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布鲁氏菌OMP25与OMP31蛋白的表达及其间接ELISA诊断试剂盒研制 被引量:5
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作者 王海丽 董炳梅 +2 位作者 李芬 许崇友 王金良 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期404-410,共7页
目的为建立布鲁氏杆菌间接ELISA检测方法。方法本研究根据GenBank中已登录猪种布鲁氏菌S2株全基因组序列,分别针对omp25和omp31设计一对引物,分别扩增并回收573 bp与783 bp目的基因片段,将其分别克隆入pET-28a原核表达载体中,构建重组质... 目的为建立布鲁氏杆菌间接ELISA检测方法。方法本研究根据GenBank中已登录猪种布鲁氏菌S2株全基因组序列,分别针对omp25和omp31设计一对引物,分别扩增并回收573 bp与783 bp目的基因片段,将其分别克隆入pET-28a原核表达载体中,构建重组质粒pET-OMP25与pET-OMP31,进行酶切鉴定与基因序列测定后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导表达,OMP25与OMP31蛋白主要以包涵体形式存在;将目的蛋白纯化,应用Western blot进行蛋白活性的检测。结果纯化的目的蛋白具有良好的免疫学活性。以纯化的重组蛋白为包被抗原,在确定了OMP25与OMP31蛋白最佳配比为4∶1、抗原最佳包被浓度为10μg/mL、血清的最佳稀释倍数为1∶50倍稀释、临界值为0.314的基础上,建立羊布鲁氏菌病抗体间接ELISA诊断方法并组装成诊断试剂盒,并将试剂盒进行了特异性、敏感性、重复性、符合率试验、血清交叉反应性等检测。结论研制的羊布鲁氏菌病抗体ELISA诊断试剂盒具有良好的特异性、敏感性,可重复性,可应用于临床样本检测。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 OMP25 OMP31 间接ELISA
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温度、水分含量及贮藏期对玉米、DDGS及花生粕霉菌与霉菌毒素B1的影响 被引量:5
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作者 丁丽 李会荣 +5 位作者 杨智国 朱良志 刘玉民 王星凌 武英 盛清凯 《山东畜牧兽医》 2014年第6期3-4,共2页
本文研究了温度、水分、贮藏期对玉米、DDGS及花生粕菌与霉菌素B1的影响。结果表明,对霉菌生长及黄曲霉毒素影响最大的是物料种类及水分含量。
关键词 温度 水分 贮藏期
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氨基酸螯合物对生长猪生长性能和粪便中微量元素含量的影响 被引量:3
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作者 尹志明 王莉 +1 位作者 孙春萍 刘玉民 《山东畜牧兽医》 2012年第10期12-13,共2页
80日龄杜长大三元猪共120头,随机分成4(A、B、C、D)组,每小组30只。A组作为对照组,不用氨基酸螯合铁、铜、锰、锌替代基础日粮的无机元素,B组、C组和D组分别用12.5%、25%、37.5%的氨基酸螯合铁、铜、锰、锌替代基础饲粮相应无机元素25%... 80日龄杜长大三元猪共120头,随机分成4(A、B、C、D)组,每小组30只。A组作为对照组,不用氨基酸螯合铁、铜、锰、锌替代基础日粮的无机元素,B组、C组和D组分别用12.5%、25%、37.5%的氨基酸螯合铁、铜、锰、锌替代基础饲粮相应无机元素25%、50%和75%。结果分析,与照组1组相比B组、C组、D组的日增重都提高了10.39%(P<0.05)、8.36%(P<0.05)、2.34%(P>0.05);料重比分别降低了7.09%(P<0.05)、7.09%(P<0.05)、1.42%(P>0.05)。结论:在生长猪日粮中添加微量元素氨基酸螯合物取代部分的无机微量元素可在一定程度上改善日增重和料重比。 展开更多
关键词 氨基酸螯合物 生长猪 日增重 料重比
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纳豆芽孢杆菌的分离培养与鉴定 被引量:3
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作者 孙春萍 尹志明 +1 位作者 王莉 刘玉民 《山东畜牧兽医》 2012年第10期14-16,共3页
根据纳豆芽孢杆菌耐盐、耐温、耐pH的能力及C/H值大小,从豆豉中分离出几株淀粉水解能力较强的菌株,通过初筛、复筛选出一株最优菌株,通过革兰氏染色、细胞形态、菌落形态观察和生理生化反应及大豆发酵试验,确定该菌株为枯草芽孢杆菌的... 根据纳豆芽孢杆菌耐盐、耐温、耐pH的能力及C/H值大小,从豆豉中分离出几株淀粉水解能力较强的菌株,通过初筛、复筛选出一株最优菌株,通过革兰氏染色、细胞形态、菌落形态观察和生理生化反应及大豆发酵试验,确定该菌株为枯草芽孢杆菌的一个变种。 展开更多
