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种公猪精液中与繁殖障碍有关的5种垂直传播病毒的检测 被引量：9
1
作者 姜佳佳 李美珍 +5 位作者 覃绍敏 李芳芳 张健 王英群 吴健敏 白安斌 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 北大核心 2016年第2期102-104,共3页
为了有效防控由精液垂直传播的病毒病,采用RT-PCR/PCR技术对广西15个中小规模种猪场共248份公猪精液样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等5种与... 为了有效防控由精液垂直传播的病毒病,采用RT-PCR/PCR技术对广西15个中小规模种猪场共248份公猪精液样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等5种与猪繁殖障碍有关的病毒的检测。结果表明:广西部分中小规模种猪场种公猪精液中垂直传播病带毒严重,PRRSV检出率最高,达48.39%(120/248),其次依次为PPV占42.34%(105/248),CSFV占16.94%(42/248),PRV占5.24%(13/248),PCV-2占3.23%(8/248);存在二重、三重和四重混合感染。二重感染中以PRRSV+PPV最为严重,检出率达14.92%(37/248);三重感染以PRRSV+PPV+CSFV检出率最高,达到5.65%(14/248)。检测结果表明部分种猪场公猪精液中垂直传播病带毒情况严重,PRRSV仍然是危害养猪生产的头号大敌,PPV带毒率的迅速升高值得重视。整顿公猪精液市场,加强检疫,淘汰健康带毒猪,搞好种公猪疫病的净化,是控制垂直传播疾病的关键环节。 展开更多
关键词 种公猪精液 繁殖障碍病 垂直传播 病毒检测 RT-PCR/PCR
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H6亚型禽流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：5
2
作者 周辰瑜 谢芝勋 +6 位作者 彭宜 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第11期12-16,共5页
本研究旨在建立一种快速、特异、敏感的H6亚型禽流感病毒(AIV)实时荧光定量RT-PCR检测方法。针对H6亚型AIV的血凝素(HA)基因序列保守区设计1对引物,并优化反应条件。结果表明,该方法的最低检测限为1.07×101拷贝质粒DNA,与常规PCR相... 本研究旨在建立一种快速、特异、敏感的H6亚型禽流感病毒(AIV)实时荧光定量RT-PCR检测方法。针对H6亚型AIV的血凝素(HA)基因序列保守区设计1对引物,并优化反应条件。结果表明,该方法的最低检测限为1.07×101拷贝质粒DNA,与常规PCR相比,灵敏度高出1 000倍;扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(80.81±0.08)℃,组内变异系数为0.08%～0.99%,组间变异系数为1.85%,可重复性好;对H1、H3、H5、H7、H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒等其他呼吸道病原体无扩增;检测快速,从样本处理到报告结果仅需3.5 h。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H6亚型 荧光定量RT—PCR
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H3N2亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立 被引量：4
3
作者 刘婷婷 谢芝勋 +5 位作者 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期7-11,共5页
为建立检测禽流感病毒(AIV)且同时区分H3N2亚型AIV的方法,本研究根据H3、N2亚型AIV HA、NA基因及AIV最保守M基因的保守区域,设计并筛选出3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了AIV H3N2亚型和M基因三重RT-PCR的检测方法。对该法进行特... 为建立检测禽流感病毒(AIV)且同时区分H3N2亚型AIV的方法,本研究根据H3、N2亚型AIV HA、NA基因及AIV最保守M基因的保守区域,设计并筛选出3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了AIV H3N2亚型和M基因三重RT-PCR的检测方法。对该法进行特异性及敏感性检测,并通过该三重RT-PCR方法对96份临床样品进行检测。