伸链。TAK1蛋白同源序列比对中与多房棘球绦虫的TAK1同源性最高为83%。实时荧光定量PCR显示,细粒棘球绦虫在不同发育阶段EgTAK1表达有差异,成虫阶段相对表达量最高。结论基因EgTAK1可能是细粒棘球绦虫发育分化的重要调控基因,预测该基因编码的蛋白含有B细胞抗原表位,有可能成为包虫病免疫学预防及药物研制的靶标抗原。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 TAK1 生物信息学分析 PCR

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细胞疗法在食管狭窄性疾病中的应用及评价

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作者 李子垚 伊地力斯·阿吾提 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2022年第5期31-35,共5页

食管狭窄严重影响患者生活质量,最多见于食管相关疾病外科术后、腐蚀性物质的摄入以及放疗。传统的治疗方式主要包括内镜下狭窄处扩张干预、口服或局部注射激素和食管支架的置入。虽然外科技术和器械的进步能够使食管的功能和连续性得... 食管狭窄严重影响患者生活质量,最多见于食管相关疾病外科术后、腐蚀性物质的摄入以及放疗。传统的治疗方式主要包括内镜下狭窄处扩张干预、口服或局部注射激素和食管支架的置入。虽然外科技术和器械的进步能够使食管的功能和连续性得以继续维持,但是预防食管狭窄始终是“食管修复治疗”后的一个重要环节,目前现有的传统治疗方式尚未得以满足临床需求。细胞疗法追溯至生物体的本质,可修复或重建受损的细胞、组织与器官,一旦在各领域被成功攻克将有很大希望逆转人类疾病。本文综述以“食管粘膜再生”为策略,依据主要作用原理机制的不同,阐述了三种不同种类的细胞疗法在预防食管狭窄性疾病中可能的作用并做出评价。 展开更多

关键词 再生医学 细胞疗法 食管狭窄

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Cystatin 6蛋白在哈萨克族食管鳞癌组织中的表达及其意义

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作者 李子垚 张海平 +3 位作者 买地尼也提·尼亚孜 居来提·艾尼瓦尔 张力为 伊地力斯·阿吾提 《癌变．畸变．突变》 CAS 2022年第6期429-433,438,共6页

目的:检测哈萨克族食管鳞癌患者的癌组织及其癌旁正常组织人型半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatin 6(cystatin M/E,CST6)的蛋白表达水平,并分析其与临床病理指标和预后之间的关系。方法:收集2010年12月—2020年12月行食管癌根治术的55例哈萨... 目的:检测哈萨克族食管鳞癌患者的癌组织及其癌旁正常组织人型半胱氨酸蛋白酶抑制剂cystatin 6(cystatin M/E,CST6)的蛋白表达水平,并分析其与临床病理指标和预后之间的关系。方法:收集2010年12月—2020年12月行食管癌根治术的55例哈萨克族食管鳞癌患者癌组织及癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学染色法检测其CST6蛋白的表达情况。χ^(2)检验分析CST6蛋白表达和患者临床病理指标之间的关系,Kaplan-Meier单因素和COX多因素分析影响食管癌预后的危险因素。结果:CST6蛋白的表达主要定位于细胞质、细胞膜以及角化区。食管鳞癌组织中CST6蛋白的阳性表达率为36.4%(20/55),癌旁正常组织中的阳性表达率为63.6%(35/55),差异具有统计学意义(χ^(2)=9.032,P=0.003)。CST6蛋白的表达水平与家族史(P=0.045)和肿瘤分化程度(P=0.036)有关,无肿瘤家族史以及肿瘤高分化的患者其阳性表达率更高。Kaplan-Meier生存分析发现,CST6蛋白的表达水平与患者的总生存率有关(P<0.05)。结论:CST6蛋白在哈萨克族食管鳞癌患者中呈低表达,CST6的低表达可能是哈萨克族食管鳞癌发病及不良预后的危险因素之一。 展开更多

关键词 哈萨克族 食管鳞癌 半胱氨酸组织蛋白酶抑制剂 抑癌基因 预后

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泡球蚴蛋白促进脂肪间充质干细胞向肝细胞分化的研究

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作者 刘辉 毕晓娟 +6 位作者 杨宁 柯颖 孙立 楚瑨 孙涛 吕国栋 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2022年第4期425-429,434,共6页

