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吡罗克酮乙醇胺盐通过PI3K/AKT通路破坏胶质瘤细胞的线粒体动力学 被引量:1
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作者 徐文琴 叶静静 +1 位作者 王飞 陈天兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期764-771,共8页
目的探究吡罗克酮乙醇胺盐(PO)对胶质瘤细胞U251和U373增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法培养细胞,经不同浓度的PO处理,CCK-8法和EdU实验检测细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜... 目的探究吡罗克酮乙醇胺盐(PO)对胶质瘤细胞U251和U373增殖抑制和促凋亡的作用及其机制。方法培养细胞,经不同浓度的PO处理,CCK-8法和EdU实验检测细胞增殖情况;克隆形成实验检测细胞克隆形成;流式细胞术检测细胞凋亡;JC-1检测线粒体膜电位水平;荧光探针检测线粒体形态学改变,Western blot检测线粒体分裂蛋白DRP1和融合蛋白OPA1;转录组测序和差异基因富集分析后进行Western blot检测验证PI3K,AKT和p-AKT蛋白表达水平。结果CCK-8结果显示,PO可以抑制U251和U373细胞增殖,并呈时间和剂量依赖性(P<0.001);EdU实验显示,PO处理组的细胞增殖水平明显下降,克隆形成实验的细胞克隆数也明显减少(P<0.01);流式细胞术显示,PO处理组细胞凋亡率增加(P<0.05);荧光探针检测显示,线粒体膜电位水平下降并可致线粒体形态学改变;富集分析显示,下调的基因显著富集于PI3K/AKT通路;Western blot结果显示,PO下调PI3K,AKT和p-AKT蛋白表达水平(P<0.05)。结论PO通过PI3K/AKT通路干扰线粒体融合裂变功能,进而抑制胶质瘤细胞的增殖和增加凋亡。 展开更多
关键词 吡罗克酮乙醇胺盐 线粒体裂变 胶质瘤 PI3K/AKT通路
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中性粒细胞CD64表达在重症患者感染中的意义 被引量:14
2
作者 所起凤 鲁卫华 +1 位作者 唐宗生 吕坤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期795-798,共4页
目的探讨外周血中性粒细胞CD64的表达在重症患者感染诊断及疗效评价中的价值。方法以2013年10月至2014年9月在本院重症监护病房(ICU)住院的感染患者103例为研究对象,对照组为健康体检者25例。根据临床表现和细菌学检测结果,将重症合并... 目的探讨外周血中性粒细胞CD64的表达在重症患者感染诊断及疗效评价中的价值。方法以2013年10月至2014年9月在本院重症监护病房(ICU)住院的感染患者103例为研究对象,对照组为健康体检者25例。根据临床表现和细菌学检测结果,将重症合并感染患者分成细菌感染组(86例)、真菌感染组(9例)和病毒感染组(8例)。应用流式细胞术检测中性粒细胞CD64表达,同时检测外周血C反应蛋白(CRP)及白细胞(WBC)水平,分析各组患者之间这3个指标的差异,并对17例细菌性感染的患者抗生素治疗前后CD64指数进行比较。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算CD64指数最佳临界值,同时对CRP、WBC及CD64指数的敏感度与特异度进行比较。结果细菌性感染组患者外周血CD64指数(3.416±1.854)明显高于正常对照组(1.351±0.602)、真菌感染组(1.664±0.249)和病毒感染组(1.379±0.071)(P<0.01);败血症组CD64指数(6.081±2.009)最高,且明显高于局部细菌感染组(2.853±1.234)(P<0.01);17例细菌感染患者抗生素治疗后CD64指数(3.946±1.972)明显低于治疗前(5.849±2.185)(P<0.05)。根据ROC曲线得出CD64指数具有较高的特异度(88%)和敏感度(86%),高于白细胞计数(84%,77.9%)和C反应蛋白(76%,83.7%)。结论流式细胞术检测中性粒细胞CD64指数可作为重症患者细菌感染的早期诊断、判断病情和评价治效果的可靠指标。 展开更多
关键词 中性粒细胞 CD64指数 感染 流式细胞术
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人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型的建立及其意义 被引量:12
3
作者 徐宏光 彭红心 +1 位作者 程加峰 吕坤 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第41期2912-2916,共5页
