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脂联素对高糖环境下足细胞内质网应激和细胞骨架的影响 被引量：6
1
作者 王艳红 田继华 +3 位作者 郭海秀 米洋 李佳明 李荣山 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1092-1096,共5页
目的：探讨高糖环境下脂联素对人足细胞内质网应激凋亡途径及细胞骨架的影响及其机制。方法人条件永生足细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组、高糖＋脂联素组，实时定量PCR法检测内质网应激分子糖调节蛋白78（ GPR78）、C／EB... 目的：探讨高糖环境下脂联素对人足细胞内质网应激凋亡途径及细胞骨架的影响及其机制。方法人条件永生足细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组、高糖＋脂联素组，实时定量PCR法检测内质网应激分子糖调节蛋白78（ GPR78）、C／EBP同源蛋白（ CHOP ）及caspase 12 mRNA的表达，Western印迹法检测其蛋白的表达，流式细胞仪检测足细胞凋亡；实时定量PCR法检测细胞骨架蛋白desmin、瞬时受体电势C（TRPC）6 mRNA的表达，Western印迹法检测其蛋白的表达，免疫荧光染色法检测足细胞骨架的变化。结果（1）流式细胞仪检测到高糖组足细胞凋亡率显著高于其他3组（26.15％±1.38％比2.39％±0.58％、4.84％±0.87％、16.71％±1.15％，均P＜0.05），同时内质网应激经典分子GPR78、CHOP 及caspase 12 mRNA及蛋白的表达均显著上调（均 P ＜0.05）；高糖＋脂联素组足细胞凋亡率较高糖组低10％，差异有统计学意义（ P＜0.05），且GPR78、CHOP及caspase 12 mRNA及蛋白水平均低于高糖组（均P＜0.05）。（2）在高糖环境下，细胞骨架蛋白desmin、TRPC6 mRNA及蛋白表达均较正常组高（均 P ＜0.05），而脂联素干预可抑制 desmin、TRPC6高表达（ P＜0.05）。同时免疫荧光法检测可见高糖刺激可导致足细胞骨架蛋白微丝肌动蛋白紊乱及张力纤维消失，高糖＋脂联素组这一现象明显改善。结论脂联素对高糖环境下的足细胞有保护作用，其机制可能是通过抑制内质网应激诱导的凋亡途径和减轻细胞骨架的损伤。 展开更多
关键词 足细胞 葡萄糖 内质网 细胞凋亡 细胞骨架
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慢性肾脏病患者血浆中介素的变化及其与同型半胱氨酸、胱抑素-C的相关性研究 被引量：5
2
作者 陈平 周芸 +4 位作者 周芩 王清华 李荣山 文涛 毛敏 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2013年第21期37-40,共4页
目的：探讨中介素（IMD）在慢性肾脏病（CKD）时的水平变化及其与同型半胱氨酸（Hcy）、胱抑素-C（Cyc-C）的相关性。方法检测30例正常人和147例CKD患者血浆IMD、肾上腺髓质素（ADM）和转化生长因子β1（TGF-β1）的浓度，患者根据肾小... 目的：探讨中介素（IMD）在慢性肾脏病（CKD）时的水平变化及其与同型半胱氨酸（Hcy）、胱抑素-C（Cyc-C）的相关性。方法检测30例正常人和147例CKD患者血浆IMD、肾上腺髓质素（ADM）和转化生长因子β1（TGF-β1）的浓度，患者根据肾小球滤过率分为1～5期，分析三者在不同分期的变化及其与Hcy、Cyc-C的相互关系。结果（1）随着CKD分期的不同，患者β2微球蛋白、Cyc-C、Hcy、GFR、ADM、TGF-β1水平与对照组相比，差异均有统计学意义（P＜0.05），IMD含量差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）GFR＞60 ml/min的CKD患者中不同病因类型中IMD的含量：与对照组相比，血浆IMD含量在肾病综合征组、IgA肾病组水平明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；各组ADM含量与对照组相比，差异无统计学意义。各组TGF-β1含量均明显高于对照组（P＜0.05）。（3）GFR＞60 ml/min的CKD患者中：IgA肾病组：IMD与Cys-C、Hcy均呈显著正相关（r＝0.900、0.900，P均＜0.05）。结论血浆IMD、ADM和TGF-β1在CKD进展中呈现一定变化趋势，尤其在IgA肾病早期变化明显，且与血管损伤因子Hcy、Cyc-C具有正相关性，提示IMD和ADM可能参与CKD血管损伤的病理过程；而TGF-β1在肾纤维化过程中的变化，反映了机体自我调节的作用。 展开更多
