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桑白皮化学成分的研究 被引量：27
1
作者 郑兆广 王汝上 +4 位作者 汤丹 何宝 顾斐 段婷婷 朱荃 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2011年第3期399-400,403,共3页
从桑白皮(Cortex Mori)的水提液中分离得到5个化学成分,通过波谱数据结合理化性质分别鉴定为4,4'-二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(4,4'-diphenylmethane-bis(methyl)carbamates,1),东莨菪内酯(seopoletin,2),伞形花内酯(umbelliferone,... 从桑白皮(Cortex Mori)的水提液中分离得到5个化学成分,通过波谱数据结合理化性质分别鉴定为4,4'-二苯甲烷二氨基甲酸甲酯(4,4'-diphenylmethane-bis(methyl)carbamates,1),东莨菪内酯(seopoletin,2),伞形花内酯(umbelliferone,3),3,4,5-三甲氧基苯酚(3,4,5-trimethoxyphenol,4),对羟基苯甲酸乙酯(4-hydroxy ethyl-benzoate,5)。其中,化合物1为新的天然化合物,4和5为首次从该植物中分得。 展开更多
关键词 桑白皮 二苯甲烷二氨基甲酸甲酯 东莨菪内酯 伞形花内酯 3 4 5-三甲氧基苯酚 对羟基苯甲酸乙酯
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基于核壳色谱技术的黄芪中8种异黄酮活性成分的快速定量分析 被引量：19
2
作者 汤丹 曹东敏 +4 位作者 谭兰芳 徐友华 段婷婷 朱荃 王淑美 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1410-1415,共6页
基于核壳色谱技术,建立快速同时测定黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、(6αR,11αR)-9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、(3R)-7,2-二羟基-3,4-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素、(6αR,11αR)-9,10-二甲氧... 基于核壳色谱技术,建立快速同时测定黄芪中毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、(6αR,11αR)-9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、(3R)-7,2-二羟基-3,4-二甲氧基异黄烷-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花素、(6αR,11αR)-9,10-二甲氧基紫檀烷、(3R)-7,2-二羟基-3,4-二甲氧基异黄烷8个异黄酮活性成分含量的UHPLC分析方法。采用Agilent Poroshell EC-C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm),以0.2%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,柱温40℃,检测波长260 nm和280 nm。结果表明在线性范围内8个成分线性良好(R^(2 )>0.999 8),日内精密度和日间精密度RSD均小于0.80%,平均回收率在94.71%～104.6%。经与常规HPLC进行对比,采用核壳色谱技术具有快速、柱压低及灵敏度高等优势,且适用于常规液相色谱系统。同时,进一步采用该方法对22批次黄芪样品进行了分析,结果8种异黄酮类成分均能检出,但各样品间单一异黄酮成分的含量差异较大,且变化趋势各异,而相比较单一成分的含量,各批次样品间8种异黄酮类成分的总量较稳定,且总量均高于0.1%,提示选取8种异黄酮成分作为黄芪的质量控制指标是科学合理的。 展开更多
关键词 核壳色谱 黄芪 异黄酮成分 含量测定
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郁金醇提取物对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：12
3
作者 何洁英 王汝上 +1 位作者 何洁宝 邓小霞 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期223-225,共3页
目的:探讨郁金醇提取物(CR)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的保护作用。方法:HUVEC细胞培养在含10%胎牛血清的Dulbecco’s Modified Essential Medium(DMEM)培养基中。建立过氧化氢诱导HUVEC细胞(104细胞/mL)的氧... 目的:探讨郁金醇提取物(CR)对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的保护作用。方法:HUVEC细胞培养在含10%胎牛血清的Dulbecco’s Modified Essential Medium(DMEM)培养基中。建立过氧化氢诱导HUVEC细胞(104细胞/mL)的氧化应激损伤模型。实验分为正常对照组、800μmol.L-1过氧化氢模型组、100 mg.L-1CR+800μmol.L-1过氧化氢组、50 mg.L-1CR+800μmol.L-1过氧化氢组、25 mg.L-1CR+800μmol.L-1过氧化氢组,0.1 mmol.L-1阳性对照维生素E(VE)组。