丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法的建立 被引量：8

1

作者 谭玉华 孙勇 +1 位作者 吴道贫 陈建起 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2013年第9期97-101,共5页

目的建立丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法。方法采用丙型肝炎病毒基因重组多表位嵌合蛋白作为包被抗原,生物素标记抗原作为桥接抗原,链霉亲和素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,自... 目的建立丙型肝炎病毒抗体桥式双抗原夹心时间分辨荧光免疫分析法。方法采用丙型肝炎病毒基因重组多表位嵌合蛋白作为包被抗原,生物素标记抗原作为桥接抗原,链霉亲和素标记铕作为示踪物,配制以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液,自建方法的校准品以国家标准血清物质GBW(E)090047为溯源,应用桥式双抗原夹心法建立丙型肝炎病毒抗体时间分辨荧光免疫分析法。结果自建方法在0.031～4.00NCU/ml内,相关系数可达0.99;分析内和分析间变异系数均小于10%;灵敏度可达0.016NCU/ml;校准品的效价比在0.90～1.10,平均回收率为101.47%;与相关疾病的抗原或抗体无明显交叉反应,其表观浓度值均小于0.03NCU/ml;参考值为0.05NCU/ml;符合国家检定标准的要求;37℃恒温箱烘烤7d后检测性能无明显改变;与同类方法学比对符合性好。结论自建方法精密度好,灵敏度高,特异性强,准确性好,线性范围宽,符合率高,能满足临床检测需要。 展开更多

关键词 肝炎病毒属 双抗原夹心法 生物素亲和素法 时间分辨荧光免疫法

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基于G6PD/6GPD比值法的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒性能分析 被引量：5

2

作者 郭锐 朱丽东 +1 位作者 冯健明 徐倩 《黑龙江医药》 CAS 2016年第2期199-202,共4页

目的:对基于G6PD/6GPD比值法的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒进行性能分析。方法:从试剂盒灵敏度、重复性及与对照试剂盒进行临床对比方面评价试剂盒的性能。结果:试剂盒对G6PD和6PGD的分析灵敏度分别为0.03 U/g Hb和0.02μg/ml;20次... 目的:对基于G6PD/6GPD比值法的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒进行性能分析。方法:从试剂盒灵敏度、重复性及与对照试剂盒进行临床对比方面评价试剂盒的性能。结果:试剂盒对G6PD和6PGD的分析灵敏度分别为0.03 U/g Hb和0.02μg/ml;20次检测质控品C1和C2,变异系数分别为4.18%和6.12%;该试剂盒对1000例临床样本的敏感度、特异性及总符合率均为1.00,误诊率为0.001,漏诊率为0,P=1.000>0.05,差异无统计学意义。Kappa=0.962(P<0.01),广州丰华公司的试剂盒与对照试剂盒的临床检测结果具有高度的一致性。结论:广州丰华公司的试剂盒操作简单,结果可靠,由于该方法能检出G6PD缺乏症杂合子,弥补了荧光法检测G6PD缺乏症的不足,更适合推向市场。 展开更多

关键词 G6PD/6GPD比值法 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿筛查 试剂盒 出生缺陷

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孕母血清游离β绒毛膜促性腺激素时间分辨荧光免疫试剂盒的研制与评价 被引量：5

3

作者 谭玉华 廖思红 +7 位作者 霍道贵 李贵情 季涛 卢顺舵 罗建安 沈健 何海荣 冯健明 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期75-79,共5页