结果显示,H3N2亚型AIV可扩增出3条特异性条带,其中518bp为AIV M基因、418bp为N2亚型AIV NA基因、271bp为H3亚型AIV HA基因;H3亚型和N2亚型AIV均可扩增出2条特异性条带,大小分别为518bp、271bp和518bp、418bp;其他亚型AIV可扩增出一条特异性条带,大小为518bp;常见禽病病原体均未扩增出任何条带。敏感性试验表明该法对H3N2亚型AIV的检测下限为100pg,96份临床样品检测结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究所建立的AIV H3N2亚型和M基因三重RT-PCR为一种简便、快速、有效的检测方法。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H3N2亚型 M基因 三重RT-PCR
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H6亚型禽流感病毒的分离鉴定与生物学特性分析 被引量：4
4
作者 罗思思 谢芝勋 +6 位作者 周辰瑜 刘加波 谢志勤 庞耀珊 邓显文 谢丽基 范晴 《中国家禽》 北大核心 2015年第2期54-56,共3页
为了解低致病性禽流感病毒(LPAIVs)在广西地区家禽中的流行情况,对广西地区活禽市场的家禽进行LPAIVs流行病学监测,分离鉴定出7株H6亚型禽流感病毒(AIV)。通过在广西地区活禽市场采集家禽咽喉和泄殖腔棉拭子样品,将其接种SPF鸡胚,收集... 为了解低致病性禽流感病毒(LPAIVs)在广西地区家禽中的流行情况,对广西地区活禽市场的家禽进行LPAIVs流行病学监测,分离鉴定出7株H6亚型禽流感病毒(AIV)。通过在广西地区活禽市场采集家禽咽喉和泄殖腔棉拭子样品,将其接种SPF鸡胚,收集尿囊液进行HA和HI试验,结果显示这7株只与H6亚型AIV的阳性血清发生反应,产生血凝抑制现象,初步鉴定为H6亚型AIV。通过HA和NA基因的克隆与测序鉴定,进一步确定为H6亚型AIV,与NA基因存在5种组合,包括H6N1、H6N2、H6N5、H6N6和H6N8。鸡致病性试验表明分离株可感染但不致死SPF鸡,并通过咽喉和泄殖腔排毒,结合HA裂解位点附近的氨基酸序列,表明所分离到的7株H6亚型AIV符合LPAIV的特征。 展开更多
关键词 H6亚型禽流感病毒 分离 鉴定
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H4亚型禽流感病毒套式RT-PCR检测方法的建立 被引量：3
5
作者 吴嫒琼 谢芝勋 +7 位作者 胡庭俊 谢丽基 罗思思 邓显文 谢志勤 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 《动物医学进展》 北大核心 2015年第2期11-15,共5页
旨在建立一种快速、准确检测H4亚型禽流感病毒(AIV)的方法,针对H4亚型AIV HA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H4亚型AIV套式RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该法可特异性检测出H4亚型AIV,对其他常... 旨在建立一种快速、准确检测H4亚型禽流感病毒(AIV)的方法,针对H4亚型AIV HA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H4亚型AIV套式RT-PCR检测方法。特异性试验结果显示,该法可特异性检测出H4亚型AIV,对其他常见禽病病原体无交叉;敏感性试验结果显示,该法对H4亚型AIV检测下限为360fg/μL;用该法对106份临床样品进行检测,临床样品检测结果与病毒分离结果一致。本研究建立的套式RT-PCR方法为H4亚型AIV的早期诊断及有效防控提供了快速、特异和敏感的检测方法。 展开更多
关键词 H4亚型 禽流感病毒 套式RT-PCR 检测
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H3亚型禽流感病毒巢式PCR检测方法的建立 被引量：3
6
作者 刘婷婷 谢芝勋 +5 位作者 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期85-89,共5页
为建立一种H3亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,本研究针对H3亚型AIV HA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H3亚型AIV巢式PCR检测方法。对该法进行特异性和敏感性检验,并用该法对96份临床样品进行检测。特... 为建立一种H3亚型禽流感病毒(AIV)的检测方法,本研究针对H3亚型AIV HA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H3亚型AIV巢式PCR检测方法。对该法进行特异性和敏感性检验,并用该法对96份临床样品进行检测。特异性试验结果表明该法只能检测到H3亚型AIV,对其他常见禽病病原体不扩增;敏感性试验结果表明该巢式PCR对H3亚型AIV检测下限为1×103拷贝/μL,灵敏度比常规PCR高100倍;96份临床样品检测结果与病毒分离结果一致。本研究所建立的巢式PCR为H3亚型AIV的诊断提供了一种准确、有效的检测方法。 展开更多
