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miR-106a通过调控PI3K/PDK1/AKT蛋白通路调节胃癌细胞生物学行为的研究
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作者 李琦 黄广智 +3 位作者 李亚军 武斌虎 肖茜 阮彩莲 《解剖学研究》 CAS 2024年第2期132-138,共7页
目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。... 目的探讨miR-106a对胃癌细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法选取AGS人胃癌细胞系,经培养后分为27个样本。所有样本随机分为miR-106a inhibitor、miR-mimic、miR-NC共计3组,分别给予miR-106a抑制剂、miR-106a模拟物及安慰剂干预。观察各组细胞存活率、细胞周期、细胞侵袭、迁移及caspase活性、Bax、Bcl-2、Casepase-3蛋白相对表达量、p85β、p-PDK1、p-AKT蛋白相对表达量。结果与miR-NC组比较,miR-106a inhibitor组AGS细胞活性降低[(分别为15.01±0.97)、(69.82±2.31)%](P<0.01);miR-106a mimics组AGS细胞G0/G1期细胞比例降低(P<0.05)(分别为17.33±1.04、58.24±0.82),G2/M和S期细胞比例升高(分别为50.11±1.12、35.64±1.07和31.56±0.92、9.24±0.25);miR-106a inhibitor组AGS细胞G0/G1期细胞比例升高(分别为78.43±1.12、58.24±0.82)(P<0.05),G2/M和S期细胞比例降低(分别为33.65±0.99、35.64±1.07和19.78±0.84、9.24±0.25)(P<0.01)。与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞的迁移、侵袭能力增强,miR-106a inhibitor组AGS细胞的迁移、侵袭能力减弱(P<0.01);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性降低,miR-106a inhibitor组AGS细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9活性升高(P<0.05);miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞Bax(分别为0.69±0.07、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为0.37±0.04、0.91±0.09)相对表达量降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高(分别为1.53±0.12、0.94±0.09),miR-106a inhibitor组AGS细胞Bax(分别为2.07±0.21、1.48±0.15)、Casepase-3蛋白(分别为1.23±0.12、0.91±0.09)相对表达量升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05)(分别为0.65±0.07、0.94±0.09);与miR-NC相比,miR-106a mimics组AGS细胞p85β(分别为1.24±0.12、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为2.13±0.23、1.01±0.10)、p-AKT蛋白(分别为1.14±0.11、0.72±0.06)相对表达量升高,miR-106a inhibitor组AGS细胞p85β(分别为0.69±0.07、0.94±0.09)、p-PDK1(分别为0.75±0.07、1.01±0.10)、p-AKT 展开更多
关键词 AGS人胃癌细胞系 miR-106a 磷脂酰肌醇激酶 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1 蛋白激酶B 癌细胞生物学行为
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肝脓肿患者细胞角蛋白-19表达及其调控肝细胞DNA损伤的机制研究 被引量:2
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作者 韩智 乔永宏 +1 位作者 田垒 李罡 《现代消化及介入诊疗》 2020年第11期1469-1474,共6页
目的检测细胞角蛋白-19(CK-19)在肝脓肿患者外周血中的表达,探讨其对肝细胞损伤的影响及机制。方法选取2016年12月至2019年6月延安市中医医院收治的肝脓肿患者55例以及同期进行体检的25名健康志愿者作为研究对象。采用电化学发光法和酶... 目的检测细胞角蛋白-19(CK-19)在肝脓肿患者外周血中的表达,探讨其对肝细胞损伤的影响及机制。方法选取2016年12月至2019年6月延安市中医医院收治的肝脓肿患者55例以及同期进行体检的25名健康志愿者作为研究对象。采用电化学发光法和酶联免疫吸附法检测研究对象外周血细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)与CK-19的表达水平,运用RNA干扰技术在人WRL68肝细胞中特异性沉默CK-19基因,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测转染效果,CCK-8法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测不同处理下WRL68细胞存活率和凋亡率,单细胞凝胶电泳技术分析乙醇诱导DNA损伤程度;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。结果与健康人比较,肝脓肿患者血清中CYFRA21-1和CK-19水平显著升高(P<0.05)。转染siRNA-CK19的WRL68细胞中CK-19 mRNA与蛋白相对表达水平显著下降(P<0.05);在不同浓度乙醇处理下WRL68细胞存活率显著下降(P<0.05);沉默CK-19表达的WRL68细胞在乙醇处理后存活率有所上升(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),同时减少了乙醇诱导的DNA损伤(P<0.05);此外,沉默CK-19表达后可逆转乙醇诱导的WRL68细胞内SOD和GSH-Px活性降低以及MDA含量的升高(P<0.05)。结论在WRL68细胞中沉默CK-19表达能减少乙醇诱导的DNA损伤,这种作用可能与改善细胞SOD、MDA和GSH-Px水平相关。 展开更多
关键词 肝脓肿 细胞角蛋白-19 肝细胞 DNA损伤 抗氧化
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肝脓肿患者细胞角蛋白-19表达及其调控肝细胞DNA损伤的机制研究
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作者 韩智 乔永宏 +1 位作者 田垒 李罡 《肝胆外科杂志》 2020年第5期388-392,共5页
目的检测细胞角蛋白-19(CK19)在肝脓肿患者外周血中的表达,及其对肝细胞损伤的影响及机制研究。方法电化学发光法和酶联免疫吸附法检测肝脓肿患者外周血中细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)与CK19的表达水平,运用RNA干扰技术在人WRL68肝... 目的检测细胞角蛋白-19(CK19)在肝脓肿患者外周血中的表达,及其对肝细胞损伤的影响及机制研究。方法电化学发光法和酶联免疫吸附法检测肝脓肿患者外周血中细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)与CK19的表达水平,运用RNA干扰技术在人WRL68肝细胞中特异性沉默CK19基因,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(w estern blot)检测转染效果,CCK-8法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测不同处理下WR1I68细胞存活率和凋亡率,单细胞凝胶电泳技术分析乙醇诱导DNA损伤程度;试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)水平。结果与健康人比较,肝脓肿患者血清中CYFRA21-1和CK19水平显著升高(P<0.05);转染siRNA-CK19的WR168细胞中CK19mRNA与蛋白相对表达水平显著下降(P<0.05);在不同浓度乙醇处理下WRL68细胞存活率显著下降(P<0.05);沉默CK19表达的WRL68细胞在乙醇处理后存活率有所上升(P<0.05),细胞凋亡率下降(P<0.05),同时减少了乙醇诱导的DNA损伤(P<0.05);此外,沉默CK19表达后可逆转乙醇诱导的WRL68细胞内SOD和GSH-Px活性降低以及MDA含量的升高(P<0.05)。结论在WRI68细胞中沉默CK19表达能减少乙醇诱导的DNA损伤,这种作用可能与改善细胞SOD、MDA和GSH-Px水平相关。 展开更多
关键词 肝脓肿 细胞角蛋白-19 肝细胞 DNA损伤 抗氧化
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