不同细胞系表达的抗EGFR单抗糖基化结构对比分析 被引量：9

1

作者 王冲 郭怀祖 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1018-1027,共10页

真核表达系统造就了单克隆抗体药物的广泛异质性,这些异质性通常是由翻译后修饰引起,而糖基化修饰则是关键的翻译后修饰,其对治疗性蛋白的安全性和有效性有着深远的影响,为探索细胞表达系统的改变对单抗糖基化所带来的影响,应用液相色谱... 真核表达系统造就了单克隆抗体药物的广泛异质性,这些异质性通常是由翻译后修饰引起,而糖基化修饰则是关键的翻译后修饰,其对治疗性蛋白的安全性和有效性有着深远的影响,为探索细胞表达系统的改变对单抗糖基化所带来的影响,应用液相色谱-电喷雾离子化四极杆飞行时间质谱技术(LC-ESI-Q-Tof),通过交替高低碰撞能量扫描、源内诱导解离及二级质谱的方法从释放的寡聚糖水平研究聚糖结构,对比分析由两种不同细胞系制备的抗表皮生长因子受体(EGFR)单抗,然后结合外切糖苷酶逐级消化的方法对两种蛋白的糖链结构作进一步确证分析。分析结果表明,在Fc区域的糖基化修饰,两种表达系统表达的该抗体未发生明显的改变,而在Fab区域,由小鼠骨髓瘤细胞SP2/0制备的抗EGFR单抗的聚糖结构中含有大量α半乳糖(α-Gal),且末端唾液酸形式主要是N-羟乙基神经氨酸(NGNA),具有极高的免疫原性风险。而通过中国仓鼠卵巢细胞CHO表达系统制备的抗EGFR单抗Fab区域聚糖结构中不含有α-Gal,且末端唾液酸形式主要是N乙酰神经氨酸(NANA),免疫原性风险极大降低。本研究在一定程度上可以预测由CHO表达系统制备的抗EGFR单抗具备较好的临床耐受性,超敏反应发生风险低,CHO细胞可以作为该抗体改良型生物类似药(Biobetter)的优选表达系统。 展开更多

关键词 细胞表达系统 糖基化 α半乳糖 免疫原性

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基于单克隆抗体的肿瘤免疫疗法研究进展 被引量：8

2

作者 郭亚军 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期857-870,共14页

一百多年前,"魔术子弹"学说首次提出了具有靶向特异性的抗体可以用来治疗疾病。此后,随着单克隆抗体制备技术的成熟,以及癌症血清疗法的发展,靶向肿瘤抗原的治疗性抗体开始进入临床,至今已有20余种抗体药物用于癌症的治疗。... 一百多年前,"魔术子弹"学说首次提出了具有靶向特异性的抗体可以用来治疗疾病。此后,随着单克隆抗体制备技术的成熟,以及癌症血清疗法的发展,靶向肿瘤抗原的治疗性抗体开始进入临床,至今已有20余种抗体药物用于癌症的治疗。近两年,以免疫检查点蛋白拮抗剂、双特异性抗体、抗体药物偶联药物等为代表的新一代抗体药物,不断在治疗恶性肿瘤上取得突破性进展。本文回顾了抗肿瘤抗体的发展历程,总结了新一代抗体药物的作用机制与构建策略,以及主要临床副作用。并对基于抗体的肿瘤免疫疗法未来发展趋势进行了展望。 展开更多

关键词 治疗性单抗 肿瘤免疫疗法 免疫检查点蛋白 双特异性抗体 抗体药物偶联物

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生物制品病毒安全性控制的核心理念探讨 被引量：4

3

作者 郭怀祖 杨美花 +9 位作者 杨汇川 公雪杰 侯盛 张华捷 李长清 董关木 李敏 孟淑芳 侯继锋 郭中平 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第24期2781-2788,共8页

