玫瑰糠疹患者外周血IL-17和IL-22的表达 被引量：8

1

作者 周琼艳 叶小磊 +1 位作者 许素玲 彭岚 《中国麻风皮肤病杂志》 2016年第1期22-23,共2页

目的:检测外周血IL-17和IL-22在玫瑰糠疹患者中的水平。方法:采取酶联免疫(ELISA)双抗体夹心法,检测45例玫瑰糠疹急性期患者、45例恢复期患者和45名健康人外周血中IL-17和IL-22的水平。结果:玫瑰糠疹急性期、恢复期患者与正常对照组外周... 目的:检测外周血IL-17和IL-22在玫瑰糠疹患者中的水平。方法:采取酶联免疫(ELISA)双抗体夹心法,检测45例玫瑰糠疹急性期患者、45例恢复期患者和45名健康人外周血中IL-17和IL-22的水平。结果:玫瑰糠疹急性期、恢复期患者与正常对照组外周血IL-17浓度分别为45.08±14.34 pg/mL,29.34±11.88 pg/mL和15.51±8.79 pg/mL。IL-22浓度分别为85.43±20.01 pg/mL,61.26±10.37 pg/mL和50.54±13.28 pg/mL。三组IL-17和IL-22水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:玫瑰糠疹急性期及恢复期患者均存在IL-17和IL-22的表达异常,该疾病可能存在Th17细胞亚群失衡。 展开更多

关键词 玫瑰糠疹 ELISA IL-17 IL-22

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参麦注射液改善3T3-L1细胞的胰岛素抵抗 被引量：6

2

作者 毛玉山 陈轶尘 +3 位作者 赵亚荣 车晓航 陶金 叶小磊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2233-2238,共6页

目的:探讨参麦注射液改善3T3-L1脂肪前体细胞胰岛素抵抗模型的效果及其作用机制。方法:使用地塞米松等将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,使用油红O染色法检测脂肪细胞分化情况;用胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞以建立胰岛素抵抗模型... 目的:探讨参麦注射液改善3T3-L1脂肪前体细胞胰岛素抵抗模型的效果及其作用机制。方法:使用地塞米松等将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞,使用油红O染色法检测脂肪细胞分化情况;用胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞以建立胰岛素抵抗模型,并使用葡萄糖氧化酶法检测细胞上清液中葡萄糖浓度,以评价模型建立情况。将建立胰岛素抵抗的细胞分为空白对照组、10μmol/L罗格列酮阳性对照组、25 g/L参麦组和50g/L参麦组。MTT检测各组药物作用8、16、24和36 h后的细胞活力。药物作用8、16和24 h后测定细胞上清液葡萄糖浓度。免疫印迹检测葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)在各组中的蛋白水平。结果:成功建立3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,葡萄糖浓度数据显示参麦注射液(25、50 g/L)可以改善胰岛素抵抗并可以明显增加3T3-L1细胞GLUT4、PI3K及p-AKT的蛋白水平。结论:参麦注射液可以改善3T3-L1胰岛素抵抗细胞的葡萄糖利用,并且与增加GLUT4、PI3K及p-AKT的蛋白水平有关。 展开更多

关键词 胰岛素抵抗 参麦注射液 3T3-L1前脂肪细胞

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肿瘤微环境的渗透性增强与肿瘤治疗 被引量：4

3

作者 陈芳 陶金 +2 位作者 车晓航 熊素彬 叶小磊 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期264-267,共4页

肿瘤组织的渗透性增强与滞留效应是肿瘤大分子或纳米制剂靶向治疗的基础。一系列研究表明,通过细胞因子及热疗等可进一步增强肿瘤微环境的渗透性。本文详述了机体各细胞因子及其相互作用以及热疗等对肿瘤微环境渗透性的调节特性,与肿瘤... 肿瘤组织的渗透性增强与滞留效应是肿瘤大分子或纳米制剂靶向治疗的基础。一系列研究表明,通过细胞因子及热疗等可进一步增强肿瘤微环境的渗透性。本文详述了机体各细胞因子及其相互作用以及热疗等对肿瘤微环境渗透性的调节特性,与肿瘤靶向治疗的相关性等,为肿瘤靶向治疗提供新的策略。 展开更多