关键词 H3亚型禽流感病毒 巢式PCR 检测方法
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H6亚型禽流感病毒套式 RT-PCR 检测方法的建立 被引量：3
7
作者 周辰瑜 谢芝勋 +6 位作者 罗思思 刘加波 谢丽基 邓显文 谢志勤 范晴 庞耀珊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第11期10-13,共4页
为建立一种H6亚型禽流感病毒(AIV)的套式RT-PCR检测方法,根据GenBank中H6亚型AIV HA基因序列,设计了4条特异性引物,优化反应条件,并对所建立的方法进行特异性和敏感性的检验,用该法对154份活禽市场样品进行检测。结果表明,所建立的套式R... 为建立一种H6亚型禽流感病毒(AIV)的套式RT-PCR检测方法,根据GenBank中H6亚型AIV HA基因序列,设计了4条特异性引物,优化反应条件,并对所建立的方法进行特异性和敏感性的检验,用该法对154份活禽市场样品进行检测。结果表明,所建立的套式RT-PCR方法对其他常见禽病病原体无扩增;对H6亚型AIV的最小检测限为1×102拷贝/μL,灵敏度比常规RT-PCR方法高100倍;154份样品的检测结果与病毒分离一致。所建立的H6亚型AIV套式RT-PCR检测方法具有特异性强和灵敏度高的特点。 展开更多
关键词 H6 亚型禽流感病毒 套式RT-PCR
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H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立 被引量：2
8
作者 刘婷婷 谢芝勋 +5 位作者 宋德贵 罗思思 谢丽基 李孟 谢志勤 邓显文 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期172-174,共3页
为了建立一种简便、快速检测H3N2亚型禽流感病毒的方法,试验根据Gen Bank中H3、N2亚型禽流感病毒HA和NA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件建立H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法。结果表明:该方法既能同时... 为了建立一种简便、快速检测H3N2亚型禽流感病毒的方法,试验根据Gen Bank中H3、N2亚型禽流感病毒HA和NA基因保守序列,设计并筛选出2对特异性引物,通过优化反应条件建立H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法。结果表明:该方法既能同时特异性扩增出H3N2亚型禽流感病毒,也可扩增出H3、N2亚型禽流感病毒,而对其他亚型和常见禽病病原体均不扩增;该方法对H3N2亚型禽流感病毒的检测下限为10 pg;用该方法对96份临床样品进行检测,结果与病毒分离鉴定结果一致。说明试验所建立的H3N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高的特点。 展开更多
关键词 H3N2亚型 禽流感病毒 二重RT-PCR 病毒分离 特异性 敏感性 检测技术
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猪支原体肺炎研究进展 被引量：32
9
作者 李莹莹 何颖 +5 位作者 赵武 李斌 秦毅斌 卢冰霞 梁家幸 陆芹章 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第10期95-100,共6页
猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,严重危害养猪业的健康发展。随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易... 猪支原体肺炎是猪肺炎支原体所引发的一种以气喘为主要症状,以肺部对称性肉变为主要病理变化的慢性接触性呼吸道传染病,在世界各地普遍存在,严重危害养猪业的健康发展。随着对猪肺炎支原体的深入研究,发现其单一感染致死率虽低,但是易引发其他病毒或细菌等病原的续发或并发感染,导致猪呼吸道疾病综合征,使得疫情变得更为复杂,增加猪病诊断与防控的难度,造成巨大的经济损失。论文根据猪肺炎支原体的最新研究进展,从病原学、流行病学特点、主要抗原蛋白的研究、诊断、疫苗研制、防控措施等六个方面做一综述,从而为猪肺炎支原体的进一步研究及该病的防控提供新思路。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 病原学 诊断 疫苗