生物制品的一个共同特点就是存在病毒污染的风险性。近年来,我国生物药物产业发展迅猛,随着新技术的发展以及越来越多的生物制品被批准,使用人群不断扩大,对生物制品的安全性问题提出了更高要求。与此同时,国内外关于生物制品病毒安全... 生物制品的一个共同特点就是存在病毒污染的风险性。近年来,我国生物药物产业发展迅猛,随着新技术的发展以及越来越多的生物制品被批准,使用人群不断扩大,对生物制品的安全性问题提出了更高要求。与此同时,国内外关于生物制品病毒安全性控制,已经出台了一系列技术要求和指导原则。本文分析了国内外生物制品病毒安全性控制的法规,归纳提炼了可能的生物制品病毒安全性控制核心理念,可为技术法规的建立和生物制品质量控制提供参考。生物制品病毒污染的安全性只有通过贯彻病毒安全性控制理念,采取综合措施,才能得到确切的保障。 展开更多

关键词 生物制品 病毒安全性 病毒污染 核心理念 病毒安全性评价

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西妥昔单抗或贝伐单抗联合FOLFIRI方案治疗转移性结直肠癌的研究进展 被引量：4

4

作者 赵一蓉 徐进 +2 位作者 郭怀祖 李晶 李博华 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期174-177,共4页

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在恶性肿瘤中的发病率与死亡率分别高居第三位和第四位。目前,以单克隆抗体为基础的靶向治疗药物已经成为CRC治疗的新策略。西妥昔单抗是以表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)为靶点... 结直肠癌(colorectal cancer,CRC)在恶性肿瘤中的发病率与死亡率分别高居第三位和第四位。目前,以单克隆抗体为基础的靶向治疗药物已经成为CRC治疗的新策略。西妥昔单抗是以表皮生长因子(epidermal growth factor receptor,EGFR)为靶点,其可竞争性阻断EGFR与配体结合,阻断细胞内下游信号转导途径,从而起到抑制癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡的作用。贝伐单抗则以血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为靶点,特异性抑制肿瘤组织血管生成,从而抑制肿瘤组织生长和肿瘤细胞血行转移。单抗药物通过联合FOLFIRI(氟尿嘧啶、亚叶酸钙和伊立替康)细胞毒性化疗方案对CRC的治疗有显著疗效。本文主要对西妥昔单抗或贝伐单抗联合FOLFIRI方案治疗转移性结直肠癌的疗效及安全性进行综述。 展开更多

关键词 FOLFIRI 西妥昔单抗 贝伐单抗 转移性结直肠癌

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重组GluV8的克隆表达、纯化及酶学性质研究 被引量：3

5

作者 段树燕 郭怀祖 +4 位作者 李晶 郑娟 赵自叶 张大鹏 王皓 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期36-40,共5页

谷氨酰内切酶在生物制药及检测中应用较多,但来源受限,将全基因合成的金黄色葡萄球菌来源的谷氨酰内切酶功能区部分对应的基因进行改造后,克隆入表达载体pGEX-4T-2,导入E.coli BL21(DE3),重组蛋白以可溶性形式表达。采用亲和层析等纯化... 谷氨酰内切酶在生物制药及检测中应用较多,但来源受限,将全基因合成的金黄色葡萄球菌来源的谷氨酰内切酶功能区部分对应的基因进行改造后,克隆入表达载体pGEX-4T-2,导入E.coli BL21(DE3),重组蛋白以可溶性形式表达。采用亲和层析等纯化步骤对重组蛋白进行纯化,用底物Z-Phe-Leu-Glu-pNA(L-2135)对重组蛋白的酶学性质进行了研究,用HPLC、LC-MS/MS检测方法对酶切融合蛋白的位点特异性进行了鉴定。结果表明该酶的相对活性为1568U/mg,最适作用温度为42℃、最适作用pH为8.0,在pH 9.0,50℃时仍有较高的酶活,将该酶与胰酶酶切融合蛋白所得肽段结合能够提升质谱检测结果的精确度。以上结果表明该重组酶具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 重组 GluV8 克隆 表达 酶学性质

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多属性分析方法应用于治疗类抗体药物质量控制的考量与前景 被引量：2

6

作者 汪泓 徐进 +5 位作者 尹红锐 徐明明 凌今 郭怀祖 邵泓 陈钢 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期2092-2098,共7页

