目的探讨荧光定量PCR（fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR）技术对Rh阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创性产前诊断胎儿RhD血型的可行性。方法选取78份妊娠11-40周、B超确诊为单胎的Rh阴性孕妇血浆。采用9...目的探讨荧光定量PCR（fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR）技术对Rh阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创性产前诊断胎儿RhD血型的可行性。方法选取78份妊娠11-40周、B超确诊为单胎的Rh阴性孕妇血浆。采用9个短串联重复序列（short tandem repeat，STR）多态性位点及Y染色体性别决定区基因（sex-determining region Y chromosome，SRY）确定胎儿DNA的存在；运用FQ-PCR技术对血浆中游离胎儿DNA进行RHD基因外显子5、7、10和内含子4定量分析，以确定胎儿RhD血型的基因型；其基因型结果与产后新生儿脐血血清学检测结果进行对比分析，回顾性评价胎儿基因定型结果的准确性。结果78份标本中，41份检测到SRY基因，平均浓度为（214．7±120．9）拷贝／ml，产后证实皆为男性。70份FQ-PCR基因定型结果与血清学结果相符，另有5份确定为假阳性，3份基因定型结果不可确定，检测结果总符合率为90％（70／78）。5份假阳性标本通过检测RHD1227A等位基因鉴定了4份RhD放散型，FQ-PCR最终结果准确率达到95％（74／78）。结论应用FQ-PCR方法进行非创性胎儿RhD血型检测可用于新生儿溶血病的预防和诊断。展开更多
文摘目的探讨荧光定量PCR（fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR）技术对Rh阴性孕妇血浆中游离胎儿DNA进行非创性产前诊断胎儿RhD血型的可行性。方法选取78份妊娠11-40周、B超确诊为单胎的Rh阴性孕妇血浆。采用9个短串联重复序列（short tandem repeat，STR）多态性位点及Y染色体性别决定区基因（sex-determining region Y chromosome，SRY）确定胎儿DNA的存在；运用FQ-PCR技术对血浆中游离胎儿DNA进行RHD基因外显子5、7、10和内含子4定量分析，以确定胎儿RhD血型的基因型；其基因型结果与产后新生儿脐血血清学检测结果进行对比分析，回顾性评价胎儿基因定型结果的准确性。结果78份标本中，41份检测到SRY基因，平均浓度为（214．7±120．9）拷贝／ml，产后证实皆为男性。70份FQ-PCR基因定型结果与血清学结果相符，另有5份确定为假阳性，3份基因定型结果不可确定，检测结果总符合率为90％（70／78）。5份假阳性标本通过检测RHD1227A等位基因鉴定了4份RhD放散型，FQ-PCR最终结果准确率达到95％（74／78）。结论应用FQ-PCR方法进行非创性胎儿RhD血型检测可用于新生儿溶血病的预防和诊断。