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Ⅰ群禽腺病毒分离鉴定及hexon基因的序列分析 被引量：26
10
作者 罗思思 谢芝勋 +6 位作者 邓显文 刘加波 庞耀珊 谢志勤 谢丽基 彭宜 范晴 《畜牧与兽医》 北大核心 2012年第1期52-56,共5页
为调查禽腺病毒的感染状况,2008—2010年从广西南宁市活禽市场采集样品259份,通过SPF鸡胚传代增殖,经PCR鉴定,92份为禽腺病毒阳性,阳性率为35.5%(92/259)。选取不同年份的8株进行免疫琼脂扩散、血凝性、致细胞病变、形态学和鸡胚致病性... 为调查禽腺病毒的感染状况,2008—2010年从广西南宁市活禽市场采集样品259份,通过SPF鸡胚传代增殖,经PCR鉴定,92份为禽腺病毒阳性,阳性率为35.5%(92/259)。选取不同年份的8株进行免疫琼脂扩散、血凝性、致细胞病变、形态学和鸡胚致病性试验。结果:8株均与Ⅰ群禽腺病毒阳性血清反应,不能凝集鸡红细胞,病毒粒子具有腺病毒典型特征,可致鸡胚肝细胞变圆、折光性增强,使鸡胚发育不良。将克隆的8株hexon基因进行序列比对及遗传进化分析,显示均与Ⅰ群禽腺病毒同源性最高,亲缘关系最近。结果表明,8株分离株均为Ⅰ群禽腺病毒。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 分离 鉴定 HEXON
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猪流行性腹泻病毒变异毒株与经典毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：19
11
作者 秦毅斌 卢冰霞 +8 位作者 赵武 何颖 李莹莹 李斌 梁家幸 梁保忠 苏乾莲 蒋冬福 周英宁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期509-514,共6页
为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株的快速RT-PCR检测方法,根据GenBank中PEDV S基因序列设计合成1对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立了检测PEDV变异毒株的RT-PCR方法。结果显示,建立的RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分疫苗株CV... 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株的快速RT-PCR检测方法,根据GenBank中PEDV S基因序列设计合成1对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立了检测PEDV变异毒株的RT-PCR方法。结果显示,建立的RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分疫苗株CV777和PEDV变异毒株,仅能扩增出PEDV变异毒株826bp的目的片段,与猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒及猪细小病毒均无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法能检测到的最低核酸质量为11.3pg。利用该方法对采集自广西部分地区的123份临床腹泻样品进行检测,临床腹泻样品中PEDV阳性率为67.5%,变异毒株占总PEDV毒株的86.7%(72/83)。结果表明,该RT-PCR鉴别诊断方法特异性强、灵敏度高、操作简单,为猪流行性腹泻的流行病学及病原诊断研究提供了可供借鉴的技术手段。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 RT-PCR 鉴别诊断
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利用RT-LAMP可视化检测技术检测H1亚型禽流感病毒及N1、N2亚型的分型 被引量：19
12
作者 彭宜 谢芝勋 +8 位作者 郭捷 周辰瑜 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 罗思思 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期154-161,共8页