近年来,包括治疗类抗体在内的治疗类蛋白产品已成为现代生物制药的主力军。然而,此类产品具有复杂的产品质量属性,在一定程度上限制了产品的研发与质控(quality control,QC)。随着高分辨质谱技术的发展,基于质谱的多属性分析(multi-attr... 近年来,包括治疗类抗体在内的治疗类蛋白产品已成为现代生物制药的主力军。然而,此类产品具有复杂的产品质量属性,在一定程度上限制了产品的研发与质控(quality control,QC)。随着高分辨质谱技术的发展,基于质谱的多属性分析(multi-attribute method,MAM)具有多种产品质量属性的直接检测以及杂质的鉴别能力,其在产品的研发及QC中的重要作用逐渐显现。鉴于MAM有助于促进药品质量及QC水平提升、生产成本降低,为了探索MAM在研发和QC中的应用,本文从MAM的基本流程、在生物制药领域研发与QC中的应用、FDA对MAM在QC中应用的考量以及面临的机遇与挑战进行了介绍。以期为MAM在我国治疗类抗体药物中的应用提供思路,并为其在QC中更好的开发、使用、替代传统方法奠定基础。 展开更多

关键词 质谱技术 多属性分析方法 治疗类抗体药物 质量控制 应用前景

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生物制品病毒安全性控制 被引量：1

7

作者 郭怀祖 杨美花 +9 位作者 杨汇川 公雪杰 侯盛 张华捷 李长清 董关木 李敏 孟淑芳 侯继锋 郭中平 《中国药品标准》 CAS 2022年第2期108-114,共7页

本文阐述了《中国药典》2020年版新增通则“生物制品病毒安全性控制”的原则和框架起草考量以及该通则的作用、地位和意义。

关键词 生物制品 病毒安全性 病毒污染 核心理念 病毒安全性评价 《中国药典》2020年版

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重组人心房利钠肽(ANP)的原核表达、纯化及鉴定 被引量：1

8

作者 陈晨辉 赵自叶 +5 位作者 徐进 曹雪松 郭尚敬 李军 王皓 侯盛 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1273-1285,共13页

为提高重组人心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的表达量,将3个ANP通过赖氨酸(Lysine,K)串联,并构建相对应的重组表达载体p ET28a(+)/ANP3。转染大肠杆菌进行诱导表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的60%。经过包涵体变复性,赖氨酸... 为提高重组人心房利钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)的表达量,将3个ANP通过赖氨酸(Lysine,K)串联,并构建相对应的重组表达载体p ET28a(+)/ANP3。转染大肠杆菌进行诱导表达,目的蛋白约占菌体总蛋白的60%。经过包涵体变复性,赖氨酸酶(Lys-C)和羧肽酶(CPB)水解,以及一系列层析纯化,每升培养液可获得约16 mg的ANP蛋白。最终,纯化后的ANP经UPLC及Tricine SDS-PAGE鉴定,纯度大于90%,LC-MS鉴定显示其分子量为3 080 Da,且为二硫键正确形成的ANP单体,通过ELISA试剂盒检测,其具有和参比品一致活性。本研究为ANP的大规模制备打下了基础。同时,所采用的串联表达技术也为其他多肽类药物的重组表达提供了新的思路。 展开更多

关键词 心房利钠肽 串联表达 多肽纯化

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LC-MS对奥马珠单抗与其生物类似物CMAB007的分析与结构特征 被引量：1

9

作者 徐珺 张大鹏 +1 位作者 王皓 郭怀祖 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期497-506,共10页

哮喘是当今世界威胁公共健康的最主要的慢性肺部疾病,作为治疗中重度和难治性哮喘的特效药奥马珠单抗治疗费用相对昂贵,生物类似药CMAB007的研制可以降低治疗费用。本研究用质谱分析一种奥马珠单抗生物类似药CMAB007与原研药的一致性,... 哮喘是当今世界威胁公共健康的最主要的慢性肺部疾病,作为治疗中重度和难治性哮喘的特效药奥马珠单抗治疗费用相对昂贵,生物类似药CMAB007的研制可以降低治疗费用。本研究用质谱分析一种奥马珠单抗生物类似药CMAB007与原研药的一致性,分别从氨基酸分析、肽图、N/C端序列,还原质谱,寡糖含量,N糖分析等层面对CMAB007和奥马珠单抗进行了系统的比对研究,为进一步临床研究打下基础。结果表明CMAB007和奥马珠单抗氨基酸序列一致,赖氨酸剪切也基本一致,带唾液酸修饰糖形和带核心岩藻糖形比例相近,高甘露糖形比例差异不大,CMAB007略低于奥马珠单抗。因此CMAB007满足生物类似药在结构比对上一致性的要求,有望成为国内首先上市的重组抗人Ig E单克隆抗体药物。 展开更多