关键词 肿瘤微环境 渗透性 靶向治疗 细胞因子 热疗

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沉默C-SKI对大鼠心肌细胞H9C2细胞增殖与侵袭能力的影响研究 被引量：4

4

作者 凌佳 蔡振荣 +3 位作者 庄晓华 阚丽虹 汪飞 叶小磊 《贵州医药》 CAS 2018年第1期6-8,F0003,共4页

目的通过慢病毒载体沉默心肌细胞细胞系H9C2中C-SKI(c-ski)基因的表达,探讨C-SKI基因沉默后对心肌细胞细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用。方法应用RT-PCR及蛋白质印迹方法检测SW620,HT-29,LoVo,H9C2及RKO细胞系中C-SKI的表达状况;设计人C... 目的通过慢病毒载体沉默心肌细胞细胞系H9C2中C-SKI(c-ski)基因的表达,探讨C-SKI基因沉默后对心肌细胞细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用。方法应用RT-PCR及蛋白质印迹方法检测SW620,HT-29,LoVo,H9C2及RKO细胞系中C-SKI的表达状况;设计人C-SKI基因的shRNA慢病毒载体,在293T细胞中包装病毒并感染C-SKI高表达的心肌细胞细胞系,运用蛋白质免疫印迹的方法鉴定其对C-SKI基因的沉默效果;C-SKI基因沉默后通过MTT实验检测其对细胞增殖能力的影响,并应用Transwell迁移实验检测细胞的体外侵袭迁移能力。结果 C-SKI在H9C2中高表达,构建C-SKIshRNA慢病毒载体沉默H9C2细胞中C-SKI的表达,蛋白质免疫印迹结果提示,C-SKI稳定沉默的H9C2细胞构建成功。在稳定沉默C-SKI基因后,MTT法显示C-SKI沉默不会影响细胞的增殖能力。细胞小室实验结果显示,C-SKI沉默后H9C2侵袭和迁移能力均增强(P<0.001)。结论C-SKI基因能够一定程度上抑制心肌细胞的迁移和侵袭,进而参与了心肌细胞纤维化的发生发展。 展开更多

关键词 心肌细胞 C-SKI 细胞增殖 迁移

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硫化氢对糖尿病大鼠ED的影响和机制研究 被引量：2

5

作者 毛玉山 叶小磊 +7 位作者 麦一峰 王少敏 洪中立 王黎明 赵廷启 王铁樵 吕迪 何文明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期139-143,共5页

目的:观察硫化氢(H2S)对糖尿病(DM)大鼠勃起功能障碍(ED)的影响。方法:将70只SD雄性大鼠分为2组,60只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,10只注射生理盐水为正常对照。阿朴吗啡诱导勃起后检测DM造模成功大鼠的勃起功能情况,将存在E... 目的:观察硫化氢(H2S)对糖尿病(DM)大鼠勃起功能障碍(ED)的影响。方法:将70只SD雄性大鼠分为2组,60只腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DM大鼠模型,10只注射生理盐水为正常对照。阿朴吗啡诱导勃起后检测DM造模成功大鼠的勃起功能情况,将存在ED的36只大鼠随机分成3组:糖尿病对照组(DM组)、糖尿病+硫氢化钠组(DM+NaHS组)和糖尿病+西地那非组(DM+sildenafil组)。DM+NaHS组每天腹腔注射NaHS(50μmol/kg),DM+sildenafil组每天给予西地那非(5 mg/kg)灌胃,DM组每日腹腔注射生理盐水,注射体积为0.25 mL。持续饲养12周后,观察各组大鼠勃起功能情况,采集各组大鼠动脉血,测定血液中H2S含量及各组阴茎海绵体组织胱硫醚γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase,CSE)活性及CSE表达水平。结果:STZ诱发的DM造模成功率为81.7%(49/60),DM大鼠发生ED的比例为73.5%(36/49),与DM组比,DM+NaHS组和DM+sidenafil组大鼠勃起功能良好,3个实验组大鼠勃起率分别为(33.3±5.5)%、(54.5±5.3)%和(63.6±9.1)%。与正常大鼠组比,各组DM大鼠阴茎海绵体中CSE活性与表达水平均有下降,其中DM+NaHS组大鼠的CSE活性及表达水平显著低于DM组(P<0.05)和DM+sildenafil组(P<0.05)。结论:STZ诱导的糖尿病大鼠中ED发生率较高,H2S对糖尿病合并ED大鼠勃起功能有一定的促进作用。外源性给予H2S可以反馈性抑制大鼠阴茎组织中CSE的活性和表达。 展开更多

