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新疆地区草原革蜱MaxEnt分布预测分析 被引量：4
1
作者 胡政香 诺明达来 +1 位作者 余权威 呼尔查 《生态科学》 CSCD 2022年第4期92-101,共10页
草原革蜱是新疆地区常见的蜱种之一。该蜱能够携带和传播多种人畜共患病原体。为了分析该蜱在新疆的潜在分布模式,本次预测分布采用了生物气候数据变量数据,以及草原革蜱GPS出现位点的元数据,其中包含48个甄选GPS位点,用以进行MaxEnt分... 草原革蜱是新疆地区常见的蜱种之一。该蜱能够携带和传播多种人畜共患病原体。为了分析该蜱在新疆的潜在分布模式,本次预测分布采用了生物气候数据变量数据,以及草原革蜱GPS出现位点的元数据,其中包含48个甄选GPS位点,用以进行MaxEnt分布预测分析和响应曲线分析。预测分布结果显示,草原革蜱主要分布在新疆北部。最适宜生存的区域在准噶尔盆地西缘、天山北坡、伊犁河谷地区、塔城地区、天山南坡以及巴音布鲁克草原。模型的AUC值通过10折交叉验证得出,最终输出的MaxEnt模型的平均AUC值为0.856±0.044(SD),表明该模型较为可靠。响应曲线及贡献率结果表明,6个生物气候变量中,最干月份降水量(Bio14)、等温性(Bio03)和年平均气温(Bio02)对模型的贡献率总计达到了88.5%,表明草原革蜱较适宜生存的区域分布在降水量和年均气温较高的区域。本次分布预测模型是基于MaxEnt算法得出的,首个用于分析新疆地区草原革蜱分布的模型。该MaxEnt预测分布模型将有助于新疆地区蜱类种群分布研究、蜱传病原体检测以及蜱源性疾病的风险评估分析。 展开更多
关键词 草原革蜱 MAXENT 分布预测 新疆 巴音郭楞地区
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边缘革蜱AQPs重组蛋白的表达及抗蜱效果
2
作者 伍军 何文文 +7 位作者 普浩 金敏 石文玉 马爱军 罗亭祥 杨德鹏 巴音查汗 呼尔查 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1466-1472,1506,共8页
对边缘革蜱(Dermacentor marginatus)水通道蛋白(aquaporin,AQP)rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3纯化后免疫家兔,采血,进行Western blot和ELISA试验,第3次免疫2周后进行抗蜱试验。利用SDS-PAGE凝胶电泳筛选出rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3的最... 对边缘革蜱(Dermacentor marginatus)水通道蛋白(aquaporin,AQP)rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3纯化后免疫家兔,采血,进行Western blot和ELISA试验,第3次免疫2周后进行抗蜱试验。利用SDS-PAGE凝胶电泳筛选出rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3的最优表达条件,经HisSep Ni-NTA 6FF纯化柱将3种重组蛋白纯化,家兔分4组,每组3只家兔,对照组1组,免疫组3组。纯化的3种重组蛋白分别单独免疫3组家兔,在0、14、21d分别进行1次免疫,每隔7d采血1次,制备多克隆抗体,Western blot检测其反应原性,用ELISA检测其抗体效价,待抗体效价升高后开展攻蜱试验。结果显示,rDmAQP1的最优表达条件是IPTG浓度为1.0mmol/L、37℃诱导8h;rDmAQP2的最优表达条件是IPTG浓度为1.0mmol/L、37℃诱导7h;rDmAQP3的最优表达条件是IPTG浓度为1.0mmol/L、37℃条件下诱导5h。