目的建立人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型,观察人正常颈椎椎体和退变颈椎椎体终板软骨细胞的形态及表征。方法选择2010年7月至2011年7月49例颈椎骨折、脱位(19例)及颈椎病(30例)患者术中取出的颈椎终板软骨,用酶消化法分别分离培... 目的建立人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型,观察人正常颈椎椎体和退变颈椎椎体终板软骨细胞的形态及表征。方法选择2010年7月至2011年7月49例颈椎骨折、脱位(19例)及颈椎病(30例)患者术中取出的颈椎终板软骨,用酶消化法分别分离培养人正常颈椎椎体终板软骨细胞(对照组)和退变颈椎椎体终板软骨细胞(颈椎病组);用倒置显微镜和HE染色法观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线;甲苯蓝染色及反转录-PCR(RT—PCR)法对终板软骨细胞进行鉴定;RT—PCR法检测终板软骨细胞特征性基因蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Ⅰ型胶原的表达。结果人颈椎椎体终板软骨细胞表达特征性蛋白多糖、Ⅱ型胶原及Ⅰ型胶原,其生长情况及细胞表型类似于关节软骨细胞。对照组原代终板软骨细胞以多角形为主,增殖速度较快;而颈椎病组原代终板软骨细胞以梭形为主,细胞增殖速度较慢。颈椎病组原代终板软骨细胞表达的蛋白多糖基因(0.695±0.052)和Ⅱ型胶原基因(0.726±0.035)均低于对照组(0.950±0.032、0.907±0.078,t=7.263、3.681,P=0.002、0.021),Ⅰ型胶原基因则高于对照组(0.795±0.028比0.552±0.070,t=-5.560,P=0.005)。结论成功建立了人颈椎椎体终板软骨细胞退变模型,为椎间盘退变机制研究提供了较好的细胞学基础,解决了以前一直以动物细胞模型为研究对象的局限性。 展开更多
关键词 软骨细胞 蛋白聚糖类 胶原
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过敏性哮喘患者外周血CD4^+ T细胞中miR-155的表达及临床意义 被引量:12
4
作者 张莺莺 钟民 +1 位作者 张梦莹 吕坤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期540-543,共4页
目的:探讨过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155及其前体基因BIC的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测不同严重程度哮喘患者50例及健康对照20例外周血CD4+T细胞中BIC及miR-155的表达水平,并且与哮喘患者临床指... 目的:探讨过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155及其前体基因BIC的表达及临床意义。方法:应用实时荧光定量聚合酶链反应检测不同严重程度哮喘患者50例及健康对照20例外周血CD4+T细胞中BIC及miR-155的表达水平,并且与哮喘患者临床指标进行相关性分析;运用过表达或抑制,探讨miR-155在CD4+T细胞体外分化中的作用。结果:哮喘患者组BIC及miR-155的表达较对照组显著降低(P<0.01),中、重度哮喘患者的BIC表达均低于对照组(P<0.05),轻、中、重度哮喘患者的miR-155表达显著低于对照组(P<0.01);组间比较发现,轻、中、重度哮喘患者的BIC表达无统计学意义,而重度哮喘患者miR-155的表达较轻度哮喘组有明显下降(P<0.05);miR-155的表达与用力呼气第1秒量之间呈正相关(P<0.01);miR-155过表达促进CD4+T细胞向Th1分化,而抑制miR-155的表达则促进CD4+T细胞向Th2分化。结论:过敏性哮喘患者外周血CD4+T细胞中miR-155表达下调,其表达水平与哮喘严重程度相关,提示miR-155调控CD4+T细胞分化在哮喘中发挥重要作用。 展开更多
关键词 过敏性哮喘 MIR-155 BIC
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循证医学在医学院校本科生教育中的实践与探索 被引量:12
5
作者 唐宗生 陶香香 《现代医药卫生》 2017年第12期1887-1888,共2页
循证医学(EBM)是一门新兴的学科,是未来临床医学教育发展的必然趋势,其核心思想是在医疗决策中将临床证据、个人经验与患者的实际情况和意愿三者相结合。在医学校本科生教育中开展EBM,可促进医学教育观念和教育方式的转变,必将对医学教... 循证医学(EBM)是一门新兴的学科,是未来临床医学教育发展的必然趋势,其核心思想是在医疗决策中将临床证据、个人经验与患者的实际情况和意愿三者相结合。在医学校本科生教育中开展EBM,可促进医学教育观念和教育方式的转变,必将对医学教学、科研和医疗实践产生重大的影响。 展开更多
关键词 循证医学 教育 医学 院校 医学 教学方法
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循环机械压力诱导下兔椎间盘退变器官模型的建立及意义 被引量:9
6
作者 徐宏光 章平治 +6 位作者 宋俊兴 胡斌 赵泉来 吕坤 钟民 张梦莹 所起凤 《中国骨与关节外科》 2014年第1期45-51,共7页