关键词 硫化氢 糖尿病 勃起功能障碍 胱硫醚γ-裂解酶

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抑郁症治疗非单胺作用靶标研究进展 被引量：2

6

作者 车晓航 叶小磊 陈春林 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第8期943-949,共7页

过去的几十年来,针对抑郁症治疗的药物虽然取得了一定的发展,但临床应用仍以单胺能靶标的药物为主。基于近年来对抑郁症分子机制的深入研究,研究人员发现抑郁症作为一种复杂的疾病,所涉及的过程并不仅仅局限于单胺能递质的失调,这使人... 过去的几十年来,针对抑郁症治疗的药物虽然取得了一定的发展,但临床应用仍以单胺能靶标的药物为主。基于近年来对抑郁症分子机制的深入研究,研究人员发现抑郁症作为一种复杂的疾病,所涉及的过程并不仅仅局限于单胺能递质的失调,这使人们得以突破单胺能递质的局限从而探求新的抗抑郁策略。本文将围绕这些新靶标以及相应分子机制的研究进展予以综述,并分析相应的发展前景。 展开更多

关键词 抑郁症 非单胺作用靶标 分子机制

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血竭素通过影响MAPK通路抑制神经胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡 被引量：2

7

作者 余建军 车晓航 +3 位作者 陶金 叶小磊 陈轶尘 陈晓东 《中国现代医生》 2015年第31期11-15,F0003,共6页

目的观察天然药物血竭素高氯酸盐（Dracorhodin perchlorate，Dp）对胶质瘤细胞U251和神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y抑制作用，并探讨其作用机制。方法于2013年12月～2014年12月期间采用四甲基偶氮唑盐（Mar）比色法检测不同浓度Dp（0～100... 目的观察天然药物血竭素高氯酸盐（Dracorhodin perchlorate，Dp）对胶质瘤细胞U251和神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y抑制作用，并探讨其作用机制。方法于2013年12月～2014年12月期间采用四甲基偶氮唑盐（Mar）比色法检测不同浓度Dp（0～100μM）z作用后细胞生长的抑制率；DAPI染色观察细胞形态学的变化；流式细胞术（FCM）检测Dp作用后细胞周期分布情况；Western blot检测凋亡相关蛋白以及增殖相关通路，并用小分子抑制剂确认通路靶点活化情况。结果血竭素高氯酸盐可以显著抑制胶质瘤细胞U251和神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y的增殖（P〈0．05），并使细胞周期阻滞在G0／G1期，细胞周期相关蛋白Cyclin D1和CDK4的表达随Dp浓度增加而减少，与0μM组比，差异有统计学意义（P〈0．05）。增殖相关通路研究显示，血竭素高氯酸盐作用细胞24h后Bax的表达明显增加，Bcl－2表达减少。p53蛋白的表达随药物作用浓度增加而上调，Caspase－3和Caspase－9活化形式表达随药物作用浓度增加而上调。下游信号通路显示，加入Dp后，MAPK通路中JNK和p38的磷酸化增强，加入对应的抑制剂SP600125（JNK抑制剂）和SB203580（p38MAPK抑制剂）后，可以减少由Dp所引起的凋亡。加人不同的凋亡抑制剂后，z-DEVD—fmk和z—LEHD—fmk对Dp诱导凋亡的拮抗作用最明显（P〈0．05）。结论血竭素可以抑制胶质瘤细胞U251和神经母细胞瘤细胞SH—SY5Y的增殖，阻滞细胞于G0／G1期。血竭素高氯酸盐可以诱导细胞发生内源性凋亡，并且通过活化Caspase-3以及Caspase-9诱导细胞凋亡，加入凋亡抑制剂z—DEVD—fmk和z—LEHD-fmk可在一定程度上减少凋亡细胞比例。研究机制表明Dp可能通过活化MAPK通路中的JNK和p38发挥促进凋亡的作用，加入对应抑制剂后会显著降低Dp所诱导的凋亡。 展开更多

