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一株降氰细菌的筛选及其转化特性初步研究 被引量：15
1
作者 刘幽燕 何玉财 +3 位作者 李青云 韩文亮 童张法 何勇强 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期25-28,共4页
从污染土壤中分离一株高效降氰菌株DN25,经表型分析和16SrDNA分析,初步判断为产碱杆菌(Alcaligenessp.)。该菌株耐氰能力强,能在氰浓度达1000mg/L的环境中生长。其生长和转化的最佳温度和pH分别为30℃和8.0,10h对氰浓度为500mg/L的溶液... 从污染土壤中分离一株高效降氰菌株DN25,经表型分析和16SrDNA分析,初步判断为产碱杆菌(Alcaligenessp.)。该菌株耐氰能力强,能在氰浓度达1000mg/L的环境中生长。其生长和转化的最佳温度和pH分别为30℃和8.0,10h对氰浓度为500mg/L的溶液转化率可达到99%。同时菌株也可有效转化亚铁氰化钾,对于氰浓度相当于500mg/L的亚铁氰化钾液,12h的转化率可达到96%。 展开更多
关键词 氰化物 生物转化 筛选 转化特性
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聚氨酯泡沫固定化产碱杆菌细胞生物转化氰化物 被引量：11
2
作者 刘幽燕 李青云 +3 位作者 覃益民 韦炳努 何勇强 童张法 《环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第3期586-589,共4页
利用1株产碱杆菌DN25作为降氰菌株,以聚氨酯泡沫为载体进行固定化,研究其转化特性.结果表明,采用吸附生长法能有效实现菌株DN25的固定,固定细胞量可达到每g泡沫载体生物量干重0.35g.固定化细胞的最适转化温度和pH为35℃、8.0.对于低浓... 利用1株产碱杆菌DN25作为降氰菌株,以聚氨酯泡沫为载体进行固定化,研究其转化特性.结果表明,采用吸附生长法能有效实现菌株DN25的固定,固定细胞量可达到每g泡沫载体生物量干重0.35g.固定化细胞的最适转化温度和pH为35℃、8.0.对于低浓度氰化物,固定化细胞和游离细胞的转化速率相当;对于高浓度氰化物,固定化细胞具有明显优势,不仅可耐受更高浓度的氰化物转化,其转化速率也高于游离细胞,最大转化速率为507mg/(L.h),是游离细胞的2.8倍.通过初步的摇瓶模拟序列批式反应,固定化细胞活性可保持20d. 展开更多
关键词 聚氨酯泡沫 固定化细胞 氰化物 生物转化
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低毒病毒及板栗疫病菌低毒力机制 被引量：13
3
作者 商巾杰 陈保善 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期835-844,共10页
低毒病毒是一类存在于板栗疫病菌细胞质中自主复制的无衣壳正链RNA病毒。感染低毒病毒后,板栗疫病菌的致病力显著降低,色素分泌减少,菌丝体由感染病毒前的桔黄色变为白色,产孢量降低或不产孢,漆酶表达水平明显下降。低毒病毒侵染性克隆... 低毒病毒是一类存在于板栗疫病菌细胞质中自主复制的无衣壳正链RNA病毒。感染低毒病毒后,板栗疫病菌的致病力显著降低,色素分泌减少,菌丝体由感染病毒前的桔黄色变为白色,产孢量降低或不产孢,漆酶表达水平明显下降。低毒病毒侵染性克隆的获得以及高效转化和转染体系的建立,使得低毒病毒成为目前唯一可以进行全面遗传操作的真菌病毒。利用低毒病毒作为探针来探测板栗疫病菌的致病力组成和毒力调节机制,已获得了一些很有意义的发现。本文介绍近几年低毒病毒及其与真菌相互作用的研究进展,包括低毒病毒的基因组和功能基因研究、低毒病毒和线粒体损害引起的板栗疫病菌低毒力机制、板栗疫病菌的RNA沉默系统以及低毒病毒抗RNA沉默的机制。低毒病毒/板栗疫病菌系统已经成为研究病毒与宿主相互作用以及病原真菌致病机理的很好的模式系统。 展开更多
关键词 板栗疫病菌 低毒病毒 低毒力 RNA沉默 基因组学
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高产生物丁醇新菌株的筛选、鉴定及发酵研究 被引量：9
