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抗TREM2抗体的制备及生物学活性的初步研究 被引量：1
1
作者 胡钰清 冯艳平 +3 位作者 梁家蓓 郝锋 宁金鹰 李莉 《中南药学》 CAS 2024年第6期1429-1434,共6页
目的制备抗髓系细胞触发受体2(TREM2)抗体并初步探究其生物学活性。方法采用杂交瘤筛选的方法,获得稳定分泌抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,并对杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行筛选,选择结合效果最佳的单克隆抗体进行人源化改造得到嵌合... 目的制备抗髓系细胞触发受体2(TREM2)抗体并初步探究其生物学活性。方法采用杂交瘤筛选的方法,获得稳定分泌抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,并对杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体进行筛选,选择结合效果最佳的单克隆抗体进行人源化改造得到嵌合抗体;对嵌合抗体进行进一步的人源化改造,采用酶联免疫吸附法(ELISA)及流式细胞术(FACS)检测人源化抗体的抗原抗体结合活性;采用生物膜干涉技术(BLI)检测人源化抗体与人TREM2结合动力学;通过基于报告基因的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)生物学活性测定方法,检测人源化抗体的依赖细胞介导的细胞毒效应;使用免疫缺陷小鼠对人源化抗体进行体内药效实验。结果利用杂交瘤技术成功筛选到稳定表达抗TREM2抗体的杂交瘤细胞株,对杂交瘤细胞株进行进一步人源化改造,获得纯度高于95%的人源化抗体h7B6-11,抗体h7B6-11与TREM2-His蛋白具有高度亲和性,且对293T-TREM2细胞的ADCC活性明显强于对照抗体。体内药效实验结果显示,h7B6-11与程序性死亡受体1(PD1)抗体联合用药抑制肿瘤生长效果明显。结论抗体h7B6-11具有高度亲和力和良好的生物学活性,有望开发成为新一代肿瘤免疫治疗的抗体药物。 展开更多
关键词 髓系细胞触发受体2 杂交瘤 单克隆抗体 人源化抗体 生物学活性
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基于PI3K/Akt通路研究山莴苣苦素对三阴性乳腺癌细胞增殖和迁移的影响
2
作者 叶银松 雷毅 +3 位作者 康金森 宁金鹰 马晓丽 杨建 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第2期234-237,共4页
目的研究山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖和迁移的影响。方法采用CellTiter-Glo发光法测定山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖的影响;通过Transwell细胞迁移实验观察山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞迁移... 目的研究山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖和迁移的影响。方法采用CellTiter-Glo发光法测定山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖的影响;通过Transwell细胞迁移实验观察山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞迁移的影响;以蛋白质印迹法测定乳腺癌细胞中PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平。结果山莴苣苦素对三阴性乳腺癌MDA-MB-453细胞的IC_(50)为2.879μmol/L。与对照组比较,随着山莴苣苦素浓度的升高,其对三阴性乳腺癌细胞增殖和迁移能力的抑制作用明显增强,经山莴苣苦素处理的MDA-MB-453乳腺癌细胞的p-Akt随着山莴苣苦素处理浓度的升高,其表达水平明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论山莴苣苦素通过抑制PI3K/Akt信号通路,达到抑制MDA-MB-453乳腺癌细胞增殖和迁移的作用。 展开更多
关键词 MDA-MB-453乳腺癌细胞 山莴苣苦素 PI3K/AKT信号通路
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乳腺癌帕博西尼耐药细胞株的建立及耐药机制研究 被引量：2