关键词 血竭素 胶质瘤 凋亡 MAPK通路 JNK通路

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过表达缺氧诱导因子-1α的结直肠癌裸鼠可视化模型的建立 被引量：2

8

作者 李喆 叶小磊 +4 位作者 杨生生 殷佩浩 胡送娇 陈磊 房林 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期246-251,共6页

目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱... 目的:建立一种荧光可视化显像且稳定过表达缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)的裸鼠结直肠癌移植瘤模型。方法:对不同的人结直癌细胞系(SW480、SW620、LOVO及HCT116细胞)用缺氧诱导剂Co Cl2处理,根据HIF-1α被诱导表达的情况选择合适的靶细胞;将HIF-1α的c DNA序列克隆至慢病毒表达质粒p LV-TRC-EGFP,构建p LVHIF1α-EGFP慢病毒表达质粒,并包装过表达HIF-1α的慢病毒颗粒Lenti-HIF1α-EGFP。将Lenti-HIF1α-EGFP感染SW480细胞,嘌呤霉素筛选稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,Western blotting检测SW480HIF-1α细胞内HIF-1α及其下游蛋白VEGF、M1型丙酮酸激酶(pyruvate kinase expression M1,PKM1)的表达情况,Transwell实验检测其迁移能力。裸鼠腹腔注射SW480HIF-1α建立结直肠癌移植瘤模型,倒置荧光显微镜观察裸鼠腹腔移植瘤结节。结果:常氧条件下4种结直肠癌细胞均不表达HIF-1α,经Co Cl2诱导后,除SW480细胞系以外的细胞均可被诱导表达HIF-1α,故选择SW480细胞作为研究靶细胞。成功构建稳定过表达HIF-1α的细胞株SW480HIF-1α,SW480HIF-1α细胞内HIF-1α、VEGF和PKM1的表达水平均高于野生型SW480细胞,其迁移能力较野生型SW480细胞显著增强[观察视野内迁移细胞数:(250±11)vs(50±5)个,P<0.01]。SW480HIF-1α组裸鼠肠壁形成肿瘤结节数量显著多于SW480组[(15±4)vs(4±1)个,P<0.05]。结论:成功建立了高表达HIF-1α的荧光可视化裸鼠移植瘤模型,为进一步的相关功能学研究以及药物筛选提供条件。 展开更多

关键词 结直肠癌 移植瘤模型 稳定转染 慢病毒 缺氧诱导因子-1Α 绿色荧光蛋白

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沉默泡膜蛋白1对SW480细胞增殖与侵袭影响的研究 被引量：2

9

作者 郭显智 叶小磊 +3 位作者 车晓航 唐来芹 刘晓健 余明华 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期151-158,共8页

目的泡膜蛋白1(vacuole membrane protein-1,VMP1)是近年来新发现的一个重要功能的抑癌基因。为明确VMP1在结直肠癌中的功能和意义,本研究通过慢病毒载体沉默结直肠癌细胞系SW480中VMP1基因的表达,探讨VMP1基因沉默后对结直肠癌细胞增... 目的泡膜蛋白1(vacuole membrane protein-1,VMP1)是近年来新发现的一个重要功能的抑癌基因。为明确VMP1在结直肠癌中的功能和意义,本研究通过慢病毒载体沉默结直肠癌细胞系SW480中VMP1基因的表达,探讨VMP1基因沉默后对结直肠癌细胞增殖、凋亡及迁移的调控作用。方法应用RT-PCR及蛋白质印迹法检测5种结直肠癌细胞系中VMP1的表达状况;设计人VMP1基因的shRNA慢病毒载体,在293T细胞中包装病毒并感染VMP1高表达的结直肠癌细胞系,运用蛋白质印迹法鉴定其对VMP1基因的沉默效果;VMP1基因沉默后,通过MTT法和软琼脂克隆形成实验检测其对细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞技术检测细胞凋亡;运用Transwell迁移实验检测细胞的体外侵袭迁移能力。结果 VMP1在5种细胞系中存在差异性表达。具有低转移潜能的HT-29和SW480细胞与具有高转移潜能的LoVo、RKO和SW620细胞相比,有更高的VMP1表达水平,其中mRNA表达差异有统计学意义,t=3.88,P=0.005;而蛋白表达差异有统计学意义,t=14.29,P<0.001。选取低转移细胞株中VMP1表达相对较高的SW480细胞作为研究对象,构建VMP1shRNA慢病毒载体沉默SW480细胞中VMP1的表达。蛋白质印迹结果提示,VMP1稳定沉默的SW480细胞构建成功。在稳定沉默VMP1基因后,MTT法显示SW480细胞的增殖速度在24和48h显著升高,F值分别为79.77和12.35,P值分别为<0.001和0.025。软琼脂克隆形成实验结果显示,SW480细胞的集落数目显著增多,F=75.23,P<0.001。二者均表明SW480细胞增殖能力增强。流式细胞技术检测显示,VMP1基因沉默后可抑制SW480细胞凋亡,F=84.44,P<0.001。Transwell迁移实验结果显示,VMP1沉默后SW480迁移能力增强,F=155.90,P<0.001。结论 VMP1基因可能与结直肠癌的细胞增殖、凋亡与转移有关,进而参与了结直肠癌的发生、发展。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 泡膜蛋白1 细胞增殖 迁移