背景:力学因素是导致椎间盘退变(IDD)的重要诱因,建立力学相关性IDD的器官模型能为IDD机制的研究提供理想的模型基础。目的:建立兔椎间盘器官模型,并施以循环机械压力,探究循环机械压力载荷对IDD的影响。方法:6月龄新西兰大白兔随机分... 背景:力学因素是导致椎间盘退变(IDD)的重要诱因,建立力学相关性IDD的器官模型能为IDD机制的研究提供理想的模型基础。目的:建立兔椎间盘器官模型,并施以循环机械压力,探究循环机械压力载荷对IDD的影响。方法:6月龄新西兰大白兔随机分为加力组和对照组,静脉给予1.3 ml肝素(5000 U/ml),待肝素体内循环5 min后处死。无菌条件下完整取出带部分椎骨的腰段椎间盘,放入20%胎牛血清的培养液中培养。加力组应用加力器施以0.2 MPa压力值,每日加压1次,每次30 min。经过各个时段的培养后,苏木精-伊红(HE)染色观察椎间盘大体组织形态学变化;氯化硝基四氮唑蓝(NBT)染色及4',6-二眯基-2-苯基吲哚(DAPI)复染检测椎间盘细胞成活率;Realtime RT-PCR和Western-blotting检测蛋白多糖(AGN)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)的mRNA和蛋白表达。结果:对照组和加力组培养至第7 d的组织形态学无明显变化,培养至第14 d均表现为组织形态学破坏,且以加力组表现更为明显。对照组培养至第7 d的细胞成活率及AGN、COLⅡ表达与0 d相比无明显变化;对照组培养第14 d与0 d比较,培养第7 d加力组与对照组比较,培养第14 d加力组与对照组比较,均表现为细胞成活率明显下降,AGN、COLⅡ表达下调。结论:成功建立短周期兔椎间盘体外器官模型,并在此模型基础上阐明循环机械压力载荷可直接导致椎间盘退变样改变。 展开更多
关键词 器官培养 循环机械压力 椎间盘退变
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芝麻酚调控巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪组织炎症及胰岛素抵抗 被引量:9
7
作者 孔祥 华强 +3 位作者 姚新明 孟祥健 钟民 郭莉群 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第7期728-733,共6页
目的:探讨芝麻酚能否通过调控巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪组织炎症及胰岛素抵抗。方法:建立高脂饲料喂饲的肥胖小鼠模型,灌服芝麻酚(100 mg/kg)8周,行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,测血脂和胰岛素水平。免疫印迹检测附睾脂... 目的:探讨芝麻酚能否通过调控巨噬细胞极化改善肥胖小鼠脂肪组织炎症及胰岛素抵抗。方法:建立高脂饲料喂饲的肥胖小鼠模型,灌服芝麻酚(100 mg/kg)8周,行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,测血脂和胰岛素水平。免疫印迹检测附睾脂肪组织P-AKT和P-JNK蛋白表达。脂肪组织切片行F4/80及Cd11c免疫组化及免疫荧光染色。实时荧光定量PCR测脂肪组织细胞因子及趋化因子mRNA表达。结果:芝麻酚治疗后降低肥胖小鼠体质量及血脂水平,改善糖耐量损伤及胰岛素抵抗。芝麻酚治疗组小鼠脂肪组织巨噬细胞浸润减少,P-AKT表达恢复,P-JNK表达降低,M1型巨噬细胞标志物(Cd11c、i NOS、TNF-α和IL-6)mRNA表达减少,M2型标志物(Chi3l3、Arg1和Mgl1)mRNA表达增加。结论:芝麻酚减轻肥胖小鼠脂肪组织炎症和胰岛素抵抗,其作用与芝麻酚抑制脂肪组织JNK信号通路,改善巨噬细胞极化失衡状态有关。 展开更多
关键词 芝麻酚 肥胖小鼠 巨噬细胞极化
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巨噬细胞极化在心血管疾病中的作用 被引量:9
8
作者 贺玲 吕坤 《国际免疫学杂志》 CAS 2016年第2期168-171,共4页
心血管病,尤其是急性心肌梗死和收缩性心功能衰竭已成为西方国家患者死亡的主要原因,在发展中国家也呈明显上升趋势。缺血性的心脏病已经成为普遍现象,是引起病人死亡的主要原因。尽管早期血管再建和药物治疗能够明显提高心肌梗死后... 心血管病,尤其是急性心肌梗死和收缩性心功能衰竭已成为西方国家患者死亡的主要原因,在发展中国家也呈明显上升趋势。缺血性的心脏病已经成为普遍现象,是引起病人死亡的主要原因。尽管早期血管再建和药物治疗能够明显提高心肌梗死后的生存率,但仍有大量病人发展成心力衰竭。巨噬细胞除了具有免疫防御和维持组织稳态功能,还在心肌梗死诱导的病理生理过程中发挥重要作用。巨噬细胞的亚群已被证实参与心血管疾病(动脉粥样硬化、心肌梗死、心肌缺血、心肌纤维化)的发生和发展,在心脏损伤和心肌重塑中有重要作用,研究基于巨噬细胞调控治疗心血管疾病的治疗策略很有价值。 展开更多
关键词 巨噬细胞 心血管疾病 极化 M1 M2
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非编码RNA与糖尿病血管病变的关系 被引量:9
9
作者 万淑君 孔祥 吕坤 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期665-670,共6页
