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中性粒细胞外泌体中miR⁃15a⁃5p通过靶向抑制BCL2L2促进巨噬细胞凋亡
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作者 柯桥 胡龙辉 +1 位作者 阮楚峻 黎敏 《海南医学院学报》 2023年第19期1441-1447,共7页
目的:探讨中性粒细胞外泌体调控巨噬细胞凋亡的可能机制。方法:采用脂多糖诱导中性粒细胞,ELISA检测炎症因子,电镜鉴定外泌体形态,RT‑PCR检测外泌体中miR‑15a‑5p表达;并采用中性粒细胞外泌体与miR‑15a‑5p模拟物分别处理raw267.4巨噬细胞... 目的:探讨中性粒细胞外泌体调控巨噬细胞凋亡的可能机制。方法:采用脂多糖诱导中性粒细胞,ELISA检测炎症因子,电镜鉴定外泌体形态,RT‑PCR检测外泌体中miR‑15a‑5p表达;并采用中性粒细胞外泌体与miR‑15a‑5p模拟物分别处理raw267.4巨噬细胞,CCK8检测细胞活力,流式检测细胞凋亡;预测并采用双荧光素酶实验验证miR‑15a‑5p与BCL2L2结合位点;RT‑PCR与Western blot验证miR‑15a‑5p对BCL2L2表达调控。结果:脂多糖诱导的中性粒细胞炎症因子IL‑2、IL‑6、IL‑10与TNF‑α显著升高,电镜观察到外泌体形态特征,miR‑15a‑5p在脂多糖诱导的中性粒细胞外泌体中显著高表达;脂多糖诱导的中性粒细胞外泌体与miR‑15a‑5p模拟物均可以促进raw267.4巨噬细胞凋亡,抑制其细胞活力;Targetscan数据库预测miR‑15a‑5p与BCL2L2具有结合位点,双荧光素酶实验验证miR‑15a‑5p与BCL2L2通过结合位点结合;miR‑15a‑5p模拟物转染raw267.4巨噬细胞后抑制BCL2L2 mRNA与蛋白表达。结论:炎症状态中性粒细胞,可能通过分泌包含miR‑15a‑5p的外泌体,通过靶向抑制BCL2L2进而促进raw267.4巨噬细胞凋亡。这可能为进一步理解中性粒细胞与巨噬细胞炎症调控分子机制提供理论依据。 展开更多
关键词 中性粒细胞 外泌体 巨噬细胞 MIRNA 凋亡
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