期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
高表达抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体细胞株的建立及其表达产物的分析 被引量：2
1
作者 聂艳桃 何太平 +7 位作者 谢荣麟 葛永红 容新宗 陶昆蓉 刘宇虹 王琰 Sendi Montanie Vladka Curin-Serbec 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期553-556,共4页
目的建立高表达抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体的工程细胞株。方法将构建的抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体基因真核表达载体转染CHO细胞,并采用DHFR/MTX基因扩增策略,经反复加压和克隆筛选,提高抗体的表达量。用ELISA、Westernblot和体外中和试验分... 目的建立高表达抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体的工程细胞株。方法将构建的抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体基因真核表达载体转染CHO细胞,并采用DHFR/MTX基因扩增策略,经反复加压和克隆筛选,提高抗体的表达量。用ELISA、Westernblot和体外中和试验分析比较抗人TNF-α人-鼠嵌合抗体与鼠亲本单抗的特性。结果获得的表达抗人TNF-α嵌合抗体的转染细胞系2F5,在静止培养4d后工程抗体的表达量约80mg/L。所表达的工程抗体优于鼠亲本单抗F7/2,并具有良好的特异性和中和活性,其相对亲和力约为2.1×10-10mol/L。结论已成功建立了高表达的嵌合抗体工程细胞株,其抗体具有潜在的临床应用前景。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 嵌合抗体 CHO细胞
下载PDF
人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段的基因克隆和原核表达
2
作者 刘兰军 何太平 +3 位作者 杨春 雍雪飞 何敏 葛永红 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期571-573,共3页
目的克隆人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段并构建其原核表达系统。方法用PCR法从人巨细胞病毒AD169株基因组DNA中扩增gB/AD-1片段并克隆至pGEM-T载体,酶切后,亚克隆至表达载体pET-15b,构建重组表达质粒pET-15b/gB/AD-1,并转化大肠杆菌... 目的克隆人巨细胞病毒包膜糖蛋白gB/AD-1片段并构建其原核表达系统。方法用PCR法从人巨细胞病毒AD169株基因组DNA中扩增gB/AD-1片段并克隆至pGEM-T载体,酶切后,亚克隆至表达载体pET-15b,构建重组表达质粒pET-15b/gB/AD-1,并转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。表达产物经金属螯合层析一步纯化,并用Westernblot鉴定。结果gB/AD-1蛋白表达量达到35%。表达产物经纯化后,纯度大于95%。经Westernblot检测,表达产物与CMV阳性人血清发生特异性反应。结论已成功构建重组表达载体pET-15b/gB/AD-1,并在大肠杆菌中高水平表达gB/AD-1。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 包膜糖蛋白 抗原决定簇
下载PDF
抗调亡基因bcl-xl过表达提高工程细胞IVCC及目的蛋白表达的研究 被引量：3
3
作者 何太平 唐菁燕 +3 位作者 宋春雷 聂艳桃 雷韬 杨波 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期674-679,共6页
用无血清培养基或化学成分明确的培养基生产治疗用重组蛋白已成为趋势。然而,在此条件下凝血因子、糖蛋白激素等微量糖蛋白的表达十分困难,其主要原因之一是在细胞培养过程中工程细胞大量凋亡造成的细胞密度低和生存期短。通过将早期抗... 用无血清培养基或化学成分明确的培养基生产治疗用重组蛋白已成为趋势。然而,在此条件下凝血因子、糖蛋白激素等微量糖蛋白的表达十分困难,其主要原因之一是在细胞培养过程中工程细胞大量凋亡造成的细胞密度低和生存期短。通过将早期抗凋亡基因导入工程细胞并进行过表达可改善工程细胞的活细胞密度积分(integral viable cell concentration,IVCC),提高表达量。该研究将bcl-xl基因导入工程细胞,筛选其高表达细胞株,并验证工程细胞的抗凋亡能力,获得了稳定表达抗凋亡蛋白和目的蛋白的工程细胞株。与母细胞相比,稳定表达Bcl-xL的工程细胞的IVCC提高了50%,最终目的蛋白表达增加超过200%,显示抗凋亡基因bcl-xl的过表达可改善工程细胞在无血清悬浮培养过程中的细胞凋亡,提高表达量,为表达人凝血因子、糖蛋白激素等微量糖蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 细胞凋亡 BCL-XL CHO细胞 无血清培养基 糖蛋白 表达
原文传递
重组人促卵泡激素在CHO细胞中的表达 被引量：3
4
作者 何太平 唐菁燕 +5 位作者 徐珑 宋春雷 谭晓晶 聂艳桃 杨波 雷韬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第12期1409-1412,共4页
目的在CHO细胞中表达重组人促卵泡激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)。方法用内部核糖体进入位点序列(IRES)将FSHα和β亚基在基因水平上进行拼接,并在同一启动子的控制下构建重组真核表达质粒pcDNA5/dhfr/FSH,转染CHO细胞,筛选... 目的在CHO细胞中表达重组人促卵泡激素(Follicle-stimulating hormone,FSH)。方法用内部核糖体进入位点序列(IRES)将FSHα和β亚基在基因水平上进行拼接,并在同一启动子的控制下构建重组真核表达质粒pcDNA5/dhfr/FSH,转染CHO细胞,筛选并建立稳定表达工程细胞株,并对工程细胞的生长和表达进行分析。结果重组真核表达质粒pcDNA5/dhfr/FSH经双酶切和测序证明构建正确;转染CHO细胞获得高的阳性克隆率(80.65%),经MTX加压和克隆筛选获得稳定表达工程细胞株D5;D5细胞株在无血清摇瓶批次培养中FSH的表达量为2.5 IU/ml,在培养参数可控的生物反应器中FSH的表达量为摇瓶中的2倍多,达6 IU/ml。结论建立了一种在CHO细胞中表达异二聚体糖蛋白的方法,获得的工程细胞适应无血清培养且易于扩大培养,在生物反应器中可获得高的表达量,且具有进一步优化提高表达量的潜力。 展开更多
关键词 促卵泡激素 异二聚体糖蛋白 CHO细胞 培养基 无血清
原文传递
重组复杂蛋白快速表达体系的建立 被引量：2
5
作者 何太平 杨波 +5 位作者 谭晓晶 唐菁燕 雷韬 宋春雷 聂艳桃 徐珑 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第11期1259-1263,共5页
目的建立重组复杂蛋白快速表达体系。方法利用定点整合技术建立定点整合宿主细胞库,分别以X-Fc融合蛋白和人凝血因子Ⅷ(FⅧ)为研究对象进行定点整合转染和表达分析。结果通过定点整合转染建立了高表达的宿主细胞库;X-Fc融合蛋白和人FⅧ... 目的建立重组复杂蛋白快速表达体系。方法利用定点整合技术建立定点整合宿主细胞库,分别以X-Fc融合蛋白和人凝血因子Ⅷ(FⅧ)为研究对象进行定点整合转染和表达分析。结果通过定点整合转染建立了高表达的宿主细胞库;X-Fc融合蛋白和人FⅧ均在宿主细胞中获得了高表达,X-Fc融合蛋白的表达量为220 mg/L,人FⅧ在有血清培养条件下的酶活性为2 IU/ml,且细胞株表达稳定,易于扩大培养。结论已成功建立了基于CHO细胞定点整合的重组复杂蛋白快速表达体系,该体系在克隆效率和时间上具有很大优势,可实现蛋白的有效快速表达。 展开更多
关键词 重组蛋白 CHO细胞 定点整合 快速表达
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部