关键词 单克隆抗体 奥马珠单抗 哮喘 液质联用 生物类似药

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基因工程改造与中国仓鼠卵巢细胞凋亡 被引量：1

10

作者 张存超 寇庚 王皓 《化学与生物工程》 CAS 2014年第12期1-3,8,共4页

中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是表达重组单克隆抗体常用的工程细胞。在细胞培养过程中,凋亡是限制重组蛋白产量提高的重要因素之一。对CHO细胞进行基因工程改造是抑制细胞凋亡的重要途径。主要从细胞凋亡信号途径、细胞信号通路以及microRNA... 中国仓鼠卵巢(CHO)细胞是表达重组单克隆抗体常用的工程细胞。在细胞培养过程中,凋亡是限制重组蛋白产量提高的重要因素之一。对CHO细胞进行基因工程改造是抑制细胞凋亡的重要途径。主要从细胞凋亡信号途径、细胞信号通路以及microRNA等方面综述了运用基因工程手段对CHO细胞凋亡改造的进展,并探讨了潜在的基因工程靶点。 展开更多

关键词 凋亡 基因工程 MICRORNA 中国仓鼠卵巢细胞

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治疗类糖蛋白的糖基化分析

11

作者 汪泓 尹红锐 +6 位作者 陈益乐 方欣欣 徐明明 田橙 徐进 陈钢 邵泓 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期2779-2786,共8页

糖基化作为至关重要的一种蛋白质翻译后修饰,在治疗类糖蛋白的安全性、有效性、质量可控性中起到关键性作用。然而,糖基化为非模板依赖性的酶促修饰,具有天然的异质性,使得糖基化的分析成为治疗类糖蛋白表征及质控的一个挑战。为了推动... 糖基化作为至关重要的一种蛋白质翻译后修饰,在治疗类糖蛋白的安全性、有效性、质量可控性中起到关键性作用。然而,糖基化为非模板依赖性的酶促修饰,具有天然的异质性,使得糖基化的分析成为治疗类糖蛋白表征及质控的一个挑战。为了推动治疗类糖蛋白的技术法规建立及质控水平提高,本文从治疗类糖蛋白糖基化分析的核心理念、分析策略、良好分析的实施以及技术趋势4个方面进行深入探讨,力图为我国工业界治疗类糖蛋白糖基化分析提供参考,推动我国糖蛋白类生物医药产业的发展。 展开更多

关键词 治疗类糖蛋白 糖基化分析 核心理念

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半胱氨酸蛋白酶IdeS的原核表达、纯化及活性鉴定

12

作者 许静 赵自叶 +5 位作者 徐进 郭怀祖 郑娟 段树燕 彭晓云 王皓 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期8-14,共7页

酿脓链球菌来源的免疫球蛋白G降解酶(immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes,IdeS)是一种典型的半胱氨酸水解酶,可以在抗体铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab)2片段和Fc片段,由于其独特的酶活特... 酿脓链球菌来源的免疫球蛋白G降解酶(immunoglubulin G-degrading enzyme of Streptococcus pyogenes,IdeS)是一种典型的半胱氨酸水解酶,可以在抗体铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab)2片段和Fc片段,由于其独特的酶活特异性和高活性,IdeS可以作为工具酶应用于IgG的亚单位制备、结构分析及表征分析。利用双标签(GST-tag及His6-tag)表达系统在E.coli中高效表达了可溶性重组蛋白酶GST-IdeS-His6,并在IdeS的氨基端与GST之间加上肠激酶酶切位点,以利于标签的去除。再利用亲和层析的纯化方法对目的蛋白进行纯化。使用SDS-PAGE、HPLC-SEC、LC-MS对纯化后的IdeS进行分析和鉴定。结果表明:本系统所表达的蛋白酶IdeS得率高,每1L菌液纯化可获得约25mg纯度为90%以上的蛋白酶IdeS,将此蛋白酶与抗体IgG以1∶100(m/m)比例混合,于37℃反应30min,即可酶切完全。能够满足蛋白质结构分析中对蛋白酶的高质量要求,并且适用于抗体类药物的表征分析。同时,蛋白酶IdeS也可以应用于生物仿制药、生物改良药和新一代抗体以及Fc-融合蛋白的研究。 展开更多