目的研制一种用于产前筛查孕母血清游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGβ）的时间分辨荧光免疫（TRFIA）试剂盒。方法采用2株freehCG13单克隆抗体（McAb），一株用于固相包被（3μg／ml），另一株用于标记铕（Eu3＋）制备Eu3＋-freehCG13M... 目的研制一种用于产前筛查孕母血清游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGβ）的时间分辨荧光免疫（TRFIA）试剂盒。方法采用2株freehCG13单克隆抗体（McAb），一株用于固相包被（3μg／ml），另一株用于标记铕（Eu3＋）制备Eu3＋-freehCG13MeAb，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，应用双抗体夹心法建立freehCGBTRFIA法，并对其进行性能评价。采用线性回归分析及配对t检验进行统计学分析。结果该试剂盒的剂量一反应曲线线性相关系数（r）达0．9990；分析内、分析间变异系数（CV）均小于10．00％；标准品各点实测值与标示值的偏差（DIFF）均小于5．00％；灵敏度不高于0．20ng／ml；以国家标准品为对照，标准品效价比在0．9130～1．100间；与人促甲状腺激素（hTSH）、人黄体生成素（hLH）、人卵泡刺激素（hFSH）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）交叉反应低；线性范围为2．00—200ng／ml；与同类国外试剂比对，线性回归方程为y=x＋0．0565，r=0．9771，检测结果间差异无统计学意义（t=0．1839，P〉0．05）；国内外同类仪器比对检测，线性回归方程为y=0．9894x＋0．0957，r=0．9995，检测结果间差异无统计学意义（t=-0．9669，P〉0．05）；室间质量评价实测值与靶值偏倚（-11．93％～7．01％）符合标准；干扰实验表明乙二胺四乙酸钾（EDTA．K2）≥0．54mmol／L、柠檬酸钠≥1．06mmol／L、草酸钾（K2C204H20）≥2．12mmol／L、氟化钠（NaF）≥29．76mmo]／L时，自制试剂盒检测结果明显偏低（干扰程度均〉10％），肝素≤150U／L、血红蛋白≤12g／L、三酰甘油≤21．54mmol／L和胆红素≤818txmol／L对该试剂盒检测结果无明显干扰（干扰程度均〈10％）；温度升高会使样本检测结果偏高。结论该试剂盒具有灵敏度高、特异性强、准确度好、线性范围宽等优点，与国外的同类产品性能相仿，� 展开更多

关键词 绒毛膜促性腺激素 Β亚单位 人 荧光免疫测定 铕

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自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的应用评价 被引量：5

4

作者 谭玉华 刘海平 +5 位作者 张正武 卢顺舵 吴木清 彭中华 朱延彬 吴道贫 《现代检验医学杂志》 CAS 2010年第2期66-68,共3页

目的为推动国内新生儿苯丙酮尿症（PKU）筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及，自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统，并对自建系统进行基本的分析性能进行评价。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）文件和相关文献，以labsys... 目的为推动国内新生儿苯丙酮尿症（PKU）筛查技术的发展和新生儿PKU筛查的普及，自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统，并对自建系统进行基本的分析性能进行评价。方法参考美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）文件和相关文献，以labsystems配套检测系统作为可溯源参比系统，对自建系统的精密度、灵敏度、线性进行评价，并用临床样本进行比对试验和偏倚评估，回归相关系数大于0．975，偏倚以中国卫生部临检中心苯丙氨酸室间质评的1／4允许系统误差（靶值±30％）作为检测系统可比性的临床接受标准；通过检测1353例正常新生儿样本，建立参考值，并对引用参考值进行确认。结果自建检测系统分析内、分析间不精密度均小于15％；检测灵敏度为0．55mg／dl；在1．00～15．00mg／dl内，回归系数r=0．9991；与参比系统比对试验回归方程为Y（自建）=1．0078X（参比）-0．0416，r=0．9987，相对偏倚小于7．50％。参考值可以直接引用2．00mg／dl作为切值判断。结论自建新生儿苯丙氨酸荧光定量检测系统的基本性能可以满足临床需要，值得推广应用。 展开更多

关键词 苯丙氨酸 荧光 检测系统 性能评价

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总甲状腺素时间分辨荧光免疫分析方法的建立 被引量：4

5

作者 谭玉华 何海荣 +1 位作者 卢顺舵 沈健 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期33-35,共3页

目的建立总甲状腺素（TT4）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）竞争检测法。方法用羊抗鼠IgG包板，对应的抗T4抗体（Anti-T4）为竞争抑制抗体，用Eu^3＋标记T4-BSA做标记物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，竞争法TrFIA检测人血清... 目的建立总甲状腺素（TT4）时间分辨荧光免疫分析（TrFIA）竞争检测法。方法用羊抗鼠IgG包板，对应的抗T4抗体（Anti-T4）为竞争抑制抗体，用Eu^3＋标记T4-BSA做标记物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，竞争法TrFIA检测人血清中的TT4。结果TT4-TrFIA的灵敏度达6．895nmol／L（1．000nmol／L=0．7778ng／ml）；批内CV为4．12％～5．62％。批间CV为5．58％～8．61％；特异性好；平均回收率为99．16％；线性范围在11．0～300．0nmol／L之间；热稳定性好；与TT4微粒子酶免疫分析技术（MEIA）比对，相关系数达0．9544。结论建立的TT4-TrFIA法具有灵敏度高，特异性强，稳定性好，测定范围宽，检测时间短和非放射性等优点，具有良好的应用价值。 展开更多