关键词 纳豆芽孢杆菌 分离 鉴定 生化试验
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乳酸菌微胶囊制剂的添加和不同养殖模式对断奶仔猪生长性能的影响 被引量:2
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作者 王莉 孙春萍 +1 位作者 尹志明 刘玉民 《山东畜牧兽医》 2012年第10期2-4,共3页
本试验将益生元、酶制剂和中药草加入到乳酸菌中制成微胶囊制剂,通过进行对比试验研究表明,猪在食用了加入乳酸菌微胶囊制剂的动物饲料后,日增重和饲料的转化率显著提高,大大降低断奶仔猪的腹泻和发病率,降低了垫料中总氮、总磷、铵态... 本试验将益生元、酶制剂和中药草加入到乳酸菌中制成微胶囊制剂,通过进行对比试验研究表明,猪在食用了加入乳酸菌微胶囊制剂的动物饲料后,日增重和饲料的转化率显著提高,大大降低断奶仔猪的腹泻和发病率,降低了垫料中总氮、总磷、铵态氮和养殖环境中氨气和硫化氢浓度的含量,为微生态饲料的研究奠定基础。 展开更多
关键词 乳酸菌微胶囊制剂 酶制剂 发酵床养猪技术
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克雷伯氏菌产1,3-丙二醇aldH基因缺失菌株的构建 被引量:2
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作者 杨建楼 郑海杰 +2 位作者 马春玲 王瑞明 陈利飞 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第4期56-60,共5页
该研究利用λRed重组技术对克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia)中的乙醛脱氢酶(ald H)基因进行敲除,成功构建缺失菌株K.pneumonia2-1Δald H,与原始菌株相比,缺失菌株K.pneumonia2-1Δald H发酵液中乙醇产量由原来的7.24 g/L降为0.47 g/L... 该研究利用λRed重组技术对克雷伯氏菌(Klebsiella pneumonia)中的乙醛脱氢酶(ald H)基因进行敲除,成功构建缺失菌株K.pneumonia2-1Δald H,与原始菌株相比,缺失菌株K.pneumonia2-1Δald H发酵液中乙醇产量由原来的7.24 g/L降为0.47 g/L,降低了93.51%;1,3-丙二醇产量由原来的78.83 g/L增长至82.55 g/L,提高了4.72.%;甘油转化率由60.64%增长至63.50%,提高了2.86%。缺失菌株K.pneumonia2-1Δald H 50 L发酵罐小试试验中,1,3-丙二醇的产量为78.13 g/L,乙醇产量为0.50 g/L。 展开更多
关键词 克雷伯氏菌 1 3-丙二醇 aldH基因 λRed同源重组
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米曲霉降解黄曲霉毒素培养工艺的研究
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作者 陈利飞 刘玉民 +2 位作者 孙春萍 尹志明 王莉 《中国饲料添加剂》 2016年第4期26-32,共7页
饲料霉变是困扰饲料工业和畜牧业生产的严重问题,其中饲料霉变中主要霉菌毒素为黄曲霉毒素。本研究主要利用米曲霉发酵制备黄曲霉毒素降解酶,以此降解黄曲霉毒素。通过单因素实验、正交试验和响应面优化实验确定了米曲霉的最优培养基... 饲料霉变是困扰饲料工业和畜牧业生产的严重问题,其中饲料霉变中主要霉菌毒素为黄曲霉毒素。本研究主要利用米曲霉发酵制备黄曲霉毒素降解酶,以此降解黄曲霉毒素。通过单因素实验、正交试验和响应面优化实验确定了米曲霉的最优培养基和培养工艺。 展开更多
关键词 米曲霉 黄曲霉毒素 降解率 培养基 培养工艺
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不同功能物质对猪粪发酵液产硫化氢的影响
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作者 王利民 刘玉民 +2 位作者 马常俊 武英 盛清凯 《山东农业科学》 2013年第6期96-98,共3页
研究不同剂量的外源色氨酸、果聚糖和酪蛋白对不同猪粪发酵液产硫化氢的影响。试验组日粮中添加纳豆芽孢杆菌,对照组不添加。猪粪液全部体外厌氧发酵。结果表明:试验组猪粪乳酸杆菌和梭菌含量分别高于(P<0.01)和低于(P<0.05)对照... 研究不同剂量的外源色氨酸、果聚糖和酪蛋白对不同猪粪发酵液产硫化氢的影响。试验组日粮中添加纳豆芽孢杆菌,对照组不添加。猪粪液全部体外厌氧发酵。结果表明:试验组猪粪乳酸杆菌和梭菌含量分别高于(P<0.01)和低于(P<0.05)对照组,发酵液硫化氢含量低于对照组(P<0.05);果聚糖对两组猪粪发酵液产硫化氢影响最大,色氨酸对两组猪粪发酵液产硫化氢影响最小。建议猪日粮中添加纳豆芽孢杆菌及调整猪粪中果聚糖含量以减少猪粪发酵液中硫化氢的产生。 展开更多
关键词 猪粪 色氨酸 果聚糖 酪蛋白 硫化氢
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