关键词 IdeS 原核表达 纯化 酶活鉴定

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重组内肽酶AspN的原核表达纯化和活性鉴定

13

作者 郑娟 郭怀祖 +5 位作者 李晶 段树燕 赵自叶 张大鹏 郭尚敬 王皓 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期186-192,共7页

蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸的N端肽键,广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌,产量低,制备困难,成本高,极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶... 蛋白内肽酶AspN是一种锌金属内切肽酶,能选择性切割天冬氨酸的N端肽键,广泛应用于蛋白的多肽制备及质量肽图谱鉴定。目前内肽酶AspN来源于细菌分泌,产量低,制备困难,成本高,极大地限制了该酶的应用。将脑膜脓毒性黄杆菌分泌的蛋白内肽酶Asp N所对应的基因克隆入表达载体p ET32a,导入E.coli BL21(DE3),首次运用原核表达系统进行可溶性融合表达,亲和层析对重组蛋白进行纯化。用HPLC、SDS-PAGE和荧光底物Anthranilyl-Ala-Phe-Ala-Phe-Asp-Val-Phe(NO2)-Tyr-Asp对重组酶进行酶活鉴定。结果表明重组的内肽酶Asp N具有与标准品基本一致的酶切活性,能够较好地应用于生物和制药领域。 展开更多

关键词 重组内肽酶AspN 原核表达 纯化 活性鉴定

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新型融合蛋白pro-SIRPα的构建及体外活性研究

14

作者 赵一蓉 徐进 +5 位作者 郭怀祖 李彦韬 陈曦 钱卫珠 李晶 李博华 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期89-95,共7页

筛选获得肿瘤特异性释放封闭肽的高亲和力新型融合蛋白pro-SIRPα并对其体外活性进行了研究。首先利用噬菌体表面展示肽库筛选能与信号调节蛋白SIRPα-cv1活性区结合的短肽,并以含有尿激酶(uPA)酶切位点的linker将其连接在SIRPα-cv1融... 筛选获得肿瘤特异性释放封闭肽的高亲和力新型融合蛋白pro-SIRPα并对其体外活性进行了研究。首先利用噬菌体表面展示肽库筛选能与信号调节蛋白SIRPα-cv1活性区结合的短肽,并以含有尿激酶(uPA)酶切位点的linker将其连接在SIRPα-cv1融合蛋白的氨基末端,构建完整的pro-SIRPα。通过竞争ELISA实验验证pro-SIRPα前端封闭肽具有封闭效应。由于氨基端封闭肽的存在,pro-SIRPα与CD47的结合能力显著下降。而肿瘤微环境中富含uPA,可水解pro-SIRPα氨基末端的linker,使得封闭肽解离并暴露出的完整SIRPα-cv1,恢复与CD47的结合能力。因此,pro-SIRPα可特异性作用于肿瘤细胞,减少了与正常血液系统细胞的非特异性结合,降低了毒性以及可能引起的抗原沉默(antigen sink effect)现象。我们的体外实验还证实,与单独应用抗EGFR-IgG1单抗相比,pro-SIRPα与抗EGFR-IgG1单抗联用可显著增强巨噬细胞对A431肿瘤细胞的吞噬作用。pro-SIRPα的研制可能为肿瘤靶向治疗提供新的策略。 展开更多

关键词 SIRPα CD47 封闭肽 高亲和力突变体

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聚山梨酯对单克隆抗体药物稳定性的影响

15

作者 朱圣婴 曹嘉炜 +7 位作者 徐进 陈晨辉 郭清城 李军 张大鹏 钱卫珠 侯盛 郭怀祖 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期172-177,共6页