非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)为一类不编码蛋白的RNA分子,是机体重要的生物调控因子,在转录及转录后水平调控基因表达,影响糖尿病血管病变的发展过程。ncRNA按其片段大小主要分为微RNA(microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non cod... 非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)为一类不编码蛋白的RNA分子,是机体重要的生物调控因子,在转录及转录后水平调控基因表达,影响糖尿病血管病变的发展过程。ncRNA按其片段大小主要分为微RNA(microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non coding RNA,lncRNA)及环状RNA(circular RNA,circRNA)。miRNA可在转录后水平调控靶基因表达,并有成为临床诊断标志物的潜能。lncRNA影响多种分子信号通路,其在糖尿病血管病变中的作用逐渐受到关注。circRNA具有显著的基因调节功能,可与miRNA竞争结合位点,参与调控糖尿病血管病变。该文回顾目前有关ncRNA与糖尿病血管病变的研究,探讨ncRNA与糖尿病微血管及大血管病变间的关系,为糖尿病血管病变的诊断和治疗提供新思路。 展开更多
关键词 非编码RNA 微RNA 长链非编码RNA 糖尿病 糖尿病血管病变
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基于TBL教学模式在循证医学教学中的实践效果研究 被引量:9
10
作者 杨辉 陈天兵 +2 位作者 朱小龙 石玮 李雪琴 《皖南医学院学报》 CAS 2019年第4期391-395,共5页
目的:构建线上线下相结合的以团队学习为基础的TBL教学模式,探讨其应用效果。方法:选择我校2014级临床医学专业本科生10个班级共289名学生为研究对象,随机分为观察组(n=147)和对照组(n=142)。观察组使用线上线下结合的TBL教学模式,对照... 目的:构建线上线下相结合的以团队学习为基础的TBL教学模式,探讨其应用效果。方法:选择我校2014级临床医学专业本科生10个班级共289名学生为研究对象,随机分为观察组(n=147)和对照组(n=142)。观察组使用线上线下结合的TBL教学模式,对照组使用传统教学模式,通过课后随堂测试、学生自主学习能力比较两种教学方法的效果。采用自制问卷描述观察学生对TBL教学模式的评价与反馈。结果:观察组学生的课后随堂测试成绩和成绩优良率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);问卷调查自主学习能力,观察组和对照组在实施前差异无统计学意义(P>0.05),观察组在各项评分、自我管理能力、信息能力、学习合作能力及总分均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组学生认为TBL教学模式在教学内容、组织新式、教学效果和考核方式上新颖独特,尤其是在提高师生间与学生间的互动合作能力上有较好的效果。结论:TBL教学模式有效提升了学生的学习成绩和学习主观能动性,对教学质量的提高有着较为积极的影响。 展开更多
关键词 TBL 循证医学 教学实践 问卷调查
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过表达lncRNAHEM2M改善非酒精性脂肪肝病小鼠的肝脏损伤 被引量:1
11
作者 孔祥 张腾 +5 位作者 张妍 高灵犀 汪文 汪梦燕 王国栋 吕坤 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-8,共8页
目的探讨过表达长链非编码RNA(lncRNA)HEM2M对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的影响。方法野生型C57BL/6(WT)和条件性髓系细胞lncRNAHEM2M过表达(MYKI)小鼠分别喂饲普通饮食(ND)和高脂饮食(HFD),即为WT+ND、MYKI+ND、WT+HFD和MYKI+... 目的探讨过表达长链非编码RNA(lncRNA)HEM2M对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝损伤的影响。方法野生型C57BL/6(WT)和条件性髓系细胞lncRNAHEM2M过表达(MYKI)小鼠分别喂饲普通饮食(ND)和高脂饮食(HFD),即为WT+ND、MYKI+ND、WT+HFD和MYKI+HFD组。12周后行腹腔糖耐量及胰岛素耐量试验后处死小鼠,检测小鼠血清和肝脏组织的肝功能指标,制备肝脏组织切片后行HE染色和F4/80免疫组化染色,ELISA法检测肝脏组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,qRT-PCR检测M1型(TNF-α、iNOS和IL-6)和M2型(Arg-1、YM-1和IL-10)巨噬细胞标志物mRNA表达,免疫印迹检测肝脏组织中P-AKT、T-AKT、NLRC4、caspase-1和GSDMD蛋白表达,比色法和免疫荧光测定肝脏组织caspase-1活性。结果与HFD喂饲的WT小鼠相比,MYKI+HFD小鼠肝功能损伤减轻(P<0.01),肝脏脂肪变缓解,肝脏巨噬细胞浸润减少,糖耐量损伤及胰岛素抵抗改善(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低(P<0.01),M1型巨噬细胞标志物mRNA表达减少(P<0.01),M2型mRNA表达增加(P<0.01);MYKI+HFD小鼠肝脏组织NLRC4炎症小体活性降低(P<0.01),活性caspase-1减少,GSDMD-N蛋白表达降低(P<0.05)。结论过表达lncRNAHEM2M降低NAFLD小鼠肝脏炎症因子水平,进而改善胰岛素抵抗并抑制肝脏NLRC4炎症小体激活,减少肝细胞焦亡,最终改善NAFLD小鼠肝脏损伤。 展开更多