关键词 肾功能不全 慢性 半胱氨酸 中介素 胱抑素-C
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骨化三醇对局灶增生性IgA肾病患者CD4＋记忆性T细胞的影响 被引量：3
3
作者 于春洋 罗静 +2 位作者 李荣山 王利华 郭珲 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期486-493,共8页
目的 探讨骨化三醇[1,25（OH）2D3]对局灶增生性IgA肾病（IgAN）患者外周血CD4＋记忆性T细胞的影响.方法 选取局灶增生性IgAN患者（Lee Ⅲ级）20例（IgAN组）及健康志愿者20例（健康对照组）为研究对象.IgAN组再分为尿蛋白量＜1g/24h和... 目的 探讨骨化三醇[1,25（OH）2D3]对局灶增生性IgA肾病（IgAN）患者外周血CD4＋记忆性T细胞的影响.方法 选取局灶增生性IgAN患者（Lee Ⅲ级）20例（IgAN组）及健康志愿者20例（健康对照组）为研究对象.IgAN组再分为尿蛋白量＜1g/24h和尿蛋白量≥1g/24 h两亚组.用放射免疫测定法（RIA）检测血清1,25（OH）2D3水平;采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（PBMCs）,分别给予不同浓度的1,25（OH）2D3、地塞米松（DEX）或者2种药物联合处理PBMCs,细胞培养72 h后用流式细胞仪检测人干扰素（IFN）-γ、白细胞介素（IL）-4、IL-17A、人叉头框蛋白P3 （human forkhead box P3,Foxp3）的变化.结果 与健康对照组相比,IgAN组患者血清1,25（OH）2D3水平显著降低（P＜0.05）;与尿蛋白量＜1 g/24 h亚组及健康对照组比较,尿蛋白量≥1 g/24 h亚组患者血清1,25（OH）2D3水平明显降低（均P＜0.05）.与健康对照组相比,IgAN组患者PBMCs分泌IFN-y、IL-17A水平及IFN-γ/IL-4、IL-17A/Foxp3比值明显升高,Foxp3水平明显降低（均P＜0.05）;与尿蛋白量＜1 g/24h亚组及健康对照组比较,尿蛋白量≥1 g/24 h亚组PBMCs分泌IFN-γ、IL-17A水平及IL-17A/Foxp3比值明显升高,Foxp3水平明显降低,IFN-γ/IL-4比值升高（均P＜0.05）.1,25（OH）2D3处理后,PBMCs分泌IFN-γ、IL-17A、IFN-γ/IL-4、IL-17 A/Foxp3水平明显降低,Foxp3水平明显升高,并呈剂量依赖关系（均P＜ 0.05）;1,25 （OH）2D3＋DEX联合刺激PBMCs后,上述IFN-y、IL-17A、IFN-γ/IL-4、IL-17A/Foxp3、Foxp3变化更加显著,且IL-4水平明显降低（均P＜0.05）.结论 局灶增生性IgAN患者存在维生素D缺乏,并与蛋白尿的严重程度相关;局灶增生性IgAN患者可能存在CD4＋记忆性T细胞功能紊乱,1,25（OH）2D3具有纠正局灶增生性IgAN患者CD4＋记忆性T细胞功能紊乱的作用. 展开更多
关键词 骨化三醇 CD4阳性T淋巴细胞 蛋白尿
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中介素后处理对肾脏缺血再灌注损伤后微血管密度及缺氧诱导因子的影响 被引量：2
4
作者 苏雯 李荣山 王晨 《中国药物与临床》 CAS 2013年第11期1394-1396,I0001,共4页
目的探讨中介素(IMD)后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后损伤肾组织微血管密度(MVD)及缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法正常雄性SD大鼠24只随机分为:假手术组(Sham组)、IRI组、IRI+IMD组和IRI+0.9%氯化钠注射液(NS)组。大鼠... 目的探讨中介素(IMD)后处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后损伤肾组织微血管密度(MVD)及缺氧诱导因子(HIF-1α)表达的影响。方法正常雄性SD大鼠24只随机分为:假手术组(Sham组)、IRI组、IRI+IMD组和IRI+0.9%氯化钠注射液(NS)组。大鼠右肾切除1周后左肾制作肾脏IRI模型。各组分别于恢复血流后的24 h留取血液及肾组织标本。检测血清的尿素氮和肌酐水平;过碘酸雪夫(PAS)染色观察肾组织的病理变化;CD31免疫组织化学标记MVD计数;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HIF-1αmRNA的表达。