关键词 甲状腺素 时间分辨荧光免疫分析 竞争法

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葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒(荧光比值法)的研制 被引量：3

6

作者 周剑辉 周文英 +2 位作者 徐倩 冯健明 王毅 《诊断学理论与实践》 2016年第6期623-626,共4页

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）参与了磷酸戊糖代谢过程,催化还原氧化型辅酶Ⅱ（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP）[1]。作为红细胞中产生还原型辅酶Ⅱ（reduced nicotinamide adeni... 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）参与了磷酸戊糖代谢过程,催化还原氧化型辅酶Ⅱ（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADP）[1]。作为红细胞中产生还原型辅酶Ⅱ（reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH）的唯一方式,保护红细胞免受氧化损伤。G6PD活性降低或缺失称为G6PD缺乏症,是一种X连锁不完全显性遗传疾病,该病影响了全世界2~4亿人口的健康[2]。 展开更多

关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 新生儿筛查 试剂盒

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中孕期母血清产前筛查抑制素A检测室间质量调查结果分析 被引量：3

7

作者 杜雨轩 冯健明 +6 位作者 王薇 何法霖 钟堃 袁帅 刘佳丽 张志新 王治国 《中华围产医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期341-344,共4页

目的分析2018年中孕期母体血清产前筛查抑制素A检测室间质量调查结果,以改进和提高产前筛查实验室抑制素A检测的质量。方法卫生部临床检验中心于2018年3月向全国94家产前筛查实验室发放3个批号质控样本(批号201811~201813)。实验室自愿... 目的分析2018年中孕期母体血清产前筛查抑制素A检测室间质量调查结果,以改进和提高产前筛查实验室抑制素A检测的质量。方法卫生部临床检验中心于2018年3月向全国94家产前筛查实验室发放3个批号质控样本(批号201811~201813)。实验室自愿参加此次调查活动,并按照规定格式上报结果、测定方法、仪器和试剂等相关信息。采用Clinet EQA程序和Microsoft Excel 2010等软件,对各实验室检测结果进行统计分析,并对质控样本是否符合预期结果情况进行描述性评价。结果共有55家实验室回报结果,回报率为58.5%(55/94)。55家中,52家(94.5%)3个批号全部符合预期结果,3家(5.5%)3个批号均不符合预期结果,且各实验室3个批号质控样本检测结果的偏移均位于同一侧(2家所有的3个批号均为负向偏移,1家3个批号的检测结果均为正向偏移)。结论通过本次抑制素A检测室间质量调查结果发现大部分实验室均能获得满意的结果,但仍有部分实验室存在与预期不符合的结果。有必要将中孕期母血清产前筛查抑制素A纳入为正式的室间质量评价计划,定期监测其检测质量水平。 展开更多

关键词 抑制素类 产前诊断 临床实验室技术 质量控制 妊娠中期

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时间分辨荧光免疫法乙型肝炎病毒e抗原定量测定试剂盒的研制与性能评价 被引量：2

8

作者 谭玉华 曾华 +6 位作者 魏绍静 董梅 陈建起 袁国悦 李水珍 王佳佳 吴道贫 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第18期2242-2244,共3页

目的对自研时间分辨荧光免疫法(TRFIA)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量测定试剂盒进行性能评价。方法 2株单克隆抗体分别用于固相包被和铕标记,固相双抗体夹心二步分析法检测人血清HBeAg,并对自研试剂盒线性范围、精密度、分析灵敏度、特... 目的对自研时间分辨荧光免疫法(TRFIA)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量测定试剂盒进行性能评价。方法 2株单克隆抗体分别用于固相包被和铕标记,固相双抗体夹心二步分析法检测人血清HBeAg,并对自研试剂盒线性范围、精密度、分析灵敏度、特异度等进行评价,与对照试剂盒平行检测1 020例样本,检验结果采用线性回归分析,一致性采用Kappa检验。结果自研试剂盒线性范围为0.60～160 NCU/mL,相关系数达0.99,批内和批间变异系数均小于10%,灵敏度达0.05NCU/mL,检测国家标准物质或自制参考品的效价比为0.90～1.10,检测国家参考品符合国家的质量检定标准,37℃恒温箱烘烤6d后检测性能无明显改变,与同类试剂检测结果线性相关系数达0.95,临床研究试验总符合率达100%,Kappa指数为1。结论自研试剂盒精密度好、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、符合率高,可取代对照试剂盒,值得推广应用。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫法 乙型肝炎病毒E抗原 试剂盒 诊断