关键词 lncRNAHEM2M 巨噬细胞 非酒精性脂肪肝 细胞焦亡
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哮喘小鼠脾脏来源CD4^+ T细胞促进体外培养巨噬细胞的M2极化 被引量:6
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作者 张梦莹 李志 +2 位作者 李雪琴 钟民 吕坤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期289-295,共7页
目的探讨哮喘小鼠脾脏来源CD4^+T细胞体外对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)极化的影响及其机制。方法建立粉尘螨变应原诱导的过敏性哮喘小鼠动物模型。于末次激发24h后,取小鼠肺中叶、HE染色观察炎症改变,运用实时荧光定量PCR检测肺、脾脏... 目的探讨哮喘小鼠脾脏来源CD4^+T细胞体外对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)极化的影响及其机制。方法建立粉尘螨变应原诱导的过敏性哮喘小鼠动物模型。于末次激发24h后,取小鼠肺中叶、HE染色观察炎症改变,运用实时荧光定量PCR检测肺、脾脏组织中miR-155-5p水平;免疫磁珠分选哮喘小鼠脾脏CD4^+T细胞,实时荧光定量PCR检测哮喘小鼠脾脏CD4^+T细胞miR-155-5p水平,同时用流式细胞术检测哮喘小鼠脾脏中CD4^+IFN-γ^+Th1细胞和CD4^+IL-4^+Th2细胞比例的变化;实时荧光定量PCR检测正常组和哮喘组小鼠肺组织中M2相关标志基因精氨酸酶1(Arg1)、类几丁质酶3样分子3(YM1/Chi3l3)、类抵抗素α(retnlα/FIZZ1)的mRNA水平;哮喘小鼠脾脏来源CD4^+T细胞与BMDM进行共培养,实时荧光定量PCR检测BMDM的M2相关标志基因Arg1、YM1、FIZZ1的mRNA水平;通过瞬时转染的方法,将miR-155-5p抑制剂(miR-155-5p-inhibitor)和阴性对照分别转染入哮喘小鼠脾脏CD4^+T细胞后,再与BMDM进行共培养48h后,实时定量PCR测定BMDM中的Arg1、YM1、FIZZ1的mRNA水平。结果与对照组相比,哮喘组小鼠肺、脾脏组织中miR-155-5p水平增加,脾脏CD4^+T细胞miR-155-5p水平升高,且Th2细胞比例上升,肺组织中Arg1、YM1、FIZZ1表达上调;哮喘组小鼠脾脏CD4^+T细胞与BMDM体外共培养后,BMDM的Arg1、YM1、FIZZ1的mRNA水平上调,而转染miR-155-5p-inhibitor后的脾脏CD4^+T细胞并未明显影响体外共培养的BMDM的M2标志基因表达。结论哮喘小鼠脾脏来源的CD4^+T细胞能够促进体外共培养的巨噬细胞向M2极化。 展开更多
关键词 哮喘 CD4^+T细胞 巨噬细胞 极化 miR-155-5p
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OBE理念在检验医学教学中的应用 被引量:7
13
作者 张莺莺 程龙 杨辉 《皖南医学院学报》 CAS 2022年第2期181-183,共3页
目的:探索成果导向教育(OBE)模式在检验医学教学中的应用优势。方法:选取进行住院医师规范化培训的检验科住院医师共80名,随机分为OBE模式教学组和传统教学组各40名,分别采用基于OBE理念的模式和传统教学模式进行教学,比较两组学生在理... 目的:探索成果导向教育(OBE)模式在检验医学教学中的应用优势。方法:选取进行住院医师规范化培训的检验科住院医师共80名,随机分为OBE模式教学组和传统教学组各40名,分别采用基于OBE理念的模式和传统教学模式进行教学,比较两组学生在理论成绩、实践能力、综合素质和满意度上的差异。结果:两组学生在性别、年龄、身份、学历和从业年限上差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。OBE模式教学组学生理论成绩、实践能力和综合素质方面均较传统教学组有所提升(P<0.05),且对于教学效果的满意度也高于传统教学组(P<0.05)。结论:OBE模式下的教学为检验医学教学过程中存在的问题提供了有效的解决思路,切实提高了学生的综合素质和教学满意度,值得推广和继续完善。 展开更多
关键词 OBE理念 检验医学 医学教学改革
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皖南地区放射工作人员外周血淋巴细胞染色体畸变和微核分析 被引量:7
14
作者 吕坤 钟民 张梦莹 《检验医学与临床》 CAS 2011年第3期267-268,共2页
目的研究比较健康成年人和放射工作人员染色体畸变率和微核率。方法使用微量全血培养法制备标本,用常规染色体分析法和常规微核分析法检测皖南地区100名健康成年人和200名放射工作人员淋巴细胞染色体畸变率和微核率。结果健康成人和放... 目的研究比较健康成年人和放射工作人员染色体畸变率和微核率。方法使用微量全血培养法制备标本,用常规染色体分析法和常规微核分析法检测皖南地区100名健康成年人和200名放射工作人员淋巴细胞染色体畸变率和微核率。结果健康成人和放射工作人员染色体畸变率(双+环)分别为(0.02±0.01)%和(0.21±0.02)%,差异有统计学意义(P<0.05)。健康成年人微核率为(2.07±0.18)‰,放射工作人员微核率为(4.24±0.10)‰,差异有统计学意义(P<0.05)。结论放射工作人员染色体畸变率及微核率明显高于健康人群,因此加强从业人员的辐射防护知识的培训及做好安全防护措施非常重要。 展开更多
