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直接竞争化学发光酶免疫法检测呋喃妥因代谢物 被引量：6
1
作者 李亚楠 王瑞 +2 位作者 李涛 王云贵 黄登宇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期231-235,共5页
建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度... 建立检测动物组织中呋喃妥因代谢物的直接竞争化学发光酶免疫法。采用棋盘法确定抗体和酶标抗原的最佳稀释度,通过单因素试验优化包被条件、封闭液种类和竞争反应时间,建立直接竞争抑制曲线,并对方法的灵敏度、特异性、准确度和精密度进行方法学评价。结果表明,经优化,最佳反应条件为抗体稀释度1∶4 000,酶标抗原稀释度1∶80,包被条件为37℃2h后4℃过夜,封闭液为1%牛血清白蛋白,竞争反应1h。该方法的线性检测范围为0.030~10.595 ng/m L,IC_（50）为0.559 ng/m L;加标回收率为84.9%~103.4%,批内变异系数为3.4%~7.8%,批间变异系数为4.7%~11.8%;除与呋喃妥因原药交叉反应率为36.2%,与其他结构类似物及衍生化试剂交叉反应率均小于0.1%。该方法灵敏、准确,可用于动物组织中呋喃妥因代谢物的快速筛查。 展开更多
关键词 呋喃妥因 1-氨基-乙内酰脲 直接竞争化学发光酶免疫检测 动物组织
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呋喃它酮代谢物直接竞争化学发光酶免疫分析法的建立 被引量：5
2
作者 吕月霞 王瑞 +2 位作者 黄登宇 王云贵 李涛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第22期71-75,86,共6页
采用以对碘苯酚为增强剂的鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢化学发光检测体系,建立检测动物组织中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-2-氨基-2-僫唑烷基酮（AMOZ）残留的直接竞争化学发光酶免疫分析法（dc-CLEIA）。结果表明：此方法IC50为0.62 n... 采用以对碘苯酚为增强剂的鲁米诺-辣根过氧化物酶-过氧化氢化学发光检测体系,建立检测动物组织中呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-2-氨基-2-僫唑烷基酮（AMOZ）残留的直接竞争化学发光酶免疫分析法（dc-CLEIA）。结果表明：此方法IC50为0.62 ng/m L,检测限为15.52 pg/m L,线性范围0.038~9.78 ng/m L,变异系数均小于10%;该方法中抗体除了与呋喃它酮原药有一定交叉外,与其他结构类似物无交叉,表现了良好的特异性;鸡肉样品添加回收率为83%~94%,验证了该方法的准确性,为实际动物组织中AMOZ残留提供了便捷、准确、快速筛查的手段。 展开更多
关键词 呋喃它酮代谢物 直接竞争化学发光酶免疫分析法 鸡肉
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呋喃妥因代谢物化学发光酶联免疫检测方法的研究 被引量：5
3
作者 王瑞 吕月霞 +2 位作者 黄登宇 王云贵 李涛 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第4期35-41,共7页
对呋喃妥因代谢物1－氨基乙内酰脲（ AHD）进行半抗原改造，采用活化酯法将半抗原与卵清蛋白（ OVA）偶联为包被原，与标准品竞争AHD单克隆抗体的抗原结合位点，加入辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗，建立了AHD间接竞争化学发光酶联免疫（... 对呋喃妥因代谢物1－氨基乙内酰脲（ AHD）进行半抗原改造，采用活化酯法将半抗原与卵清蛋白（ OVA）偶联为包被原，与标准品竞争AHD单克隆抗体的抗原结合位点，加入辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗，建立了AHD间接竞争化学发光酶联免疫（ CLEIA）检测法，并对化学发光液、包被原与抗体最优稀释度、包被条件、封闭液和竞争时间五项参数进行优化。结果表明：该方法具有良好的特异性， IC50为0．753 ng／mL，在鸡肉组织中的检测限为0．028μg／kg，添加回收率在80．54％～102．64％之间，变异系数均小于10％。与国标中液相色谱－串联质谱法（ LC－MS／MS）和我国出入境行业标准中酶联免疫检测法（ ELISA）相比，不仅降低了检测限，而且操作简便，为动物源性食品中呋喃妥因代谢物的残留提供了准确、便捷的分析检测手段。 展开更多
关键词 呋喃妥因代谢物 包被原 化学发光酶联免疫检测
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化学发光酶免疫法检测呋喃它酮代谢物残留 被引量：3
4
作者 杨典原 吕月霞 +3 位作者 李亚楠 王云贵 李涛 黄登宇 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第4期112-115,共4页
旨在建立一套准确性好、特异性高的检测呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮（AMOZ）的快速检测方法。试验通过优化抗原与抗体稀释倍数、封闭液的选择等试验条件,建立了间接化学发光酶免疫分析方法 （ic-CLEIA）检测AMOZ,并... 旨在建立一套准确性好、特异性高的检测呋喃它酮代谢物5-吗啉甲基-3-氨基-2-恶唑烷基酮（AMOZ）的快速检测方法。试验通过优化抗原与抗体稀释倍数、封闭液的选择等试验条件,建立了间接化学发光酶免疫分析方法 （ic-CLEIA）检测AMOZ,并对该方法进行了方法学评价。通过线性方程y=0.268x-0.004表明,IC_（50）值为0.079 ng/m L,最低检测限（IC_（10）值）为2.44 pg/m L,变异系数为6.56%,该法除与呋喃它酮有一定交叉,与其他结构类似物药物并无交叉,表明该法特异性良好。通过添加回收试验,测得回收率在86%-106%,其准确度符合快速检测要求。结果表明,本研究所建立的间接化学发光酶免疫法可以准确测定呋喃它酮代谢物的残留量。 展开更多
关键词 呋喃它酮 AMOZ 间接化学发光酶免疫分析法
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直接竞争酶联免疫法测定呋喃妥因代谢物 被引量：2
5
作者 李亚楠 王瑞 +5 位作者 孙元媛 杨典原 黄种乾 王云贵 李涛 黄登宇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第9期3723-3729,共7页
目的建立动物组织中呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲的直接竞争酶联免疫(ELISA)检测法,为检测食品中呋喃妥因代谢物残留提供快速检测的方法。方法采用活化酯法制备辣根过氧化物酶标记抗原,并用棋盘法确定酶标抗原和抗体的稀释度,优化反应... 目的建立动物组织中呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲的直接竞争酶联免疫(ELISA)检测法,为检测食品中呋喃妥因代谢物残留提供快速检测的方法。方法采用活化酯法制备辣根过氧化物酶标记抗原,并用棋盘法确定酶标抗原和抗体的稀释度,优化反应条件,建立检测呋喃妥因代谢物的直接竞争酶联免疫法,并对其进行方法学评价。结果该方法的线性方程为Y=-34.723X+158.01(r2=0.9922),线性检测范围为0.177~11.508ng/m L,IC50为1.291 ng/m L;猪肉、鸡肉、鱼肉的最低检测限分别为0.115、0.113、0.109μg/kg,加标回收率在82.6%~104.7%之间,批内变异系数在3.6%~9.3%之间,批间变异系数在4.3%~12.4%之间。结论本方法快速准确,适用于动物组织中呋喃妥因代谢物的检测。 展开更多
关键词 呋喃妥因代谢物 直接竞争酶联免疫检测法 动物组织
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