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大规模多场景移动实验室新型冠状病毒核酸应急检测专家共识 被引量：10
1
作者 广州实验室新型冠状病毒核酸应急检测专家组 钟南山 +9 位作者 杨子峰 陈翊 邓小玲 邓小燕 关文达 梁晓丽 刘勇 罗雷 郑夔 郑磊 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第40期3271-3277,共7页
特定区域的大规模核酸筛查是发现社区潜在传染源,切断传播链条,评估防控策略、阻断措施和效果的最有效手段,其目的在于实现对新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)病例的早发现、早报告、早隔离、早治疗。广州实验室新型冠状病毒核酸应急检... 特定区域的大规模核酸筛查是发现社区潜在传染源,切断传播链条,评估防控策略、阻断措施和效果的最有效手段,其目的在于实现对新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)病例的早发现、早报告、早隔离、早治疗。广州实验室新型冠状病毒核酸应急检测专家组在国家和地方性技术指导文件的基础上,总结气膜实验室和全集成车载移动实验室在新型冠状病毒核酸应急大筛查实际操作过程中积累的经验,融合最新的检测技术临床应用进展,联合编写《大规模多场景移动实验室新型冠状病毒核酸应急检测专家共识》,分别从总体规划、标本采集运输与信息管理、实验室检测管理、安全管理、资源保障五个方面为各个地方政府部门、医疗与疾控机构以及第三方检验机构,提供一个实用、科学、规范的参考组织方案,向国内外推广新冠肺炎疫情大规模筛查统筹管理方面的宝贵经验。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 大规模筛查 移动实验室 核酸 应急检测
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三种甲型流感病毒抗原POCT的应用比较
2
作者 丁信 刘勇 +7 位作者 黄文靖 吴秋保 伍时冠 潘思华 陈立 杨子峰 邓小燕 关文达 《热带医学杂志》 CAS 2024年第2期176-180,共5页
目的比较甲型流感病毒抗原即时检验(POCT)免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法的临床诊断效能。方法以q RT-PCR为诊断标准,比较3种甲型流感病毒抗原POCT对甲型流感病毒的检出限、分析特异性和在临床样本检测中的诊断灵敏度和诊断... 目的比较甲型流感病毒抗原即时检验(POCT)免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法的临床诊断效能。方法以q RT-PCR为诊断标准,比较3种甲型流感病毒抗原POCT对甲型流感病毒的检出限、分析特异性和在临床样本检测中的诊断灵敏度和诊断特异性。结果免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法对H1N1pdm09的检出限分别为1∶10000、1∶1000和1∶100,对季节性流感H1N1、H1N1(PR8株)、H3N2(Aichi株)、禽流感病毒H6N2和H7N3的检出限分别为1∶100000、1∶10000和1∶1000。检出限从低到高依次为免疫荧光法、乳胶免疫层析法和免疫胶体金法。3种甲型流感病毒抗原POCT对除甲流外的25种临床呼吸道感染常见病原体均无交叉反应。与qRT-PCR相比,免疫荧光法、乳胶免疫层析法、免疫胶体金法的诊断灵敏度分别为74.63%、56.72%和40.30%,免疫荧光法的诊断灵敏度高于乳胶免疫层析法,差异有统计学意义(χ^(2)=46.13,P<0.05),免疫荧光法的诊断灵敏度高于免疫胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=71.94,P<0.05),乳胶免疫层析法的诊断灵敏度高于免疫胶体金法,差异有统计学意义(χ^(2)=103.54,P<0.05)。免疫荧光法、乳胶免疫层析法、免疫胶体金法的诊断特异性分别为96.41%、100.00%、100.00%,受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为0.86、0.78和0.70。结论免疫荧光法在3种甲型流感病毒抗原POCT中表现最佳,具有最低的检出限、最高的诊断灵敏度和AUC,以及较好的分析特异性和诊断特异性,可满足临床对甲型流感病毒抗原的快速检测需求。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 即时检验 免疫荧光法 乳胶免疫层析法
