类孟买血型家系α1，2岩藻糖基转移酶基因突变的分析 被引量：6

1

作者 梁伟 陈秀丽 +7 位作者 杨亮 邓丹菲 梅传亮 许德义 邓刚 贺芸蕾 周建霖 张哲 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期487-489,共3页

H血型抗原作为ABO血型形成的前体糖链，存在于几乎所有人的红细胞表面，除了罕见的H缺乏表现型个体，主要包括孟买型和类孟买型。孟买型定义为H完全缺乏的非分泌型，其血清学特点是红细胞表面缺乏ABH抗原，分泌液中缺乏H物质，其基因型... H血型抗原作为ABO血型形成的前体糖链，存在于几乎所有人的红细胞表面，除了罕见的H缺乏表现型个体，主要包括孟买型和类孟买型。孟买型定义为H完全缺乏的非分泌型，其血清学特点是红细胞表面缺乏ABH抗原，分泌液中缺乏H物质，其基因型为h／h，se／se；而类孟买型的定义尚存在争议，现在认为类孟买型一般指H部分缺乏的表现型。 展开更多

关键词 类孟买血型 酶基因突变 岩藻糖 类孟买型 红细胞表面 家系 转移 ABO血型

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HLA-A、-B功能表位错配对血液病患者血小板输注效果的影响分析

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作者 俞露 贺云蕾 +3 位作者 何意文 李双月 陈春销 邓刚 《中国输血杂志》 CAS 2024年第6期673-677,共5页

目的探究HLA抗原(human leukocyte antigen,HLA)功能表位错配(epitope mismatch,EM)对血液病患者血小板输注有效性的影响。方法对血小板供者和2021年6月—2023年6月间申请血小板血清学交叉配型和HLA基因配型的血液病患者,用PCR-SBT法进... 目的探究HLA抗原(human leukocyte antigen,HLA)功能表位错配(epitope mismatch,EM)对血液病患者血小板输注有效性的影响。方法对血小板供者和2021年6月—2023年6月间申请血小板血清学交叉配型和HLA基因配型的血液病患者,用PCR-SBT法进行HLA基因分型,HLA基因配型是基于CREG的原则为患者选择供者。对患者临床血小板输注资料进行回顾性分析,使用HLA Matchmaker 4.0软件分析供体-受体HLA EM信息,并从国际HLA表位注册网站(www.Epregistry.com.br)中查询相关HLA功能表位(Eplets)的表达量、基因分布等信息。评价HLA EM对血小板输注效果的影响。结果血液病患者血小板的输注有效性与患者性别、年龄无关,而与患者的血小板配型策略相关。当HLA EM总数在20以下时,供受者HLA EM总数越低的分组,其血小板输注有效率越高(χ^(2)=19.311,P=0.001),24 h血小板计数(Plt)增量校正值(CCI)平均数也越高(F=7.737,P<0.001)。供受者HLA EM总数与24 h CCI实际值呈负相关(Rho=-0.322,P<0.001)。进一步统计分析发现17个与血小板的输注有效性有关的Eplets,其基因位点分布可能是HLA-A(17.6%)或-B位点(64.7%)独有,或者是HLA-A和-B位点共享(17.6%);且其表达量可能是高表达(58.8%),或者是中等表达(41.2%)。结论HLA EM的总数是影响血小板输注有效性的重要因素;发现若干与血小板的输注有效性相关的HLA Eplets。 展开更多

关键词 血小板输注无效 抗原表位错配 HLA 表位

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基于微流控芯片的实时荧光定量PCR技术快速检测血小板制剂细菌污染 被引量：3

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作者 俞露 贺云蕾 邓刚 《临床检验杂志》 CAS 2022年第7期495-497,共3页