Western blot结果显示rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3都具有一定的反应原性。ELISA结果显示rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3免疫家兔的抗体效价分别为:1∶409600、1∶51200和1∶409600,rDmAQP1蛋白免疫后总的抗蜱效果为79.74%,对边缘革蜱的平均饱血蜱质量、平均卵质量及平均卵孵化率的抑制率分别为9.43%、25.17%和63.81%;rDmAQP2蛋白免疫后总的抗蜱效果为78.78%,对边缘革蜱的平均饱血蜱质量、平均卵质量及平均卵孵化率的抑制率分别为8.30%、20.14%和68.26%;rDmAQP3蛋白免疫后总的抗蜱效果为87.91%,对边缘革蜱的平均饱血蜱质量、平均卵质量及平均卵孵化率的抑制率分别为3.23%、22.47%和80.50%。本研究通过血清学试验及抗蜱试验,发现rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3都具有抗蜱疫苗候选抗原潜力,其中rDmAQP3的免疫效果最佳,为rDmAQP1、rDmAQP2和rDmAQP3功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 边缘革蜱 水通道蛋白 多克隆抗体的制备 抗蜱效果评价
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新疆和静县焉耆马体表硬蜱种属鉴定及进化分析 被引量：3
3
作者 诺明达来 甘露 +5 位作者 才思盖来 郑会珍 刘燕 吐热古丽 呼尔查 巴音查汗 《中国动物检疫》 CAS 2022年第10期28-33,共6页
为了解新疆焉耆马体表硬蜱的种类及其遗传进化特性,选取5个焉耆马场作为采样点,采集马体表及其饲养环境中的硬蜱共830只,借助显微镜观察鉴定其形态结构;使用PCR对其COI基因进行扩增测序,利用Meagalign与Mega11.0生物学软件中的邻接法(NJ... 为了解新疆焉耆马体表硬蜱的种类及其遗传进化特性,选取5个焉耆马场作为采样点,采集马体表及其饲养环境中的硬蜱共830只,借助显微镜观察鉴定其形态结构;使用PCR对其COI基因进行扩增测序,利用Meagalign与Mega11.0生物学软件中的邻接法(NJ)进行同源性比较及遗传进化树构建,分析其遗传进化特征。结果显示:通过形态学和分子生物学鉴定,5个采样点的56匹焉耆马体表及其饲养环境中采集的830只硬蜱,分属于革蜱属的边缘革蜱、草原革蜱、森林革蜱。使用PCR扩增COI基因发现,在709 bp处出现与预期一致的目的片段;基于COI基因测序比对发现,采集的边缘革蜱、草原革蜱、森林革蜱同种间的同源性均达99.0%以上,其中边缘革蜱与新疆HM193889株位于同一分支,草原革蜱与新疆KF583573株位于同一分支,而森林革蜱与新疆MH079424株、山西MK213073株分属两个分支。结果表明,以上3种蜱中,边缘革蜱、草原革蜱具备较完整的遗传进化特征,而森林革蜱遗传进化特征不完整。本研究为地方蜱及蜱媒病防治奠定了基础。 展开更多
关键词 焉耆马 硬蜱 鉴定 COI基因 进化分析
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边缘革蜱aqp基因的生物信息学分析及克隆与表达 被引量：2
4
作者 伍军 何文文 +6 位作者 刘燕 王水怡 普浩 金敏 温丽翠 巴音查汗 呼尔查 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期755-760,共6页