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时间分辨荧光免疫法定量测定孕妇血清中甲胎蛋白含量 被引量：2

9

作者 谭玉华 霍道贵 +1 位作者 廖思红 谭子军 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2010年第10期193-197,共5页

目的探讨孕妇血清甲胎蛋白(MSAFP)含量与孕周、孕妇体质量和孕妇年龄的关系。方法自建MSAFP时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)并对其进行评价,采用自建方法定量检测孕妇血清3711例,建立实验室参考值,分析AFP浓度与孕周、孕妇体质量和孕妇... 目的探讨孕妇血清甲胎蛋白(MSAFP)含量与孕周、孕妇体质量和孕妇年龄的关系。方法自建MSAFP时间分辨荧光免疫测定法(TRFIA)并对其进行评价,采用自建方法定量检测孕妇血清3711例,建立实验室参考值,分析AFP浓度与孕周、孕妇体质量和孕妇年龄的关系。结果自建AFP-TRFIA方法灵敏度优于1.0U/ml,线性范围为1.00～1000.00U/ml,分析内、分析间变异系数(CV)分别不超过10.0%、15.0%,与国外同类试剂比对结果相关性好(r=0.9856)。在13～13周+6d,14～14周+6d,15～15周+6d,16～16周+6d,17～17周+6d,18～18周+6d,19～19周+6d,20～20周+6d,21～21周+6d各孕周的MSAFP含量中位数(M)分别为16.51U/ml,23.81U/ml,29.98U/ml,32.96U/ml,36.86U/ml,43.01U/ml,49.61U/ml,59.66U/ml,71.11U/ml。各孕周MSAFP平均浓度或浓度中位值与孕周呈线性正相关,r分别为0.9766,0.9832。各体质量段MSAFP浓度与孕妇体质量呈负相关,r在-0.9929～-0.9142。同孕周组内,各年龄段间的MSAFP浓度均数差异无统计学意义(P>0.05)。结论自建AFP-TRFIA法检测性能能满足临床应用的需要。MSAFP浓度与孕周和孕妇体质量密切相关,在产前筛查时要准确校对以上因素。 展开更多

关键词 甲胎蛋白类 遗传筛查 荧光免疫测定

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液相色谱-串联质谱法测定25-羟基维生素D 被引量：2

10

作者 潘晓芳 黄燕虹 +3 位作者 黄浩然 李海明 陈建起 吴静标 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第6期1010-1014,共5页

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定血清中25-OH VD2和25-OH VD3的方法。方法采用蛋白沉淀(PPT)和液液萃取(LLE)相结合的方法对待测的人血清样本进行前处理,然后取样本提... 目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)同时测定血清中25-OH VD2和25-OH VD3的方法。方法采用蛋白沉淀(PPT)和液液萃取(LLE)相结合的方法对待测的人血清样本进行前处理,然后取样本提取液用LC-MS/MS系统中进行分析。以25-OH VD同位素作为内标,通过对校准品中25-OH VD2和25-OH VD3的峰面积及其内标峰面积的比值对相应的校准品浓度拟合标准曲线,再将其他检测样本中25-OH VD2和25-OH VD3峰面积与相应内标峰面积的比值代入拟合的标准曲线方程中计算浓度,从而LC-MS/MS快速测定25-OH VD2和25-OH VD3的方法。结果本实验条件下可同时快速检测血清25-OH VD2和25-OH VD3,分析时间仅为2.8 min,特异性高,25-OH VD2和25-OH VD3的信噪比(S/N)最小为69,25-OH VD2和25-OH VD3分别在2~100 ng/mL和5~250 ng/mL范围内具有良好线性关系,峰面积比与对应的浓度线性相关系数均>0.999,重复性的变异系数CV最大为3.67%和3.39%。结论本研究成功建立了LC-MS/MS简单快捷、灵敏度高、准确测定血清25-羟基维生素D的方法。 展开更多

关键词 25-羟基维生素D 25-OH VD 液相色谱-串联质谱法

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新生儿苯丙氨酸荧光分析法的建立及其试剂盒的临床评价 被引量：2

11

作者 谭玉华 季涛 +7 位作者 李贵情 华丽 赵德华 欧明才 沈健 冯建明 何海荣 吴道贫 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2011年第6期1592-1596,共5页