目的通过微流控芯片检测平台应用Taqman探针的实时定量PCR技术对血小板制剂中的细菌16S rDNA进行检测,探讨该体系在血小板细菌污染的快速检测的应用。方法向机采血小板中人为添加一定浓度的金黄色葡萄球菌或铜绿假单胞菌,模拟成10~2~10~... 目的通过微流控芯片检测平台应用Taqman探针的实时定量PCR技术对血小板制剂中的细菌16S rDNA进行检测,探讨该体系在血小板细菌污染的快速检测的应用。方法向机采血小板中人为添加一定浓度的金黄色葡萄球菌或铜绿假单胞菌,模拟成10~2~10~8 CFU/mL细菌污染的血液标本,经10倍梯度稀释后进行细菌计数及微流控芯片FQ-PCR检测细菌16S rDNA,并对检测体系进行特异性、检出限和重复性评价。结果微流控芯片FQ-PCR体系特异性较强,探针和引物对阳性标本均有反应,与空白对照无反应。对污染血小板的金黄色葡萄球菌,该方法的最低检出限为865 CFU/mL,而对铜绿假单胞菌的最低检出限为885 CFU/mL。当金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌浓度分别达到最低检测限时,空白对照与各细菌组的Ct值之差分别为4.35±1.01和2.03±0.61。各浓度菌液提取的DNA进行微流控芯片FQ-PCR扩增后的Ct值计算重复性指数在0.012~0.052范围内。结论微流控芯片FQ-PCR检测平台可特异、有效地检出血小板中的细菌污染,为确保输血安全提供帮助。 展开更多

关键词 微流控芯片 TAQMAN探针 16S rDNA 血小板 细菌污染

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MN血型四种方法检测比较分析 被引量：3

4

作者 许德义 孙春霞 +5 位作者 高家良 邓刚 梁伟 贺云蕾 彭明喜 童微星 《中国优生与遗传杂志》 2015年第8期37-39,4,F0002,共5页

目的比较MN血型四种方法检测方法的差异,为MN血型检测的准确性研究提供参考。方法分别用血型血清学、免疫印迹法、PCR-SSP法、直接测序法检测MN血型。血型血清学以免疫学为基础,按抗原抗体反应原理测定;免疫印迹法是把SDS电泳分离的红... 目的比较MN血型四种方法检测方法的差异,为MN血型检测的准确性研究提供参考。方法分别用血型血清学、免疫印迹法、PCR-SSP法、直接测序法检测MN血型。血型血清学以免疫学为基础,按抗原抗体反应原理测定;免疫印迹法是把SDS电泳分离的红细胞膜蛋白从凝胶转移到PVDF膜上,并检测目标蛋白。PCR-SSP法针对红细胞MN血型系统基因不同碱基的变异设计特异性引物进行测定;直接测序法可测出MN血型的相关外显子基因序列,并与正常人相应的测序进行比对。结果血清学方法检测MN血型200例,其中MM 57例(28.5%),MN 87例(43.5%),NN 56例(28%);基因频率:m为50.25%,n为49.75%。Ss血型系统中,表现型为ss 198例、Ss 2例,未检到SS血型。免疫印迹法结果表明不同血型的红细胞之间膜蛋白图谱基本相似,但存在一些差异点,提示不同血型的红细胞之间可能存在膜蛋白的差异。PCR-SSP法和测序法解决了血清学方法抗体特异性、大量输血患者或自身溶血性贫血患者等问题。4种方法测得的血型结果一致,符合率100%。其中直接测序法可获得核苷酸的变异,使得该方法在研究血型遗传机制中发挥着重要的作用。结论 4种方法检测结果之间不存在差异,但均有一定的局限性和优势,可实现相互验证,确保MN血型检测的准确性。 展开更多

关键词 MN血型 免疫印迹法 PCR-SSP GYPA基因 DNA测序

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CisAB_(01)-A_(102)血型分子遗传分析及其红细胞抗原表达 被引量：2

5

作者 孙春霞 邓刚 +2 位作者 贺云蕾 梁伟 许德义 《中国优生与遗传杂志》 2016年第1期24-26,共3页

目的探讨ABO血型系统中Cis AB01/A102血型的分子机理及其红细胞A、B抗原的表达情况。方法应用血清学、ABO基因直接测序、流式细胞仪检测等方法确定献血者ABO血型。结果发现了1例比较少见的Cis AB01/A102亚型,该亚型是由于ABO基因第7外... 目的探讨ABO血型系统中Cis AB01/A102血型的分子机理及其红细胞A、B抗原的表达情况。方法应用血清学、ABO基因直接测序、流式细胞仪检测等方法确定献血者ABO血型。结果发现了1例比较少见的Cis AB01/A102亚型,该亚型是由于ABO基因第7外显子存在467C>T、803G>C突变,分别引起多肽链P156L、G268A替换。Cis AB01/A102血型红细胞表面A抗原荧光强度强度正常,而B抗原荧光强度则比正常B血型抗原强度略低。结论 ABO基因467C>T、803G>C突变是导致Cis AB01亚型的分子遗传基础,同时该亚型红细胞B抗原荧光强度与正常红细胞相比均有一定程度的减弱。 展开更多

