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大熊猫γ-干扰素基因的克隆与序列分析 被引量:8
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作者 黄道超 张志和 +6 位作者 杨光友 张安居 郭万柱 王成东 候蓉 沈富军 袁欣 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期35-38,共4页
本实验应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫γ-干扰素基因(GenBank accession No:DQ630727),并将其克隆到pGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定与序列分析,结果表明,经... 本实验应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫γ-干扰素基因(GenBank accession No:DQ630727),并将其克隆到pGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定与序列分析,结果表明,经克隆得到的IFN-γ基因开放阅读框由498个核苷酸组成,编码一个由166个氨基酸组成的多肽,包括编码19个氨基酸的信号肽和147个氨基酸的成熟肽,预测蛋白分子量和等电点分别约为20Ku和9.36。与GenBank中其他哺乳动物的IFN-γ基因比较,它与犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的核苷酸序列同源性在57.7%(鼠)~93.2%(犬)之间;IFN-γ编码氨基酸序列同源性在46.8%(鼠)~92.8%(犬)之间;进化树构建结果表明大熊猫与犬的遗传距离最近。 展开更多
关键词 大熊猫 γ 干扰素 克隆 序列分析
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人工辅助大熊猫母兽哺乳幼仔研究 被引量:5
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作者 黄祥明 张志和 +5 位作者 兰景超 余健秋 李明喜 王成东 侯容 刘选珍 《四川动物》 CSCD 北大核心 2005年第4期588-592,共5页
2004年大熊猫母兽'蜀庆'(谱系号480)产仔后,虽能抱仔保温但不会哺乳幼仔,经人工辅助让幼仔吃上母乳,幼仔生长发育良好.本文报道了160天内幼仔吮乳的情况,收集了幼仔日吮乳次数、吮乳时间分布、日吮乳量及其与体重的关系等资料.... 2004年大熊猫母兽'蜀庆'(谱系号480)产仔后,虽能抱仔保温但不会哺乳幼仔,经人工辅助让幼仔吃上母乳,幼仔生长发育良好.本文报道了160天内幼仔吮乳的情况,收集了幼仔日吮乳次数、吮乳时间分布、日吮乳量及其与体重的关系等资料.结果表明:1)人工辅助母兽哺乳是解决性情温顺、母性好、有乳汁,但不会哺乳的母兽哺乳幼仔问题的方法;2)大熊猫幼仔每日吮乳次数由1~6前6天的12次左右,逐渐减少并固定在48天后的2次左右;80天内,幼仔吮乳时间在每日的平均分布有4个高峰时间段和4个低谷时间段;3)0~35天间,幼仔日吮乳量(y)与日龄(x)的关系可用公式y = 6.2228 x + 11.184(R2 = 0.9258)表示,日吮乳量随日龄增长而呈直线增加,35天后幼仔日吮乳量随日龄增长波动上升;4)幼仔日吮乳量与体重比在1~19天为30.22±1.31 %,处于整个育幼期的高水平,之后逐渐下降,95天后稳定在3.92±0.10 %的低水平. 展开更多
关键词 大熊猫 哺乳 人工辅助 圈养
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圈养大熊猫同时哺育双胞胎行为观察 被引量:4
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作者 黄祥明 张志和 +7 位作者 王成东 余星明 兰景超 李明喜 今津孝二 中尾健子 渡部敏 藩英仁 《兽类学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期267-273,共7页
2003年,圈养大熊猫"梅梅"首例哺育成活一胎二仔,通过对其近半年的育幼行为观察,结果发现:1)母兽主要以同时衔2仔、同时衔和抱2仔二种方式将幼仔抱入怀中哺育;60d内,育幼姿势以坐位为主,倦卧其次,其它姿势更少,其中坐位随日龄... 2003年,圈养大熊猫"梅梅"首例哺育成活一胎二仔,通过对其近半年的育幼行为观察,结果发现:1)母兽主要以同时衔2仔、同时衔和抱2仔二种方式将幼仔抱入怀中哺育;60d内,育幼姿势以坐位为主,倦卧其次,其它姿势更少,其中坐位随日龄增加逐渐减少,倦卧变化不大。2)母兽活动时间在产仔当天最多,之后显著下降并维持在35·2±0·6%的低水平,47d后再缓慢上升到108d后的54·8±0·9%。3)双胞胎幼仔间哺乳的日均次数和时间无显著差异。4)7d内2幼仔"仔在母身上"的时间占100%,21~23d后显著减少,而"母体盖仔"、"仔在母身边"和"母仔自然分离"的时间显著增加,但"母体盖仔"的时间在32d左右后又显著减少;双胞胎分别在与母兽的此四种位置变化的时间上无显著差异。5)母兽的活动、幼仔哺乳日均次数、"母仔自然分离"在全天的日均时间分布有峰、谷变化。6)随幼仔活动能力的逐渐增强,幼仔离"育幼窝"的距离也逐渐增加,双胞胎幼仔离"育幼窝"的远近也有差别。7)母兽分别与其雄性双胞胎幼仔玩耍的时间有显著差异,而两幼仔自玩的时间无差异,此两双胞胎自玩和一起玩耍所用时间远大于分别与母兽玩耍的时间。该研究丰富了大熊猫育幼行为内容,并为以后的大熊猫双胞胎育幼提供了可供参考的行为资料。 展开更多