4
作者 裴建新 左文朴 +4 位作者 庞浩 张穗生 黄志民 黎贞崇 黄日波 《可再生能源》 CAS 北大核心 2011年第5期99-102,共4页
丁醇是具有巨大应用潜力的可再生能源。为了获得高效生产丁醇的菌株,通过玉米培养基富集、丁醇耐受筛选的方法,从自然环境(牛粪、沼气池和土壤)来源的60份样品中分离获得1株丁醇发酵比率高的新菌株,菌株命名为gxzp-13-2。经梯度浓度葡... 丁醇是具有巨大应用潜力的可再生能源。为了获得高效生产丁醇的菌株,通过玉米培养基富集、丁醇耐受筛选的方法,从自然环境(牛粪、沼气池和土壤)来源的60份样品中分离获得1株丁醇发酵比率高的新菌株,菌株命名为gxzp-13-2。经梯度浓度葡萄糖发酵试验表明,5%葡萄糖发酵丁醇产量较高,最高可达10.05 g/L,总溶剂达到13.95 g/L,丁醇比约为72.1%,转化率为31.8%。对此菌株进行了分子鉴定,经16S rDNA基因序列同源性分析表明,gxzp-13-2与拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)的同源性最高,相似性高达98%。gxzp-13-2在厌氧固体培养基上生长,菌落呈紫色。该菌株为下一步的菌种基因改造工作提供了研究基础,也为丁醇发酵提供了宝贵的菌种资源。 展开更多
关键词 拜氏梭菌 生物丁醇 鉴定 发酵
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碱性土壤微生物基因的克隆和多样性分析 被引量：7
5
作者 胡婷婷 蒋承建 +2 位作者 梁璇 隆文杰 武波 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1287-1293,共7页
从碱性土壤样品中直接抽提和分离宏基因组DNA,首先构建了包含5562个阳性克隆的碱性土壤16SrDNA文库,随机抽取9个克隆测序后构建的系统进化树表明了碱性土壤环境微生物种群基因的多样性。纯化土壤宏基因组DNA后采用EcoRⅠ酶部分酶切处理... 从碱性土壤样品中直接抽提和分离宏基因组DNA,首先构建了包含5562个阳性克隆的碱性土壤16SrDNA文库,随机抽取9个克隆测序后构建的系统进化树表明了碱性土壤环境微生物种群基因的多样性。纯化土壤宏基因组DNA后采用EcoRⅠ酶部分酶切处理,我们又构建了以pGEM-3Zf(+)为载体的DNA部分文库AL01。AL01文库包含23650个克隆,随机插入载体的外源DNA片段平均大小为3.2kb左右,DNA文库的总容量为75.68Mb。建库效率为从每克环境样品中获得6000个左右的含随机外源DNA片段插入载体的克隆。采用酶活筛选策略,我们从AL01文库中筛选到一个编号为pGXAA2011的阳性克隆携带有一个完整的碱性蛋白酶基因。蛋白酶活性检测其酶活作用最佳温度为40℃,最适作用pH值为9.5。另外,我们还克隆和表达了一个新型-葡萄糖苷酶基因unglu01,该基因和现有数据库中的-葡萄糖苷酶基因没有任何DNA或者氨基酸水平的同源性。将unglu01基因的ORF与表达载体pETBlue-2连接后导入宿主菌株Tuner(DE3)pLacI中,该重组表达克隆在含柠檬酸高铁铵和七叶苷的LA平板上表现清晰的-葡萄糖苷酶活性,SDS-PAGE电泳可以检测到29kDa大小的目的蛋白。 展开更多
关键词 宏基因组 文库 未培养微生物 碱性蛋白酶 Β-葡萄糖苷酶
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高盐极端环境土壤基因组DNA的分离纯化方法研究及基因文库的构建 被引量：6
6
作者 孙栋 唐莉丽 +3 位作者 王倩倩 杨冬梅 蒋承建 武波 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第1期24-29,共6页