关键词 CIS AB ABO基因直接测序 流式细胞仪

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TRALI相关致病因子在输血患者中的表达分析 被引量：1

6

作者 俞露 许德义 +2 位作者 贺云蕾 邓刚 陆少燕 《临床血液学杂志》 CAS 2021年第8期541-544,共4页

目的:观察多次输血患者、输血相关性急性肺损伤(TRALI)疑似患者和健康献血者3个队列的TRALI相关致病因子,探讨TRALI的发病机制。方法:选取54例输血患者(多次输血患者27例,TRALI疑似患者27例)的外周血标本,另选36例正常献血者的外周血作... 目的:观察多次输血患者、输血相关性急性肺损伤(TRALI)疑似患者和健康献血者3个队列的TRALI相关致病因子,探讨TRALI的发病机制。方法:选取54例输血患者(多次输血患者27例,TRALI疑似患者27例)的外周血标本,另选36例正常献血者的外周血作为对照。用流式细胞仪检测多形核中性粒细胞(PMN)表面CD11a与CD11b抗原的分布与表达,用ELISA法检测外周血细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白含量。结果:与TRALI疑似患者、多次输血患者相比,献血者(97.50%±1.68%)PMN含CD11a和CD11b抗原的阳性率均显著高于TRALI疑似患者(79.37%±18.57%)和多次输血患者(87.93%±8.91%),差异有统计学意义(P=0.0036,P=0.0022)。与献血者(64.39±21.08 ng/mL)比较,TRALI疑似患者血浆中ICAM-1蛋白含量(99.69±28.10 ng/mL)相对较高,差异有统计学意义(P=0.0024);而多次输血患者(85.41±35.54 ng/mL)与献血者比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究发现献血者人群PMN细胞的CD11b激活状态比例较高,而多次输血患者和TRALI疑似患者的PMN细胞可能由于炎症因子等因素干扰逐渐丧失CD11a和CD11b抗原活性。此外,PMN的致敏黏附聚集和ICAM-l参与的炎症反应有关。 展开更多

关键词 输血相关性急性肺损伤 中性粒细胞 细胞间黏附分子-1

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血小板中hsa_circ_0060079的生物信息学分析与验证

7

作者 郝秀芳 俞露 邓刚 《全科医学临床与教育》 2022年第3期259-261,共3页

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类高度保守、高稳定性的非编码RNA,可作为miRNA海绵通过吸附miRNA调控其靶基因的表达,从而调控其他相关RNA的表达水平[1]。circRNA呈封闭环状结构,不受RNA外切酶影响,表达更稳定,不易降解。近年的研... 环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类高度保守、高稳定性的非编码RNA,可作为miRNA海绵通过吸附miRNA调控其靶基因的表达,从而调控其他相关RNA的表达水平[1]。circRNA呈封闭环状结构,不受RNA外切酶影响,表达更稳定,不易降解。近年的研究表明,circRNA分子富含miRNA结合位点,在细胞中起到miRNA海绵的作用,能阻断或降低miRNA对基因的抑制作用,从而促进靶基因的表达[2]。 展开更多

关键词 环状结构 非编码RNA 生物信息学分析 血小板 结合位点 抑制作用

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1例罕见AB3亚型的分子机制

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作者 蔡斌 王燕 +3 位作者 许德义 贺云蕾 俞露 邓刚 《临床检验杂志》 CAS 2019年第3期188-190,共3页

