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基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的本科教学实验体系的创建与实践
被引量：
5
1
作者
张敏
宋亚坤
+5 位作者
吕沫
贾方兴
刘杰
卢希彬
王益林
余春红
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期135-143,共9页
CRISPR/Cas9是新兴的基因编辑技术,在生命科学研究中发挥着重要的作用。将它引入本科生的实验教学,使本科生了解这项前沿科研技术很有意义。我们创建了一个基于CRISPR/Cas9技术的本科教学实验体系。该实验体系侧重CRISPR/Cas9技术在哺...
CRISPR/Cas9是新兴的基因编辑技术,在生命科学研究中发挥着重要的作用。将它引入本科生的实验教学,使本科生了解这项前沿科研技术很有意义。我们创建了一个基于CRISPR/Cas9技术的本科教学实验体系。该实验体系侧重CRISPR/Cas9技术在哺乳动物细胞中的应用,选用一株基因组上被插入mCherry基因的小鼠胚胎成纤维细胞为实验材料,命名为STO-82。首先设计靶向mCherry的sgRNA,构建CRISPR-Cas9/sgRNA共表达质粒。经测序验证无误后,转染到STO-82细胞。采用流式细胞仪分析检测mCherry阴性和阳性两群细胞,分选出阴性单细胞并扩大培养。最后用测序检验单克隆细胞中靶标DNA序列的编辑情况。结果显示,靶位点有插入或缺失突变,说明体系创建成功。该实验体系将sgRNA设计、CRISPR-Cas9/sgRNA共表达质粒的构建、细胞转染、单细胞分选、单克隆细胞培养、测序序列分析等内容融合为一个综合实验,用于高年级本科生的实验教学。根据实际情况,将教学实践内容分解分块教学,也可以做完整性项目教学。本教学实践采用10人左右的小班分块教学,2人一组,经过3个班(共13组)的实践,绝大部分学生都能完成实验,得到预期结果。通过这个实验,学生加深了对CRISPR/Cas9技术的原理和实验流程的理解,锻炼了实验操作能力和严谨的科研思维,也使学生对该技术的医疗应用风险有了一些认识。
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关键词
生命科学研究综合实验
CRISPR/Cas9
本科生教育
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职称材料
探索细胞的“脚步”:黏着斑的动态结构
被引量：
1
2
作者
余聪
魏志毅
《生命的化学》
CAS
2023年第7期975-986,共12页
黏着斑是细胞与细胞外基质之间重要的黏附结构,对于细胞黏附、信号传导和细胞迁移起着重要作用。通过感知外界机械力并将其转化为细胞内信号,黏着斑使细胞能够感知和响应环境变化,其结构也在发生动态变化,如同人类行走的“脚步”。深入...
黏着斑是细胞与细胞外基质之间重要的黏附结构,对于细胞黏附、信号传导和细胞迁移起着重要作用。通过感知外界机械力并将其转化为细胞内信号,黏着斑使细胞能够感知和响应环境变化,其结构也在发生动态变化,如同人类行走的“脚步”。深入了解黏着斑的结构和功能,对于揭示细胞生理和病理过程具有重要意义。本文概述了黏着斑结构与功能的最新研究进展,着眼于黏着斑动态结构变化中蛋白-蛋白相互作用、机械力以及液-液相分离的调控,同时也对黏着斑研究领域中未来的研究方法和研究内容进行了展望。
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关键词
整合素
液-液相分离
蛋白-蛋白相互作用
细胞骨架
细胞黏附
细胞微环境
原文传递
题名
基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的本科教学实验体系的创建与实践
被引量：
5
1
作者
张敏
宋亚坤
吕沫
贾方兴
刘杰
卢希彬
王益林
余春红
机构
南方科技大学生物系
南方科技大学生物系
南方科技大学检测中心
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第1期135-143,共9页
基金
南方科技大学教学教改项目(Nos.ZLGC201603,JG201604,SJZLGC201701)。
文摘
CRISPR/Cas9是新兴的基因编辑技术,在生命科学研究中发挥着重要的作用。将它引入本科生的实验教学,使本科生了解这项前沿科研技术很有意义。我们创建了一个基于CRISPR/Cas9技术的本科教学实验体系。该实验体系侧重CRISPR/Cas9技术在哺乳动物细胞中的应用,选用一株基因组上被插入mCherry基因的小鼠胚胎成纤维细胞为实验材料,命名为STO-82。首先设计靶向mCherry的sgRNA,构建CRISPR-Cas9/sgRNA共表达质粒。经测序验证无误后,转染到STO-82细胞。采用流式细胞仪分析检测mCherry阴性和阳性两群细胞,分选出阴性单细胞并扩大培养。最后用测序检验单克隆细胞中靶标DNA序列的编辑情况。结果显示,靶位点有插入或缺失突变,说明体系创建成功。该实验体系将sgRNA设计、CRISPR-Cas9/sgRNA共表达质粒的构建、细胞转染、单细胞分选、单克隆细胞培养、测序序列分析等内容融合为一个综合实验,用于高年级本科生的实验教学。根据实际情况,将教学实践内容分解分块教学,也可以做完整性项目教学。本教学实践采用10人左右的小班分块教学,2人一组,经过3个班(共13组)的实践,绝大部分学生都能完成实验,得到预期结果。通过这个实验,学生加深了对CRISPR/Cas9技术的原理和实验流程的理解,锻炼了实验操作能力和严谨的科研思维,也使学生对该技术的医疗应用风险有了一些认识。
关键词
生命科学研究综合实验
CRISPR/Cas9
本科生教育
Keywords
comprehensive life science research experiment
CRISPR/Cas9
undergraduate education
分类号
Q789 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
探索细胞的“脚步”:黏着斑的动态结构
被引量：
1
2
作者
余聪
魏志毅
机构
南方科技大学生命科学学院
广东省
细胞
微
环境
与
疾病
研究
重点
实验室
出处
《生命的化学》
CAS
2023年第7期975-986,共12页
基金
国家自然科学基金项目(31500621,31870757,32170697)
深圳市科技创新委员会项目(JCYJ20200109141241950,ZDSYS20140509142721429)。
文摘
黏着斑是细胞与细胞外基质之间重要的黏附结构,对于细胞黏附、信号传导和细胞迁移起着重要作用。通过感知外界机械力并将其转化为细胞内信号,黏着斑使细胞能够感知和响应环境变化,其结构也在发生动态变化,如同人类行走的“脚步”。深入了解黏着斑的结构和功能,对于揭示细胞生理和病理过程具有重要意义。本文概述了黏着斑结构与功能的最新研究进展,着眼于黏着斑动态结构变化中蛋白-蛋白相互作用、机械力以及液-液相分离的调控,同时也对黏着斑研究领域中未来的研究方法和研究内容进行了展望。
关键词
整合素
液-液相分离
蛋白-蛋白相互作用
细胞骨架
细胞黏附
细胞微环境
Keywords
integrin
liquid-liquid phase separation
protein-protein interaction
cytoskeleton
cell adhesion
cell microenvironment
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的本科教学实验体系的创建与实践
张敏
宋亚坤
吕沫
贾方兴
刘杰
卢希彬
王益林
余春红
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
下载PDF
职称材料
2
探索细胞的“脚步”:黏着斑的动态结构
余聪
魏志毅
《生命的化学》
CAS
2023
1
原文传递
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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