以钦州市犀牛角镇晒盐池内（盐浓度〉25％）的土壤样品为研究对象，对土壤混合基因组DNA的提取和纯化方法进行了深入研究，结果表明。冻融法、十二烷基磺酸钠（SDS）和蛋白酶K联合使用的提取法，能有效提高DNA得率，DNA的产量达到每克... 以钦州市犀牛角镇晒盐池内（盐浓度〉25％）的土壤样品为研究对象，对土壤混合基因组DNA的提取和纯化方法进行了深入研究，结果表明。冻融法、十二烷基磺酸钠（SDS）和蛋白酶K联合使用的提取法，能有效提高DNA得率，DNA的产量达到每克土壤样品10～15μg。交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、SeDhadex G-200树脂以及大量胶回收的使用，可有效纯化DNA。纯化的DNA产量可达每克土壤样品4～6μg，DNA片段大小〉30kb，将纯化的DNA用BamH Ⅰ部分酶切后构建以pLAFR3为载体的混合基因组文库，该文库包含15600个克隆，外源片段DNA平均大小为18kb。通过DNA序列测定和同源性比较，对从文库中随机挑取的10个克隆进行了序列分析，发现9个外源插入片段包含未知DNA序列。 展开更多
关键词 土壤 DNA提取 DNA纯化 混合基因组DNA文库
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玉米混合组织的EST文库的构建和部分EST序列的分析 被引量：5
7
作者 张洁 焦岳宏 +1 位作者 陆海峰 李有志 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2004年第3期243-248,共6页
以CLONTEECH的pDNR-LIB质粒为载体,构建了干旱和盐碱共胁迫48h和相应的无胁迫正常生长条件下耐旱玉米(ZeamaysL.)YQ7-96品系的雌雄分化期(12片叶龄)的混合组织(叶、茎和花器)EST文库。该文库容量>2×105个克隆,覆盖了预计的玉米... 以CLONTEECH的pDNR-LIB质粒为载体,构建了干旱和盐碱共胁迫48h和相应的无胁迫正常生长条件下耐旱玉米(ZeamaysL.)YQ7-96品系的雌雄分化期(12片叶龄)的混合组织(叶、茎和花器)EST文库。该文库容量>2×105个克隆,覆盖了预计的玉米基因组5万个基因的4倍以上。随机对3168个克隆中插入的cDNA进行测序,获得有效序列2098条,其中,2002个克隆中的cDNA进行了5'端测序,96个克隆中的cDNA的进行了5'和3'两端测序。结果表明,3'端测序的96个克隆的cDNA都含有polyA尾巴;进一步对这2098条组装分析,形成168个重叠群(Contig)和1693个单拷贝EST(Singlet),代表了共计1861条独立基因(Unigene);根据GenBank中的玉米EST数据库和BLASTn分析软件进行核苷酸同源性分析,1731条(93.01%)EST的score值大于或等于100,130条(6.99%)的EST的score值小于100,说明这130条属于新的表达基因的序列,有21条可以定位在玉米的不同染色体上;BLASTx分析表明,2098条EST中,1007条(48%)有功能注释信息,1091条(52%)无功能注释信息。该文库中的EST将会对公共数据库中现存的玉米EST数据起到补充作用。 展开更多
关键词 玉米 干旱 盐碱 共胁迫 表达序列标签 文库
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缺水和缺铁胁迫对玉米光合作用特性和根生长的影响 被引量：5
8
作者 陆海峰 潘英华 +2 位作者 卿冬进 任振胜 李有志 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2007年第1期44-49,共6页
研究了缺水胁迫和缺铁胁迫对三叶期玉米(Zea mays)的光合作用特性和根生长的影响。玉米叶部的光合作用均受缺水胁迫和缺铁胁迫影响;短时间(≤2 h)缺水胁迫对光合作用造成的不利影响不能被短时间(24 h)的复水完全消除,而较长时间的缺铁胁... 研究了缺水胁迫和缺铁胁迫对三叶期玉米(Zea mays)的光合作用特性和根生长的影响。玉米叶部的光合作用均受缺水胁迫和缺铁胁迫影响;短时间(≤2 h)缺水胁迫对光合作用造成的不利影响不能被短时间(24 h)的复水完全消除,而较长时间的缺铁胁迫(168 h)对光合作用造成的抑制作用可以被短时间(24 h)的补铁措施消除。短时间缺水(≤2 h)或短时间(≤72 h)缺铁不影响根系生长。较长时间的缺铁(168 h)严重限制根的生长并导致根生长畸形,短时间(24 h)补铁不能消除较长时间的缺铁对根的生长带来的不利影响。 展开更多