目的探讨1例罕见AB3亚型的分子机制。方法对1例ABO血型正反定型不符患者的血型通过血清学鉴定、PCR-SSP、ABO基因直接测序、TA克隆单体型分析等方法分析其分子机制。结果该患者血型鉴定为比较少见的A102/B301亚型,该亚型是由于ABO基因... 目的探讨1例罕见AB3亚型的分子机制。方法对1例ABO血型正反定型不符患者的血型通过血清学鉴定、PCR-SSP、ABO基因直接测序、TA克隆单体型分析等方法分析其分子机制。结果该患者血型鉴定为比较少见的A102/B301亚型,该亚型是由于ABO基因第七外显子存在1054C/T杂合导致R352W氨基酸改变所致。结论 ABO基因存在1054C>T,该突变可能是导致B301亚型的分子遗传基础之一。关健词: 展开更多

关键词 ABO血型 AB3亚型 ABO基因

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PCR-SSP技术在红细胞ABO血型快速基因分型中的应用研究 被引量：9

9

作者 梁伟 周建霖 +6 位作者 杨亮 许德义 黄丹丹 邓刚 梅传亮 韩新乐 张哲 《中华全科医学》 2015年第8期1323-1327,F0003,共6页

目的探讨PCR-SSP技术用于临床标本红细胞ABO血型快速定型的可行性。方法利用PRIMER 5软件针对A101等位基因c DNA第261、703 SNP位点不同的碱基设计4对序列特异性引物;通过温度梯度PCR反应确定各个引物对的最佳退火温度;利用基因测序技... 目的探讨PCR-SSP技术用于临床标本红细胞ABO血型快速定型的可行性。方法利用PRIMER 5软件针对A101等位基因c DNA第261、703 SNP位点不同的碱基设计4对序列特异性引物;通过温度梯度PCR反应确定各个引物对的最佳退火温度;利用基因测序技术来评价PCR-SSP的性能;用100例临床盲样的SSP结果与其相应的血清学结果的比对来观测该方法临床应用的有效性;选择26例血清学定型结果有疑问的临床疑难标本进一步考察该法的性能。结果确定261G、261A、703A以及703G的最佳退火温度分别为70℃、64℃、60℃、64℃;通过随机抽取5例不同反应格局的标本进行第6、7外显子基因测序,测序结果表明该4对引物可以对261位点G缺失情况以及703位点G/A的分布情况进行有效鉴别;100例的临床盲样检测与血清学完全一致;26例血清学定型有疑问的标本通过该法可以为血清学实验提供有效的参考依据。结论 PCR-SSP基因分析技术在红细胞ABO血型快速鉴定方面具有可行性,在临床常规标本血型方面性能可靠并可作为ABO定型临床疑难标本进行进一步的DNA测序的依据。 展开更多

关键词 序列特异性引物聚合酶链反应 单核苷酸多态性 ABO血型 基因分型

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一例A3血型样本的分子机制 被引量：5

10

作者 梁伟 杨亮 +5 位作者 梅传亮 许德义 邓刚 贺芸蕾 刘奕宇 张哲 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期703-706,共4页

目的研究1例ABO定型时出现混合外观凝集特征个体的分子遗传机制。方法应用血清学方法和流式细胞术鉴定其ABO红细胞表型，序列特异性引物聚合酶链反应（sequence-specificprimer-polymerasechainreaction，PCR-SSP）方法进行ABO基因型的... 目的研究1例ABO定型时出现混合外观凝集特征个体的分子遗传机制。方法应用血清学方法和流式细胞术鉴定其ABO红细胞表型，序列特异性引物聚合酶链反应（sequence-specificprimer-polymerasechainreaction，PCR-SSP）方法进行ABO基因型的初步检测，对ABO基因第6、7外显子进行聚合酶链反应和DNA序列分析，并进一步通过克隆测序法鉴定ABO基因单倍型。结果样本在首次离心时正定型呈现0型的血清学表型，多次离心后红细胞与抗A血清出现混合凝集外观；红细胞表面ABO抗原的流式细胞术检测结果显示仅有部分红细胞表达A抗原；PCR—SSP检测结果显示ABO基因型为A／0，AB0基因第6、7外显子测序结果的多态性位点碱基分布为261G／A、425T／T、467C／T、646A／T、681A／G、745C／T、771C／T、829A／G，单倍型序列分析结果为A307／002杂合子，A307等位基因与A101相比，在第7外显子的467C〉T、745C〉T错义突变，导致A糖基转移酶多肽链Pr0156Leu、Arg249Trp替换。结论在中国大陆人群中首次检出一种A变异型的等位基因A307，是引发A3血清表型的重要原因。 展开更多

