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山东省肉鸭鸭疫里默氏杆菌流行病学调查及耐药性分析 被引量:11
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作者 骆延波 李兰波 +5 位作者 贾纪美 刘晓东 齐静 李璐璐 胡明 刘玉庆 《中国家禽》 北大核心 2015年第21期79-82,共4页
针对目前肉鸭养殖中细菌传染病发病率高、防治困难的现状,分离鸭疫里默氏杆菌,检测其抗药性程度,筛选合适的抗生素适宜剂量。从山东省内12个地区/市、河北省4个地区及河南省4个市区养殖场或养殖小区采集到447份疑似鸭疫里默氏杆菌病病... 针对目前肉鸭养殖中细菌传染病发病率高、防治困难的现状,分离鸭疫里默氏杆菌,检测其抗药性程度,筛选合适的抗生素适宜剂量。从山东省内12个地区/市、河北省4个地区及河南省4个市区养殖场或养殖小区采集到447份疑似鸭疫里默氏杆菌病病鸭肝脏及脑部组织病料中分离菌株。利用鸭疫里默氏杆菌的omp A基因为目的基因,建立PCR快速检测方法。结果:PCR快速鉴定该菌的方法,共分离到65株鸭疫里默氏杆菌,分离率为13.62%,其抗药性程度均较高。根据CLSI琼脂稀释法药敏试验原理,建立了96点阵接种药敏检测盒,检测分离菌株的MIC,筛选适用于临床的敏感药物和剂量。试验表明:鸭里默氏杆菌抗药性较高,可根据药敏检测结果筛选抗生素,并轮换使用。 展开更多
关键词 肉鸭 鸭疫里默氏杆菌 药敏试验 多重耐药
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表征抗菌药物抑菌动力学的等效线药敏试验方法 被引量:5
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作者 刘玉庆 胡明 +8 位作者 刘焕奇 王进文 赵敏 李靖冉 付晓杰 骆延波 齐静 李璐璐 高培基 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2015年第6期614-622,共9页
以抗菌药物作用浓度与时间对抑菌率的协同作用,改进通行的药敏试验方法.采用Bioscreen全自动生长曲线分析仪,在线测定连续时间、连续固定浓度抗菌药物作用下禽致病性大肠杆菌BBZ6-3g在MHB中生长量(A600),建立了抑菌动力学检测体... 以抗菌药物作用浓度与时间对抑菌率的协同作用,改进通行的药敏试验方法.采用Bioscreen全自动生长曲线分析仪,在线测定连续时间、连续固定浓度抗菌药物作用下禽致病性大肠杆菌BBZ6-3g在MHB中生长量(A600),建立了抑菌动力学检测体系.用Sigmaplot构建以相对抑菌率RBR=1—At-i/At_0对抗菌药物浓度和作用时间的等效线图.等效线图全面地反映了药物浓度和时间对抑菌量的影响过程及趋势,兼具二维曲线的量化和三维曲面的直观特点,而且RBR通过归一化处理,消除了细菌群体的自然增殖的本底、不同接种量、不同抗菌药物的差异影响,可以直接比较不同抗菌药物的抑菌率,专门比较浓度和时间对抑菌率的影响.抑菌作用本质上是抗菌药物抑制细菌对营养物质的利用效率和程度,与细菌死亡是不同但是相关的过程。0.5RBR为传统的目测最低抑菌浓度(MIC),以此为界,等效线图可以直观地分为3部分:分化区(O.5纵向等效线以左,全部浓度)、生长区(0.5以上的等效线)、抑菌区(0.5纵向等效线以右延伸且0.5以下的等效线).分化区边界时间在100~300min,因此传统的药敏试验以8—12h的终态来判断抑菌率,确定MIC是可靠的;抑菌区和生长区之间的等效线疏密,实际上是浓度依赖性和时间依赖性的依据.抑菌动力学检测体系和反映RBR的等效线图,改良了传统药敏试验方法,有望分析不同接种量对抑菌率和菌群变异的影响、不同浓度的抗菌药物后效应(PAE),比较不同菌种或不同抗药性水平菌株的抑菌动力学. 展开更多
关键词 相对抑菌率(RBR) 等效线 抑菌区 浓度 时间
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大型肉鸡养殖场中死淘鸡病原菌分析 被引量:5