关键词 玉米 缺水 缺铁 光合作用 根生长
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碱性土壤基因组DNA的分离纯化和基因文库的构建 被引量：4
9
作者 蒋承建 隆文杰 +2 位作者 梁璇 孙栋 武波 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2004年第1期63-66,共4页
直接从广西南宁市凤凰纸业排污沟碱性土壤样品中抽提和分离纯化混合基因组 DNA,所获得DNA的产量为每克土壤样品 1 0～ 3 0μg。采用限制性内切酶 Eco R1酶处理后 ,构建了以 p GEM-3 Zf(+)为载体的 DNA部分文库。文库的容量为 2 3 65 0... 直接从广西南宁市凤凰纸业排污沟碱性土壤样品中抽提和分离纯化混合基因组 DNA,所获得DNA的产量为每克土壤样品 1 0～ 3 0μg。采用限制性内切酶 Eco R1酶处理后 ,构建了以 p GEM-3 Zf(+)为载体的 DNA部分文库。文库的容量为 2 3 65 0个转化子 ,外源片段 DNA平均大小为 3 .2 kb。建库效率为每克环境样品获得 60 0 0个左右的含 1～ 1 5 kb外源随机插入片段的克隆。通过 DNA序列测定和同源性比较 ,对从文库随机调取的 1 6个转化子序列进行分析 ,发现 1 3个外源插入片段包含序列尚未确定的 DNA片段。 展开更多
关键词 碱性土壤 基因组 DNA 分离 纯化 基因文库 序列分析
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利用糖蜜发酵生产丁醇菌株的分离筛选及鉴定 被引量：6
10
作者 裴建新 左文朴 +4 位作者 庞浩 黄志明 黎贞崇 韦宇拓 黄日波 《酿酒科技》 2010年第5期32-35,共4页
高效利用糖蜜产生丁醇的菌株是低成本生产丁醇的基础。本研究从自然环境(牛粪、沼气池、土壤)中筛选具有利用糖蜜产生丁醇能力强的菌株。采样通过玉米培养基富集初筛分离获得12株生产丁醇能力较强的菌株。用8度糖蜜发酵复筛,有2株菌株... 高效利用糖蜜产生丁醇的菌株是低成本生产丁醇的基础。本研究从自然环境(牛粪、沼气池、土壤)中筛选具有利用糖蜜产生丁醇能力强的菌株。采样通过玉米培养基富集初筛分离获得12株生产丁醇能力较强的菌株。用8度糖蜜发酵复筛,有2株菌株丁醇产量较高,分别为8.57 g/L和8.45 g/L,丁醇比高达75%。将菌株分别命名为gxzp-5和gxzp-9,经过16S rDNA基因序列同源性分析初步鉴定,2株菌株都为拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)。 展开更多
关键词 微生物 糖蜜 生物丁醇 鉴定 拜氏梭菌
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高效苯胺降解细菌GXA7的筛选鉴定与特性研究 被引量：3
11
作者 毕洪凯 黄媛 武波 《广西大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2003年第4期309-313,共5页
从广西大学农药厂排出的活性污泥中筛选到一株高效的苯胺降解细菌 GXA7,能够在以苯胺为唯一碳源和氮源的无机盐培养基上生长 .通过对菌株 GXA7在不同温度、p H值 ,以及培养基中不同苯胺浓度条件下的生长和降解苯胺的情况 ,我们初步确定... 从广西大学农药厂排出的活性污泥中筛选到一株高效的苯胺降解细菌 GXA7,能够在以苯胺为唯一碳源和氮源的无机盐培养基上生长 .通过对菌株 GXA7在不同温度、p H值 ,以及培养基中不同苯胺浓度条件下的生长和降解苯胺的情况 ,我们初步确定了 GXA7的最适生长和降解苯胺的温度为 3 2℃～ 3 6℃ ,最适 p H值为 7.0 ,对苯胺最高的耐受浓度为 2 5 0 0 mg/ L.通过形态观察及 1 6S r DNA编码序列同源性比较分析 ,我们鉴定该菌株为 Delf tia acidovoranssp. 展开更多
关键词 苯胺 生物降解 活性污泥 废水处理 环境污染 环境保护
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锰和色氨酸组合对丝状真菌微紫青霉菌抗氧化酶及多酚氧化酶活性的影响 被引量：5
