乙醇对再生神经载脂蛋白的合成与分泌的影响 被引量：3

1

作者 李成军 《川北医学院学报》 CAS 1998年第3期1-4,共4页

本文检测了再生神经释放载脂蛋白Ｅ和Ａ１的量。把从含有乙醇的液体饲料喂养的大白鼠取得的再生神经，切成较小的节段培养后，测得释放入培养基中的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）的量，仅仅只有对照组的５０％，而载脂蛋白Ａ１（ａｐｏＡ１）... 本文检测了再生神经释放载脂蛋白Ｅ和Ａ１的量。把从含有乙醇的液体饲料喂养的大白鼠取得的再生神经，切成较小的节段培养后，测得释放入培养基中的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）的量，仅仅只有对照组的５０％，而载脂蛋白Ａ１（ａｐｏＡ１）的量几乎是对照组的２００％。释放入培养基中ａｐｏＥ减少的程度与神经中ｍＲＮＡ减少的程度一致。这样，慢性乙醇摄入影响再生神经ａｐｏＥ的合成是通过改变它的ｍＲＮＡ的水平所致。另一方面，ａｐｏＡ１的ｍＲＮＡ在实验组和对照组的神经中均不能检测出。由再生神经释放入培养基中的ａｐｏＡ１与培养前所含的量没有明显的差异。因此，由损伤神经释放的ａｐｏＡ１很可能是从血流而来的。而乙醇喂养的老鼠损伤神经中ａｐｏＡ１含量的增加，是由于增强了神经———血液屏障的通透性。载脂蛋白在损伤神经中的堆积很可能在神经再生过程中扮演一个重要的角色。 展开更多

关键词 乙醇 载脂蛋白E 再生神经 mRNA 乙醇性 多神经病

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重组P_(53)真核表达载体的构建 被引量：3

2

作者 李仁 任碧轩 +1 位作者 杨晓红 唐恩洁 《川北医学院学报》 CAS 1998年第1期1-4,共4页

为进一步探索Ｐ５３基因与机体发育、肿瘤发生的关系及其与细胞周期中其它调控因子的相互作用，我们采用粘性末端连接法构建了重组野生型Ｐ５３－ＰＸＴ１真核表达载体，并成功地转化Ｃａｃｌ２处理的ＲＲ１细胞，经多种方法鉴定表明... 为进一步探索Ｐ５３基因与机体发育、肿瘤发生的关系及其与细胞周期中其它调控因子的相互作用，我们采用粘性末端连接法构建了重组野生型Ｐ５３－ＰＸＴ１真核表达载体，并成功地转化Ｃａｃｌ２处理的ＲＲ１细胞，经多种方法鉴定表明其连接率为６９％，转化率为３９×１０３／μｇＤＮＡ。该重组载体的构建无疑将为肿瘤。 展开更多

关键词 P53基因 表达载体 构建 真核表达载体

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固定对用TUNEL技术原位检测细胞凋亡的影响 被引量：1

3

作者 彭彬 孔令淑 +5 位作者 张仁东 黄安培 唐恩洁 赵明才 康健 杨正伟 《川北医学院学报》 CAS 2001年第2期1-3,共3页

用TUNEL技术原位检测凋亡细胞对组织的处理方法较为敏感。本研究采用灌注固定及浸润固定处理的石蜡切片来比较固定处理对细胞凋亡检测的影响。结果显示成年大白兔睾丸 (正常及输精管结扎术后的 )内凋亡的生精细胞 ,在用 4%的多聚甲醛先... 用TUNEL技术原位检测凋亡细胞对组织的处理方法较为敏感。本研究采用灌注固定及浸润固定处理的石蜡切片来比较固定处理对细胞凋亡检测的影响。结果显示成年大白兔睾丸 (正常及输精管结扎术后的 )内凋亡的生精细胞 ,在用 4%的多聚甲醛先灌注固定然后浸润固定处理后可以检测到 ,仅用Bouin液浸润固定整个器官 2 4小时的方法检测不到凋亡细胞。尽管其原因不清楚 ,但该结果可能提示TUNEL法对凋亡细胞检测的敏感度高度依赖于固定处理情况 ,故对凋亡细胞的阴性检测结果的解释应慎重。 展开更多