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作者 蔡亚娜 白华 +4 位作者 齐静 魏甜甜 单虎 刘玉庆 胡明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期213-217,共5页
本试验通过对山东某地区8个大型集约化肉鸡养殖场的27只死淘鸡进行剖检、电镜观察、病原菌分离鉴定,明确了细菌混合感染为其显著特征,此地区优势致病菌依次为粪肠球菌、浅绿气球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌。用专利产品(专利... 本试验通过对山东某地区8个大型集约化肉鸡养殖场的27只死淘鸡进行剖检、电镜观察、病原菌分离鉴定,明确了细菌混合感染为其显著特征,此地区优势致病菌依次为粪肠球菌、浅绿气球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜水气单胞菌。用专利产品(专利号:ZL 2009 2 0253251.5)吸管药敏检测盒对死淘鸡病变组织的细菌混合感染进行药敏检测,对照传统的药敏检测结果,表明吸管药敏检测盒具有准确的原位药敏检测的特点和优势,有助于了解肉鸡养殖场潜在的致病因素、提供可行的预防方案。 展开更多
关键词 死淘鸡 病原菌 混合感染 吸管药敏检测盒
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以梯度平板法改进药敏试验方法及其药物浓度质量控制 被引量:1
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作者 王杰 张庆 +5 位作者 李璐璐 胡明 骆延波 齐静 张印 刘玉庆 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2017年第7期740-749,共10页
药敏试验是临床选择敏感抗生素的精确检测工作,其成败在于质量控制的可靠性和最低抑菌浓度(MIC)的精确性、前瞻性.本文结合质控试验和药敏试验对梯度平板法进行验证,梯度平板法所测得的MIC与微量肉汤稀释法和琼脂稀释法测得的MIC结果一... 药敏试验是临床选择敏感抗生素的精确检测工作,其成败在于质量控制的可靠性和最低抑菌浓度(MIC)的精确性、前瞻性.本文结合质控试验和药敏试验对梯度平板法进行验证,梯度平板法所测得的MIC与微量肉汤稀释法和琼脂稀释法测得的MIC结果一致,且因为线性设置的药物浓度,MIC更加精确,能推算抗菌药物的原始浓度,更好地保证质控试验的可靠性.同时,按照美国临床实验室标准委员会或欧盟药敏试验委员会的敏感(S),中介(I)以及抗药(R)范围标准设置0-S,S-R,R-8R这样3个线性梯度,首先判断菌株敏感性范围,然后精确测定细菌群落的MIC值,并能有效分离出抗性菌株,预警该抗生素使用后可能出现的抗药性,进而指导临床抗菌药物的选择和应用.梯度平板的主要困难在于手工制备的繁琐和不稳定性,如果自动化生产即用型梯度平板,将便利临床药敏试验,改进抗药性筛选技术. 展开更多
关键词 药敏试验 质量控制 梯度平板法 琼脂稀释法 微量肉汤稀释法 最低抑菌浓度(MIC)
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动态分析抗菌作用的新方法
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作者 张庆 胡明 +4 位作者 王杰 杨炜华 金建玲 刘玉庆 高培基 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2017年第6期650-657,共8页