目的建立新生儿苯丙氨酸荧光分析法并评价其试剂盒性能。方法以滤纸为载体制备标准品和质控品干血片,琥珀酸盐缓冲液、L-亮氨酸-L-丙氨酸二肽和茚三酮溶液作为反应液,硫酸铜为主要成分的溶液作为增强剂和稳定剂,应用荧光定量法检测新生... 目的建立新生儿苯丙氨酸荧光分析法并评价其试剂盒性能。方法以滤纸为载体制备标准品和质控品干血片,琥珀酸盐缓冲液、L-亮氨酸-L-丙氨酸二肽和茚三酮溶液作为反应液,硫酸铜为主要成分的溶液作为增强剂和稳定剂,应用荧光定量法检测新生儿滤纸干血片中的苯丙氨酸,并对方法进行性能评价。比对试验采用线性回归分析,配对计数资料结果的一致性采用Kappa检验分析。结果自研试剂的曲线线性相关系数r大于0.99,检测限不高于0.5mg/dl,标准品的效价比在0.9667～1.0060,批内、批间的变异系数均不高于10%,20mg/dl以内的常见的氨基酸干扰物对检测方法无明显影响;2～8℃保存的试剂可以稳定13个月;与国外试剂比对,回归方程为Y(自研试剂盒)=0.8565X(AniLabsystemsKIT)+0.1448,r=0.9853;不同包装规格的试剂比对检测,线性回归方程Y(96人份/盒)=1.0101X(960人份/盒)-0.0098,r=0.9854。国内外的检测仪器比对检测,回归方程为Y(TAKEEN)=1.011X(1420)-0.0058,r=0.9948;Y(TAKEEN)=1.027X(FLUOROSKAN)-0.011,r=0.9937;参考值定为2.0mg/dl;临床研究评价一致程度百分比可达99.81%。结论自研试剂盒灵敏度高,特异性强,准确度好,精密度好,稳定性良好,与AniLabsystems的试剂盒比对试验检测结果的相关性好,符合率高,不同包装规格的试剂盒分析性能一致,并且适合于国内外的检测仪器,自建方法和自研试剂盒能满足临床新生儿苯丙酮尿症筛查的需要。 展开更多

关键词 婴儿 新生 苯丙酮尿症 苯丙氨酸 荧光分析

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高糖环境下不同浓度黄芩苷对人肾小管上皮细胞凋亡的影响 被引量：1

12

作者 孙韬 黄竹娟 苏宁 《中国民族民间医药》 2016年第21期29-31,共3页

目的:研究在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预对人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:本研究通过体外实验,分别检测在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预24h、48h、72h上皮细胞增殖及凋亡情况,并同时设立阴性对照组(低糖组)、阳性对照组(高糖组)... 目的:研究在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预对人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法:本研究通过体外实验,分别检测在高糖环境下不同浓度黄芩苷干预24h、48h、72h上皮细胞增殖及凋亡情况,并同时设立阴性对照组(低糖组)、阳性对照组(高糖组)和阳性药物对照组(RGZ)。结果:24h、48h时间点,黄芩苷干预下的上皮细胞以促进增殖、抑制凋亡为主要表现;72h时间点,低剂量黄芩苷(50、100μmol/L)干预下的上皮细胞仍以促进增殖、抑制凋亡为主要表现,但高剂量黄芩苷组别(200μmol/L)干预下的上皮细胞以抑制增殖、促进凋亡为主要表现。在高糖环境下黄芩苷可抑制上皮细胞凋亡,与阳性药物对照(RGZ)的趋势一致。结论:黄芩苷可能通过抑制细胞凋亡的药理作用,发挥对肾脏的保护作用。 展开更多

关键词 黄芩苷 人肾小管上皮细胞(HK-2) 细胞凋亡 糖尿病

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TR-FIA与RIA法检测HBV标志物的比较分析 被引量：1