为直接根据颜色变化进行可视化检测H1亚型、N1亚型、N2亚型禽流感病毒(AIV),根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立针对H1亚型AIV及特异性鉴定N1、N2亚型的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。根据GenBank中的AIV基因序列,设计了三套... 为直接根据颜色变化进行可视化检测H1亚型、N1亚型、N2亚型禽流感病毒(AIV),根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立针对H1亚型AIV及特异性鉴定N1、N2亚型的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。根据GenBank中的AIV基因序列,设计了三套分别针对H1亚型AIV-HA基因及N1、N2亚型AIV-NA基因的特异性简并引物,并优化反应条件和体系。结果表明建立的检测方法对其它亚型AIV及禽呼吸道病原体无交叉扩增反应并能特异性地检测N1、N2亚型AIV,灵敏度优于传统的RT-PCR方法。整个反应在常规水浴中50min就可完成,反应结束后不需打开反应管盖,可根据反应液的颜色变化对结果直接进行判定。120份临床样品用建立的RT-LAMP方法检测到14份H1N1亚型AIV、8份H1N2亚型AIV,结果与病毒分离结果相符。本研究建立的三种RT-LAMP可视化检测技术特异、灵敏、快速、操作和结果判定简便,适合在基层进行H1亚型AIV的快速检测及N1、N2亚型AIV的分型。 展开更多
关键词 逆转录环介导等温扩增 可视化检测 H1 N1 N2亚型禽流感病毒
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猪丹毒丝菌不同年代分离菌株流行病学特征及部分生物学特性比较研究 被引量：18
13
作者 王力波 刘芳 +5 位作者 谢江 曹颖颖 饶桂波 胡桂学 蒋玉文 吴健敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期423-430,共8页
比较新近分离到的4株猪丹毒丝菌与4株20世纪50—80年代猪丹毒丝菌参考菌株的流行病学特征及部分生物学特性。观察菌株的生长形态特征,绘制生长曲线,测定生理生化特性、药物敏感特性、半数致死量（LD50）及疫苗免疫保护作用,同时用PCR方... 比较新近分离到的4株猪丹毒丝菌与4株20世纪50—80年代猪丹毒丝菌参考菌株的流行病学特征及部分生物学特性。观察菌株的生长形态特征,绘制生长曲线,测定生理生化特性、药物敏感特性、半数致死量（LD50）及疫苗免疫保护作用,同时用PCR方法扩增8株猪丹毒丝菌4个毒力因子的7个毒力基因片段,并以GXBY-1代表株进行毒力基因的遗传进化分析。结果显示,8株菌表现出一致的形态特征、生长曲线和生理生化特性;LD50结果显示,新近分离到的4株菌LD50高于4株参考菌株,表明新近分离菌株毒力有所下降;免疫保护试验结果表明,免疫GC42株活疫苗的昆明小鼠在注射不同年代的猪丹毒丝菌后仍能保持80%~100%存活;对8株菌进行30种常用抗菌药物的药物敏感试验,结果显示,8株菌对β-内酰胺类、氯霉素类、大环内酯类、硝基呋喃类和双萜类药物仍保持高敏,但对四环素、林可霉素、诺氟沙星敏感性出现差异,4株新近临床分离菌株对上述3种药物的敏感性显著低于4株老菌株,表现为耐药。多数菌株对氨基糖苷类、多肽类、磺胺类、硝基咪唑类、利福霉素家族药物表现为耐药。8株菌均能扩增出7个毒力基因,与参考菌株相比新近临床分离菌株毒力基因中仅CPSA、CPSC发生变异,而SpaA、Sialidase、CPSB、RspA、RspB为保守基因,同源性近100%。结果表明,不同年代猪丹毒丝菌具有较为一致的生物学特性,但其中菌株LD50、药物敏感特性、毒力基因遗传性出现了差异。 展开更多
关键词 猪丹毒丝菌 不同年代 流行病学特征 生物学特性
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Ⅰ群禽腺病毒双价油乳剂灭活苗的研究 被引量：18
14
作者 韦悠 谢芝勋 +5 位作者 范晴 刘加波 谢丽基 庞耀珊 邓显文 谢志勤 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第12期1550-1554,共5页
【目的】提高国内I群禽腺病毒疫苗的防控能力,防止I群禽腺病毒蔓延。【方法】优化I群禽腺病毒的增殖条件,以I群禽腺病毒血清4型(FAV-4)及血清8型(FAV-8)的抗原液制备油乳剂单价及双价灭活苗,比较甲醛及β-丙内酯(BPL)的灭活效果,并检验... 【目的】提高国内I群禽腺病毒疫苗的防控能力,防止I群禽腺病毒蔓延。【方法】优化I群禽腺病毒的增殖条件,以I群禽腺病毒血清4型(FAV-4)及血清8型(FAV-8)的抗原液制备油乳剂单价及双价灭活苗,比较甲醛及β-丙内酯(BPL)的灭活效果,并检验疫苗性状、监测免疫抗体水平及进行免疫攻毒试验和田间试验。【结果】疫苗灭活以1.00mL/L终浓度的甲醛或0.500mL/L终浓度的BPL为宜;3种疫苗均为白色状乳液,4°C下保存期均可达12个月,单价疫苗的最小免疫剂量为100μL/羽,双价疫苗的最小免疫剂量为250μL/羽;免疫抗体水平监测结果表明,免疫后第4周抗体水平达到峰值,且在免疫后第8周仍维持较高水平;免疫攻毒试验结果显示,3种疫苗的保护率均为100%,能完全抵抗病毒攻击;田间试验结果表明,在免疫初期3种疫苗抗体均达到预期免疫效果,免疫保护期在6个月以上,在生产中使用双价疫苗可以减少注射次数。【结论】FAV-4、FAV-8双价油乳剂灭活苗免疫效果好、保存期长、安全性好,为净化I群禽腺病毒提供了技术支撑。 展开更多
