扩增禽4型副黏病毒(Avian paramyxovirus type 4,APMV-4)新疆野鸭源分离株APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/2016的F基因,并构建原核表达载体。参考GenBank上公布的APMV-4序列,通过DNAStar设计F基因特异性引物,以APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/201...扩增禽4型副黏病毒(Avian paramyxovirus type 4,APMV-4)新疆野鸭源分离株APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/2016的F基因,并构建原核表达载体。参考GenBank上公布的APMV-4序列,通过DNAStar设计F基因特异性引物,以APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/2016基因组RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增F基因编码区,连接于pMD19-T载体,用BamHⅠ和HindⅢ酶切原核表达载体pET-30a重组质粒,将酶切产物克隆至pET-30a多克隆位点上,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,构建F基因原核表达载体,并对阳性重组质粒进行PCR和测序鉴定。结果显示,扩增出的片段大小为1701 bp,经测序鉴定该扩增片段为F基因全长,与GenBank中收录的APMV-4序列核苷酸相似性为99%;连接表达载体结果表明,原核表达载体pET-30a-F成功构建,为APMV-4诊断方法的建立提供了良好的技术基础。展开更多
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种免疫抑制性疾病,又称“猪蓝耳病”。该病毒属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属病毒,PRRSV主要感染单核巨噬细胞系统,尤其...猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种免疫抑制性疾病,又称“猪蓝耳病”。该病毒属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属病毒,PRRSV主要感染单核巨噬细胞系统,尤其对猪的肺泡巨噬细胞具有专噬性,导致感染猪蓝耳病毒的猪只出现免疫抑制现象。展开更多
文摘扩增禽4型副黏病毒(Avian paramyxovirus type 4,APMV-4)新疆野鸭源分离株APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/2016的F基因,并构建原核表达载体。参考GenBank上公布的APMV-4序列,通过DNAStar设计F基因特异性引物,以APMV-4/Pintail/CH(XJ)/01/2016基因组RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增F基因编码区,连接于pMD19-T载体,用BamHⅠ和HindⅢ酶切原核表达载体pET-30a重组质粒,将酶切产物克隆至pET-30a多克隆位点上,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,构建F基因原核表达载体,并对阳性重组质粒进行PCR和测序鉴定。结果显示,扩增出的片段大小为1701 bp,经测序鉴定该扩增片段为F基因全长,与GenBank中收录的APMV-4序列核苷酸相似性为99%;连接表达载体结果表明,原核表达载体pET-30a-F成功构建,为APMV-4诊断方法的建立提供了良好的技术基础。
文摘猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种免疫抑制性疾病,又称“猪蓝耳病”。该病毒属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属病毒,PRRSV主要感染单核巨噬细胞系统,尤其对猪的肺泡巨噬细胞具有专噬性,导致感染猪蓝耳病毒的猪只出现免疫抑制现象。
