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大鼠脂肪来源干细胞对紫外线造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用研究 被引量：1
1
作者 张金丽 刘志河 +4 位作者 汤文彬 熊喜峰 张志 曹雯娟 李孝建 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期600-606,共7页
目的探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对紫外线照射造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用。方法取3~4周龄SD大鼠(体质量100~120 g)腹股沟脂肪,利用Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养ADSCs并传代;取第3代细胞采用流式... 目的探讨大鼠脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对紫外线照射造成的软骨细胞DNA损伤的修复作用。方法取3~4周龄SD大鼠(体质量100~120 g)腹股沟脂肪,利用Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养ADSCs并传代;取第3代细胞采用流式细胞仪检测其表面相关标记,行成骨及成脂诱导鉴定其多向分化潜能。另取SD大鼠关节软骨,利用酶消化法分离培养软骨细胞并传代,并行甲苯胺蓝染色鉴定。取第3代软骨细胞,采用40 J/m^2剂量紫外线照射;照射后细胞分别以正常培养基培养(照射组)、以含ADSCs培养上清的培养基培养(ADSCs上清组)或与ADSCs共培养(ADSCs组)24h。以不进行紫外线照射的正常第3代软骨细胞作为对照(对照组)。采用MTS法检测细胞增殖情况,免疫荧光染色、Western blot法检测软骨细胞DNA损伤标志蛋白磷酸化组蛋白2A变异体(phosphorylatedhistone family 2A variant,γH2AX)的表达情况。结果经流式细胞仪检测及成骨、成脂诱导鉴定,所培养细胞为ADSCs。对照组、照射组及ADSCs上清组吸光度(A)值分别为2.20±0.10、1.34±0.04、1.57±0.06,照射组及ADSCs上清组显著低于对照组,照射组显著低于ADSCs上清组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光染色示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白荧光强度明显弱于照射组,ADSCs组和ADSCs上清组则无明显区别。Western blot法检测示,照射组、ADSCs上清组及ADSCs组γH2AX蛋白相对表达量均明显高于对照组,但ADSCs上清组及ADSCs组显著低于照射组,差异均有统计学意义(P<0.05);ADSCs组和ADSCs上清组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠ADSCs有助于恢复紫外线照射后的软骨细胞的增殖,降低DNA损伤标志蛋白γH2AX的表达,对紫外线照射所致软骨细胞损伤具有修复作用。 展开更多
关键词 脂肪来源干细胞 软骨细胞 辐射 修复 大鼠
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人增生性瘢痕成纤维细胞中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制 被引量：11
2
作者 况芳 张志 +3 位作者 陈宾 刘昌玲 赵元元 许志荣 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期634-638,共5页
目的探讨人增生性瘢痕Fb中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制。方法收集笔者单位2013年1—10月收治的8例烧伤后瘢痕增生需行手术治疗患者的增生性瘢痕组织及其手术切除的全层皮肤供皮区的正常皮肤组织。组织块培养法分离人增生性... 目的探讨人增生性瘢痕Fb中SnoN的表达及其参与增生性瘢痕形成的机制。方法收集笔者单位2013年1—10月收治的8例烧伤后瘢痕增生需行手术治疗患者的增生性瘢痕组织及其手术切除的全层皮肤供皮区的正常皮肤组织。组织块培养法分离人增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，并进行传代培养，取第3～5代细胞进行以下实验。（1）取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，蛋白质印迹法检测2种细胞中SnoN的蛋白表达。（2）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，RT—PCR法检测2种细胞中SnoNmRNA表达。（3）另取增生性瘢痕Fb和正常皮肤Fb，加入10ng／mLTGF-β1，刺激30min和1、2、6h后，同前检测未刺激及刺激后2种细胞中SnoN的蛋白及mRNA表达。对数据行单因素方差分析、独立样本t检验。结果（1）增生性瘢痕Fb中SnoN的蛋白表达量为0．020±0．003，明显低于正常皮肤Fb的0．032±0．005（t=7．19，P〈0．05）。（2）增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量为0．407±0．157，与正常皮肤Fb的0．339±0．095无明显差异（t=-1．29，P〉0．05）。（3）正常皮肤Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性增高，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显高于未刺激细胞（t值为2．27～27．89，P值均小于0．05）。增生性瘢痕Fb中SnoN蛋白表达量在TGF—β1刺激下呈时间依赖性降低，刺激30min和1、2、6h，细胞中SnoN蛋白表达量均明显低于未刺激细胞（t值为10．80—13．85，P值均小于0．05）。（4）正常皮肤Fb和增生性瘢痕Fb中SnoNmRNA表达量在TGF-β1刺激下均呈时间依赖性增高，2种细胞刺激30min和1、2、6h，其SnoNmRNA表达量均明显高于未刺激细胞（t值为18．16～58．22，P值均小于0．05）。结论增生性瘢痕Fh中SnoN蛋白表达减少，导致其对TGF-β1信号抑制作用减弱，从而放大了TGF-β1信号，可能参与了增生性瘢痕的形成。 展开更多
关键词 瘢痕 成纤维细胞 转化生长因子Β1 SNON
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中国医师协会烧伤科医师分会2018年年会纪要
3
作者 陈宾 李孝建 张志 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期917-918,共2页
由中国医师协会烧伤科医师分会主办的“中国医师协会烧伤科医师分会2018年年会”于2018年11月16-18日在广东省广州市顺利召开,300余名烧伤科医师代表出席了本次会议。会议紧密结合临床实际需求,以院士讲座、专题报告、专题讨论和疑难、... 由中国医师协会烧伤科医师分会主办的“中国医师协会烧伤科医师分会2018年年会”于2018年11月16-18日在广东省广州市顺利召开,300余名烧伤科医师代表出席了本次会议。会议紧密结合临床实际需求,以院士讲座、专题报告、专题讨论和疑难、复杂病例讨论为主。针对我国烧伤专科的发展现状和面临挑战、烧伤专科医师培养的现状和问题等,特别邀请了相关专家做专题报告和进行讨论。会议期间召开了中国医师协会烧伤科医师分会换届选举大会,选举产生了第四届委员会,彭毅志教授当选会长。 展开更多
关键词 烧伤 会议 中国医师协会
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