目的 探讨泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis protein,EmP)促脂肪间充质干细胞(Adipose tissue Derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs)向肝细胞分化的作用。方法 体外分离人脂肪组织来源的ADSCs,第三代(P3)ADSCs分为对照组(HDM... 目的 探讨泡球蚴蛋白(Echinococcus multilocularis protein,EmP)促脂肪间充质干细胞(Adipose tissue Derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs)向肝细胞分化的作用。方法 体外分离人脂肪组织来源的ADSCs,第三代(P3)ADSCs分为对照组(HDM肝细胞诱导分化组)和Em蛋白处理组(HDM+EmP组),经无血清肝细胞诱导培养基培养7、14和21 d,检测对照组和EmP处理组肝细胞样细胞(iHep)百分比、糖原染色面积、肝细胞标志物白蛋白(Albumin,ALB)的蛋白及基因表达水平。Western-Blot法检测p-GSK-3β的表达情况。结果 P3代ADSCs具有成脂及成骨分化能力并表达干细胞标志物(CD29、CD90和CD105等)。在ADSCs向肝细胞诱导分化14 d,EmP处理组iHep细胞百分比显著高于对照组(P<0.05),EmP处理组糖原染色面积显著高于对照组(P<0.05)。免疫荧光染色结果显示两组细胞在诱导分化7 d开始表达ALB,荧光强度随诱导时间增加呈增强趋势。qPCR结果显示在诱导分化后第14 d,EmP处理组ALB表达水平显著高于对照组,两组间具有统计学差异(P<0.05)。Western-Blot结果显示,诱导分化第7 d和14 d,EmP处理组p-GSK-3β蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.01和P<0.05)。结论 Em蛋白可能通过激活GSK-3β而具有促进ADSCs向肝细胞分化的作用,本研究为临床应用ADSCs移植治疗泡型棘球蚴病奠定了基础。 展开更多

关键词 泡球蚴蛋白 脂肪间充质干细胞 肝细胞分化 GSK-3Β

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EpCAM在泡球蚴感染所致小鼠肝纤维化中的作用研究

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作者 杨宁 闫怡 +6 位作者 刘辉 毕晓娟 吕国栋 孙立 柯颖 马文梅 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第11期1304-1309,共6页

目的通过检测泡球蚴感染不同时期小鼠肝脏纤维化情况以及上皮细胞粘附因子(Epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)在肝脏中的表达水平变化,探讨EpCAM在泡球蚴感染所致小鼠肝纤维化中的作用。方法36只雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术... 目的通过检测泡球蚴感染不同时期小鼠肝脏纤维化情况以及上皮细胞粘附因子(Epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)在肝脏中的表达水平变化,探讨EpCAM在泡球蚴感染所致小鼠肝纤维化中的作用。方法36只雌性C57BL/6小鼠随机分为假手术组和模型组,采用门静脉注射法建立泡球蚴感染模型,于感染后30、90和180d各取12只小鼠处死,HE染色观察肝脏病理改变,天狼星红染色以及Masson染色检测肝脏纤维化水平;免疫组化检测泡球蚴感染小鼠肝脏中EpCAM的表达。实验设假手术对照组。采用Pearson相关系数法对EpCAM以及肝脏纤维化水平进行相关性分析。结果HE染色观察模型组小鼠肝脏中可见泡球蚴病灶且病灶周围伴有纤维化。天狼星红染色结果显示与假手术组相比,感染组病灶周围纤维化程度随着感染时间延长而加重,天狼星红染色两组小鼠阳性面积在感染后30d分别为[(19540.94±2607.76)μm^2和(2071.03±159.14)μm^2],90d分别为[(23641.96±2795.52)μm^2和(2170.86±437.56)μm^2],180d分别为[(42018.43±2309.06)μm^2和(2125.30±273.73)μm^2],差异均有统计学意义(均P<0.05)。Masson染色结果显示与假手术组相比,感染组病灶周围可见大面积胶原表达,围绕病灶形成纤维环/带,且纤维化程度随着感染时间的延长逐渐加重,两组小鼠胶原阳性染色面积在感染后30d分别为[(6127.40±339.07)μm^2和(2851.31±110.58)μm^2],90d分别为[(8636.59±356.79)μm^2和(2214.14±221.38)μm^2],180d分别为[(12537.15±370.39)μm^2和(2556.65±94.36)μm^2],差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫组化结果显示假手术组和感染组小鼠EpCAM表达在感染后30d分别为[(784.66±161.65)μm^2和(161.83±55.85)μm^2],90d分别为[(1246.80±213.54)μm^2和(171.46±19.44)μm^2],180d分别为[(1307.92±117.01)μm^2和(195.15±25.48)μm^2],差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示EpCAM的表达水平与天狼星红染色阳性区域� 展开更多

关键词 上皮细胞粘附因子 泡球蚴 小鼠 肝纤维化

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荧光三维重建技术在细粒棘球蚴结构解析中的应用

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作者 杨宁 闫怡 +6 位作者 毕晓娟 刘辉 房彬彬 孙立 楚瑨 吕国栋 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期667-670,共4页