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基质金属蛋白酶-1基因启动子区(-1607)基因多态性与肾移植后环孢素诱导牙龈增生的相关性 被引量：1

10

作者 戴巧群 单海琴 +3 位作者 任雨 吴寅 孙科家 叶小磊 《中国现代医生》 2014年第30期152-155,共4页

目的研究MMP1基因单核苷酸多态（-1607）1G/2G与环孢素诱导牙龈增生（CsA-GO）发生风险的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析方法,分别检测42例环孢素诱导牙龈增生病人和118位正常对照者MMP1（-1607）1G/2... 目的研究MMP1基因单核苷酸多态（-1607）1G/2G与环孢素诱导牙龈增生（CsA-GO）发生风险的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）分析方法,分别检测42例环孢素诱导牙龈增生病人和118位正常对照者MMP1（-1607）1G/2G多态的基因型;以Logistic回归模型计算不同基因型与环孢素诱导牙龈增生风险的关系。结果环孢素诱导牙龈增生病例组的MMP1（-1607）3种基因型频率分布与对照组无显著差异（P=0.37）。携带MMP1（-1607）2G基因型者发生环孢素诱导牙龈增生的风险比携带1G基因型者高1.38倍（95%CI=0.81-2.36,P=0.24）,而1G基因型与环孢素诱导牙龈增生风险无关。结论 MMP1基因启动子区（-1607）1G/2G单核苷酸多态性可能并非环孢素诱导牙龈增生的遗传易感因素,携带2G基因型的患者发生CsA-GO的风险有增高趋势。 展开更多

关键词 牙龈增生 基质金属蛋白酶 基因多态性 遗传易感性

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新一代片段分析技术在丙型肝炎个体化治疗中的应用 被引量：1

11

作者 丁世雄 马建波 +3 位作者 高国生 叶小磊 颜进 吴勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第18期2587-2591,共5页

目的验证新一代片段分析技术（advanced fragment analysis,AFA）,对HCV基因分型及白细胞介素28B的2个SNP位点多态位点检测的可靠性,并探讨其在聚乙二醇干扰素联合利巴韦林抗HCV的疗效预判中的意义。方法收集132例慢性丙型肝炎患者外周... 目的验证新一代片段分析技术（advanced fragment analysis,AFA）,对HCV基因分型及白细胞介素28B的2个SNP位点多态位点检测的可靠性,并探讨其在聚乙二醇干扰素联合利巴韦林抗HCV的疗效预判中的意义。方法收集132例慢性丙型肝炎患者外周血样本。同时随访1年~2.5年,并将患者分成2组,比较HCV不同基因型以及携带不同SNP位点患者在2组中的差异。结果 AFA对样本进行分型检测,与Sanger测序法比较,准确性达到100%,随访发现感染HCV亚型为1b的患者、或者rs12979860 CT型、或rs8099917 TG型患者干扰素治疗后,复发概率高。结论AFA法检测丙型肝炎病毒基因分型及rs12979860和rs8099917位点多态性,具有准确性好、通量高、操作简便等特点,适合于临床推广应用。 展开更多

关键词 片段分析 丙型肝炎病毒 基因分型 单核苷酸多态性

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