关键词 染色体畸变 微核 放射工作人员
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Wnt/β-catenin通路参与脂肪间充质干细胞对大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控 被引量:6
15
作者 李志 张梦莹 +2 位作者 李雪琴 陆进明 徐亮 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1486-1490,共5页
目的探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)经Wnt/β联蛋白(β-catenin)通路对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法以大鼠ADSC的条件培养基作用于HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,通过流式细胞术分析细胞周期、RNA干扰、实时定量PCR和Western blot等技术分析... 目的探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)经Wnt/β联蛋白(β-catenin)通路对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法以大鼠ADSC的条件培养基作用于HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,通过流式细胞术分析细胞周期、RNA干扰、实时定量PCR和Western blot等技术分析HBZY-1细胞增殖能力、Wnt信号通路中相关基因和蛋白表达水平的变化。结果在ADSC条件培养基作用下,HBZY-1细胞增殖受到明显抑制,dickkopf WNT信号通路抑制物1(DKK1)mRNA表达水平明显升高,而纤连蛋白(fibronectin)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达显著降低,同时系膜细胞的β-catenin和Bcl-2蛋白的表达受到明显抑制。ADSC中DKK1 mRNA表达水平显著高于HBZY-1细胞,利用小干涉RNA敲低ADSC的DKK1表达后,其β-catenin蛋白的表达水平显著升高。将干扰后的ADSC条件培养基作用于HBZY-1细胞,可重新增加HBZY-1细胞Wnt信号通路中β-catenin和Bcl-2的蛋白水平。结论 Wnt/β-catenin信号通路可能参与ADSC对HBZY-1肾小球系膜细胞增殖的调控。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞(ADSC) 系膜细胞 Wnt DICKKOPF WNT信号通路抑制物1(DKK1)
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LncRNA SNHG11在结直肠癌患者血清中的表达及临床意义 被引量:6
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作者 陶绍能 王莹莹 +3 位作者 杨军 程光华 戴云海 吕坤 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期792-795,共4页
目的检测结直肠癌患者血清中长链非编码RNA SNHG11的表达并探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR检测70例结直肠癌患者、35例结直肠良性疾病患者和35例健康对照血清SNHG11水平,分析其血清表达水平变化、与临床病理参数关系及诊断效能。... 目的检测结直肠癌患者血清中长链非编码RNA SNHG11的表达并探讨其临床意义。方法采用荧光定量PCR检测70例结直肠癌患者、35例结直肠良性疾病患者和35例健康对照血清SNHG11水平,分析其血清表达水平变化、与临床病理参数关系及诊断效能。结果与健康对照组比较,SNHG11在结直肠癌中明显升高,差异有统计学意义(Z=-5.583,P<0.01),而与结直肠良性疾病比较差异无统计学意义(Z=-1.100,P=0.272);结直肠良恶性疾病比较差异有统计学意义(Z=-6.613,P<0.01)。SNHG11在TNMⅠ/Ⅱ期中的表达较健康对照组明显升高(Z=-4.667,P<0.01),但是在TNMⅠ/Ⅱ期与TNMⅢ/Ⅳ期之间差异无统计学意义(Z=-1.233,P=0.218);结直肠癌患者血清SNHG11与患者的各项临床病理参数之间无明显相关性(P>0.05);ROC曲线分析显示,血清SNHG11诊断结直肠癌的AUC优于CEA、CA199,诊断敏感性明显高于CEA和CA199,分别为0.786、0.457、0.343,但是特异性略低于CEA、CA199,分别为0.871、0.929、0.929。联合CEA检测可略提高检测效能(AUC=0.895)。结论血清SNHG11在结直肠癌患者血清中异常高表达,可作为结直肠癌新的诊断循环分子标志物,与CEA联合诊断可提高结直肠癌的诊断效能。 展开更多
关键词 长链非编码RNA SNHG11 结直肠癌 血清