蜱类水通道蛋白(AQP)是负责胞内外水分子运输的蛋白质,属于内在蛋白超家族成员。该蛋白是一种潜在的抗蜱疫苗候选抗原。为探究边缘革蜱(Dm)AQP(Dm AQP)的生物学特性及其是否具有抗原性,本研究利用PCR扩增Dm两条不同的Dmaqp基因,分别得到... 蜱类水通道蛋白(AQP)是负责胞内外水分子运输的蛋白质,属于内在蛋白超家族成员。该蛋白是一种潜在的抗蜱疫苗候选抗原。为探究边缘革蜱(Dm)AQP(Dm AQP)的生物学特性及其是否具有抗原性,本研究利用PCR扩增Dm两条不同的Dmaqp基因,分别得到582 bp的Dmaqp1基因和1094 bp的Dmaqp2基因,并将其翻译成相应的蛋白,经各种生物信息学软件分析后显示,Dm AQP1和Dm AQP2蛋白理论等电点分别为4.76和8.65,Dm AQP1有4个跨膜区及1个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)结构,Dm AQP2有4个跨膜区以及2个NPA结构;Dm AQP1和Dm AQP2蛋白分别有5个和9个B细胞抗原表位,11个和25个磷酸化位点,两种蛋白均为疏水性蛋白;Dm AQP1和Dm AQP2蛋白二级结构均主要由α-螺旋以及无规则卷曲组成,分别占34.02%、39.69%和32.93%、39.52%。基于Dmaqp1和Dmaqp2基因,从其编码区选择抗原决定簇密集且跨膜区域少的片段进行截短基因的PCR扩增,构建原核表达质粒p ET-32a-jd Dmaqp1和p ET-28a-jd Dmaqp2并转化至大肠杆菌BL21中,重组菌经IPTG诱导获得大小约为28 ku和14 ku的重组蛋白rjd Dm AQP1和rjd Dm AQP2;将纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备小鼠多克隆抗体,western blot鉴定结果显示,两种蛋白分别出现了28 ku和14 ku的特异性条带,表明rjd Dm AQP1和rjd Dm AQP2均具有较好的反应原性。本研究首次经原核系统表达了Dm AQP,为进一步研究其生物学特性以及开展后续模式动物免疫抗蜱实验奠定基础。 展开更多
关键词 边缘革蜱 生物学特性 重组蛋白 western blot
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借助超星学习通平台开展兽医内科学教学改革与实践 被引量：1
5
作者 呼尔查 郭庆勇 +2 位作者 李建龙 刘丹丹 胡政香 《中国畜禽种业》 2023年第1期97-100,共4页
为探索更适合兽医内科学的教学方法,笔者采用超星学习通平台对动物医学本科生进行教学。超星学习通是众多新型教学平台之一,正在改变传统课程教学模式。超星学习通平台强大的师生互动模块,仅需教师在课前配置优质课程资源,上传至教学平... 为探索更适合兽医内科学的教学方法,笔者采用超星学习通平台对动物医学本科生进行教学。超星学习通是众多新型教学平台之一,正在改变传统课程教学模式。超星学习通平台强大的师生互动模块,仅需教师在课前配置优质课程资源,上传至教学平台,结合学生学情分析结果,设置灵活的自定义课程设计,放大了传统课堂教学模式亲和力的同时,增强了课前、课中、课后师生之间的相互交流。通过将超星学习通平台教学方法应用到兽医内科学课程的教学,笔者认为在线下教学过程中可以更加灵活和快速调用教学资源,有效保持学生的课堂注意力,掌握学生的学习数据,并根据师生互动反馈,调整教学方式,因材施教。超星学习通平台教学方法突出以学生为主体的思路,对于新入职的教师教学能力的提升,有较大帮助。 展开更多
关键词 超星学习通 兽医内科学 互动式教学 教学改革
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小亚璃眼蜱人工饲养条件下吸血期组织器官形态变化观察 被引量：1
6
作者 余权威 姚鹤松 +9 位作者 妥小丽 梁欣悦 玉山·艾合麦特 何文文 伍军 诺明达来 罗亭祥 杨德鹏 胡政香 呼尔查 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2023年第3期160-165,共6页