3
作者 唐瑶 杨建 +3 位作者 郭正成 郝峰 宁金鹰 康金森 《新疆医科大学学报》 CAS 2021年第11期1282-1288,共7页
目的建立人乳腺癌帕博西尼耐药细胞株T47D-PalR,分析研究其耐药机制。方法采用抑制剂低浓度梯度递增法,建立人乳腺癌帕博西尼耐受的T47D-PalR体外耐药细胞模型;采用CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)法检测T47D-... 目的建立人乳腺癌帕博西尼耐药细胞株T47D-PalR,分析研究其耐药机制。方法采用抑制剂低浓度梯度递增法,建立人乳腺癌帕博西尼耐受的T47D-PalR体外耐药细胞模型;采用CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)法检测T47D-PalR的耐药特性;采用实时荧光定量RT-PCR法与免疫蛋白印迹(Western-Blot)法分析T47D、T47D-PalR两种细胞相关耐药基因CDK2、CDK4、CDK6及CCND1、E2F1、Rb等的mRNA表达及蛋白表达水平。结果经10个月的诱导成功建立T47D-PalR耐药细胞株,可在20μmol帕博西尼培养液中稳定生长。帕博西尼对亲本细胞T47D和耐药细胞T47D-PalR的IC50别为(0.069±0.018)μmol和(4.281±0.167)μmol,耐药指数(RI)为62;帕博西尼对T47D-PalR的单克隆细胞T47D-PalR-clone 39#的IC50>10μmol,耐药指数>144.9,属于高度耐药。与亲本细胞T47D比较,T47D-PalR细胞形态发生了明显改变,且T47D-PalR耐药细胞中CDK2、CDK4、CDK6、E2F1、CCND1等耐药基因的mRNA相对表达量均较T47D细胞升高,差异有统计学意义(P<0.05),而Rb的mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);与母本细胞T47D比较,T47D-PalR耐药细胞中p-Rb、CDK4、CDK6、E2F1的蛋白表达均较T47D升高,差异有统计学意义(P<0.05),但CDK2与总的Rb蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论乳腺癌帕博西尼耐药细胞株对CDK4/6抑制剂帕博西尼具有稳定良好的耐药作用。 展开更多
关键词 CDK4/6抑制剂 乳腺癌 耐药细胞株 帕博西尼
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冷应激对奶牛生产性能的影响及其防控措施概述 被引量：8
4
作者 郭爽 孟繁宇 +4 位作者 徐熙亮 杨健 李亚东 王煦 王洪宇 《天津农业科学》 CAS 2021年第3期61-64,共4页
温度是影响奶牛生产的重要应激因素,包括热应激和冷应激,相关调研结果显示冷应激在我国北方尤其是高寒地区严重影响了奶牛生产,需引起从业人员的广泛关注。根据已有奶牛冷应激的相关文献报道,笔者以奶牛采食量、产奶量和乳品质、免疫功... 温度是影响奶牛生产的重要应激因素,包括热应激和冷应激,相关调研结果显示冷应激在我国北方尤其是高寒地区严重影响了奶牛生产,需引起从业人员的广泛关注。根据已有奶牛冷应激的相关文献报道,笔者以奶牛采食量、产奶量和乳品质、免疫功能等方面为切入点,对奶牛生产性能受冷应激影响的相关研究进行了归纳总结,并结合领域内的生产实践,在加强日常的饲养管理提高奶牛舒适度、注重日粮的营养调控满足营养需求及抗应激产品的使用等方面提出了奶牛冷应激的防控建议,为实际生产中奶牛冷应激的合理预防及控制提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 奶牛 冷应激 生产性能 影响 防控措施
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牛常见皮肤病的诊治要点分析 被引量：3
5
作者 徐熙亮 李达 曾昭红 《吉林畜牧兽医》 2020年第10期118-119,共2页
近年来随着我国畜牧业的迅猛发展,牛只的养殖数量逐年增加,养殖的技术水平有了较大的提高。牛皮肤病作为牛病中的一部分,虽然发病率低,没有得到人们的重视,但是对皮张的质量影响较大,带来很大的经济损失。在这里,笔者将牛的常见皮肤病... 近年来随着我国畜牧业的迅猛发展,牛只的养殖数量逐年增加,养殖的技术水平有了较大的提高。牛皮肤病作为牛病中的一部分,虽然发病率低,没有得到人们的重视,但是对皮张的质量影响较大,带来很大的经济损失。在这里,笔者将牛的常见皮肤病的诊治加以介绍,增加人们对该类疾病的认识水平。 展开更多
关键词 养殖数量 常见皮肤病 牛病 技术水平 诊治要点 认识水平 我国畜牧业 经济损失
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