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超高压加工对荔枝果肉中两种品质酶的影响 被引量：6
1
作者 李艳霞 张水华 +2 位作者 刘仲明 潘科 孙远明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期49-52,共4页
研究了超高压处理对荔枝果肉中可溶性蛋白质和过氧化物酶、果胶甲基酯酶的特性影响,同时研究了柠檬酸、L-抗坏血酸以及氯化钙与超高压共同处理对荔枝果肉中过氧化物酶(POD)和果胶甲基酯酶(PME)活性的影响。
关键词 超高压 荔枝果肉 可溶性蛋白质 过氧化物酶 果胶甲基酯酶
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抗克伦特罗单链抗体可溶性表达及特性鉴定 被引量：4
2
作者 王弘 潘科 +5 位作者 杨金易 张宏斌 王捷 武婕 雷红涛 孙远明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期332-335,共4页
目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELIS... 目的:表达抗克伦特罗(CBL)可溶性单链抗体(scFv)并进行抗原结合活性鉴定。方法:利用呈现scFv的重组噬菌体感染大肠杆菌HB2151,IPTG诱导可溶性scFv表达。渗透休克法提取菌体细胞周质腔中scFv。经SDS-PAGE、Western-Blotting以及间接ELISA法分析检测可溶性scFv的表达,并采用间接竞争ELISA法鉴定scFv的抗原结合活性。结果:细菌培养上清及周质腔中均有抗CBL可溶性scFv表达,其分子量约为29kD;上清液及周质腔中scFv效价分别为1:80,1:1600,能够被CBL竞争性抑制,IC50分别为0.78、0.95ng/ml。结论:可溶性抗CBLscFv在大肠杆菌HB2151中获得成功表达,表达的scFv与CBL具有很好的结合活性,可用于进一步建立CBL相应的免疫学检测方法。 展开更多
关键词 克伦特罗 单链抗体 可溶性表达
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Lipocalin文库的构建及与克百威有结合活性的小分子筛选 被引量：2
3
作者 武婕 杨金易 +6 位作者 张宏斌 潘科 王弘 雷红涛 郑霖 肖治理 孙远明 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期528-532,共5页
构建大菜粉蝶Lipocalin蛋白家族中的BBP蛋白突变文库,依据基因序列,分别设计10条和12条引物,通过PCR重叠延伸法得到包含随机突变蛋白BBP的基因序列,并重组到噬菌粒载体pCANTAB5E中构建Lipocalin突变文库,库容达到4.0×109.以偶联分... 构建大菜粉蝶Lipocalin蛋白家族中的BBP蛋白突变文库,依据基因序列,分别设计10条和12条引物,通过PCR重叠延伸法得到包含随机突变蛋白BBP的基因序列,并重组到噬菌粒载体pCANTAB5E中构建Lipocalin突变文库,库容达到4.0×109.以偶联分子BSA-克百威和OVA-克百威为靶分子,采用柱式和平皿式交叉法对Lipocalin文库进行了筛选,用竞争洗脱法洗脱特异结合活性的噬菌体.经过3轮筛选,从第3轮的洗脱液中随机挑选了10个重组克隆,用Dot-blotting法检测出K7anticalin分子能与克百威特异结合.为研发克百威的Anticalin类检测试剂盒提供了候选分子,也为拓宽Lipocalin文库在有害小分子检测方面的应用奠定了基础. 展开更多
关键词 Lipocalin文库 克百威 Anticalin分子
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以UPS构建的重组酿酒酵母表达载体及其稳定性研究 被引量：1
4
作者 王弘 郑文岭 +1 位作者 杨太成 冼江 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期4-7,共4页
采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性。实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性。同时,... 采用通用载体质粒融合系统UPS构建了一种以绿色荧光蛋白GFP为报告基因的酿酒酵母表达载体pYES-GFP,并研究了其在重组酿酒酵母中的稳定性。实验表明,所构建的附加型质粒pYES-GFP在经近100代传代后,仍未发生丢失,具有良好的稳定性。同时,通过实验验证了,UPS在进行表达载体构建时快速、简便、高效。 展开更多
关键词 酿酒酵母 表达载体 GFP基因 UPS 重组酿酒酵母 表达载体构建 酵母表达载体 稳定性研究 通用载体质粒融合系统 绿色荧光蛋白
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基因治疗发展研究现状 被引量：1
5
作者 王弘 郑文岭 《实用医学杂志》 CAS 2004年第10期1199-1200,共2页
关键词 基因治疗 临床方案 临床科学 遗传学研究 医学 基因转移 发病机制 发展研究 发展速度 现状
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