小亚璃眼蜱Hyalomma anatolicum属于硬蜱科璃眼蜱属,是一种寄生于动物体表的专性吸血寄生虫,其分布范围广、寄生强度大。该蜱种可传播多种人畜共患病原体,对畜牧业造成巨大损失。为研究媒介蜱生物学特性和吸血期蜱类生理学变化,本研究... 小亚璃眼蜱Hyalomma anatolicum属于硬蜱科璃眼蜱属,是一种寄生于动物体表的专性吸血寄生虫,其分布范围广、寄生强度大。该蜱种可传播多种人畜共患病原体,对畜牧业造成巨大损失。为研究媒介蜱生物学特性和吸血期蜱类生理学变化,本研究利用实验室F2代小亚璃眼蜱进行人工饲养和组织器官切片染色,观察小亚璃眼蜱吸血期组织器官的形态学特征。结果显示,小亚璃眼蜱在实验条件下,从虫卵孵化为幼虫,再通过吸血成为若虫,进而吸血蜕皮为成蜱,共需要50.0 d。吸血期小亚璃眼蜱雌蜱苏木精伊红染色(HE染色)组织切片显示,随着雌蜱从半饱血至饱血状态,唾液腺细胞逐渐溶解消失,中肠腔内消化产生的血红素转移至中肠基底层和血淋巴中,然而卵巢组织并未出现明显变化。本研究首次观察了吸血期小亚璃眼蜱组织器官的变化,丰富了该蜱的生物学特性和组织学形态资料。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 人工饲养 器官形态 组织切片
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小亚璃眼蜱吸血前后组织形态比较观察
7
作者 李晓森 罗亭祥 +8 位作者 杨德鹏 伍军 石文玉 张华聪 艾则麦提·艾合买提 苏蓓琪 玛合力亚·马合木提 胡政香 呼尔查 《中国动物检疫》 CAS 2023年第12期104-109,共6页
小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum)是新疆南疆地区常见的寄生于家畜体表的一种外寄生虫。该蜱虫可携带和传播多种人兽共患病病原。为观察小亚璃眼蜱吸血前后的组织学变化,采用糖原PAS染色方法,将人工饲养的小亚璃眼蜱雌蜱制作为组织切片... 小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum)是新疆南疆地区常见的寄生于家畜体表的一种外寄生虫。该蜱虫可携带和传播多种人兽共患病病原。为观察小亚璃眼蜱吸血前后的组织学变化,采用糖原PAS染色方法,将人工饲养的小亚璃眼蜱雌蜱制作为组织切片,观察其在饥饿、半饱血以及饱血状态下不同组织器官的特征。冠状面组织切片观察结果显示,饥饿雌蜱体内糖原含量较低,主要分布在中肠基底膜周围、唾液腺和卵巢组织表面,气管密度与半饱血和饱血雌蜱相比稍大;半饱血雌蜱体内糖原含量较高,主要集中在中肠、唾液腺导管和卵巢周围组织;饱血雌蜱体内糖原含量较高,主要集中在中肠和卵巢组织表面。在饥饿至饱血过程中,唾液腺细胞接触宿主血液后迅速发育,随雌蜱饱血自然脱离宿主,唾液腺逐渐溶解萎缩;中肠组织从饥饿状态下的“小而空”形态,转变成充满糖类物质的“储存池”。本试验丰富了蜱类组织器官形态学分析数据,为了解吸血期硬蜱器官的变化提供了重要参考。 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 人工饲养 器官形态 组织切片
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边缘革蜱aqp 3截短基因的表达、生物信息学分析与多克隆抗体制备 被引量：1
8
作者 伍军 何文文 +7 位作者 普浩 金敏 石文玉 马爱军 罗亭祥 杨德鹏 巴音查汗 呼尔查 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4589-4599,共11页