结果 IRI、IRI+NS、IRI+IMD组的尿素氮、肌酐水平和肾小管及间质病理损伤均明显高于Sham组(均P<0.01);IRI+IMD组的尿素氮、肌酐水平以及肾小管和间质病理损伤也较IRI和IRI+NS组显著减低或减轻(均P<0.01)。与Sham组相比,IRI及IRI+NS组肾间质的MVD增多;IRI+IMD组肾间质的MVD较IRI及IRI+NS组增多更为明显(均P<0.01)。RT-PCR结果显示:IRI及IRI+NS组HIF-1αmRNA表达较Sham组增多;IRI+IMD组HIF-1αmRNA表达较IRI及IRI+NS组显著增多(均P<0.01)。结论中介素作为后处理药物能够在肾脏IRI后增加缺血组织的MVD并上调血管生成因子HIF-1α的表达,从而参与损伤肾组织的血管新生。 展开更多
关键词 肾脏 缺血 再灌注损伤 中介素 缺氧诱导因子-1Α 血管新生
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炎症介质在慢性肾脏病中的作用 被引量：2
5
作者 张妍 周芸 《中华健康管理学杂志》 CAS 2015年第5期386-389,共4页
慢性炎症参与大多数疾病的发生发展过程，参与炎症反应包括炎症细胞和炎症介质。炎症本质是机体对各种损伤的一种防御性反应，发生在有血管分布的组织，对机体是有益的，炎症反应是一个复杂的过程，需要精确的调控，一旦炎症反应剧烈不... 慢性炎症参与大多数疾病的发生发展过程，参与炎症反应包括炎症细胞和炎症介质。炎症本质是机体对各种损伤的一种防御性反应，发生在有血管分布的组织，对机体是有益的，炎症反应是一个复杂的过程，需要精确的调控，一旦炎症反应剧烈不可控制、抗炎系统调节功能异常和慢性炎症状态持续存在，炎症不仅无保护功能，还会对血管和器官造成损伤，对机体造成危害。 展开更多
关键词 炎症介质 慢性肾脏病 慢性炎症状态 炎症反应 血管分布 防御性反应 炎症细胞 功能异常
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1,25-二羟维生素D_3对IgA肾病大鼠白介素-4的调节作用 被引量：1
6
作者 郑喜洁 罗静 +2 位作者 郭珲 王利华 李荣山 《中国血液净化》 2014年第11期772-774,共3页
目的探讨1,25-二羟维生素D3对Ig A肾病大鼠白介素-4的调节作用。方法 52只Wister大鼠剔除死亡随机分为A组(正常对照组)、B组(未干预组)、C组(强的松组)、D组(1,25(OH)-2D3组)、E组(强的松+1,25(OH)-2D3组)。检测大鼠24小时尿蛋白定量、... 目的探讨1,25-二羟维生素D3对Ig A肾病大鼠白介素-4的调节作用。方法 52只Wister大鼠剔除死亡随机分为A组(正常对照组)、B组(未干预组)、C组(强的松组)、D组(1,25(OH)-2D3组)、E组(强的松+1,25(OH)-2D3组)。检测大鼠24小时尿蛋白定量、脾脏及淋巴结IL-4含量。结果 1尿蛋白定量:A组(正常对照组)为7.03±0.99 mg/24h;B组(未干预组)为51.49±3.04 mg/24h;C组(强的松组)为12.15±0.75 mg/24h;D组(1,25(OH)2D3治疗组)为23.0±2.27 mg/24h;E组(强的松+1,25(OH)2D3治疗组)为9.99±0.79 mg/24h;经治疗后C、D、E组24h尿蛋白较B组均有显著下降(P<0.05),其中E组下降最显著(P<0.05);2脾脏IL-4含量:A组(正常对照组)1.428±0.60%;B组(未干预组)5.10±0.08%;C组(强的松组)2.93±0.13%;D组(1,25(OH)2D3治疗组)4.56±0.19%;E组(强的松+1,25(OH)2D3治疗组)1.44±0.56%;3淋巴结IL-4含量:A组(正常对照组)1.50±0.13%;B组(模型组)15.4±3.11%;C组(强的松组)2.74±0.29%;D组(1,25(OH)2D3治疗组)6.55±0.66%;E组(强的松+1,25(OH)2D3治疗组)2.32±0.34%。C、D、E组脾脏及淋巴结IL-4含量较B组均有显著下降(P<0.05),其中E组下降最显著(P<0.05)。结论 1,25-二羟维生素D3可能下调Ig A肾病大鼠IL-4的表达,影响Th2细胞的调节。 展开更多
关键词 1 25-二羟维生素D3 IGA肾病 白介素-4
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中介素对缺氧/复氧大鼠肾小管上皮细胞增殖作用及细胞周期的影响及其机制 被引量：1
7
作者 王艳红 田继华 +2 位作者 苏晓乐 乔晞 李荣山 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期482-487,共6页
