目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10...目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10μmol/L)去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷处理SMMC-7721细胞,用甲基化特异性PCR法检测miR-1247-5p基因启动子区甲基化水平;用SYBR Green qReal Time PCR法检测miR-1247-5p的表达。结果与正常人肝细胞系LO_2相比,肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达降低(P<0.05)且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平高;经去甲基化药物干预后miR-1247-5p的表达较对照组有明显上调(P<0.01),且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平降低。结论 miR-1247-5p基因甲基化调控可能参与了肝癌的发生。展开更多
文摘目的探讨不同浓度黄芪甲苷对急性髓系白血病HL60细胞系增殖和凋亡的影响。方法用含不同浓度黄芪甲苷的培养液培养HL60细胞,CCK-8实验和台盼蓝染色法检测细胞增殖及生长情况;流式细胞术和Hochest 33258染色实验检测细胞凋亡情况;Real time PCR和Western blot方法检测细胞Bax、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平变化情况。结果与对照组相比,160μmol·L^(-1)和320μmol·L^(-1)黄芪甲苷均可降低HL60细胞存活率(P均<0.01)。经10、20、40、80μmol·L^(-1)黄芪甲苷干预72 h后,HL60细胞凋亡比率逐渐升高(P<0.01),细胞出现核固缩、核碎裂等凋亡形态变化越明显。Real time PCR和Western blot实验结果发现,细胞凋亡促进因子Bax的基因转录水平和蛋白表达水平均升高(P均<0.05),细胞凋亡抑制因子Bcl-2的基因转录水平和蛋白表达水平均下降(P均<0.05)。结论一定药物浓度干预下,黄芪甲苷可抑制急性髓系白血病HL60细胞增殖并诱导其发生凋亡。
文摘目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10μmol/L)去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷处理SMMC-7721细胞,用甲基化特异性PCR法检测miR-1247-5p基因启动子区甲基化水平;用SYBR Green qReal Time PCR法检测miR-1247-5p的表达。结果与正常人肝细胞系LO_2相比,肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达降低(P<0.05)且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平高;经去甲基化药物干预后miR-1247-5p的表达较对照组有明显上调(P<0.01),且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平降低。结论 miR-1247-5p基因甲基化调控可能参与了肝癌的发生。