目的利用激光共聚焦显微镜对体外培养的细粒棘球蚴进行荧光染色三维重建,探讨荧光三维重建技术在细粒棘球蚴结构解析中的应用价值。方法建立细粒棘球蚴体外培养体系,制作细粒棘球蚴冰冻切片,设置活体观察组、冰冻切片组及三维重建组3组... 目的利用激光共聚焦显微镜对体外培养的细粒棘球蚴进行荧光染色三维重建,探讨荧光三维重建技术在细粒棘球蚴结构解析中的应用价值。方法建立细粒棘球蚴体外培养体系,制作细粒棘球蚴冰冻切片,设置活体观察组、冰冻切片组及三维重建组3组,分别利用细胞核荧光染料DAPI(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)和细胞膜荧光探针DiI(1,1’-Dioctadecyl-3,3,3’,3’-Tetramethylindocarbocyanine Perchlorate,DiI)对虫体进行染色,置于激光共聚焦显微镜下进行图像采集或三维重建,比较3种荧光成像方式的异同。结果DAPI及DiI荧光可分别标记出细粒棘球蚴的细胞核与细胞膜结构。活体观察组仅良好显示虫体外膜结构,与冰冻切片组及三维重建组相比,虫体内部结构荧光结合效率低,无法实现虫体内部结构解析;冰冻切片组虫体内外部结构荧光标记效率高,但虫体形态均由外翻型棘球蚴转变为内陷型,虫体表面出现明显皱缩,提示虫体结构遭到破坏;三维重建组虫体形态良好,虫体内外部结构荧光结果效率高,三维重建后可同时显示虫体内外部的荧光分布。结论荧光三维重建技术应用于细粒棘球蚴的结构解析,可获取荧光信号在细粒棘球蚴空间上的分布信息,具有较好的应用价值。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 激光共聚焦显微镜 三维重建

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新疆株细粒棘球蚴Innexin-unc9ORF的克隆鉴定及蛋白生物信息学分析

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作者 黎飞海 吴军 +3 位作者 李军 张文宝 吴川川 杨梅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第11期1272-1279,共8页

目的分子克隆新疆株细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(也称内联蛋白,EgInnexin unc9,EgInx)的完整开放阅读框(ORF)并鉴定,利用生物信息学软件分析该蛋白的分子特性,为进一步研究EgInx的功能和研制犬抗细粒棘球绦虫疫苗奠定基础。方法从新... 目的分子克隆新疆株细粒棘球绦虫缝隙连接通道蛋白(也称内联蛋白,EgInnexin unc9,EgInx)的完整开放阅读框(ORF)并鉴定,利用生物信息学软件分析该蛋白的分子特性,为进一步研究EgInx的功能和研制犬抗细粒棘球绦虫疫苗奠定基础。方法从新疆株细粒棘球蚴中扩增EgInx-ORF全长,克隆到pMD20-T上并测序;利用Expasy ProtParam、ProtScale、SignalP-5.0、TMHMM2.0、NetPhos3.1、ProtCompv9.0、NetSurfP-2.0和SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学分析软件分析EgInx的理化特性、信号肽序列、跨膜结构域、磷酸化位点、蛋白翻译后修饰位点及亚细胞定位、二级结构及三级结构;采用BLAST进行蛋白序列的同源性分析,采用Mega7进行系统进化分析。结果EgInx-ORF全长约1317 bp,编码438个氨基酸残基的EgInx蛋白;该蛋白等电点7.19,不稳定系数48.05,为不稳定蛋白;亲水性平均系数0.086,为疏水性蛋白,存在4个跨膜结构域;该蛋白不含信号肽序列,可能是非分泌跨膜蛋白。EgInx具有42个丝氨酸(Ser)磷酸化位点,29个苏氨酸(Thr)磷酸化位点,10个酪氨酸(Tyr)磷酸化位点;该蛋白有多个翻译后修饰位点,主要定位于细胞膜、高尔基体和线粒体。预测其二级结构以α-螺旋为主,占53.42%;三维结构以八聚体形式组装。EgInx与扁形动物门绦虫纲的多房棘球绦虫(Em)、小口膜壳绦虫(Hm),涡虫纲的东亚三角头涡虫(Dj),吸虫纲的中华枝睾吸虫(Cs)、日本血吸虫(Sj)的Innexin unc 9的氨基酸序列一致性分别为98.14%、58.97%、33.66%、33.11%、33.69%。进化树分析显示,EgInx与Em、Hm的Inx在一个分支上。结论成功克隆了EgInx-ORF,预测EgInx蛋白为疏水性跨膜蛋白,且含有多个磷酸化位点,可为EgInx的功能研究提供参考。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 内联蛋白 克隆 生物信息学

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