目的探讨中介素(intermedin,IMD)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧(H/R)后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组,模型组:缺氧/复氧组(H/R)、H/R+空质粒组、H/R+IMD质粒组。MTT法检测细胞增殖,比色法检测... 目的探讨中介素(intermedin,IMD)对大鼠近端肾小管上皮细胞NRK-52E缺氧/复氧(H/R)后细胞增殖、细胞周期的影响。方法 NRK-52E细胞随机分为对照组,模型组:缺氧/复氧组(H/R)、H/R+空质粒组、H/R+IMD质粒组。MTT法检测细胞增殖,比色法检测培养基上清LDH含量,流式细胞术检测细胞周期,Real time-PCR法和Western blot法检测cyclin D1、CDK、p57 mRNA及蛋白表达,间接免疫荧光染色检测cyclin D1亚细胞定位。结果 1与对照组相比,H/R组培养基中LDH含量升高了106%,同时细胞存活率明显下降,与H/R组比较,H/R+IMD组培养基中LDH含量下降了33.85%(P<0.01),而细胞存活率增高(79.15%±1.42%vs 61.22%±1.63%,P<0.05),2细胞周期结果显示,与对照组相比,H/R组细胞G0/G1期比例增加,S期细胞比例降低(P<0.05);与H/R组比较,H/R+IMD组G0/G1期细胞比例明显降低,而S及G2期细胞比例增加(P<0.05)。3H/R可增加cyclin D1、CDK4及p57的表达也增加(与对照组比较,P<0.05);而IMD可进一步上调cyclin D1、CDK4的表达,同时下调p57的表达,与对照组及H/R组相比差异具有显著性(P<0.05)。4免疫荧光检测结果可见,cyclin D1呈红色荧光,在NRK-52E细胞内主要表达在细胞核中。结论 IMD可以上调cyclin D1、CDK4蛋白表达,下调p57的表达,促进细胞周期进展,从而加速肾组织IRI后细胞增殖和修复。 展开更多
关键词 中介素 缺氧/复氧损伤 肾小管上皮细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞周期蛋白
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中介素延缓大鼠单侧输尿管梗阻模型纤维化的机制研究 被引量：8
8
作者 张妍 周芸 +4 位作者 董红霖 甘小芳 李荣山 原成英 张彩香 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期459-461,共3页
慢性肾脏病（CKD）发展至终末期肾病的共同特征是肾脏纤维化,肾脏微血管稀疏和丢失是其重要表现之一.本课题组在早期研究中发现,中介素（intermedin,IMD）对急性肾损伤有保护作用,能减轻单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏纤维化.血管... 慢性肾脏病（CKD）发展至终末期肾病的共同特征是肾脏纤维化,肾脏微血管稀疏和丢失是其重要表现之一.本课题组在早期研究中发现,中介素（intermedin,IMD）对急性肾损伤有保护作用,能减轻单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏纤维化.血管内皮生长因子（VEGF）是最主要的血管相关因子,其具有增加血管通透性,促进内皮细胞增殖和血管出芽等作用,对损伤后血管的再生修复有非常重要的意义.VEGF所引起的内皮细胞生理或病理的改变主要是由血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）介导,VEGF-VEGFR2是血管生成的重要信号通路. 展开更多
关键词 单侧输尿管梗阻模型 肾脏纤维化 大鼠模型 中介素 血管内皮生长因子受体 急性肾损伤 内皮细胞增殖 终末期肾病
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中介素对单侧输尿管梗阻大鼠模型微血管损伤的影响 被引量：4
9
作者 甘小芳 周芸 +3 位作者 董红霖 张妍 李荣山 罗琰琨 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期289-295,共7页
