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高致病性H5N8亚型禽流感假病毒的制备与验证
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作者 胡敏昊 罗婉蓉 +5 位作者 夏艺丹 俞俊岭 周雪 方惟希 杨思天 何军 《安徽预防医学杂志》 2024年第1期1-5,27,共6页
目的为研究高致病性H5N8亚型(A/Astrakhan/3212/2020)禽流感病毒的结构,制备相应假病毒,并对其在细胞水平上的感染能力以及血清抗体的中和能力进行初步验证。方法通过对H5N8亚型病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的氨基酸序列分析,将目... 目的为研究高致病性H5N8亚型(A/Astrakhan/3212/2020)禽流感病毒的结构,制备相应假病毒,并对其在细胞水平上的感染能力以及血清抗体的中和能力进行初步验证。方法通过对H5N8亚型病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的氨基酸序列分析,将目的HA和NA序列进行优化并提取相应质粒,采用慢病毒包装系统制备H5N8亚型假病毒;使用感染含有α-2,6唾液酸受体的293T-ST6GAL1细胞后的荧光素酶读值、血凝抑制试验、透射电镜以及血清中和试验对制备的假病毒进行验证。结果成功制备H5N8亚型假病毒,其对293T-ST6GAL1细胞的感染力为103TCID50/m L,浓缩50倍后血凝活性从16提高到128,透射电镜可观察到典型的流感病毒颗粒,中和试验显示3份H5N8阳性血清中和活性明显高于其他亚型阳性血清以及阴性血清。结论成功制备高致病性H5N8亚型禽流感假病毒,为未来的疫苗开发和中和抗体筛选提供了重要的实验平台。 展开更多
关键词 H5N8亚型禽流感病毒 假病毒制备 血凝素 神经氨酸酶 中和试验
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