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巨噬细胞源性泡沫细胞适配子PM1的特异性 被引量:5
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作者 严鹏科 汪江波 +2 位作者 张慧 段才闻 李世煌 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期405-408,共4页
目的研究特异性寡核苷酸适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变结合的特异性,为动脉粥样硬化的体内靶向治疗提供实验依据。方法对适配子PM1进行FITC标记,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、... 目的研究特异性寡核苷酸适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变结合的特异性,为动脉粥样硬化的体内靶向治疗提供实验依据。方法对适配子PM1进行FITC标记,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、巨噬细胞源性泡沫细胞结合情况。采用高脂方法建立兔动脉粥样硬化模型,利用PCR方法和荧光显微镜观察适配子与动脉粥样硬化病变结合情况。结果适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变组织高度特异性结合,但不结合血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞和正常动脉组织。结论筛选出的适配子PM1能特异性结合巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变。 展开更多
关键词 适配子 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化病变
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Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子的初步研究 被引量:4
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作者 汪江波 李艳红 严鹏科 《中国医药科学》 2012年第24期25-28,共4页
目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细... 目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细胞和血管平滑肌细胞为反筛细胞,利用Cell SELEX技术筛选与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的寡核苷酸序列,并对最后一轮筛选结果进行克隆测序。结果 PCR的退火温度对PCR产物的量有显著的影响,退火温度由65℃提高为72℃时的产物量明显增加。利用生物素-链霉亲和素磁珠分离法获得了纯度高、产量大的ssDNA文库;经过18轮筛选后,成功获得了28个与预期大小相同的ssDNA序列。结论利用Cell SELEX技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子,为研发用于动脉粥样硬化的早期无创诊断试剂和靶向治疗药物奠定了基础。 展开更多
关键词 CELL SELEX技术 巨噬细胞源性泡沫细胞 适配子 随机ssDNA文库
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泡沫细胞寡核苷酸适配子PM2的特异性研究 被引量:2
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作者 林广庆 严鹏科 +3 位作者 汪江波 张慧 段才闻 李世煌 《中国医药科学》 2011年第12期20-23,共4页
目的研究寡核苷酸适配子对动脉粥样硬化病变组织结合的特异性。方法将前期研究获得的特异性适配子命名为PM2,FITC标记后,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、巨噬细胞源性泡沫细胞结合情况。采用高脂方法... 目的研究寡核苷酸适配子对动脉粥样硬化病变组织结合的特异性。方法将前期研究获得的特异性适配子命名为PM2,FITC标记后,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、巨噬细胞源性泡沫细胞结合情况。采用高脂方法建立兔的动脉粥样硬化模型。利用PCR方法和荧光显微镜观察适配子与动脉粥样硬化病变结合情况。结果 PM2适配子与巨噬细胞源性泡沫细胞高度特异性结合,但不与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞结合;PM2适配子能特异性结合动脉粥样硬化斑块组织,而不结合正常动脉组织结合。结论筛选出的PM2适配子特异性结合巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变。 展开更多
关键词 SELEX 特异性 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化病变
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泡沫细胞靶向适配子的体外筛选 被引量:2
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作者 严鹏科 汪江波 +2 位作者 张慧 段才闻 李世煌 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期459-464,共6页
目的筛选巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供实验依据。方法以80 mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育THP-1巨噬细胞72 h,建立泡沫细胞模型;利用指数富集配基的系统进化技术,从体外合成的随机单链DNA文库中筛... 目的筛选巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供实验依据。方法以80 mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育THP-1巨噬细胞72 h,建立泡沫细胞模型;利用指数富集配基的系统进化技术,从体外合成的随机单链DNA文库中筛选特异性寡核苷酸适配子;荧光显微镜观察寡核苷酸文库与泡沫细胞结合的特异性;克隆、测序确定适配子的序列并进行一级结构和二级结构分析。结果通过油红O染色和高效液相色谱分析,确定成功建立泡沫细胞模型;经过18轮的循环筛选,寡核苷酸文库仅与泡沫细胞结合,不再结合巨噬细胞、血管平滑肌细胞。测序鉴定出的所有适配子序列可以分为12个家族,没有共同的同源序列。二级结构分析表明,适配子主要形成茎环结构,这可能是适配子与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的结构基础。结论利用复合靶指数富集配基的系统进化技术成功筛选出巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子。 展开更多
关键词 指数富集配基的系统进化技术 巨噬细胞源性泡沫细胞 寡核苷酸适配子
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中西医结合治疗50例病毒性心肌炎患者的疗效观察
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作者 肖兵 麦泳仪 陈伟家 《贵阳中医学院学报》 2013年第2期191-192,共2页
目的:探讨中西医结合治疗病毒性心肌炎的临床疗效。方法:将入住我院且诊断为病毒性心肌炎的100例患者随机分为治疗组和对照组各50例,对照组给予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上配以自拟中药汤剂和中医辨证治疗,疗程均为4周... 目的:探讨中西医结合治疗病毒性心肌炎的临床疗效。方法:将入住我院且诊断为病毒性心肌炎的100例患者随机分为治疗组和对照组各50例,对照组给予西医常规治疗,治疗组在西医常规治疗的基础上配以自拟中药汤剂和中医辨证治疗,疗程均为4周。结果:疗程结束后,治疗组、对照组总有效率分别为92%、62%,治疗组疗效明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用中西医结合治疗病毒性心肌炎能提高疗效,安全性好,值得临床进一步推广。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 疗效 中西医结合
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Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化
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作者 严鹏科 赵慧 +2 位作者 黄煌 梅峥嵘 段才闻 《中国医药科学》 2011年第13期25-29,共5页
目的观察Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化,为肿瘤的治疗寻找新的靶点。方法体外培养血管内皮细胞免疫细胞化学法检测其Jagged 1的表达。建立鸡胚尿囊膜动态血管发育模型,免疫荧光化学和Westernblot检测不同发育时期... 目的观察Jagged 1在生理性和病理性新生血管形成中的表达变化,为肿瘤的治疗寻找新的靶点。方法体外培养血管内皮细胞免疫细胞化学法检测其Jagged 1的表达。建立鸡胚尿囊膜动态血管发育模型,免疫荧光化学和Westernblot检测不同发育时期尿囊膜血管中Jagged 1的表达。免疫组织化学和Western blot检测正常结直肠组织和大、中、小三种尺寸的结直肠癌肿块中Jagged 1的表达。结果 (1)免疫细胞化学结果显示,Jagged 1是细胞跨膜蛋白,表达于细胞膜上。(2)成功建立鸡胚尿囊膜动态血管发育模型,其免疫荧光和Western blot结果显示,Jagged 1随着血管的发育而表达,随血管密度、血流量增加而表达上调。(3)免疫组化结果显示Jagged 1在结直肠癌中广泛表达,而在正常皮肤及结直肠组织中表达较少,Jagged 1的表达量同肿瘤的体积有关。结论 Jagged 1在内皮细胞、血管发育初期和肿瘤新生血管中表达上调,表明其可能是新生血管形成的早期事件,参与诱导下游新生血管形成基因的表达。 展开更多
关键词 JAGGED 1 新生血管生成 鸡胚尿囊膜
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