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海藻糖的生物合成与分解途经及其生物学功能 被引量:12
1
作者 杨平 李敏惠 +2 位作者 潘克俭 王玉明 苏晓庆 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期233-236,共4页
海藻糖是一类在干旱、低温、热击或脱水等逆境环境下具有独特抗逆保护作用的二糖,广泛分布于藻类、细菌、真菌和动植物体内。近年来,随着对海藻糖研究的深入,海藻糖已经被广泛应用到食品、医药、化妆品和分子生物学研究等领域。该文简... 海藻糖是一类在干旱、低温、热击或脱水等逆境环境下具有独特抗逆保护作用的二糖,广泛分布于藻类、细菌、真菌和动植物体内。近年来,随着对海藻糖研究的深入,海藻糖已经被广泛应用到食品、医药、化妆品和分子生物学研究等领域。该文简述了海藻糖在生物体内的代谢途径、生物学功能和研究进展,并对灭蚊真菌Pythiumsp.GY1938菌株海藻糖代谢酶基因的研究前景加以展望。 展开更多
关键词 海藻糖 海藻糖酶 真菌
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昆虫抗菌肽及其基因工程研究进展 被引量:9
2
作者 李敏惠 杨平 何正波 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期437-440,共4页
昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中许多有害微生物侵染的重要因素.近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的应用越来... 昆虫抗菌肽是一类具有免疫效应的小分子多肽,它具有热稳定、抗菌谱广、无免疫原性、作用机制独特等特性,是昆虫能够抵御自然界中许多有害微生物侵染的重要因素.近年来,随着有关抗菌肽作用机理及功能研究的深入,其在医药领域的应用越来越引起人们的关注.本文就昆虫抗菌肽的分类、生物功能、基因工程研究进展等作一综述. 展开更多
关键词 抗菌肽 昆虫 基因工程
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新分离的灭蚊真菌(Pythium sp.GY1938)对家蝇幼虫的安全性检测 被引量:9
3
作者 杨平 刘萍 +1 位作者 苏晓庆 吴建伟 《贵阳医学院学报》 CAS 2006年第3期203-204,207,共3页
目的:检测新分离的灭蚊真菌(Pythiumsp.代号GY1938)对非靶生物家蝇(Musca dom esticaV ic ina)幼虫的安全性。方法:用分别拌以高(1%)、中(0.5%)和低(0.1%)剂量该真菌菌丝悬液的家蝇饲料饲养家蝇幼虫,并以不加真菌的家蝇饲料饲养的家蝇... 目的:检测新分离的灭蚊真菌(Pythiumsp.代号GY1938)对非靶生物家蝇(Musca dom esticaV ic ina)幼虫的安全性。方法:用分别拌以高(1%)、中(0.5%)和低(0.1%)剂量该真菌菌丝悬液的家蝇饲料饲养家蝇幼虫,并以不加真菌的家蝇饲料饲养的家蝇幼虫作对照。待幼虫成熟后,拣出幼虫并计数,计算幼虫拣出率。并观察幼虫的外形,称体重。结果:实验组家蝇幼虫的外形和体重与对照组无显著性差异。结论:灭蚊真菌Pyth-ium sp.GY1938对家蝇没有毒性作用。 展开更多
关键词 灭蚊 真菌 安全 家蝇 害虫防治 生物学
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可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及性质研究 被引量:9
4
作者 李灵玲 张涛 余蓉 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期177-179,共3页
目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳... 目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶(PP)并研究其部分酶学性质。方法将PP偶联在羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上,制备得到水溶性固定化PP,并测定游离和水溶性固定化PP最适作用pH、最适作用温度、Km值、热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果最适作用pH分别为6.0、5.0,最适作用温度分别为60℃、70℃,Km值分别为2.53、3.07 mg.m l-1;可溶性固定化PP在60℃条件下,保温12 h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30 d后活性保留达90%以上;在pH6时稳定性最好,pH4-7范围内也较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化PP能够在大于pH5.5的溶液中完全溶解,最适作用pH范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热和酸碱的稳定性均明显增强。 展开更多