目的评估不同种类聚山梨酯(polysorbate,PS)对不同类型单克隆抗体(简称单抗)药物稳定性的影响。方法以单抗A(mAbA,IgG1前抗体药物)、单抗B(mAbB,IgG1单抗)和单抗C(mAbC,IgG1单抗,Fc N297A突变)3种单抗药物作为模型蛋白,分别在其各自的... 目的评估不同种类聚山梨酯(polysorbate,PS)对不同类型单克隆抗体(简称单抗)药物稳定性的影响。方法以单抗A(mAbA,IgG1前抗体药物)、单抗B(mAbB,IgG1单抗)和单抗C(mAbC,IgG1单抗,Fc N297A突变)3种单抗药物作为模型蛋白,分别在其各自的制剂处方中添加不同种类及含量的PS,并进行影响因素研究,通过考察蛋白聚集体、不溶性微粒等质量属性的变化,综合评估PS对单抗药物稳定性的影响。结果PS20和PS80对于抑制3种单抗中聚集体及电荷异质体生成的作用差异均无统计学意义(P>0.05),而mAbB中加入PS80,mAbC中加入PS20分别能起到更显著地抑制不溶性微粒增加的效果(P<0.05);PS20含量的高低对于mAbC中电荷异质体及不溶性微粒的检测指标影响显著(P<0.05)。结论不同类型的单抗对于不同种类、不同含量PS的敏感度不同,因此在进行单抗制剂处方设计时,需选择适合的PS种类及含量,以进一步提高单抗制剂的稳定性。 展开更多

关键词 聚山梨酯 单克隆抗体 稳定性 聚集体 不溶性微粒

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rhLFA-3:Fc融合蛋白连续静脉注射对食蟹猴长期毒性实验研究 被引量：1

16

作者 张晓芳 佘佳红 +7 位作者 李先平 陆国才 张晓冬 姜华 陈黛影 戴益民 张淑英 袁伯俊 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1157-1165,共9页

目的:评价食蟹猴静脉注射重复给予rhLFA-3:Fc融合蛋白的安全性。方法:将食蟹猴随机分为溶媒对照组,rhLFA-3:Fc融合蛋白低、中和高剂量组(1,5和20 mg.kg-1),每组6只,静脉注射给药,每周2次,连续90 d,恢复期180 d,进行各项毒理学指标检测... 目的:评价食蟹猴静脉注射重复给予rhLFA-3:Fc融合蛋白的安全性。方法:将食蟹猴随机分为溶媒对照组,rhLFA-3:Fc融合蛋白低、中和高剂量组(1,5和20 mg.kg-1),每组6只,静脉注射给药,每周2次,连续90 d,恢复期180 d,进行各项毒理学指标检测。结果:rhLFA-3:Fc融合蛋白使各剂量组食蟹猴外周血淋巴细胞比例下降,各剂量组动物给药后免疫学指标发生一定改变,表现为CD2+,CD3+,CD4+及CD8+淋巴细胞下降,发生迟发性变态反应的动物数及反应强度降低。给药组部分食蟹猴脾脏的绝对重量和相对重量偏大,而恢复期时未发现类似情况。组织病理学结果提示rhLFA-3:Fc融合蛋白的靶器官为脾脏和淋巴结,表现为脾脏淋巴滤泡及淋巴结皮质区以次级淋巴滤泡结构为主,大多生发中心明显肥大,B淋巴细胞增生活跃,核分裂像相对数量较多。其余指标包括一般症状、体重、摄食量、呼吸、体温、瞳孔、尿液、心电图、生化指标、骨髓象等未见明显与供试品相关的异常。结论:rhLFA-3:Fc融合蛋白iv 90 d(每周2次)毒性作用位点为免疫系统,靶器官为脾脏和淋巴结。rhLFA-3:Fc融合蛋白iv对食蟹猴的安全剂量为20 mg.kg-1。建议临床使用时应密切注意rhLFA-3:Fc融合蛋白对免疫系统的影响。 展开更多

关键词 rhLFA-3 FC融合蛋白 食蟹猴 临床前安全性 毒性

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