13

作者 张新利 谭玉华 党淑萍 《标记免疫分析与临床》 CAS 2004年第4期222-224,共3页

铕 (Eu)标记时间分辨荧光免疫技术 (TR -FIA)是新近推出的一种非放射性标记微量检测技术 ,将其与RIA比较分析 ,结果表明 :TR -FIA法较RIA法灵敏度高 ,测量范围宽 ,准确度相近 ;在乙型肝炎病毒标志物(HBVM)常见的 8种组合模式中 ,有 7种... 铕 (Eu)标记时间分辨荧光免疫技术 (TR -FIA)是新近推出的一种非放射性标记微量检测技术 ,将其与RIA比较分析 ,结果表明 :TR -FIA法较RIA法灵敏度高 ,测量范围宽 ,准确度相近 ;在乙型肝炎病毒标志物(HBVM)常见的 8种组合模式中 ,有 7种完全符合 (符合率为 10 0 % ) ,只有HBSAg +抗 -Hbe +抗 -HBc组合模式符合率为 73.3% ,而HBeAg值差异较大。 展开更多

关键词 铕 时间分辨荧光免疫分析 放射免疫分析 肝炎病毒 乙型

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血清甲胎蛋白和游离β绒毛膜促性腺激素双标记时间分辨荧光免疫试剂盒的研制与评价 被引量：1

14

作者 谭玉华 孙勇 +5 位作者 何海荣 吴道贫 张祥瑞 薛文勇 陈建起 袁国悦 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第3期119-122,共4页

目的研铺一种用于产前筛查的母血清甲胎蛋白（AFP）和游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGB）双标记时间分辨荧光免疫法（TrFIA）试剂盒。方法采用AFP单克隆抗体铕（Eu^3＋）标记物和freehCGis单克隆抗体钐（Sm^3＋）标记物作为示踪物，以... 目的研铺一种用于产前筛查的母血清甲胎蛋白（AFP）和游离β绒毛膜促性腺激素（freehCGB）双标记时间分辨荧光免疫法（TrFIA）试剂盒。方法采用AFP单克隆抗体铕（Eu^3＋）标记物和freehCGis单克隆抗体钐（Sm^3＋）标记物作为示踪物，以β-萘甲酰三氟丙酮为主要成分制备增强液，应用双抗体夹心法研制出hAFP和freehCG卢双标记时间分辨荧光免疫法试剂盒，并对其进行分析性能评价，平行比对试验采用线性回归分析。结果自制试刺盒AFP和freehCGβ的剂量-反应曲线线性相关系数（r）可达0．9990以上；批内、批间CV（％）均小于10．00％；AFP和freehCGP的灵敏度分别为0．12U／ml和0．08ng／ml；以国家标准品为对照，AFP和freehCG8的标准品效价比在0．900～1．100间；检测AFP和freehCG8的线性范围分别为0.25U／ml-500U／ml和0．2ng／ml-200ng／ml；试剂盒在4℃保存下可至少稳定12月；与国外同类试剂比对，AFP和freehCGβ的回归方程的线性相关系数（r）分剐为0．9730和0．9927。结论自制试剂盒具有灵敏度高、特异性强、准确度好、线性范围宽等优点，与国外的同类产品检测结果相关性好，能满足临床需要。 展开更多

关键词 甲胎蛋白 Β绒毛膜促性腺激素 铕 钐 时间分辨荧光免疫

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新生儿促甲状腺素的时间分辨荧光免疫分析方法及其试剂盒研制 被引量：1

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作者 谭玉华 冯健明 +4 位作者 卢顺舵 罗建安 李建国 季涛 李贵情 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第4期79-81,共3页

目的利用时问分辨荧光免疫分析（TrFIA）技术，建立新生儿促甲状腺素（NeonatalTSH）微量检测法，并研制其检测试剂盒。方法采用一株TSH单克隆抗体用于固相包被，另一株TSH单克隆抗体用于标记铕（Eu3＋），固相双抗体夹心时间分辨荧光... 目的利用时问分辨荧光免疫分析（TrFIA）技术，建立新生儿促甲状腺素（NeonatalTSH）微量检测法，并研制其检测试剂盒。方法采用一株TSH单克隆抗体用于固相包被，另一株TSH单克隆抗体用于标记铕（Eu3＋），固相双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法检测NeonatalTSH。结果自建的NeonatalhTSHTrFIA法灵敏度高，可达2．28btU／ml，且在测量范围内，自制试剂盒剂量一反应曲线的相关系数r达0．9987，与hLH，hFSH，HCG无明显交叉反应。分析内或分析间质控结果在靶值±25％内，室内低质控、高质控分析内和分析间变异系数（Cy）分别为7．12％和6．09％，7．82％和7．03％。与DELFIAONeonatalTSH试剂标准品进行准确性比对，实测值与标示效价比平均值为1．05。与DELFIA睁NeonatalTSH试剂比对试验符合率一致，相关系数r可达0．9822。试剂盒室间质评能力比对成绩100％。结论自建的NeonatalTSHTrFIA法具有灵敏度高，特异度强，准确度高，精密性好和非放射性等优点，具有良好的临床应用价值。 展开更多