最低抑菌浓度(MIC)是表征抗菌药物对细菌生长抑制最终效应的常规方法,不能描述抑菌作用的时间过程,药敏试验也不适用于高抗药性水平菌株的治疗方案确定.因此本文提出了一个普适性的新药敏试验方法.不同接种量的质控菌株Escherichia coli... 最低抑菌浓度(MIC)是表征抗菌药物对细菌生长抑制最终效应的常规方法,不能描述抑菌作用的时间过程,药敏试验也不适用于高抗药性水平菌株的治疗方案确定.因此本文提出了一个普适性的新药敏试验方法.不同接种量的质控菌株Escherichia coli ATCC 25922和临床高抗药性水平菌株E.coli BBZ在不同系列浓度的6种抗菌药物(环丙沙星、氨苄西林、头孢噻呋、阿米卡星、硫酸黏菌素和多西环素)作用下,37℃下培养1200 min,连续检测时间序列点的光密度值A600作为反应变量,以相对抑菌效应(RIE=((a.b)/a)×100%)表征抑制效应,进而用等效线图表征药物浓度和时间协同抑制效应的动态过程,量化了浓度依赖型和时间依赖型,细化不同菌株对药物敏感性的差别.由此得到,达到最大抑制效应时,需要的最低药物浓度和时间,以及增大药物浓度或延长反应时间对抑制效应的影响,这正是临床用药最需要的信息.此外,大接种量下最大抑菌效应很低,表明不适合治疗.本方法为防治高抗药性菌株感染提供了药敏试验方法,也有益于促进新药研发药敏检测方法的改进.最后提出适于临床应用的、快速定性显示药物敏感性的方法的建议. 展开更多
关键词 药敏试验 抗菌药物 相对抑菌效应 等效线图
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基于高通量测序分析青贮玉米微生物多样性 被引量:6
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作者 朱见深 胡明 +5 位作者 齐静 骆延波 张庆 李璐璐 张印 刘玉庆 《山东农业科学》 2020年第4期68-72,共5页
青贮饲料发酵质量好坏很大程度上由其微生物组成决定。为了解青贮玉米微生物的多样性,利用高通量测序技术结合传统的纯培养技术,对31个青贮饲料样本进行微生物多样性分析。结果表明,青贮玉米微生物群落组成的共享核心菌属41个,占总样本... 青贮饲料发酵质量好坏很大程度上由其微生物组成决定。为了解青贮玉米微生物的多样性,利用高通量测序技术结合传统的纯培养技术,对31个青贮饲料样本进行微生物多样性分析。结果表明,青贮玉米微生物群落组成的共享核心菌属41个,占总样本微生物组成的87. 7%,丰度较大的(≥1%)有10个菌属,其中乳杆菌属、克雷伯菌属及魏斯氏菌属分别占42. 9%、12. 1%、10. 3%;真菌主要有念珠菌属、黑粉菌属、半乳糖霉菌属等。比较乳熟期组与蜡熟期组青贮的微生物群落,发现玉米的成熟度不同,青贮发酵产品中某些属微生物在数量上存在差别,但微生物群落组成无明显差异。本研究可为青贮饲料微生物群落结构及功能的研究提供参考。 展开更多
关键词 青贮玉米 高通量测序 微生物多样性
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山东省及周边地区肉鸭源大肠杆菌流行病学调查及耐药性分析 被引量:2
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作者 骆延波 李兰波 +5 位作者 贾纪美 齐静 李璐璐 胡明 刘玉庆 邓旭明 《山东农业科学》 2018年第2期119-123,共5页
为建立鸭大肠杆菌快速鉴定及药敏检测方法,筛选合适的抗生素,本试验从山东省12个、河北4个及河南4个地区养殖场或养殖小区采集到447份疑似感染鸭大肠杆菌的肉鸭肝脏和脑部组织病料,共分离到300株大肠杆菌,分离率为67.11%。利用大肠杆菌p... 为建立鸭大肠杆菌快速鉴定及药敏检测方法,筛选合适的抗生素,本试验从山东省12个、河北4个及河南4个地区养殖场或养殖小区采集到447份疑似感染鸭大肠杆菌的肉鸭肝脏和脑部组织病料,共分离到300株大肠杆菌,分离率为67.11%。利用大肠杆菌phoA基因为目的基因,建立了PCR快速鉴定鸭源大肠杆菌的方法。该PCR检测方法可快速鉴定鸭源大肠杆菌,鉴定效率显著提高。根据美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)标准及琼脂稀释法药敏试验原理,建立了96点接种药敏检测盒快速检测方法,结果表明:硫酸多粘菌素、甲磺酸培氟沙星抑菌率相对较高;卡那霉素、氨苄西林、氟苯尼考抑菌率相对较低。根据药敏检测结果可快速筛选适用的敏感药物和剂量,并交替轮流使用抗生素。 展开更多
关键词 大肠杆菌 药敏试验 多重耐药
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