12
作者 梁玲 张晨 +3 位作者 韦植元 王倩 董明右 李有志 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期266-272,共7页
Cu是一种十分常见的重金属,在高浓度下铜对生物体产生毒害。丝状真菌是重要的一类真核微生物资源。超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD),以及电子传递相关的多酚氧化酶(PPO)在非生物胁迫下的抗氧化胁迫中起重要作用... Cu是一种十分常见的重金属,在高浓度下铜对生物体产生毒害。丝状真菌是重要的一类真核微生物资源。超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD),以及电子传递相关的多酚氧化酶(PPO)在非生物胁迫下的抗氧化胁迫中起重要作用。锰(Mn)是SOD的重要组成成份,铜(Cu)是PPO的必须组成成份。色氨酸(Trp)是一类重要的非酶抗氧化氨基酸。但是目前并不清楚Mn、Trp以及Mn-Trp组合对这些酶系的酶活性的影响。我们对在Cu胁迫下,以及在添加外源性Mn和Trp条件下的抗重金属能力很高的微紫青霉菌(Penicillium janthinellum)GXCR菌株及其紫外诱变的Cu抗性降低突变体SM1的上述酶活性变化进行了研究,结果表明,外源性单独添加Mn和Trp或者同时添加Mn和Trp能够提高抗氧化酶SOD,CAT和POD活性,也能增强PPO活性,但是,依据不同菌株的Cu抗性的背景的差异或者提高或者抑制酶活性。该研究结果对进一步深入研究抗氧化酶系-Mn-Trp相互作用下的真菌的Cu抗性机制提供了线索。 展开更多
关键词 真菌 重金属抗性 酶活性
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药用野生稻抗褐飞虱基因的RAPD标记研究 被引量：4
13
作者 梁肖仍 金科 +3 位作者 龙章德 申佩弘 蒋承建 武波 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期865-868,824,共5页
以药用野生稻1665(O.officinals)和栽培稻桂99远缘杂交的抗褐飞虱近等基因系B3F4分离群体为材料,利用随机引物对其抗褐飞虱基因进行了RAPD标记研究,获得3个与抗褐飞虱基因表现连锁的RAPD分子标记(S229703、S403783和S11591408)。采用MAP... 以药用野生稻1665(O.officinals)和栽培稻桂99远缘杂交的抗褐飞虱近等基因系B3F4分离群体为材料,利用随机引物对其抗褐飞虱基因进行了RAPD标记研究,获得3个与抗褐飞虱基因表现连锁的RAPD分子标记(S229703、S403783和S11591408)。采用MAPMAKER/EXP.Version 3.0分析,结果表明3个RAPD分子标记与抗褐飞虱基因属于同一连锁群,覆盖大小为18.1cm,标记间平均距离为4.53cm,为下一步水稻抗褐飞虱基因的精确定位和克隆奠定坚实的基础。 展开更多
关键词 药用野生稻 褐飞虱 抗褐飞虱基因 RAPD标记
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板栗疫病菌脱毒方法的比较研究 被引量：3
14
作者 康宁 蓝秀万 陈保善 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期83-87,共5页
病毒与宿主相互作用中,存在宿主主动或被动摆脱病毒的机制。本研究用光照诱导-单孢分离、原生质体再生和菌丝尖端分离3种方法对携带低毒病毒的板栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)的EP721、EP713和Euro7三个菌株的脱毒效率进行了比较... 病毒与宿主相互作用中,存在宿主主动或被动摆脱病毒的机制。本研究用光照诱导-单孢分离、原生质体再生和菌丝尖端分离3种方法对携带低毒病毒的板栗疫病菌(Cryphonectria parasitica)的EP721、EP713和Euro7三个菌株的脱毒效率进行了比较。结果表明:经光照诱导-单孢分离后所有菌株均可获得脱毒菌株,而原生质体再生对EP721的脱毒效率最高,是继光照诱导-单孢分离脱毒法之后另一种新的有效的脱毒方法,特别适用于不产孢的真菌脱毒。 展开更多