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银翘解毒软胶囊体外抑制人冠状病毒229E及其介导的炎症的研究 被引量：3
3
作者 刘振海 杨春光 +4 位作者 雷标 王周琅 谢玉琪 杨子峰 谢斌 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期64-68,共5页
目的探究银翘解毒软胶囊(YQ)对人冠状病毒229E(HCoV-229E)的体外抑制作用。方法通过经典的体外细胞模型分析银翘解毒软胶囊的体外毒性及对HCoV-229E的抑制作用;通过空斑实验验证银翘解毒软胶囊对HCoV-229E的抑制作用;应用实时定量PCR法... 目的探究银翘解毒软胶囊(YQ)对人冠状病毒229E(HCoV-229E)的体外抑制作用。方法通过经典的体外细胞模型分析银翘解毒软胶囊的体外毒性及对HCoV-229E的抑制作用;通过空斑实验验证银翘解毒软胶囊对HCoV-229E的抑制作用;应用实时定量PCR法分析银翘解毒软胶囊对HCoV-229E介异的炎症因子表达水平的影响。结果银翘解毒软胶囊对人肝癌细胞的50%毒性浓度为(3 315±131)μg·mL^(-1),对HCoV-229E的50%抑制浓度为(361.9±36)μg·mL^(-1),选择指数为9.16。空斑实验表明银翘解毒软胶囊2 mg·mL^(-1)几乎可完全抑制病毒复制(P<0.001)。银翘解毒软胶囊在2 mg·mL^(-1)浓度作用下,可明显抑制由冠状病毒HCoV-229E感染介导的炎症因子如趋化因子(C-C基元)配体5(CCL-5,P<0.001)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1,P<0.001)、白细胞介素6(IL-6,P<0.001)、白细胞介素8(IL-8,P<0.001)和肿瘤坏死因子α(TNF-α,P<0.001)核酸的升高。结论体外实验显示银翘解毒软胶囊可抑制人冠状病毒HCoV-229E的复制及其介导的炎症反应,具有作为抗冠状病毒药物的开发价值。 展开更多
关键词 银翘解毒软胶囊 人冠状病毒229E(HCoV-229E) 炎症因子 人肝癌细胞Huh7
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流感病毒即时检验研究进展
4
作者 丁信 伍圣桢 +1 位作者 杨子峰 关文达 《中华临床实验室管理电子杂志》 2022年第1期41-49,共9页
流行性感冒是由流感病毒引起的一种传播快、传染力强的人类呼吸道传染病,可在全球范围造成巨大的生命和财产损失。世界卫生组织已将开发针对呼吸道病毒的即时检验(POCT)列为优先事项。POCT对流感样患者进行快速、准确的诊断,对预防和控... 流行性感冒是由流感病毒引起的一种传播快、传染力强的人类呼吸道传染病,可在全球范围造成巨大的生命和财产损失。世界卫生组织已将开发针对呼吸道病毒的即时检验(POCT)列为优先事项。POCT对流感样患者进行快速、准确的诊断,对预防和控制流感病毒的传播以及减少重症病人的发生发展有重要意义。基于免疫学的流感病毒POCT快速、简便但灵敏度低,基于检测核酸的流感POCT方便快捷,弥补了免疫学POCT灵敏度低的缺点,未来通过优化成本效益可在临床POCT环境中大量应用。现对目前用于诊断流感病毒的正在应用和开发研究的POCT方法进行综述。 展开更多
关键词 流感病毒 即时检验
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2017—2021年广东地区基层医疗机构金黄色葡萄球菌临床分离株耐药谱分析
5
作者 林舒楠 党文强 +4 位作者 钟天 梁斯欣 张磊 唐晓华 袁文常 《中华临床实验室管理电子杂志》 2023年第3期139-144,150,共7页
目的回顾性分析金黄色葡萄球菌(SAU)临床分离株耐药谱特征,为临床治疗选择合理抗菌药物提供依据。方法收集2017年至2021年送检金域医学的广东地区临床分离的SAU,采用法国生物梅里埃VITEK®MS微生物质谱检测系统及Vitek-2 compact药... 目的回顾性分析金黄色葡萄球菌(SAU)临床分离株耐药谱特征,为临床治疗选择合理抗菌药物提供依据。方法收集2017年至2021年送检金域医学的广东地区临床分离的SAU,采用法国生物梅里埃VITEK®MS微生物质谱检测系统及Vitek-2 compact药物敏感性(简称药敏)分析系统进行细菌鉴定和药敏试验。用WHONET 5.6软件对病原菌的分布及耐药情况进行统计分析。