关键词 可溶性固定化酶 木瓜蛋白酶 酶学性质 偶联
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黑木耳多糖对高功率微波辐射大鼠卵巢和子宫形态结构的影响 被引量:10
5
作者 朱辛为 田洪艳 +5 位作者 徐冶 李质馨 潘晓燕 沈楠 林冬静 田志杰 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2012年第5期735-737,共3页
目的:探讨黑木耳多糖对高功率微波辐射大鼠卵巢和子宫形态结构的影响。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、辐射模型组和治疗组,每组10只。辐射模型组和治疗组给予表面功率200 mW/cm2,10 min的微波辐射。正常对照组和辐射模型组... 目的:探讨黑木耳多糖对高功率微波辐射大鼠卵巢和子宫形态结构的影响。方法:Wistar大鼠30只,随机分为正常对照组、辐射模型组和治疗组,每组10只。辐射模型组和治疗组给予表面功率200 mW/cm2,10 min的微波辐射。正常对照组和辐射模型组蒸馏水1.5 ml灌胃,治疗组1%木耳多糖1.5 ml灌胃,连续10天。第11天取卵巢和子宫,制备组织学标本,光学显微镜观察。结果:治疗组与辐射模型组相比,卵巢皮质增厚,卵泡数量增多,各级卵泡形态结构基本正常,黄体形态规则;子宫内膜增厚,上皮细胞排列较紧密,固有层内子宫腺增多,腺腔扩大,组织细胞结构基本正常。结论:木耳多糖在高功率微波辐射时,对卵巢和子宫具有保护修复作用。 展开更多
关键词 木耳多糖 微波辐射 卵巢 子宫
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一种适于简并PCR的Pythium sp.GY1938基因组DNA制备方法 被引量:6
6
作者 杨平 黄杰 +3 位作者 余琳 邓未 傅龙章 李敏惠 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2012年第3期192-194,共3页
目的探索适用于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P... 目的探索适用于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR的基因组DNA模板制备方案。方法采用微波法、石英沙法、氯化苄法、CTAB法、尿素法提取DNA,并通过特异PCR和简并PCR评价各种方案的优弊。结果 5种方法制备的DNA含量差异无统计学意义(F=2.355,P>0.05);DNA制备效率相近;特异性PCR结果一致,但氯化苄法制备的DNA经简并PCR扩增出的条带较多,目的条带更清晰。结论 5种方法均适于特异性PCR所需DNA模板的制备,但氯化苄法更适于Pythiumsp.GY1938菌株简并PCR模板DNA的制备。 展开更多
关键词 真菌 基因组 简并
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高校研究型中心实验室建设与管理的新探索 被引量:6
7
作者 李敏惠 杨平 邹强 《实验技术与管理》 CAS 2008年第3期103-104,128,共3页
在实验室管理体制的改革探索过程中,建立具有多功能技术平台的中心实验室,是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例,详细介绍了该中心“开放、共享”的特点,以及“共建、共... 在实验室管理体制的改革探索过程中,建立具有多功能技术平台的中心实验室,是当前高校研究型实验室改进管理弊端的必由之路。文章以成都医学院院级实验室——科研实验中心为例,详细介绍了该中心“开放、共享”的特点,以及“共建、共管、共用”的人性化管理模式。 展开更多
关键词 实验室 管理 高校
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二硫苏糖醇和β-巯基乙醇在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应 被引量:2
8
作者 杨平 李敏惠 +4 位作者 常山 何建荣 罗兴艳 刘阳 邹强 《医学研究生学报》 CAS 2009年第9期916-919,共4页
目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品... 目的:二硫苏糖醇(DTT)和β-巯基乙醇(2-ME)是十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术中最常用的2种还原剂。文中旨在观察这2种还原剂在SDS-PAGE电泳过程中的扩散效应及建立规避扩散效应的方法。方法:将含有还原剂的蛋白样品和未还原蛋白样品间隔上样进行电泳,通过观察未还原样品的电泳条带来判断是否受到邻近泳道还原剂的扩散影响。结果:还原剂DTT或2-ME可扩散到邻近泳道,使未还原蛋白样品发生部分还原,扩散效应的强弱与还原剂的含量成正相关。结论:SDS-PAGE电泳过程中DTT和2-ME均存在扩散效应,在同一块凝胶上同时分离还原蛋白和未还原蛋白时,至少应该在2个泳道间设置一空白泳道,以规避扩散效应。 展开更多