关键词 圈养大熊猫 行为 母兽育幼 双胞胎
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大熊猫肠道菌抗生素抗性菌转座酶的基因克隆和表达 被引量:1
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作者 余丛 张义正 +3 位作者 侯蓉 张志和 严悦 谭雪梅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期715-722,共8页
对大熊猫肠道大肠杆菌抗生素抗性质粒pAm08CD7339全序列的生物信息学分析结果表明,该质粒中存在一个编码转座酶的DNA片段,两条DNA链均可编码转座酶,其编码区长度分别为717 bp和600 bp,编码238个和199个氨基酸残基(分别命名为Transposase... 对大熊猫肠道大肠杆菌抗生素抗性质粒pAm08CD7339全序列的生物信息学分析结果表明,该质粒中存在一个编码转座酶的DNA片段,两条DNA链均可编码转座酶,其编码区长度分别为717 bp和600 bp,编码238个和199个氨基酸残基(分别命名为Transposase-238和Transposase-199).以pAm08CD7339质粒DNA为模板,利用PCR方法对2个转座酶基因进行扩增,构建相应表达质粒,转化不同大肠杆菌菌株进行表达,结果表明:Transposase-199可以在E.coli BL21(DE3)中表达,而Transposase-238则只能在E.coli BL21 Rosetta(DE3)中表达.它们表达产物几乎全是包涵体. 展开更多
关键词 大熊猫 大肠杆菌 质粒 转座酶 基因克隆 基因表达
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大熊猫IL-4基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 黄道超 杨光友 +6 位作者 张志和 张安居 郭万柱 王成东 候蓉 沈富军 袁欣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期549-552,共4页
应用RT-PCR技术从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,克隆得到的IL-4基因开放阅读框由396个核苷酸组成,编码一个由132个氨基酸... 应用RT-PCR技术从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-4基因,并将其克隆到PGEM-T载体中。经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,克隆得到的IL-4基因开放阅读框由396个核苷酸组成,编码一个由132个氨基酸组成的多肽,包括编码24个氨基酸的信号肽和108个氨基酸的成熟肽。与GenBank中已登录的大熊猫IL-4(DQ166512)的核苷酸序列同源性分别为99.5%和100%;与其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的IL-4核苷酸同源性为50.7%(鼠)~87.7%(犬);IL-4编码氨基酸同源性在35.7%(鼠)~78.8%(犬);进化树构建结果表明,大熊猫与犬、猫遗传距离最近。 展开更多
关键词 大熊猫 IL-4 克隆 序列分析
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大熊猫IL-2基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 杨光友 黄道超 +6 位作者 张志和 张安居 郭万柱 王成东 侯蓉 沈富军 袁欣 《西华师范大学学报(自然科学版)》 2006年第4期339-343,共5页
本实验应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-2基因,并将其克隆到PGEM-T载体中.经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,经克隆得到的IL-2基因开放阅读框由465个核... 本实验应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从ConA诱导培养的大熊猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到大熊猫IL-2基因,并将其克隆到PGEM-T载体中.经菌落PCR鉴定、序列测定及序列分析,结果表明,经克隆得到的IL-2基因开放阅读框由465个核苷酸组成,编码一个由155个氨基酸组成的多肽,包括编码20个氨基酸的信号肽和135个氨基酸的成熟肽.该基因(已在Genbank中登录,序列号为:DQ852339)与已知的其他哺乳动物如犬、猫、人、猪、牛、羊、马、兔、鼠等的IL-2核苷酸同源性在66.5%(鼠)—91.5%(犬)之间;IL-2编码氨基酸同源性在54.8%(鼠)—85.2%(犬)之间;进化树构建结果表明大熊猫与犬亲缘关系最近. 展开更多
关键词 大熊猫 IL-2 克隆 序列分析
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