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原癌基因Pokemon的克隆原核表达及纯化 被引量：1
1
作者 郎旭宇 闫萍 +3 位作者 王惠珍 张悦红 程牛亮 郭睿 《中国药物与临床》 CAS 2006年第8期576-579,共4页
目的克隆小鼠Pokemon(POKeryhroidmyeloidontogenicfactor)基因并进行原核表达及重组蛋白的纯化。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的基因片段,克隆人pGEM-T-easy载体,经鉴定后,以限制性核酸内切酶分别消化重组质粒及原核表达... 目的克隆小鼠Pokemon(POKeryhroidmyeloidontogenicfactor)基因并进行原核表达及重组蛋白的纯化。方法应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的基因片段,克隆人pGEM-T-easy载体,经鉴定后,以限制性核酸内切酶分别消化重组质粒及原核表达载体pET-30a(+),体外定向连接,进行PCR、内切酶酶切及DNA序列分析,阳性重组表达质粒进一步转化到大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中诱导表达,经Ni-NTA亲和层析纯化融合蛋白,Westernblotting检测其特异性。结果限制性核酸酶切及序列分析表明重组表达质粒包含Pokemon基因编码区,阅读框架无移位;十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示有预期相对分子质量为36000的重组蛋白表达,经亲和层析纯化后,融合蛋白的纯度达到90%以上;Westernblotting印迹表明纯化的融合蛋白具有特异的免疫反应特性。结论采用基因克隆技术成功构建了Pokemon原核表达载体,并获得了高纯度的重组蛋白,为后期抗体的制备及进一步研究该基因与肿瘤发生的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 原癌基因 遗传载体 原核表达
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原癌基因pokemon mRNA及其蛋白在非小细胞肺癌中的表达和意义 被引量：5
2
作者 李喜霞 郎旭宇 +2 位作者 乔从进 崔慧林 郭睿 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期89-93,共5页
目的探讨原癌基因PokemonmRNA及其编码蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC发生的关系。方法应用RT-PCR和原位杂交技术检测pokemon mRNA在NSCLC组织和癌旁正常组织中的相对表达量及细胞定位;... 目的探讨原癌基因PokemonmRNA及其编码蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC发生的关系。方法应用RT-PCR和原位杂交技术检测pokemon mRNA在NSCLC组织和癌旁正常组织中的相对表达量及细胞定位;利用免疫组织化学染色分析NSCLC组织和癌旁正常组织标本中Pokemon蛋白的表达。结果半定量RT-PCR显示,pokemon mRNA在NSCLC组织中高表达(0.916±0.424),在对应的癌旁正常组织中低表达(0.408±0.307),两组之间具有显著的统计学差异(P<0.05);原位杂交结果显示,pokemon转录本在NSCLC细胞胞质中呈阳性表达,而癌旁正常组织不表达或低表达;免疫组织化学染色分析结果显示,NSCLC组织和对应的癌旁正常组织中Pokemon蛋白阳性表达率分别为87.5%(35/40)和15%(6/40),两组之间具有显著的统计学差异(X2=42.076,P<0.005)。Pokemon蛋白主要定位在癌细胞胞质内,少量定位在胞核中,呈颗粒状分布。结论原癌基因poke-mon mRNA及其编码蛋白在NSCLC中的高表达很可能与NSCLC的发生密切相关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 POKEMON 半定量RT-PCR 免疫组织化学
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肺癌患者血清肿瘤标志物的检测及意义 被引量：5
3
作者 郎旭宇 郭睿 张栋 《山西医科大学学报》 CAS 2005年第6期715-716,共2页