关键词 细胞凋亡 敏感度 TUNEL 石蜡切片 固定处理

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缺铁与胆囊结石形成关系的研究

4

作者 彭祥玉 李成军 +2 位作者 王城 蒋兴亮 唐中 《川北医学院学报》 CAS 2000年第1期13-14,共2页

本文检测了 110例 (男 32 ,女 78)胆囊结石病人的血清铁水平 ,低于正常值者 31例 ,占 2 8 2 % ;其中女性 2 5例 ,占80 6 % ,男性仅 6例 ,占 19 4%。铁在肝脏的酶代射过程中扮演着重要角色 ,因此 ,缺铁可能改变胆固醇的代谢 ,增强胆囊... 本文检测了 110例 (男 32 ,女 78)胆囊结石病人的血清铁水平 ,低于正常值者 31例 ,占 2 8 2 % ;其中女性 2 5例 ,占80 6 % ,男性仅 6例 ,占 19 4%。铁在肝脏的酶代射过程中扮演着重要角色 ,因此 ,缺铁可能改变胆固醇的代谢 ,增强胆囊结石的形成。 展开更多

关键词 缺铁 胆固醇 胆囊结石

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重组P_(53)基因在HepG-2中的表达及作用 被引量：2

5

作者 任碧轩 李仁 +7 位作者 冯莉 唐恩洁 杨晓红 赵明才 杨健 张紫福 张艳艳 魏祥云 《川北医学院学报》 CAS 1999年第2期1-4,共4页

为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用，本文用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法，将本室构建的ＰＸＴ１Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系内，经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实，外源性Ｐ５３ 基因已在Ｈｅ... 为进一步探索正常Ｐ５３ 对肿瘤细胞增殖的抑制作用，本文用磷酸钙ＤＮＡ共沉淀法，将本室构建的ＰＸＴ１Ｐ５３ 真核表达细胞转移至ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系内，经斑点杂交技术和间接免疫荧光技术证实，外源性Ｐ５３ 基因已在ＨｅｐＧ２ 细胞中稳定表达，导入的Ｐ５３基因亦能抑制ＨｅｐＧ２ 肝癌细胞系增殖并诱导其凋亡。实验结果提示正常Ｐ５３ 基因可成为治疗不同肿瘤的重要靶分子之一。 展开更多

关键词 重组P53基因 HEPG-2细胞 表达 肿瘤 基因治疗

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β-地中海贫血基因治疗研究进展

6

作者 汪小敏 杜传书 顾军 《国外医学（遗传学分册）》 1998年第6期297-301,共5页

基因治疗是根治β地贫的唯一途径。本文就目前对β地贫基因治疗研究的β珠蛋白基因转移治疗、药物的基因治疗、反义核酸技术的治疗作了较为系统的综述，着重介绍了ＲＶ、ＡＡＶ载体介导β基因导入β地贫患者造血干／祖细胞以获得细胞和... 基因治疗是根治β地贫的唯一途径。本文就目前对β地贫基因治疗研究的β珠蛋白基因转移治疗、药物的基因治疗、反义核酸技术的治疗作了较为系统的综述，着重介绍了ＲＶ、ＡＡＶ载体介导β基因导入β地贫患者造血干／祖细胞以获得细胞和红系组织的稳定整合和正常表达、ＨＵ等药物激活γ珠蛋白基因表达及提高β６５４突变基因转录本正常剪接水平、反义核酸修复β６５４突变基因转录本正常剪接等研究的新进展及其作用机制和临床治疗的探索。 展开更多