结果共收集9713株非重复SAU,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)4959株,分离率为51.06%。SAU主要标本来源为痰液(41.50%)、伤口分泌物(31.87%)、脓液(8.87%)、咽拭子(5.34%)以及血(4.74%)。痰液、咽拭子、血、尿液、穿刺液及肺泡灌洗液MRSA分离率超过50.00%。SAU对青霉素(PEN)、苯唑西林(OXA)、红霉素(ERY)、克林霉素(CLI)耐药率>50.00%。多重耐药甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)2021年分离率为20.09%,并且呈现逐年递减的趋势。对PEN敏感的MSSA(MSSA-PENS)分离率呈现上升趋势。在MRSA中,有41.51%的菌株对10种抗生素耐药,12.54%的菌株对4种抗生素耐药,11.57%的菌株对5种抗生素耐药。MRSA对14种常见抗生素(组合)存在105种耐药谱,其中59种耐药谱分离到2株以上细菌,分离株超过100株的耐药谱有10种,分离率超过5%的优势耐药谱为耐药谱七:PEN/OXA/ERY/CLI/CIP;耐药谱八:PEN/OXA;耐药谱九:PEN/OXA/ERY/CLI;耐药谱十:PEN/OXA/TET/CIP/LEV/MXF/ERY/CLI/GEN。耐药谱七和耐药谱九的MRSA分离率呈现下降趋势,而耐药谱八和耐药谱十MRSA分离率呈现上升趋势。结论广东省基层医疗机构MRSA分离率较高,MSSA对PEN等抗生素敏感性增高,MRSA的耐药谱在发生变化。基层医疗机构需要加强院感监测、耐药检测等工作,同时提高医护人员防范意识,进一步合理规范地使用抗生素,防止SAU及MRSA的流行和暴发。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐药性 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 耐药谱
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青蒿素及其衍生物的抗病毒作用机制研究进展 被引量：7
6
作者 蔡雪君 关文达 +2 位作者 马钦海 秦聖乐 王新华 《现代药物与临床》 CAS 2022年第3期653-658,共6页
青蒿素提取于传统中药黄花蒿,具有强大的抗疟作用。随着研究的深入,青蒿素及其衍生物还被发现对疱疹病毒科、黄病毒科和冠状病毒科等不同病毒科的多种病毒具有抗病毒作用,并可以抑制病毒诱导的炎症反应。青蒿素及其衍生物抗病毒的可能... 青蒿素提取于传统中药黄花蒿,具有强大的抗疟作用。随着研究的深入,青蒿素及其衍生物还被发现对疱疹病毒科、黄病毒科和冠状病毒科等不同病毒科的多种病毒具有抗病毒作用,并可以抑制病毒诱导的炎症反应。青蒿素及其衍生物抗病毒的可能机制是烷基化宿主核因子κB(NF-κB)p65亚基的DNA结合域、抑制NF-κB p65的质核转运或产生活性氧或激活碳中心自由基调控宿主Keap1/Nrf2/ARE通路以抑制病毒复制,并通过抑制病毒诱导的NF-κB通路、ERK通路激活以减轻炎症反应。通过对青蒿素及其衍生物抗病毒可能的作用机制进行综述,以期为青蒿素抗新发病毒提供参考,促进老药新用。 展开更多
关键词 青蒿素 青蒿素衍生物 抗病毒 抗炎 核因子ΚB
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基于转录组学探讨阿比朵尔对HCoV-OC43感染诱导神经营养因子信号通路活化的影响
7
作者 陈琪敏 周红霞 +4 位作者 谢佩芳 李润峰 杨子峰 邱敏珊 沈利汉 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期81-89,共9页
目的采用转录组学技术分析阿比多尔(arbidol,ARB)对HCoV-OC43感染引起宿主信号通路活化的影响,并探讨ARB抗炎活性与其作用于神经营养因子信号通路的关系。方法用OC43感染HRT-18细胞,并以ARB进行干预。感染96 h后提取总RNA,进行转录组学... 目的采用转录组学技术分析阿比多尔(arbidol,ARB)对HCoV-OC43感染引起宿主信号通路活化的影响,并探讨ARB抗炎活性与其作用于神经营养因子信号通路的关系。方法用OC43感染HRT-18细胞,并以ARB进行干预。感染96 h后提取总RNA,进行转录组学分析,获得差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),开展基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,筛选出ARB可能作用的生物学过程及相关信号通路。