目的探讨外周血肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific eno-lase,NSE)、p53抗体、细胞角蛋白19(CYFRA21-1)在肺癌患者血清中的水平及其在肺癌辅助诊断中的应用价值。方法采用酶联免... 目的探讨外周血肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific eno-lase,NSE)、p53抗体、细胞角蛋白19(CYFRA21-1)在肺癌患者血清中的水平及其在肺癌辅助诊断中的应用价值。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测35例肺癌患者、20例健康人和32例肺部良性疾病患者血清中4种肿瘤标志物的水平。结果肺癌患者的4种血清肿瘤标志物水平均明显高于健康人组和肺部良性疾病组(P<0.01),且不同病理类型肺癌4种标志物的水平呈显著性差异,具有统计学意义。结论4种血清肿瘤标志物对于肺癌的辅助诊断有一定的临床参考价值。 展开更多
关键词 肿瘤标志物 肺肿瘤 诊断
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凋亡抑制因子在非小细胞肺癌中的表达及其意义 被引量：1
4
作者 郎旭宇 冯晋潞 +2 位作者 冯珍 赵建滨 解军 《肿瘤研究与临床》 CAS 2006年第6期370-373,共4页
目的探讨凋亡抑制基因(IAPs)家族在非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中的表达及其意义。方法采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot分别从mRNA和蛋白水平对36例NSCLC、36例肺部良性病变进行研究,检测生存蛋白(survivin),human... 目的探讨凋亡抑制基因(IAPs)家族在非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织中的表达及其意义。方法采用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot分别从mRNA和蛋白水平对36例NSCLC、36例肺部良性病变进行研究,检测生存蛋白(survivin),human IAP-1(hIAP-1),humanIAP-2(hIAP-2)及X chromosome-linked IAP(XIAP)表达情况。结果36例NSCLC组织中有32例survivin mRNA表达阳性,而对照组无一例阳性表达;26例癌组织中XIAP mRNA处于高表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);hIAP-1mRNA仅仅在腺癌组织中高表达(P<0.05),具有组织学类型特异性。Western blot显示在survivin mRNA阳性组织中均可检测到survivin蛋白的表达;XIAP和hIAP-1mRNA高表达的组织同样可检测到相应蛋白。相关性分析表明只有hIAP-1的表达与NSCLC组织学类型相关。结论survivin mRNA高表达可以作为NSCLC辅助诊断的重要指标,hIAP-1可用来协助鉴定NSCLC亚型,survivin和XIAP在肿瘤基因治疗中具有潜在的应用价值和前景。 展开更多
关键词 凋亡抑制基因 非小细胞肺癌
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胃间置代食管治疗食道和喷门癌78例体会 被引量：1
5
作者 张俊 《中国继续医学教育》 2013年第2期21-22,共2页
目的分析胃间置代食管治疗食道和喷门癌78例的效果。方法研究选取2009~2012年本院收治的癌症患者共78例,全部行胃间置代食管术治疗,其中45例患者接受全胃代食管,33例患者接受残胃代食管。观察治疗效果和术后并发症,随访半年,调查患者康... 目的分析胃间置代食管治疗食道和喷门癌78例的效果。方法研究选取2009~2012年本院收治的癌症患者共78例,全部行胃间置代食管术治疗,其中45例患者接受全胃代食管,33例患者接受残胃代食管。观察治疗效果和术后并发症,随访半年,调查患者康复情况。结果本组所有病例均治愈出院,术后共出现并发症5例,并发症发生率为6.4%。随访半年,钡餐复查未发现胸胃扩张,6例患者有轻微的返流。结论在食道和贲门癌治疗中行胃间置代食管能提高手术治愈率,同时能避免胸胃扩张,减少胃排空障碍,降低术后并发症的出现。 展开更多
关键词 胃排空障碍 返流 胃间置代食管