关键词 地中海贫血 基因治疗 研究进展

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干扰素及Fas抗体对肝癌细胞的细胞毒性研究

7

作者 杨晓红 任碧轩 《中国实验临床免疫学杂志》 1999年第3期34-35,共2页

应用基因重组人干扰素γ和抗Ｆａｓ抗体体外处理人肝癌细胞系ＨｅＰＧ－２，采用ＭＴＴ法检测各处理组和对照组细胞的凋亡。结果表明：ＩＦＮ－γ诱导ＨｅＰＧ－２２４ｈ后，再加入Ｆａｓ抗体，发现对ＨｅＰＧ－２细胞的细胞毒作用显著... 应用基因重组人干扰素γ和抗Ｆａｓ抗体体外处理人肝癌细胞系ＨｅＰＧ－２，采用ＭＴＴ法检测各处理组和对照组细胞的凋亡。结果表明：ＩＦＮ－γ诱导ＨｅＰＧ－２２４ｈ后，再加入Ｆａｓ抗体，发现对ＨｅＰＧ－２细胞的细胞毒作用显著高于ＩＦＮ－γ和Ｆａｓ抗体单独作用，提示ＩＦＮ－γ能促进抗Ｆａｓ抗体对肝癌细胞的细胞毒性，为ＩＦＮ－γ协同Ｆａｓ抗体治疗肿瘤提供了一定的实验依据。 展开更多

关键词 IFN-Γ 抗Fas抗体 HEPG-2 MTT法 肝癌

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原核表达载体pKpL5的构建及应用研究

8

作者 张仁刚 敬保迁 张洁 《川北医学院学报》 CAS 2008年第1期8-12,共5页

目的构建基因工程生产用高效原核融合表达质粒载体。方法在原核表达质粒pKpL4起始密码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s RNA3端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,构建成原核表达质粒pKpL5,并将人生存素单体、双体及利什曼原虫L... 目的构建基因工程生产用高效原核融合表达质粒载体。方法在原核表达质粒pKpL4起始密码下游嵌入人工合成的六聚组氨酸编码区、16s RNA3端互补区、凝血酶识别位点编码区接头,构建成原核表达质粒pKpL5,并将人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因编码区分别克隆入pQE32、pKpL4和pKpL5进行表达,SDS-PAGE电泳分析各目的蛋白的表达量。结果人生存素单体、双体及利什曼原虫LACK抗原基因读码框在pQE32和pKpL4质粒载体内均不表达,而在pKpL5内,其目的蛋白表达量分别占细菌总蛋白量的5.1%,19%和35%。结论pKpL5可用作通用原核高效表达质粒载体表达各种目的基因。 展开更多

关键词 原核表达 质粒 pKpL5

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结核杆菌多价核酸疫苗的构建及其免疫原性的初步研究 被引量：8

9

作者 谢勇恩 《川北医学院学报》 CAS 2007年第1期7-10,共4页

目的构建包含结核杆菌3种抗原蛋白Ag85A、ESAT-6和CFP-10真核表达质粒的多价DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析。方法PCR扩增获得结核杆菌ag85 a、esat-6和cfp-10基因片段,分别克隆入真核表达质粒VR1020的BamHⅠ位点构建... 目的构建包含结核杆菌3种抗原蛋白Ag85A、ESAT-6和CFP-10真核表达质粒的多价DNA疫苗,并对其在小鼠体内的免疫原性进行初步分析。方法PCR扩增获得结核杆菌ag85 a、esat-6和cfp-10基因片段,分别克隆入真核表达质粒VR1020的BamHⅠ位点构建DNA疫苗,以此多价DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测小鼠体内的特异性抗体应答和细胞免疫反应,并与BCG免疫组、质粒VR1020免疫组和生理盐水对照组相比较。结果多价DNA疫苗免疫小鼠后能产生特异性的细胞和体液免疫应答,DNA疫苗免疫组小鼠脾细胞IFN-γ的表达量显著高于BCG免疫组,而DNA疫苗免疫组小鼠所产生的特异性抗体水平低于BCG免疫组。结论成功构建了结核杆菌多价DNA疫苗,免疫小鼠后检测到特异性细胞和体液免疫应答。 展开更多

关键词 结核杆菌 多价核酸疫苗 免疫原性

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第三代反义核酸技术—肽核酸 被引量：3

10

作者 谢勇恩 《川北医学院学报》 CAS 2007年第4期309-313,共5页

肽核酸是一种人工合成的DNA分子的类似物,被称之为第三代反义核酸,是目前反义核酸技术领域研究的前沿和热点。本文简要叙述了肽核酸的分子结构、理化性质和杂交特性以及肽核酸在基因表达调控、分子生物学实验研究和疾病基因治疗研究等... 肽核酸是一种人工合成的DNA分子的类似物,被称之为第三代反义核酸,是目前反义核酸技术领域研究的前沿和热点。本文简要叙述了肽核酸的分子结构、理化性质和杂交特性以及肽核酸在基因表达调控、分子生物学实验研究和疾病基因治疗研究等方面的应用情况。 展开更多