关键词 I群禽腺病毒 FAV-4 FAV-8 双价油乳剂灭活苗
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鸡滑液支原体LAMP快速可视化检测方法的建立 被引量：15
15
作者 邓显文 谢芝勋 +5 位作者 谢志勤 刘加波 庞耀珊 谢丽基 范晴 罗思思 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期46-49,共4页
为建立能够快速检测鸡滑液支原体(MS)的检测方法,本研究根据GenBank中MS热休克ATP依赖蛋白酶基因的保守序列,设计了一套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,建立了MS的LAMP可视化检测方法。该方法的敏感性可达102拷贝DNA,高于常规PCR方法 1... 为建立能够快速检测鸡滑液支原体(MS)的检测方法,本研究根据GenBank中MS热休克ATP依赖蛋白酶基因的保守序列,设计了一套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,建立了MS的LAMP可视化检测方法。该方法的敏感性可达102拷贝DNA,高于常规PCR方法 10倍;全部反应可以在1 h内完成;可以通过肉眼观察钙黄绿素颜色变化直接判定结果;对其它常见病原体的检测结果均为阴性。结果表明建立的LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,可以用于MS感染的快速检测。 展开更多
关键词 鸡滑液支原体 LAMP 检测
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广西牡蛎养殖业的现状与发展对策 被引量：14
16
作者 庞耀珊 谢芝勋 +4 位作者 谢丽基 邓显文 刘加波 谢志勤 范晴 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2118-2121,共4页
【目的】更好地促进广西牡蛎养殖业的健康可持续发展,为政府管理部门及科技工作者提供参考。【方法】对当前广西牡蛎养殖业现状和问题进行分析,找出阻碍当前广西牡蛎养殖业发展的主要原因,提出促进广西牡蛎养殖业健康可持续发展的对策... 【目的】更好地促进广西牡蛎养殖业的健康可持续发展,为政府管理部门及科技工作者提供参考。【方法】对当前广西牡蛎养殖业现状和问题进行分析,找出阻碍当前广西牡蛎养殖业发展的主要原因,提出促进广西牡蛎养殖业健康可持续发展的对策与建议。【结果】目前广西牡蛎养殖业普遍存在种质资源良莠不齐、牡蛎死亡现象时有发生、牡蛎加工方式落后、牡蛎贸易链短等问题。【建议】通过挖掘本地种质资源优势,建立无特定病原体(SPF)牡蛎原种场;合理规划养殖,构建安全高效的健康可持续发展的海水养殖模式;研究、引进养殖和加工新技术,延伸牡蛎产业链条等方式,以促进广西牡蛎养殖业的高效、健康可持续发展,增加牡蛎养殖业的经济效益。 展开更多
关键词 牡蛎养殖业 现状 问题 对策 广西
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禽流感病毒疫苗研究进展 被引量：13
17
作者 谭伟 谢丽基 谢芝勋 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1492-1497,共6页
疫苗接种仍然是防控禽流感的最有效措施之一,目前有紧急接种、预防接种、系统接种及替代接种等4种常见形式。禽流感疫苗的主要类型包括灭活全病毒疫苗、亚单位疫苗、重组病毒载体疫苗、DNA疫苗、复制缺陷型疫苗、病毒样颗粒疫苗及通用... 疫苗接种仍然是防控禽流感的最有效措施之一,目前有紧急接种、预防接种、系统接种及替代接种等4种常见形式。禽流感疫苗的主要类型包括灭活全病毒疫苗、亚单位疫苗、重组病毒载体疫苗、DNA疫苗、复制缺陷型疫苗、病毒样颗粒疫苗及通用疫苗等,影响其免疫效果的因素有免疫原选择及佐剂类型、病毒变异、决策机构的反应速度、免疫覆盖率、疫苗质量及稳定性、遗传结构及机体免疫状态、加强免疫方案等。鉴于传统禽流感疫苗不能对不同亚型禽流感病毒(AIV)及变异株提供交叉保护,且所使用的油佐剂副作用较大,对动物机体损伤较严重,今后应加强研制新型免疫佐剂及其他更安全高效的新型疫苗来弥补现有禽流感疫苗的不足。 展开更多
关键词 禽流感病毒(AIV) 疫苗 类型 影响因素 免疫效果
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Ⅰ群禽腺病毒抗体间接hexon-ELISA检测方法的建立 被引量：11
18