细胞给予药物处理48 h后,分别测定培养液中的超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及丙二醛(MDA)的含量。细胞以超氧化物阴离子荧光探针二氢乙锭(DHE)处理,荧光显微镜下测定荧光强度,评价细胞内活性氧(ROS)的生成。结果:800μmol.L-1过氧化氢与正常组相比,显著下调SOD活性[(87.65±7.82),(110.57±10.32)nU.mg-1],增加MDA含量[(19.72±3.68),(12.04±2.33)nmol.mg-1]和LDH活性[(6.93±0.27),(3.62±0.42)U.mg-1]以及ROS产物[(119.47±2.46)%,(100.00±5.73)%,(P<0.01)];与模型组相比,100,50,25 mg.L-1 CR能显著提高SOD活性[(109.39±5.28),(101.43±6.41),(96.37±8.03)nU.mg-1],下调MDA含量[(12.47±1.90),(14.51±2.08),(16.88±2.15)nmol.mg-1],下调LDH活性[(3.77±0.53),(4.68±0.63),(5.74±0.49)U.mg-1],降低ROS产物(P<0.01)。结论:郁金醇提取物具有抗氧化应激活性,对内皮损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 郁金 氧化应激 超氧化物歧化酶 丙二醛 乳酸脱氢酶 活性氧簇
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正交试验优化板蓝根总生物碱的提取工艺 被引量：10
4
作者 黄晓玲 郑兆广 +2 位作者 封亮 朱荃 王汝上 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期66-68,共3页
目的:优选板蓝根中总生物碱的超声提取工艺。方法:以总生物碱提取量为指标,采用L9(34)正交试验考察乙醇体积分数、超声时间,料液比对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺。结果:各因素对超声提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数>超声时间&... 目的:优选板蓝根中总生物碱的超声提取工艺。方法:以总生物碱提取量为指标,采用L9(34)正交试验考察乙醇体积分数、超声时间,料液比对提取工艺的影响,确定最佳提取工艺。结果:各因素对超声提取工艺的影响顺序为乙醇体积分数>超声时间>料液比;最佳提取工艺为乙醇体积分数80%,提取时间20 min,料液比1∶10。结论:优选的提取工艺稳定可行,提取率高。 展开更多
关键词 板蓝根 总生物碱 正交试验 提取工艺
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HPLC法测定尿毒清颗粒中大黄酸的含量 被引量：6
5
作者 何洁英 王汝上 黄振山 《现代医院》 2011年第6期30-31,共2页
目的建立高效液相色谱法测定尿毒清颗粒中大黄酸含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:Phenomenex(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),柱温:室温,流速:1.0 ml.min-1,检测波长:254 nm。结果大黄酸在0.834 5μg.m... 目的建立高效液相色谱法测定尿毒清颗粒中大黄酸含量的方法。方法采用HPLC法,色谱柱:Phenomenex(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15),柱温:室温,流速:1.0 ml.min-1,检测波长:254 nm。结果大黄酸在0.834 5μg.ml-1～25.035μg.ml-1内呈良好线性,R2=0.999 6,平均回收率为100.34%,RSD为1.06%(n=9)。结论本方法准确、精密度高、专属性好,可用于尿毒清颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 大黄酸 尿毒清颗粒 含量测定
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不同产地夏枯草中抗非小细胞肺癌成分科罗索酸的差异比较 被引量：5
6
作者 欧阳慧 封亮 +4 位作者 徐友华 王珊珊 王汝上 朱荃 项平 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1571-1574,共4页
目的:比较不同产地夏枯草中抗非小细胞肺癌活性成分科罗索酸的含量差异。方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)和吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB),评价科罗索酸对非小细胞肺癌细胞的增殖抑制以及凋亡作用;建立高效液相色谱法,比较14个产地夏枯草中科... 目的:比较不同产地夏枯草中抗非小细胞肺癌活性成分科罗索酸的含量差异。方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)和吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB),评价科罗索酸对非小细胞肺癌细胞的增殖抑制以及凋亡作用;建立高效液相色谱法,比较14个产地夏枯草中科罗索酸的含量差异。结果:科罗索酸抑制SPC-A-1人非小细胞肺癌的生长增殖(IC50=1.05×10-6mol/L),并且诱导SPC-A-1细胞凋亡。14个产地夏枯草中科罗索酸的含量差异较大,山西产地的含量最高,河南-2产地的含量最低。结论:科罗索酸为夏枯草中的抗非小细胞肺癌的活性成分,不同产地夏枯草的科罗索酸含量差异较大。 展开更多