进一步利用RT-qPCR方法验证ARB干预对神经营养因子信号通路关键分子表达的抑制作用。结果与病毒感染组相比,高、中和低剂量(6、2和0.67μg/mL)ARB干预分别显示出9459、4186和1744个DEGs。GO分析显示,ARB主要干预的生物学过程是共翻译蛋白膜靶向,作用的细胞组成为粘着斑和细胞-底物间连接,影响的分子功能为钙粘蛋白结合。KEGG分析发现,与冠状病毒感染相关的细胞凋亡信号通路和神经营养因子信号通路有明显富集,其中ARB对神经营养因子信号通路中的MAPK、PI3K和NF-κB通路分子有显著抑制作用。RT-qPCR检测显示,ARB对PIK3CA、AKT、TRAF-6、Bax、p38和c-JUN等分子的mRNA表达具有明显抑制作用。结论本研究提示了ARB应用于治疗冠状病毒感染引起神经炎症的可能性。 展开更多
关键词 转录组学 阿比多尔 HCoV-OC43 神经营养因子信号通路
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奇异变形杆菌modABC基因缺失株的构建及其生物学特性
8
作者 黄伊 丁信 +2 位作者 黄楠 陈灿雄 邓小燕 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期859-867,共9页
目的基于同源重组方法构建奇异变形杆菌钼酸盐转运蛋白编码基因modABC基因敲除株,并采用电感耦合等离子质谱法检测胞内钼含量,探究modABC基因对奇异变形杆菌生物学特性的影响。方法利用自杀载体pCVD442通过同源重组方法构建modABC基因... 目的基于同源重组方法构建奇异变形杆菌钼酸盐转运蛋白编码基因modABC基因敲除株,并采用电感耦合等离子质谱法检测胞内钼含量,探究modABC基因对奇异变形杆菌生物学特性的影响。方法利用自杀载体pCVD442通过同源重组方法构建modABC基因敲除株ΔmodABC,并通过PCR及Sanger测序鉴定;采用电感耦合等离子质谱法测定亲本株PMI和敲除株ΔmodABC胞内钼酸盐含量,比较亲本株PMI和敲除株ΔmodABC在体外有氧和厌氧条件下的生存能力。结果利用融合PCR成功将目的基因替换为卡那霉素抗性基因Kn,与自杀载体pCVD442重组并转导到奇异变形杆菌亲本株PMI,随后发生同源重组,modABC基因被敲除,通过PCR及Sanger测序分析证实基因组目的基因已缺失,成功构建了modABC基因敲除株ΔmodABC;敲除株ΔmodABC胞内钼含量约为1.22 mg/kg,明显低于亲本株PMI(1.46 mg/kg,P<0.001);亲本株PMI和敲除株ΔmodABC在LB液体培养基中具有相似的有氧生长曲线,二者在厌氧条件下细菌的增殖速率均明显下降,并且在硝酸盐存在的LB培养基中,敲除株ΔmodABC的厌氧生长受到明显抑制(P<0.005)。结论基于自杀载体pCVD442的同源重组可成功用于奇异变形杆菌modABC基因敲除,modABC基因参与奇异变形杆菌钼酸盐的摄取并与细菌厌氧硝酸盐生长相关。 展开更多
关键词 钼酸盐转运蛋白 同源重组 自杀载体 奇异变形杆菌
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人诺如病毒重组乳酸菌疫苗的制备及免疫效果评价
9
作者 曹颖雯 薛亮 +2 位作者 徐锐权 高珺珊 寇晓霞 《国际病毒学杂志》 北大核心 2024年第1期1-7,共7页
目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主... 目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主要衣壳蛋白(viral protein 1,VP1)的重组乳酸乳球菌,并评价其诱导机体产生黏膜免疫和体液免疫的能力.方法将HuNoV GⅡ.2型VP1基因片段无缝克隆至乳酸菌表达系统中,体外诱导表达目的蛋白VP1,并通过正交试验优化蛋白表达条件.对小鼠进行口服免疫后通过ELISA方法测定其血清和组织中的免疫因子水平.结果构建了一株针对HuNoV GⅡ.2型的新型重组乳酸乳球菌疫苗,口服免疫后可诱导小鼠产生NoV特异性IgG和IgA,并诱导产生黏膜免疫系统的主要效应分子sIgA.结论本研究构建的口服乳酸菌疫苗能够诱导小鼠产生针对NoV的先天性和获得性免疫,并产生对应的免疫分子.与被广泛用于研究的病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗相比,此口服疫苗还具有制备快捷、成本更低、运输方便的优势. 展开更多
关键词 人诺如病毒 口服疫苗 乳酸菌 VP1
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