关键词 还原剂 扩散效应 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳
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HIF-1α和VEGF在结肠癌组织和SW480细胞中表达的生物学意义 被引量:5
9
作者 潘克俭 赖雁 +1 位作者 梁素华 樊元春 《川北医学院学报》 CAS 2007年第4期316-319,共4页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达与肿瘤组织学分级关系,以及HIF-1α和VEGF之间的相关性;缺养环境对人结肠癌SW480细胞中HIF-1α和VEGF表达的影响。方法用免疫组织化学方法染色显示... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在结肠癌组织中的表达与肿瘤组织学分级关系,以及HIF-1α和VEGF之间的相关性;缺养环境对人结肠癌SW480细胞中HIF-1α和VEGF表达的影响。方法用免疫组织化学方法染色显示结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达,分析HIF-1α、VEGF表达随结肠癌组织学分级的变化及二者之间的关系;RT-PCR研究SW480细胞HIF-1α和VEGF表达在常氧与缺氧时的差异。结果HIF-1α和VEGF蛋白均在结肠癌组织中表达,且表达水平随结肠癌组织学分级提高而上升;各级结肠癌组织中HIF-1α和VEGF的表达呈正相关性;缺氧诱导SW480细胞的VEGF mRNA表达上升。结论HIF-1α和VEGF的表达随结肠癌恶性程度的增高而增强。 展开更多
关键词 结肠癌 HIF-lα VEGF 缺氧
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Pythium sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的克隆与序列分析 被引量:4
10
作者 杨平 李敏惠 苏晓庆 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期5-8,共4页
目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle... 目的克隆Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因。方法在已经克隆得到的Pythi- um sp.GY1938菌株类枯草菌素蛋白酶cDNA片段的基础上,首先通过PCR扩增得到与其相对应的基因组DNA片段,然后分别通过Mini基因组DNA文库法和Panhandle PCR法扩增其上游和下游未知片段,最后通过PCR法扩增得到类枯草菌素蛋白酶基因片段。结果克隆得到1 519bp Pr1蛋白酶基因序列YP1977.DNAassist软件分析其中含有一个969bp的完整的开放阅读框,编码323个氨基酸,NCBI BlastX比对结果显示,该阅读框可能编码的氨基酸序列与多个物种的Pr1蛋白酶都具有较高的同源性。结论YP1977很可能是Pythium sp.CY1938菌株类枯草菌素蛋白酶Pr1基因的部分片段,但仍需要进一步通过构建表达系统加以验证。 展开更多
关键词 类枯草菌素蛋白酶 克隆 基因组文库 锅柄聚合酶链式反应
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固态发酵贵州绿僵菌产壳聚糖酶的亲和层析纯化及其性质研究 被引量:5
11
作者 杨俐 张涛 +1 位作者 李晓红 余蓉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期713-716,共4页
目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲... 目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲和层析和分子筛分离可获得电泳纯的壳聚糖酶,酶活力回收率为43.52%。每克干培养基可获壳聚糖酶328μg,比活达106.39U/mg。酶蛋白相对分子质量为50.3×103。结论固态发酵贵州绿僵菌生产壳聚糖酶可作为壳聚糖酶的新酶源。用交联壳聚糖树脂亲和层析、Cu2+洗脱和分子筛分离的方法可以纯化壳聚糖酶。 展开更多
关键词 贵州绿僵菌 固态发酵 壳聚糖酶 亲和层析 交联壳聚糖树脂 CU2+
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用SDS-PAGE和Vorum银染法比较真菌菌丝体破壁效果 被引量:2
12
作者 李敏惠 潘克俭 +3 位作者 宋丽萍 钟文英 邹珂珂 杨平 《生物技术通讯》 CAS 2011年第6期867-869,共3页