关键词 新生儿 促甲状腺素 时间分辨荧光免疫分析

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时间分辨荧光免疫法检测HBVPreS1Ag试剂盒的应用评价 被引量：1

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作者 谭玉华 林艳芬 +5 位作者 廖思红 陈建起 孙勇 沈健 袁国悦 吴道贫 《现代检验医学杂志》 CAS 2013年第6期58-62,共5页

目的建立乙型肝炎病毒前S1抗原（HBVPreSlAg）时间分辨荧光免疫法（TrFIA），并对自研试剂盒检测PreSlAg的应用价值进行评价。方法对自研试剂盒的精密度、灵敏度、特异度、稳定性和参考值等分析性能指标进行评价；与对照试剂盒平行检测l... 目的建立乙型肝炎病毒前S1抗原（HBVPreSlAg）时间分辨荧光免疫法（TrFIA），并对自研试剂盒检测PreSlAg的应用价值进行评价。方法对自研试剂盒的精密度、灵敏度、特异度、稳定性和参考值等分析性能指标进行评价；与对照试剂盒平行检测l020例样本，检验结果的一致性采用Kappa检验。采用时间分辨荧光免疫法检测PreSlAg和乙型肝炎病毒标志物（HBVDNA），用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测HBVDNA，探讨PreSlAg与HBVDNA之间的相关性并对比三者在临床样本中的阳性检出率。结果自研试剂盒符合企业内部栓定标准，批内变异系数小于10％，自研试剂盒灵敏度较酶联免疫法高，有效期为12个月；自研试剂盒与对照试剂盒检测结果的总符合率达98．82％，Kappa指数达0．9763；350例样本中PreSlAg检出率与HBVDNA检出率差异无统计学意义（x2=1．69，P〉0．05）；在HBVDNA阳性时PreSIAg与HBeAg的检出灵敏度一致（x2=0．21，P〉0．05）；但在HBVDNA阴性时特异性PreSlAg不及HBeAg（x2=50．24，P〈0．05）。PreSlAg和HBeAg的检出率均随HBVDNA浓度升高而升高；PreSIAg和HBeAg联合应用检出率（66．00％）高于HBVDNA检出率（49．43％）（x2=20．88，P〈o．05）。结论PreSlAg是反应HBV复制和传染性的一个重要补充标志物。自研试剂盒在预示HBV的感染、复制和传染性等方面具有重要的价值。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 前S1抗原 时间分辨荧光免疫法

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时间分辨荧光免疫技术在HBV定量检测中的应用

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作者 党淑萍 张新利 谭玉华 《现代检验医学杂志》 CAS 2004年第5期46-47,共2页

目的　探讨铕标记时间分辨荧光免疫技术 ( TR- FIA)对乙型肝炎病毒标志物 ( HBV M)定量检测在临床的应用价值。方法　 TR- FIA法、放射免疫 ( RIA)法及 ELISA法检测并统计分析。结果　 TR- FIA法较 RIA法灵敏度高 ,测量范围宽 ,准确度... 目的　探讨铕标记时间分辨荧光免疫技术 ( TR- FIA)对乙型肝炎病毒标志物 ( HBV M)定量检测在临床的应用价值。方法　 TR- FIA法、放射免疫 ( RIA)法及 ELISA法检测并统计分析。结果　 TR- FIA法较 RIA法灵敏度高 ,测量范围宽 ,准确度相近。结论　在乙肝病毒标志物定量检测上 ,两种方法检测结果的临床符合性基本一致 ,TR- FIA较 RIA测量范围宽 ,标记物稳定 ,无放射性污染 ,具有良好的应用价值。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫 乙型肝炎病毒 定量检测

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TR-FIA对低浓度HBV标志物检出的临床价值 被引量：8

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作者 谭玉华 张新利 《标记免疫分析与临床》 CAS 2004年第3期186-188,共3页

关键词 临床价值 HBVM 检出 HBV标志物 乙肝 临床应用 低浓度 中国 作者

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时间分辨免疫荧光法检测结核感染T细胞释放γ-干扰素的方法建立及初步临床应用 被引量：8

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作者 谭玉华 朱应竹 +2 位作者 江燚 陶佳俊 吴能伟 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第6期21-25,共5页