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脂肪间充质干细胞注入退变椎间盘局部的作用 被引量:6
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作者 沈祥 徐宏光 +3 位作者 马明明 张骞 肖良 所起凤 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第1期77-81,共5页
背景:国内研究证实,脂肪间充质干细胞在一定条件下可分化为软骨细胞、成骨细胞等多种类型骨细胞,修复受损的骨或软骨组织。目的:观察脂肪间充质干细胞对兔椎间盘退变的作用。方法:将36只成年新西兰大白兔随机分为3组,正常组不进行任何处... 背景:国内研究证实,脂肪间充质干细胞在一定条件下可分化为软骨细胞、成骨细胞等多种类型骨细胞,修复受损的骨或软骨组织。目的:观察脂肪间充质干细胞对兔椎间盘退变的作用。方法:将36只成年新西兰大白兔随机分为3组,正常组不进行任何处理,对照组、实验组采用髓核穿刺抽吸法建立兔椎间盘退变模型,造模14 d后,实验组于椎间盘内注射Brd U标记的同种异体脂肪间充质干细胞悬液50μL(细胞浓度1×10~9 L^(-1)),对照组于椎间盘内注射等量的生理盐水。注射后2,4,8周,进行椎间盘放射学MRI检查、苏木精-伊红和免疫组织化学染色。结果与结论:(1)MRI检查:正常组椎间盘高度恒定,T2加权相上椎间盘信号清晰、均一;对照组注射第4周开始出现椎间隙变窄,T2加权相信号减弱,随着时间推移,椎间盘间隙逐渐狭窄,T2加权相信号也越来越低;实验组注射后第4周椎间隙高度和T2加权相信号逐渐增强;(2)苏木精-伊红染色:与正常组比较,对照组注射后2周出现椎间盘退变表现,并随时间的延长逐渐加重;实验组注射后不同时间点的椎间盘退变表现较对照组明显减轻;(3)免疫组织化学染色:移植后的Brd U标记脂肪间充质干细胞可在兔椎间盘内存活并增殖;(4)结果表明:脂肪间充质干细胞对兔椎间盘退变有修复作用。 展开更多
关键词 干细胞 移植 脂肪间充质干细胞 分离 体外培养 干细胞移植 动物模型 椎间盘退变 修复 国家自然科学基金
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PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响 被引量:6
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作者 张梦莹 李志 +2 位作者 李雪琴 钟民 吕坤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1286-1291,共6页
目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达... 目的:本文旨在探讨正性调节区锌指蛋白1(PRDM1)对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)极化和功能的影响及其分子机制。方法:体外提取BMDMs作为研究对象,并进行极化诱导,采用荧光定量PCR和Western blot法检测不同极化状态的巨噬细胞PRDM1的表达水平;设计构建PRDM1过表达腺病毒载体,瞬时感染BMDMs,48 h后分别加入IFN-γ/LPS或IL-4刺激诱导为M1/M2型巨噬细胞,采用荧光定量PCR分别检测M1/M2的标志基因iNOS、IL-12、TNF-α、Arg1、YM-1、FIZZ1的表达;ELISA法检测各组细胞上清液炎症因子TNF-α、IL-12和IL-13的表达量;细菌杀伤试验和吞噬试验检测PRDM1过表达对巨噬细胞功能的影响;构建巨噬细胞M2极化模型,将PRDM1过表达腺病毒感染细胞,Western blot法检测核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的下游信号分子p65及IKK蛋白的总体水平及磷酸化水平。结果:荧光定量PCR和Western blot结果显示,M1型巨噬细胞的PRDM1表达水平显著高于M2型巨噬细胞;与阴性对照组相比,过表达PRDM1明显促进巨噬细胞M1型标志分子iNOS、IL-12及TNF-α的表达,能抑制M2型标志分子Arg1、YM-1及FIZZ1的表达;并且显著增强BMDMs的杀菌活性,而降低了BMDMs的吞噬功能。在M2型巨噬细胞中过表达PRDM1后,NF-κB信号通路中p65及IKK磷酸化水平较阴性对照组显著升高。结论:NF-κB信号通路可能参与PRDM1调控巨噬细胞的M1极化。 展开更多
关键词 巨噬细胞极化 PRDM1基因 核转录因子ΚB
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乳酸诱导PLEKHA4的上调参与胶质瘤细胞增殖和凋亡的生物学进程 被引量:3
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作者 叶静静 徐文琴 +2 位作者 奚邦生 王能乾 陈天兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1071-1080,共10页