目的:研究不同处理方法对丝状真菌Pythium sp.GY1938菌丝体破壁效果的差异。方法:采用7种方法对真菌菌丝体进行破壁处理,将制备的胞内可溶蛋白质样品通过SDS-PAGE和Vorum法银染处理,比较不同破壁方法处理后蛋白质释放效果的优劣。结果:... 目的:研究不同处理方法对丝状真菌Pythium sp.GY1938菌丝体破壁效果的差异。方法:采用7种方法对真菌菌丝体进行破壁处理,将制备的胞内可溶蛋白质样品通过SDS-PAGE和Vorum法银染处理,比较不同破壁方法处理后蛋白质释放效果的优劣。结果:方法VI(石英砂、液氮、研磨)的破壁效果最好,蛋白质的分离效率和提取质量最高。结论:方法VI适合于丝状真菌Pythium sp.GY1938蛋白组学研究中目的蛋白的提取。 展开更多
关键词 丝状真菌 PYTHIUM sp.GY1938 破壁 银染
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五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense总RNA效果的比较 被引量:2
13
作者 杨平 陈慧娟 +3 位作者 钟文英 邓未 黄杰 李敏惠 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2011年第4期242-246,共5页
为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过... 为了探索提取贵阳腐霉Pythiumguiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimpletotal RNAkit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊。结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,OD260/OD280=2.093±0.264,RNA浓度为(0.134±0.021)μg/μL,RNA制备效率为(26.76±4.10)μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,是制备P.guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法。 展开更多
关键词 贵阳腐霉Pythium guiyangense 破壁 总RNA
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丝状真菌Pythium sp.GY1938菌株蛋白图谱染色方法的比较及优化 被引量:2
14
作者 杨平 钟剑 +3 位作者 雷帆 余琳 杨思思 李敏惠 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第9期675-678,共4页
目的探索制备灭蚊丝状真菌Pythiumsp.GY1938菌株菌丝体可溶性蛋白图谱的最佳染色方案。方法采用不同的破壁方法制备Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白,并通过SDS-PAGE进行蛋白质电泳分离,进一步采用考马斯亮蓝R-250染色法、Vorum银染法... 目的探索制备灭蚊丝状真菌Pythiumsp.GY1938菌株菌丝体可溶性蛋白图谱的最佳染色方案。方法采用不同的破壁方法制备Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白,并通过SDS-PAGE进行蛋白质电泳分离,进一步采用考马斯亮蓝R-250染色法、Vorum银染法、EMBL银染法、Blum银染法4种染色方案分别进行凝胶染色,对不同染色方案的染色效果进行分析和比较。结果对于Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白样品中的中、高分子质量蛋白(≥44ku),考马斯亮蓝R-250的染色效果较好,且简单、快捷;对于低分子质量(<44ku)的可溶性蛋白,Vorum银染法染色效果较好;Blum银染法和EMBL银染法的染色效果均不理想。结论考马斯亮蓝R-250染色法和Vorum银染法均可应用于Pythiumsp.GY1938菌丝体可溶性蛋白图谱的制备,前者适合对中、高分子质量蛋白染色,后者适合对低分子质量蛋白染色。 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 考马斯亮蓝染色 银染
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胱抑素C的IgG-和IgY-ELISA检测体系的建立与评价 被引量:2
15
作者 蒋洪娇 李敏惠 +8 位作者 邹强 王琦 吴永琴 吴啟洪 邓未 刘雯雯 杨艳玲 代爽 杨平 《成都医学院学报》 CAS 2012年第3期386-389,共4页
