目的基于Aβ损伤的PC12模型,观察人参皂苷Rb1对线粒体自噬的调节作用。方法用Aβ损伤PC12细胞建立体外AD模型,采用人参皂苷Rb1进行干预后,利用透射电镜观察自噬情况,Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、PINK1、parkin、NDP52和OPTN蛋白的表...目的基于Aβ损伤的PC12模型,观察人参皂苷Rb1对线粒体自噬的调节作用。方法用Aβ损伤PC12细胞建立体外AD模型,采用人参皂苷Rb1进行干预后,利用透射电镜观察自噬情况,Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、PINK1、parkin、NDP52和OPTN蛋白的表达,荧光实时定量PCR检测LC3、p62、PINK1、parkin、NDP52、OPTN m RNA水平。结果人参皂苷Rb1高剂量促进细胞中自噬小体包裹受损线粒体,升高LC3Ⅱ/Ⅰ比值(P<0.05),减少p62蛋白水平(P<0.05);同时,人参皂苷Rb1显著增加了PINK1蛋白表达(P<0.01),同时减少OPTN及NDP52蛋白水平(P<0.05);此外,人参皂苷Rb1高剂量组parkin、OPTN m RNA表达显著上调(P<0.01),低剂量组PINK1、NDP52 m RNA表达也显著上调(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1神经保护作用与调节线粒体自噬相关,通过激活PINK1/parkin通路促进线粒体自噬而改善体外AD模型损伤情况。展开更多
文摘目的基于Aβ损伤的PC12模型,观察人参皂苷Rb1对线粒体自噬的调节作用。方法用Aβ损伤PC12细胞建立体外AD模型,采用人参皂苷Rb1进行干预后,利用透射电镜观察自噬情况,Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、p62、PINK1、parkin、NDP52和OPTN蛋白的表达,荧光实时定量PCR检测LC3、p62、PINK1、parkin、NDP52、OPTN m RNA水平。结果人参皂苷Rb1高剂量促进细胞中自噬小体包裹受损线粒体,升高LC3Ⅱ/Ⅰ比值(P<0.05),减少p62蛋白水平(P<0.05);同时,人参皂苷Rb1显著增加了PINK1蛋白表达(P<0.01),同时减少OPTN及NDP52蛋白水平(P<0.05);此外,人参皂苷Rb1高剂量组parkin、OPTN m RNA表达显著上调(P<0.01),低剂量组PINK1、NDP52 m RNA表达也显著上调(P<0.05)。结论人参皂苷Rb1神经保护作用与调节线粒体自噬相关,通过激活PINK1/parkin通路促进线粒体自噬而改善体外AD模型损伤情况。