目的建立一种检测结核感染T细胞释放γ-干扰素(IFN-γ)的时间分辨免疫荧光法(TRFIA)及初步临床应用。方法选择73例结核分枝杆菌阳性的肺结核患者,77例结核分枝杆菌阴性的肺结核患者,25例肺外结核患者,52例呼吸道疾病以外的非结核患者,7... 目的建立一种检测结核感染T细胞释放γ-干扰素(IFN-γ)的时间分辨免疫荧光法(TRFIA)及初步临床应用。方法选择73例结核分枝杆菌阳性的肺结核患者,77例结核分枝杆菌阴性的肺结核患者,25例肺外结核患者,52例呼吸道疾病以外的非结核患者,70例非结核呼吸道疾病(含肺癌)患者作为研究对象。利用早期分泌抗原靶蛋白6(ESAT6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)作为结核分枝杆菌特异性抗原,刺激患者全血标本中的结核分枝杆菌抗原特异性T细胞释放IFN-γ。植物血凝素L作为有丝分裂原,可非特异地刺激IFN-γ的产生。应用双抗体夹心TRFIA定量测定血浆中的IFN-γ浓度。评价TRFIA检测IFN-γ的精密度、检测低限、生物检测限、功能灵敏度、线性、准确度和特异度等分析性能指标,并与酶联免疫法(ELISA)进行比对试验研究。方法间结果差异比较采用χ~2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果TRFIA检测IFN-γ的捕获抗体包被浓度为5.0μg/ml,生物素标记抗体使用工作稀释度为1∶1 800和铕标记物使用工作稀释度为1∶500;实验内变异系数(CV)<5%,实验间CV<10%;检测低限0.69pg/ml,生物检测限0.90pg/ml,功能灵敏度1.80pg/ml;线性范围2～5 000pg/ml;检测国际生物标准参考品的偏倚不超过5%;其他常见的细胞因子和常见内源性干扰物(胆红素、血红蛋白和三酰甘油)样本对该方法检测结果无明显影响。TRFIA检测297例临床样本结果判断与临床诊断的一致率可达85.19%;TRFIA与ELISA的结果具有高度一致性(κ=0.9 931),且TRFIA与ELISA的阳性检出率结果差异无统计学意义(χ~2=0,P>0.05)。结论 TRFIA检测IFN-γ的精密度好,灵敏度高,线性范围宽,准确度好,特异度强,临床符合率高,能满足临床检测需要。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 T细胞 Γ-干扰素释放试验 时间分辨免疫荧光法 性能评估

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时间分辨荧光免疫法风疹病毒IgG抗体定量测定试剂盒的研制与性能评价 被引量：8

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作者 谭玉华 于婷 +6 位作者 李奕辉 董梅 杨伟国 岑千红 陈建起 孙勇 范主桥 《国际检验医学杂志》 CAS 2014年第4期472-474,共3页

目的建立风疹病毒（RV）IgG抗体时间分辨荧光免疫法（TrFIA）并研制其试剂盒。方法采用RV抗原作为包被抗原，铕标记羊抗人IgG作为示踪物，配制以β一萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，应用TrFIA法测定RVIgG，并对自研试剂盒的最低检... 目的建立风疹病毒（RV）IgG抗体时间分辨荧光免疫法（TrFIA）并研制其试剂盒。方法采用RV抗原作为包被抗原，铕标记羊抗人IgG作为示踪物，配制以β一萘甲酰三氟丙酮为主要成分的增强液，应用TrFIA法测定RVIgG，并对自研试剂盒的最低检测限、准确度、线性、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率、热稳定性进行评价，与同类试剂盒进行方法学比对试验，比对试验定量结果的等效性采用线性回归分析。结果自研试剂盒的最低检测限、重复性、阴性参考品符合率、阳性参考品符合率均能达到国家检定标准；检测国际参考品（10IU／mL）或企业校准品，其实测值与理论值相对偏差均在正负20．0％以内；在2．0～256．0IU／mL范围内，线性相关系数不低于0．9900；于37℃恒温箱放置6d后，检测性能无明显改变；临床研究评价一致程度百分比可达100％。结论自研试剂盒灵敏度高、特异性强、精密度好、准确度高、线性范围宽，与同类产品检测结果相关性好，能满足临床需要。 展开更多

关键词 时间分辨荧光免疫法 风疹病毒 IGG抗体

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