目的研究中介素（intermedin，IMD）在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏纤维化进展中对微血管损伤的影响。方法雄性Wistar大鼠72只，随机分为假手术组（n=24，行左输尿管分离术）、模型组（UUO，n=24）和IMD组（n=24），后两组行左输... 目的研究中介素（intermedin，IMD）在单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型肾脏纤维化进展中对微血管损伤的影响。方法雄性Wistar大鼠72只，随机分为假手术组（n=24，行左输尿管分离术）、模型组（UUO，n=24）和IMD组（n=24），后两组行左输尿管结扎术。各组大鼠分别在术后7d、14d、21d、28d各取6只，留取血液及梗阻侧肾组织标本。用HE、Masson染色观察肾组织病理变化；用全自动生化分析仪检测血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）及胱抑素C（CysC）含量；用RT-PCR法检测肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）、仅平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、骨形态发生蛋白7（BMP-7）、E钙黏蛋白（E-cadhefin）、血小板反应蛋白1（TSP-1）及血管内皮生长因子（VEGF）的mRNA表达，以免疫组化法检测其蛋白的表达，并进行半定量分析。结果与假手术组相比，不同时间点UUO组大鼠肾组织纤维化程度明显，小管间质损害加重，血BUN、Scr、CysC升高（P〈0．05），TGF-β1、α-SMA、TSP-1 mRNA及蛋白表达量增多（P〈0．05），BMP-7、E—cadherin及VEGF减少（P〈0．05）；与UUO组相比，IMD组肾小管损害、间质纤维化程度均较轻，血BUN、Scr、CysC降低（P〈0．05），TGF-β1、α—SMA、TSP－1mRNA及蛋白表达量减少（P〈0．05），BMP-7、E—cadhefin及VEGF增多（P〈0．05）。结论中介素在肾脏纤维化进程中可保护。肾功能，减轻纤维化，可能与介导VEGF减轻血管损伤有关。 展开更多
关键词 纤维化 输尿管梗阻 血管内皮生长因子类 中介素
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纤维蛋白肽Bβ15～42对大鼠缺血再灌注损伤肾脏局部炎性反应的影响 被引量：1
10
作者 张琼 乔玉峰 +3 位作者 石媛媛 马月宏 邵金金 李荣山 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期527-533,共7页
目的观察纤维蛋白肽Bβ15—42（the fibrin—derivedpe ptide Bβ15-42，FgBβ15～42肽）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾脏局部炎性反应的影响并探讨其机制。方法将SD大鼠随机分成假手术组（Sham组）、IRI组、阴性治疗组和FgBβ15... 目的观察纤维蛋白肽Bβ15—42（the fibrin—derivedpe ptide Bβ15-42，FgBβ15～42肽）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（IRI）后肾脏局部炎性反应的影响并探讨其机制。方法将SD大鼠随机分成假手术组（Sham组）、IRI组、阴性治疗组和FgBβ15～42肽治疗组。Sham组：分离肾动脉后关闭腹腔；IRI组：采用双侧肾动脉夹闭的方法制作肾脏IRI模型；阴性治疗组：于肾脏再灌注后立即尾静脉注射随机肽段3．6mg／kg；FgBβ15～42肽治疗组：于肾脏再灌注后立即尾静脉注射FgBβ15～42肽3．6mg／kg。后3组按照再灌注24h、48h分为两个亚组，Sham组与各亚组均为8只大鼠。常规生化法检测肾功能；HE、PAS染色观察肾脏组织学改变；免疫组化、实时荧光定量PCR法及Western印迹检测肾组织白细胞介素1β（IL-1β）、细胞间黏附分子1（ICAM-1）的mRNA及蛋白表达。结果与Sham组相比，IRI组的Scr和BUN水平均显著增加（均P〈0．05），肾小管及间质病理损伤显著，以再灌注48h更为明显；与IRI组相比，FgBβ15～42肽治疗组Scr和BUN显著下降（均P〈0．05），小管间质损伤程度明显减轻（P〈0．05）。与Sham组相比，IRI组IL-1β和ICAM-1的mRNA和蛋白水平于再灌注24h显著上升，48h稍微下降，但仍维持在较高水平；FgBβ15～42肽治疗组大鼠肾组织IL-1B和ICAM-1的表达于再灌注24h、48h显著低于同时间点的IRI组（均P〈0．05），但仍明显高于Sham组。上述各指标在阴性治疗组和IRI组之间的表达差异无统计学意义。结论FgBβ15～42肽对肾脏IRI具有保护作用，其作用机制可能与其减少炎性因子IL-1β、黏附分子ICAM-1的表达有关。 展开更多
关键词 再灌注损伤 炎症 肾功能不全 急性 纤维蛋白肽B
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