关键词 ABO血型 A3亚型 混合外观凝集

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β2糖蛋白I在247位点Val／Leu多态性与中国汉族系统性红斑狼疮患者血栓并发症的相关性研究

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作者 张哲 梁伟 +6 位作者 王庭辉 杨亮 许德义 邓刚 黄丹丹 梅传亮 郭雯玉 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期836-839,I0001,共5页

目的探讨β2糖蛋白I（β2GPI）基因多态性与系统性红斑狼疮（SLE）患者血栓并发症的相关关系；明确β2GPI基因多态性与抗β2GH抗体浓度的相关性。方法选择90例首次因诊断SLE收住宁波市第一医院风湿科的住院患者，同时选择宁波市中心血... 目的探讨β2糖蛋白I（β2GPI）基因多态性与系统性红斑狼疮（SLE）患者血栓并发症的相关关系；明确β2GPI基因多态性与抗β2GH抗体浓度的相关性。方法选择90例首次因诊断SLE收住宁波市第一医院风湿科的住院患者，同时选择宁波市中心血站健康献血员90名作为健康对照组，采用序列特异性引物聚合酶链反应技术（PCR—SSP）检测β2GPI基因多态性，并通过测序确认基因多态性检测的有效性；选用酶联免疫吸附法（ELISA）检测SLE患者组样本抗β2GPI抗体的浓度；基因型频率和等位基因频率的差异采用矿检验。结果SLE有血栓并发症患者、无血栓并发症患者、健康人群的β2GPI247位基因型频率分别为VV 56％，VL38％，LL6％；VV9％，VL70％，LL20％；VV9％，VL67％，LL24％。等位基因频率分别为：V75％，L25％；V45％，L55％；V42％，L58％。有血栓表现的SLE患者与没有血栓症状的SIN患者相比β2GPI247位点V/V基因型和V等位基因频率明显偏高（X^2=15．568，P=0．001；X^2=9．730，P=0．003），而没有血栓表现的SLE患者与健康对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）；β2GPI基因多态性与抗β2GPI抗体浓度有明显的关联性[比值比（0R）=7．143，P=0．001]，抗β2GPI抗体阳性患者中β2GPI247位点V/V基因型频率明显高于阴性患者（X^2=12．321，P=0．001），同时也高于健康对照组（X^2=14．079，P=0．001），但抗β2GPI抗体阴性患者与健康对照组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论β2GPI在247位V/V基因型对抗β2GPI抗体的产生有强的相关性，并且β2GPI的V/V基因型在SLE血栓患者中频率明显升高。 展开更多

关键词 红斑狼疮 系统性 Β2糖蛋白I 基因多态性 血栓 中国汉族人群

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不规则抗体鉴定在疑难配血中的临床意义 被引量：11

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作者 许德义 彭明喜 董国飞 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第11期1217-1219,共3页

目的鉴定受血者红细胞血型不规则抗体,确保临床输血安全。方法在配血困难时筛查红细胞抗体,对抗体阳性受血者进行抗体特异性鉴定及抗体效价检测,以确定该抗体的临床意义。结果在21例配血困难受血者中,检出各类已知特异性抗体13例,其中抗... 目的鉴定受血者红细胞血型不规则抗体,确保临床输血安全。方法在配血困难时筛查红细胞抗体,对抗体阳性受血者进行抗体特异性鉴定及抗体效价检测,以确定该抗体的临床意义。结果在21例配血困难受血者中,检出各类已知特异性抗体13例,其中抗-E 8例、抗-D 1例、抗-e 2例、抗-c 1例、抗-M 1例。结论对有交叉配血不合、输血史、妊娠史等需要接受输血者,特别是配血困难者作常规抗体筛选试验,鉴定红细胞抗体有利于保障临床输血安全。 展开更多

关键词 抗体鉴定 疑难配血 输血安全

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γ射线照射红细胞超微结构的扫描和透射电镜观察

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作者 许德义 彭明喜 +3 位作者 余红卫 张哲 张继伟 董国飞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期360-360,共1页

关键词 显微镜检查 电子 扫描 显微镜检查 电子 扫描透射 Γ射线 红细胞 超微结构

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