关键词 夏枯草 科罗索酸 四甲基偶氮唑蓝 凋亡 高效液相色谱法 产地 质量
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板蓝根总生物碱HPLC指纹图谱 被引量：5
7
作者 何洁英 何洁宝 王汝上 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期62-64,共3页
目的:建立板蓝根总生物碱的HPLC色谱指纹图谱检测方法。方法:采用Phenomenex色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),柱温室温,流速1 m L·min-1,检测波长220 nm,进样量10μL。不同样品之间的相似度采用... 目的:建立板蓝根总生物碱的HPLC色谱指纹图谱检测方法。方法:采用Phenomenex色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),柱温室温,流速1 m L·min-1,检测波长220 nm,进样量10μL。不同样品之间的相似度采用国家药典委员会开发的"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)计算。结果:12批不同来源的板蓝根药材所含生物碱类成分均得到很好的分离,获得19个共有特征峰。结论:经过系统的方法学考察,该方法具有简便、专属性强、稳定、可重复的特点,能较好地识别板蓝根药材,为板蓝根生物碱的质量控制提供了方法学依据。 展开更多
关键词 板蓝根 生物碱 高效液相色谱法 指纹图谱
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桑白皮多糖提取工艺正交试验优化研究
8
作者 何洁英 王汝上 +1 位作者 何洁宝 邓小霞 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2012年第10期46-47,共2页
目的优选桑白皮多糖最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取次数、提取时间及醇沉浓度作为工艺因素,每个因素采用3个水平,选择L9(34)正交表进行试验,同时用硫酸-苯酚法测定桑白皮多糖的含量作为评价指标。结果桑白皮多糖的最佳提取... 目的优选桑白皮多糖最佳提取工艺。方法采用正交试验设计,以提取次数、提取时间及醇沉浓度作为工艺因素,每个因素采用3个水平,选择L9(34)正交表进行试验,同时用硫酸-苯酚法测定桑白皮多糖的含量作为评价指标。结果桑白皮多糖的最佳提取工艺为超声提取30 min,提取2次,醇沉浓度为80%。结论优选的工艺多糖提取率稳定,提取率高,提取工艺合理可行。 展开更多
关键词 桑白皮多糖 正交试验 提取工艺 含量测定
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Thoc1真核表达载体构建及其与ClC-3蛋白在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位观察
9
作者 刘学强 郑兆广 +3 位作者 王汝上 钟杰 何桂芳 徐彬 《山东医药》 CAS 2018年第16期26-29,共4页
目的克隆Thoc1基因并构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,观察Thoc1和氯离子通道3(ClC-3)在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位情况,分析ClC-3是否参与细胞转录过程。方法采用RT-PCR法扩增获得Thoc1基因的编码序列,将其克隆到p DsRed2-N1载体中... 目的克隆Thoc1基因并构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,观察Thoc1和氯离子通道3(ClC-3)在人宫颈癌细胞HeLa中的共定位情况,分析ClC-3是否参与细胞转录过程。方法采用RT-PCR法扩增获得Thoc1基因的编码序列,将其克隆到p DsRed2-N1载体中,构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体,经PCR、SacⅠ和Bam HⅠ双酶切、基因测序进行鉴定。将对数生长期HeLa细胞随机分为转染组、空转染组及空白对照组,分别采用Lipofectamine 2000转染pThoc1-DsRed2-N1质粒、p DsRed2-N1质粒及脂质体,转染48 h倒置荧光显微镜下观察红色荧光蛋白表达情况。取转染组细胞,采用免疫荧光技术观察Thoc1和ClC-3的共定位情况。结果 PCR鉴定结果显示在约2.1 kb处有一亮带;双酶切得到约4.7 kb和2.1 kb的两个片段,符合预期大小;基因测序结果显示与Genebank中Thoc1基因序列完全一致;证实成功构建pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体。空转染组可观察到较强的红色荧光,空白对照组没有观察到红色荧光,转染组红色荧光强度介于空转染组与空白对照组之间;证实HeLa细胞中存在Thoc1表达。ClC-3分布于细胞核和细胞质中,主要是细胞核中;Thoc1只分布于细胞核中;两者叠加后在细胞核呈黄色荧光,证实ClC-3和Thoc1在HeLa细胞核上存在共同定位。结论成功构建了pThoc1-DsRed2-N1真核表达载体;Thoc1与ClC-3共定位于HeLa细胞核,提示ClC-3可能参与细胞转录过程。 展开更多
关键词 Thoc1基因 真核表达载体 氯离子通道3 共定位 人宫颈癌细胞HeLa
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