目的探究乳酸诱导的PLEKHA4基因表达对胶质瘤细胞的生物学功能的影响以及潜在分子机制。方法通过GEO数据库以及GEPIA2在线网站分析PLEKHA4表达水平与胶质瘤病理分级的关系,通过RNA小干扰技术设计PLEKHA4 siRNA后分别转染胶质瘤U251和T98... 目的探究乳酸诱导的PLEKHA4基因表达对胶质瘤细胞的生物学功能的影响以及潜在分子机制。方法通过GEO数据库以及GEPIA2在线网站分析PLEKHA4表达水平与胶质瘤病理分级的关系,通过RNA小干扰技术设计PLEKHA4 siRNA后分别转染胶质瘤U251和T98G细胞处理1 d,通过实时细胞分析技术以及Edu实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力,流式分析技术检测胶质瘤细胞的周期和凋亡;PCR检测临床收集的胶质瘤样本和对照以及乳酸和葡萄糖治疗下胶质瘤细胞中PLEKHA4的mRNA表达量的变化;体内异种移植小鼠实验检测裸鼠成瘤能力;Westernblot检测cyclinD1、CDK2、Bcl2、β-catenin表达和MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化表达水平。结果GEO数据库和在线网站分析结果显示PLEKHA4在胶质瘤组织中高表达且与不良预后相关;RTCA以及Edu实验显示,敲降PLEKHA4抑制胶质瘤细胞的增殖(P<0.05);平板克隆实验显示,敲降组的细胞克隆数目明显低于对照组(P<0.01);流式细胞术分析结果显示敲低PLEKHA4后细胞周期受到阻滞G1期细胞增加,S期细胞减少,凋亡细胞增加(P<0.01);胶质瘤样本和乳酸和葡萄糖治疗后胶质瘤细胞的PLEKHA4基因的mRNA表达升高(P<0.01);敲降PLEKHA4基因后,裸鼠成瘤能力降低;Westernblot结果显示敲减PLEKHA4后能够抑制cyclinD1、CDK2、Bcl2等功能蛋白的表达,且显著抑制ERK、p38的磷酸化和β-catenin蛋白表达(P<0.01)。结论敲减PLEKHA4基因通过抑制MAPK信号通路的活化和β-Catenin的表达,抑制胶质瘤细胞的增殖促进凋亡,同时糖酵解产生的乳酸诱导PLEKHA4表达上调。 展开更多
关键词 胶质瘤 乳酸 PLEKHA4 增殖 凋亡 生物学功能
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系统性红斑狼疮患者血清抗内皮细胞抗体和抗β_2糖蛋白I抗体水平及其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响 被引量:4
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作者 张梦莹 李志 +3 位作者 吕坤 钟民 所起凤 钟正灵 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2013年第2期142-146,共5页
目的:检测抗内皮细胞抗体(AECA)和抗β2GP-Ⅰ抗体在SLE患者血清中的水平及探讨AECA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。方法:收集系统性红斑狼疮(SLE)患者90例和正常对照40例,留取血清,经酶联免疫吸附法(ELISA)检测AECA和抗β2GP-Ⅰ... 目的:检测抗内皮细胞抗体(AECA)和抗β2GP-Ⅰ抗体在SLE患者血清中的水平及探讨AECA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。方法:收集系统性红斑狼疮(SLE)患者90例和正常对照40例,留取血清,经酶联免疫吸附法(ELISA)检测AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平。收集SLE患者部分临床指标,分析AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平与临床指标间的关系。将不同浓度AECA的SLE患者血清加入HUVEC培养基,应用四唑盐比色试验(MTT)法检测各组OD值判断内皮细胞增殖状态。结果:SLE患者血清中AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平显著高于正常对照组(P<0.01)。在90例SLE患者中33例抗β2GP-Ⅰ抗体阳性,该33例SLE患者对应的AE-CA、APTT水平和SLE活动评分(SLEDAI)积分均显著高于其余57例SLE患者(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。同时该33例患者AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平呈高度正相关(r=0.984,P<0.01),AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平均与SLE-DAI呈正相关(P<0.05),抗β2GP-Ⅰ抗体水平与凝血酶原时间(PT)间存在正相关(r=0.349,P<0.05)。空白对照组、健康对照血清组和低浓度AECA血清组间OD值无差异,而高浓度AECA血清组OD值显著低于以上3组(P<0.05)。结论:AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体与SLE疾病活动相关,AECA在体外对HUVEC增殖有抑制作用。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 抗内皮细胞抗体 抗β2糖蛋白Ⅰ抗体 人脐静脉内皮细胞
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