关键词 板栗疫病菌 脱毒 原生质体再生
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产邻苯二酚工程菌的构建及发酵条件的优化 被引量：3
15
作者 张宗武 梁璇 +2 位作者 张敏 李俊芳 武波 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期67-71,共5页
从实验室保存的一株能高效降解苯胺的不动杆菌中克隆到完整的苯胺双加氧酶基因簇,序列分析表明该基因簇包含6个完整的ORF,全序列与已报道的不动杆菌YAA的苯胺双加氧酶基因簇在氨基酸水平上有较高的同源性。将该基因簇连接于pLAFR6载体,... 从实验室保存的一株能高效降解苯胺的不动杆菌中克隆到完整的苯胺双加氧酶基因簇,序列分析表明该基因簇包含6个完整的ORF,全序列与已报道的不动杆菌YAA的苯胺双加氧酶基因簇在氨基酸水平上有较高的同源性。将该基因簇连接于pLAFR6载体,电转化至E.coli,构建了该基因簇的工程菌。发酵条件优化表明,在苯胺浓度0.5mg/ml,采用pH7.0的LB培养基,E.coliDH5α为宿主菌,于37℃培养,接种量为3%的条件下,邻苯二酚产量在20h达到0.546mg/ml,底物分子水平转化率可达92.4%。 展开更多
关键词 苯胺 苯胺双加氧酶基因簇 邻苯二酚
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固定化优势菌种处理含氰废水的实验研究 被引量：3
16
作者 李青云 刘幽燕 +1 位作者 童张法 何勇强 《广西轻工业》 2007年第8期96-98,共3页
利用一株氰化物高效降解菌(Alcaligenes sp.)DN25进行生物强化处理氰的实验研究。结果表明用聚氨酯泡沫为载体固定菌株DN25,氰处理效果得到显著提高。与游离细胞相比,固定化细胞对温度、pH值变化的适应力增强。初步构建生物反应器处理... 利用一株氰化物高效降解菌(Alcaligenes sp.)DN25进行生物强化处理氰的实验研究。结果表明用聚氨酯泡沫为载体固定菌株DN25,氰处理效果得到显著提高。与游离细胞相比,固定化细胞对温度、pH值变化的适应力增强。初步构建生物反应器处理含氰模拟废水,系统连续工作50天,氰的平均去除率为93%。 展开更多
关键词 固定化 优势菌种 氰化物 聚氨酯泡沫 生物强化
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两株高丁醇耐受细菌的分离鉴定及其丁醇耐受特性的研究 被引量：3
17
作者 左文朴 裴建新 +1 位作者 庞浩 黄日波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期155-159,共5页
高浓度丁醇耐受菌株是丁醇异源重组生产的关键因素。本研究对不同环境中耐受丁醇的微生物进行筛选,从自然环境中分离得到两株能够耐受高浓度丁醇的菌株,分别命名为btpz-4-1和btpz-6-3,它们耐受丁醇的浓度达到了25g/L。通过分子标记物16S... 高浓度丁醇耐受菌株是丁醇异源重组生产的关键因素。本研究对不同环境中耐受丁醇的微生物进行筛选,从自然环境中分离得到两株能够耐受高浓度丁醇的菌株,分别命名为btpz-4-1和btpz-6-3,它们耐受丁醇的浓度达到了25g/L。通过分子标记物16S rDNA的鉴定以及分子系统进化树的分析,btpz-4-1被鉴定为Lactobacillus mucosae,btpz-6-3被鉴定为Pedi-ococcus pentosaceus。同时,对它们的生理特性进行研究,结果显示btpz-4-1和btpz-6-3的最适生长温度分别为45℃和42℃,最适生长pH分别为6.0和6.5。 展开更多
关键词 丁醇耐受 分离 鉴定 16S RDNA
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苯胺双加氧酶基因的克隆与序列分析 被引量：3
18
作者 毕洪凯 武波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期83-88,共6页