目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测... 目的建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系。方法以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,I:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体;Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab')2抗鸡酶标抗体;Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体。通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性。结果体系I的Cystatin C最低检测浓度为7.5ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10ng/mL(阴性对照OD值为0.31)。结论成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系I的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测。 展开更多
关键词 IGY抗体 IGG抗体 胱抑素C 酶联免疫吸附试验
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HIF-1α基因表达下调对人结肠癌SW480细胞增殖和VEGF表达的影响 被引量:3
16
作者 潘克俭 罗凤鸣 +3 位作者 刘小菁 姚文柱 王玉明 李亚 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第17期1583-1586,共4页
目的:研究转录因子-缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧条件下对人结肠癌SW480细胞增殖的作用,以及HIF-1α对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,研究HIF-1α调节SW480细胞增殖的机制.方法:构建针对HIF-1α的pSu-per-EGFPsiRNA表达载体,转... 目的:研究转录因子-缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在缺氧条件下对人结肠癌SW480细胞增殖的作用,以及HIF-1α对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,研究HIF-1α调节SW480细胞增殖的机制.方法:构建针对HIF-1α的pSu-per-EGFPsiRNA表达载体,转染SW480细胞,抑制HIF-1α的表达,RT-PCR和WesternBlot检测抑制结果;MTT法检测HIF-1α被抑制后,SW480在缺氧培养条件下的增殖情况;RT-PCR和WesternBlot检测VEGF的表达.结果:缺氧培养条件下,HIF-1α和VEGF表达明显上升;转染pSuper-EGFPsiRNA表达载体后,SW480细胞HIF-1αmRNA和蛋白质的表达大幅下降;SW480细胞增殖下降(P<0.05);而在缺氧培养条件下有较高表达的VEGF,其mRNA和蛋白质的表达也大幅下降.结论:HIF-1α在缺氧条件下,对SW480细胞在增殖有影响,其机制可能是通过在缺氧时上调节VEGF等细胞生长因子的表达,进而调节肿瘤细胞生长. 展开更多
关键词 缺氧诱导因子 血管内皮生长因子类 RNA干扰 SW480细胞增殖
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辣椒素提取及纯化的研究 被引量:3
17
作者 舒丹 郑人源 +2 位作者 叶小金 罗琴 张涛 《成都医学院学报》 CAS 2007年第2期112-114,共3页
目的以干辣椒为原料,研究采用壳聚糖树脂吸附提取辣椒碱及其纯化的工艺。方法:用NaOH溶液进行粗提取,提取液处理后用壳聚糖树脂柱吸附,用乙醇洗脱得到辣椒素溶液,重结晶得到淡黄色针状辣椒素晶体。采用香兰素-亚硝酸钠比色法测定辣椒素... 目的以干辣椒为原料,研究采用壳聚糖树脂吸附提取辣椒碱及其纯化的工艺。方法:用NaOH溶液进行粗提取,提取液处理后用壳聚糖树脂柱吸附,用乙醇洗脱得到辣椒素溶液,重结晶得到淡黄色针状辣椒素晶体。采用香兰素-亚硝酸钠比色法测定辣椒素含量。结果:从干辣椒中提取得到的辣椒素收率为0.38%,辣椒素晶体纯度为91.20%。结论:采用该方法提取辣椒碱,方法操作简便,成本低廉,产率和纯度较高,结果较理想。 展开更多
关键词 辣椒素 提取 纯化 含量测定
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抗胱抑素C鸡卵黄IgY抗体的制备及鉴定
18
作者 傅龙章 李敏惠 +7 位作者 潘克俭 邹珂珂 杨菌 李艳超 黄杰 叶启迪 马玲玲 杨平 《生物技术通讯》 CAS 2013年第2期222-224,共3页