关键词 肽核酸 基因表达调控 基因治疗

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鲍曼不动杆菌疫苗的研究进展 被引量：3

11

作者 郭三君 谢勇恩 《微生物学免疫学进展》 2017年第6期75-79,共5页

鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌,同时也是医院获得性感染的主要致病菌之一。由于其广泛的耐药性,普通抗生素对其治疗效果已不明显。近年来,国内外学者尝试通过研制抗菌疫苗的手段来防治鲍曼不动杆菌感染,主要有灭... 鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌,同时也是医院获得性感染的主要致病菌之一。由于其广泛的耐药性,普通抗生素对其治疗效果已不明显。近年来,国内外学者尝试通过研制抗菌疫苗的手段来防治鲍曼不动杆菌感染,主要有灭活全菌体疫苗、外膜囊泡、重组蛋白亚单位疫苗、荚膜多糖候选疫苗、联合疫苗等。现就鲍曼不动杆菌疫苗的研究进展进行了综述。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 灭活全菌体疫苗 外膜囊泡 重组蛋白亚单位疫苗 荚膜多糖候选疫苗 联合疫苗

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小干扰RNA抑制bcl-xL表达对食管癌细胞化疗敏感性的影响

12

作者 杨爱琼 王朝莉 +1 位作者 李雪婷 谢勇恩 《中国癌症防治杂志》 CAS 2011年第2期106-109,共4页

目的探讨凋亡抑制分子bcl-xL表达下调对食管癌细胞化疗敏感性的影响。方法根据人bcl-xL基因序列设计和合成3对小干扰RNA,将其转染于体外培养的人食管癌细胞株Eca-109,通过RT-PCR和Western-blotting检测bcl-xL的表达情况,筛选出对bcl-xL... 目的探讨凋亡抑制分子bcl-xL表达下调对食管癌细胞化疗敏感性的影响。方法根据人bcl-xL基因序列设计和合成3对小干扰RNA,将其转染于体外培养的人食管癌细胞株Eca-109,通过RT-PCR和Western-blotting检测bcl-xL的表达情况,筛选出对bcl-xL表达抑制作用最强的小干扰RNA,通过MTT法检测小干扰RNA转染细胞和对照细胞在不同浓度顺铂和紫杉醇作用下的细胞增殖抑制率,计算出半数抑制浓度IC50值并进行对比分析。结果食管癌细胞转染靶向bcl-xL的3种小干扰RNA后,bcl-xL mRNA和蛋白表达均显示出不同程度下调,其中siRNA1对癌细胞bcl-xL表达的抑制作用最强。siRNA1转染食管癌细胞后可使顺铂和紫杉醇对癌细胞的IC50值由转染前的(31.4±4.3)μmol/L和(35.3±6.1)μmol/L下降至转染后的(8.4±3.3)μmol/L和(15.1±4.7)μmol/L(P<0.01)。结论小干扰RNA抑制bcl-xL表达可增强食管癌细胞对顺铂和紫杉醇化疗的敏感性。 展开更多

关键词 BCL-XL 小干扰RNA 化疗敏感性 顺铂 紫杉醇

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DNA免疫法制备抗Prohibitin多克隆抗体的实验研究

13

作者 谢勇恩 唐恩洁 任碧轩 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期647-648,共2页

Prohibitin（PHB）是近年来发现的一种具有多种生物学功能的蛋白分子,可参与细胞周期调控、蛋白质折叠、转录调节等,PHB与肿瘤发生发展的关系存在两种截然不同的观点,PHB最初被认为是肿瘤发生和细胞增殖的负调节因子,但大量研究发现,PH... Prohibitin（PHB）是近年来发现的一种具有多种生物学功能的蛋白分子,可参与细胞周期调控、蛋白质折叠、转录调节等,PHB与肿瘤发生发展的关系存在两种截然不同的观点,PHB最初被认为是肿瘤发生和细胞增殖的负调节因子,但大量研究发现,PHB在多种肿瘤组织中高表达,有研究证明PHB还具有抗凋亡作用,其确切的分子功能尚有待于进一步深入研究。 展开更多

关键词 PROHIBITIN DNA免疫 多克隆抗体

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