【目的】挖掘和检测边缘革蜱(Dermacentor marginatus)水通道蛋白-3(DmAQP3)的免疫原性,为后续研发免疫抗蜱试验提供材料。【方法】利用PCR技术扩增Dmaqp 3基因,构建Dmaqp 3基因氨基酸序列系统发育树。对DmAQP3蛋白进行生物信息学分析,... 【目的】挖掘和检测边缘革蜱(Dermacentor marginatus)水通道蛋白-3(DmAQP3)的免疫原性,为后续研发免疫抗蜱试验提供材料。【方法】利用PCR技术扩增Dmaqp 3基因,构建Dmaqp 3基因氨基酸序列系统发育树。对DmAQP3蛋白进行生物信息学分析,截选抗原性最佳区域构建截短重组质粒pET-32a-jdDmaqp3,表达DmAQP3重组蛋白(rDmAQP3),Western blotting检测重组蛋白的反应原性。将纯化的重组蛋白rDmAQP3免疫昆明小鼠,制备多克隆抗体,间接ELISA方法检测多克隆抗体效价。【结果】Dmaqp 3基因PCR扩增片段大小为879 bp,与森林革蜱aqp 3基因(XM_049662329.1)相似性为98.37%,DmAQP3蛋白氨基酸序列与森林革蜱(AQP-9亚型X2)及安氏革蜱(AQP-9样亚型X2)亲缘关系最近。DmAQP3蛋白理论等电点为8.65,是一种稳定蛋白;具有6个跨膜区及2个天冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(Asn-Pro-Ala,NPA)结构;有7个B细胞抗原表位,18个磷酸化位点,为疏水性蛋白;二级结构由α-螺旋、β-转角、无规则卷曲及延伸链组成,占比分别为31.27%、3.58%、40.07%和25.08%;三级结构预测显示该蛋白由4个亚基组成。成功构建截短重组质粒pET-32a-jdDmaqp3并获得重组蛋白rDmAQP3。Western blotting结果显示,重组蛋白rDmAQP3与阳性血清反应出现大小为27 ku的目的条带,表明该蛋白具有良好的反应原性。间接ELISA结果显示,制备的重组蛋白rDmAQP3多克隆抗体效价高达1∶409600,表明该蛋白具有良好的免疫原性。【结论】本试验克隆了Dmaqp 3基因,构建了DmAQP3蛋白原核表达载体,诱导表达出重组蛋白rDmAQP3,该蛋白具有良好的反应原性和免疫原性,为进一步研究其生物学特性及建立模式动物免疫抗蜱试验提供了条件。 展开更多
关键词 边缘革蜱 截短基因 重组蛋白 Western blotting 多克隆抗体
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新疆部分焉耆马场马梨形虫病病原学检测及序列分析
9
作者 诺明达来 甘露 +3 位作者 李丽 刘燕 呼尔查 巴音查汗 《中国动物检疫》 CAS 2023年第1期17-21,41,共6页
为了解新疆地区焉耆马场马梨形虫病病原感染情况,促进当地马梨形虫病的综合防控和马产业的健康发展,选取5个焉耆马场作为试验点,随机采集156匹焉耆马全血进行马梨形虫病病原DNA检测,并使用SPSS Statistics 17.0、Megalign与MEGA 11.0软... 为了解新疆地区焉耆马场马梨形虫病病原感染情况,促进当地马梨形虫病的综合防控和马产业的健康发展,选取5个焉耆马场作为试验点,随机采集156匹焉耆马全血进行马梨形虫病病原DNA检测,并使用SPSS Statistics 17.0、Megalign与MEGA 11.0软件分析不同采样点、不同年龄、不同性别马匹的感染情况差异,同时进行病原核酸的同源性比较和系统进化树构建。结果显示:156匹焉耆马全血样品中,检出马梨形虫病病原核酸阳性82份,其中马泰勒虫、马驽巴贝斯虫和两者混合感染阳性率分别为33.3%(52/156)、26.9%(42/156)和7.7%(12/156)。不同采样点、不同年龄、不同性别焉耆马的马梨形虫病病原阳性率均无显著差异(P>0.05)。通过Megalign与MEGA11.0软件分析发现:测序得到的马泰勒虫18S rRNA基因序列与选取的参考虫株同源性为95.5%~100%,马驽巴贝斯虫BC-18S rRNA基因序列与选取的参考虫株同源性为98.6%~99.6%。马泰勒虫18S rRNA基因与马泰勒虫伊犁株(OL589505.1)位于同一分支上,进化关系较近,与其他地区马泰勒虫株进化关系较远;马驽巴贝斯虫BC-18S rRNA与马驽巴贝斯虫新疆株(MT563457.1)位于同一分支上,进化关系较近,与其他地区马驽巴贝斯虫株关系较远。结果表明,新疆地区焉耆马场的马梨形虫病病原感染情况较为严重,主要通过本地蜱叮咬传播,需要加强马梨形虫病的监测与防控,做好定期驱蜱工作。本调查为当地马梨形虫病的综合防控提供了一线数据。 展开更多