目的:制备高效价、高特异性的抗人胱抑素C鸡卵黄IgY抗体,并对其基本特性进行分析和鉴定。方法:以人胱抑素C为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化IgY抗体,采用蛋白质定量、SDS-PAGE、West ern印迹和ELISA法对IgY抗体进行... 目的:制备高效价、高特异性的抗人胱抑素C鸡卵黄IgY抗体,并对其基本特性进行分析和鉴定。方法:以人胱抑素C为抗原免疫产蛋的罗曼鸡,采用水稀释-盐析法提取及纯化IgY抗体,采用蛋白质定量、SDS-PAGE、West ern印迹和ELISA法对IgY抗体进行分析和鉴定。结果:免疫后14 d即可从鸡冠血中检测出抗胱抑素C的特异性抗体,抗体效价在28 d达最高峰(1∶32 000),并可维持2个月以上;收集高效价时的免疫鸡蛋,制备鸡卵黄抗体IgY;还原性SDS-PAGE显示抗体IgY为相对分子质量分别为65×103和21×103的2条带,抗体纯度可达92%,得率为每个鸡蛋36.5 mg,抗体检出敏感度为15.63 ng/mL;Western印迹证明该抗体具有高度特异性。结论:制备了抗胱抑素C的高效价、高特异性IgY抗体。 展开更多
关键词 IGY抗体 胱抑素C 鸡卵黄
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可溶性固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质研究 被引量:1
19
作者 刘桦 林玲 +1 位作者 王玉明 何浪 《成都医学院学报》 CAS 2006年第1期37-40,43,共5页
目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究。方法将木瓜蛋白酶偶联在亲水性高分子聚合物羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶。在相同的条件下测定游离的木瓜蛋白酶和水溶性固定化木... 目的制备一种可溶性固定化木瓜蛋白酶并对其部分酶学性质进行研究。方法将木瓜蛋白酶偶联在亲水性高分子聚合物羧甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(AS-L)上制备得到水溶性固定化木瓜蛋白酶。在相同的条件下测定游离的木瓜蛋白酶和水溶性固定化木瓜蛋白酶的活力,得到两种状态的酶的最适作用pH值和最适作用温度,再于它们各自的最适条件下测定活力,得到各自的Km值;在相同的条件下测定两种状态的酶的热稳定性、酸碱稳定性、低温稳定性和回收稳定性。结果游离木瓜蛋白酶和可溶性固定化木瓜蛋白酶的最适作用pH值分别为6.0和5.0,最适作用温度分别为60℃和70℃,Km值分别为2.53、3.07mg·ml^(-1);可溶性固定化木瓜蛋白酶在60%条件下,保温12h,仍有62%的活性;在4℃条件下,30d后活性保留达90%以上;在pH6.0时稳定性最好,在pH4.0~7.0范围内也比较稳定(相对活性>80%)。结论可溶性固定化木瓜蛋白酶能够在pH5.5以上的溶液中完全溶解,最适作用pH值范围变窄,最适作用温度和Km值升高;热稳定性和酸碱稳定性均明显增强。 展开更多
关键词 可溶性固定化酶 木瓜蛋白酶 酶学性质
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ABCA1基因变异与血浆高密度脂蛋白胆固醇水平的关系 被引量:1
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作者 李亚 王玉明 +1 位作者 贺勇 潘克俭 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2347-2349,共3页
目的探讨腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ATP-binding transporter A1,ABCA1)基因多态性与汉族人群血浆高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测... 目的探讨腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ATP-binding transporter A1,ABCA1)基因多态性与汉族人群血浆高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测376例无血缘关系的正常汉族人ABCA1基因M883I、R1587K和R219K多态性。结果研究人群中KK1587基因型者HDL-C水平明显低于RR1587和RK1587基因型者(P<0.05)。按性别分层后,仅女性KK1587基因型者HDL-C水平低于RR1587和RK1587基因型者(P<0.01)。一般线性模型分析显示,R1587K多态对女性个体HDL-C水平变异的贡献度为2.3%(P<0.01)。结论ABCA1基因M883I和R219K多态与汉族人群HDL-C水平无关,但K1587等位基因以隐性作用方式与女性HDL-C水平降低有关。 展开更多
关键词 腺苷三磷酸结合盒转运体A1基因 冠状动脉粥样硬化性心脏病 高密度脂蛋白胆固醇
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