作者 罗思思 谢芝勋 +6 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 范晴 彭宜 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期701-707,共7页
为建立一种检测Ⅰ群禽腺病毒(FAVⅠ)抗体的间接ELISA方法,以FAVⅠhexon重组蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立了FAVⅠ抗体间接hexon-ELISA检测方法。抗原最佳包被浓度为10.0μg/mL,最适包被条件为37℃2h加4℃过夜;最佳封闭液为50g/L... 为建立一种检测Ⅰ群禽腺病毒(FAVⅠ)抗体的间接ELISA方法,以FAVⅠhexon重组蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立了FAVⅠ抗体间接hexon-ELISA检测方法。抗原最佳包被浓度为10.0μg/mL,最适包被条件为37℃2h加4℃过夜;最佳封闭液为50g/L脱脂乳;血清最佳稀释度为1∶100,最佳作用时间为75min;酶标二抗最佳工作浓度为1∶2 000,最佳作用时间为45min;hexon-ELISA阴性、阳性临界值为0.379。用建立的hexon-ELISA方法检测100份鸡血清样品,阳性率为45%。结果表明,建立的hexon-ELISA方法简便、快捷,可大批量检测,具有良好的特异性、敏感性和重复性,适用于FAVⅠ的诊断、抗体水平监测及流行病学调查。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 六邻体 酶联免疫吸附试验
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Ⅰ群禽腺病毒五邻体蛋白间接ELISA检测方法的建立 被引量：11
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作者 罗思思 谢芝勋 +5 位作者 谢志勤 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢丽基 范晴 《中国家禽》 北大核心 2012年第3期10-13,共4页
为建立一种简便、快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAVI)抗体的间接ELISA方法,以表达和纯化的FAVI五邻体重组蛋白作为抗原,优化反应条件,建立了FAVI间接penton-ELISA抗体检测的方法。抗原最佳包被浓度为1.5μg/孔,最适包被条件为37℃,2h后4℃过夜... 为建立一种简便、快速检测Ⅰ群禽腺病毒(FAVI)抗体的间接ELISA方法,以表达和纯化的FAVI五邻体重组蛋白作为抗原,优化反应条件,建立了FAVI间接penton-ELISA抗体检测的方法。抗原最佳包被浓度为1.5μg/孔,最适包被条件为37℃,2h后4℃过夜;血清最佳稀释度为1∶100;酶标二抗的最佳工作浓度为1∶2000;ELISA阴、阳性临界值为0.335。用penton-ELISA方法检测100份鸡血清样品,阳性率为41%。 展开更多
关键词 Ⅰ群禽腺病毒 五邻体 ELISA
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广西猪牛羊鸡戊型肝炎血清流行病学调查分析 被引量：10
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作者 刘艳玲 赖莉敏 +9 位作者 廖凤 苏乾莲 李斌 熊敏芬 陈晖月 段群棚 秦毅斌 梁家幸 农扬 赵武 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期103-106,共4页
【目的】全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点。【方法】采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗... 【目的】全面掌握了解广西各地猪、牛、羊、鸡戊型肝炎(HE)的感染状况及其流行特点。【方法】采用双抗原夹心ELISA检测来自广西各地猪(850份)、牛(392份)、羊(428份)、鸡(352份)共2022份血清中的抗HEV抗体,并比较不同地区、不同动物间抗HEV抗体阳性率的差异。【结果】4种主要畜禽的血清总抗HEV抗体阳性率为44.76%(905/2022),其阳性率大小排序为:猪(77.53%)>牛(27.81%)>羊(21.03%)>鸡(13.35%);不同地区的畜禽血清抗HEV抗体阳性率都是以猪群的最高,均在59.00%以上。而从不同地区的4种畜禽血清总抗HEV抗体阳性率来看,以南宁市的最高(61.94%)、河池市的最低(30.93%)。【结论】广西的猪、牛、羊、鸡群中均存在HEV感染,且猪在传播HEV方面起主导作用。 展开更多
关键词 戊型肝炎 流行病学 抗HEV抗体 阳性率 广西
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