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开胸术后18例乳糜胸的治疗
6
作者 张俊 《肿瘤研究与临床》 CAS 2004年第4期272-273,共2页
目的:总结开胸术后乳糜胸患者的治疗经验,以预防和减少乳糜胸的发生。方法:回顾性分析1991年—2002年18例术后乳糜胸患者的临床资料、诊断手段、治疗方法。结果:全组18例患者,4例经内科治疗,14例行开胸手术治疗,均痊愈出院。结论:熟悉... 目的:总结开胸术后乳糜胸患者的治疗经验,以预防和减少乳糜胸的发生。方法:回顾性分析1991年—2002年18例术后乳糜胸患者的临床资料、诊断手段、治疗方法。结果:全组18例患者,4例经内科治疗,14例行开胸手术治疗,均痊愈出院。结论:熟悉解剖、规范手术操作及围术期处理严格管理,是预防和减少乳糜胸发生率的有效方法。 展开更多
关键词 普胸外科 乳糜胸 治疗
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肺癌患者围手术期血清sIL-2R的检测 被引量：1
7
作者 郎旭宇 郭睿 宋玉兰 《山西医学院学报》 1997年第4期315-317,共3页
应用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法检测了３０例正常健康人及４０例肺癌患者围手术期血清ｓＩＬ２Ｒ的水平。结果显示：肺癌组术前血清ｓＩＬ２Ｒ水平显著高于正常对照组（Ｐ＜００１）；手术切除后血清ｓＩＬ２Ｒ水平明显下降（Ｐ＜０... 应用ＥＬＩＳＡ双抗夹心法检测了３０例正常健康人及４０例肺癌患者围手术期血清ｓＩＬ２Ｒ的水平。结果显示：肺癌组术前血清ｓＩＬ２Ｒ水平显著高于正常对照组（Ｐ＜００１）；手术切除后血清ｓＩＬ２Ｒ水平明显下降（Ｐ＜００５）；肺癌细胞分型与血清ｓＩＬ２Ｒ水平无关（Ｐ＞００５）。提示血清ｓＩＬ２Ｒ水平检测对肺癌的诊断及病情变化、疗效观察有一定价值。 展开更多
关键词 肺肿瘤 SIL-2R 有丝分裂因子 淋巴细胞 诊断
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红细胞促肺癌患者外周血NK细胞活性的研究
8
作者 郭睿 郎旭宇 宋玉兰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第10期719-721,共3页
采用３Ｈ－ＴｄＲ释放法分别检测了单纯ＮＫ细胞活性及红细胞作用下ＮＫ细胞的活性，结果显示肺癌患者外周血ＮＫ细胞活性（２３．７８％±６．３４％）较正常对照组（４１．３７％±７．４３％）明显降低（Ｐ＜０．００５），... 采用３Ｈ－ＴｄＲ释放法分别检测了单纯ＮＫ细胞活性及红细胞作用下ＮＫ细胞的活性，结果显示肺癌患者外周血ＮＫ细胞活性（２３．７８％±６．３４％）较正常对照组（４１．３７％±７．４３％）明显降低（Ｐ＜０．００５），但在正常人红细胞作用下，其ＮＫ细胞毒活性为３０．３０％±６．５６％，经配对设计ｔ检验有显著性差异（Ｐ＜０．００１）；在肺癌患者红细胞作用下，机体ＮＫ细胞活性无明显变化，经检验不存在显著性差异（Ｐ＞０．０５）。表明正常人红细胞对自身及肺癌患者的ＮＫ细胞活性均有显著的促进作用，在肿瘤免疫学及临床肿瘤的治疗方面将有积极的意义。 展开更多
关键词 肺肿瘤 外周血 NK细胞 红细胞
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肺癌患者红细胞对NK细胞活性的影响
9
作者 郭睿 郎旭宇 宋玉兰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期286-286,共1页
肺癌患者红细胞对ＮＫ细胞活性的影响郭睿郎旭宇宋玉兰近来Ｓｈａｕ发现红细胞能够显著增强ＮＫ细胞的杀伤活性，并证明这一功能与红细胞膜无关，而依赖于红细胞胞浆中的自然杀伤增强因子（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｅｒｅｎｈａｎｃｉｎｇ... 肺癌患者红细胞对ＮＫ细胞活性的影响郭睿郎旭宇宋玉兰近来Ｓｈａｕ发现红细胞能够显著增强ＮＫ细胞的杀伤活性，并证明这一功能与红细胞膜无关，而依赖于红细胞胞浆中的自然杀伤增强因子（ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｅｒｅｎｈａｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＮＫＥＦ）〔１〕。本... 展开更多
关键词 肺癌 红细胞 NK细胞活性
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