关键词 马梨形虫病 焉耆马 马泰勒虫 马驽巴贝斯虫 DNA检测
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小亚璃眼蜱FER1基因的克隆表达及抗蜱效果
10
作者 何文文 伍军 +6 位作者 刘燕 李才善 甘露 郑会珍 史倩云 呼尔查 巴音查汗 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1424-1433,共10页
为挖掘抗蜱候选疫苗抗原,对蜱虫进行安全有效的防控。本研究旨在对小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum anatolicum)铁蛋白1(H.anatolicum ferritin1,HanFER1)基因进行生物信息学预测及分析,使用克隆技术和原核表达系统表达HanFER1,通过镍... 为挖掘抗蜱候选疫苗抗原,对蜱虫进行安全有效的防控。本研究旨在对小亚璃眼蜱(Hyalomma anatolicum anatolicum)铁蛋白1(H.anatolicum ferritin1,HanFER1)基因进行生物信息学预测及分析,使用克隆技术和原核表达系统表达HanFER1,通过镍柱纯化法获取高纯度HanFER1,并对其进行模式动物免疫抗蜱试验。提取小亚璃眼蜱总RNA并反转录为cDNA,构建克隆载体pMD19-T-FER1和系统进化树,通过生物信息学分析其B细胞抗原性表位、跨膜区结构、亲疏水性、蛋白理化特性、信号肽和亚细胞定位;构建表达载体pET-28a-FER1,用His-Bind亲和层析柱获得纯化蛋白;使用rHanFER1免疫家兔,制备多克隆抗体,Western blot检测其免疫原性,用ELISA检测其抗体效价,待抗体效价升高后开展攻蜱试验。本试验中的小亚璃眼蜱FER1氨基酸序列与印度的小亚璃眼蜱(序列号:AFQ98383.1)为一支,且亲缘关系最近,相似达到约99%。B细胞线性抗原表位显示有较好的抗原性,该基因编码172个氨基酸,分子式为C_(878)H_(1 357)N_(237)O_(275)S_(9),相对分子质量为19.92 ku。理论等电点(pI)为5.13,为酸性蛋白;HanFER1蛋白无跨膜区信号肽;抗原性很高,为亲水性蛋白,并且HanFER1主要存在于细胞质(56.5%),其余分布在细胞核(26.1%)、线粒体(13.0%)。使用克隆技术克隆出了HanFER1基因片段长度为509 bp,成功构建了原核表达载体pET-28a-Ha-FER1,并经His-Bind镍柱亲和层析获得纯化HanFER1蛋白,FER1蛋白大小为25 ku,并且蛋白在浓度为0.8 mmol/L、最适温度为37℃的条件下诱导7 h左右表达量最高。Western blot结果显示该蛋白具有一定的免疫原性。ELISA结果显示rHanFER1免疫家兔的抗体效价为1∶12 800,rHanFER1蛋白免疫后总的抗蜱效果为73.43%,对小亚璃眼蜱的平均饱血蜱重、平均卵重及平均卵孵化率的抑制率分别为11.7%,23.0%和55.0%。本研究通过生物信息学分析、重组蛋白表达、血清学试验及抗蜱试验 展开更多
关键词 小亚璃眼蜱 FER1蛋白 原核表达 生物信息学分析 多克隆抗体的制备 抗蜱效果评价
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