通过设计苯胺双加氧酶基因特异引物,以苯胺降解菌株ANA5基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因片断。然后利用粘粒pLAFR3作为载体,以E.coliEPI100作为受体,构建了菌株ANA5的基因组粘粒文库。以PCR扩增产物作为探针,通过菌落原位杂交筛选得... 通过设计苯胺双加氧酶基因特异引物,以苯胺降解菌株ANA5基因组DNA为模板,PCR扩增出目的基因片断。然后利用粘粒pLAFR3作为载体,以E.coliEPI100作为受体,构建了菌株ANA5的基因组粘粒文库。以PCR扩增产物作为探针,通过菌落原位杂交筛选得到两个阳性克隆,经Southern杂交及亚克隆测序分析,初步确认克隆到苯胺双加氧酶基因。同时完成了苯胺双加氧酶基因atdA3A4A5序列的测定,并对其核苷酸及其推导的氨基酸序列进行分析,结果表明克隆到的苯胺双加氧酶基因与GenBank报道的基因有一定的差异,同时体现了该基因在进化上的保守性。 展开更多
关键词 苯胺 基因组文库 苯胺双加氧酶基因
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多选择标记植物表达载体的构建 被引量：2
19
作者 李春艳 吴三民 +2 位作者 赵建宇 樊宪伟 李有志 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期27-34,共8页
具有多选择标记的植物基因表达载体有利于转基因植物研究中的转基因植株的筛选。本研究对植物基因表达载体pCAMBIA1301进行了改造,产生了1个具有可溶性的红移绿色荧光蛋白基因(smRS-GFP)、抗除草剂Basta、葡萄糖苷酸酶(GUS)及潮霉素(Hpt... 具有多选择标记的植物基因表达载体有利于转基因植物研究中的转基因植株的筛选。本研究对植物基因表达载体pCAMBIA1301进行了改造,产生了1个具有可溶性的红移绿色荧光蛋白基因(smRS-GFP)、抗除草剂Basta、葡萄糖苷酸酶(GUS)及潮霉素(Hpt)的多选择标记的新的植物基因表达载体。运用这一表达载体的多选择标记可以有效降低检测和筛选转化植株时的假阳性率。此外,如此的基因表达载体也能满足实验室的不同筛选方法的需求。 展开更多
关键词 多选择标记 红移绿色荧光蛋白 植物表达载体
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海洋源纤溶酶高产菌株的诱变育种及液体培养基优化 被引量：2
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作者 刘延廖 漆光辉 +3 位作者 李培玲 梁智群 陈桂光 曾伟 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第12期53-58,共6页
为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过^(60)Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得... 为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过^(60)Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得了组分更简单、用量更少、更利于菌株产酶的培养基:可溶性淀粉41.6g/L、黄豆粕粉26.2g/L、CaCl_2 1.0g/L,KH_2PO_42.0g/L。在此基础上,3L摇瓶放大试验结果显示,菌株F8-C的产酶量达到(3231±21)U/mL,较出发菌株H-A-3提高44.8%。结果表明利用^(60)Co辐射诱变育种,并采用统计学方法优化培养基,对于提高枯草芽孢杆菌纤溶酶的产酶量是一种有效策略。该研究结果也将为下一步发酵罐扩大试验奠定基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纤溶酶 发酵培养基 发酵条件 优化
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