促卵泡刺激素对小鼠卵巢玻璃化冻存的抗凋亡作用 被引量：3

1

作者 陈杰 王燕蓉 +1 位作者 常青 于泊洋 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期540-542,共3页

目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存... 目的:观察小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)在小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中的抗凋亡作用。方法:将4周龄C57BL/6J雌性小鼠卵巢组织,分为新鲜对照组(CG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0. 3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),玻璃化冻存条件为小鼠卵巢入培养液在37℃二氧化碳培养箱培养60 min,接着入1.5 mol/L乙二醇中预渗透平衡8 min,再移入EG5.5-30玻璃化液渗透平衡3.5 min,之后投入-196℃的液氮罐中保存1 d,全过程在22～24℃下进行。每组20枚卵巢,10枚进行HE染色后的正常卵泡百分比计数,10枚进行免疫组织化学法观察。结果:与对照组(CG)比较,玻璃化冻存对照组(VCG)正常卵泡百分比显著降低,active caspase-3的表达量显著升高(P<0.05);与玻璃化冻存对照组(VCG)比较,0.3 IU/ml FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH)组的正常卵泡百分比明显升高,active caspase-3的表达量显著降低(P<0.05)。结论:小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH干预可有效抵抗凋亡执行蛋白active caspase-3的表达,有利于卵巢组织形态结构的保护。 展开更多

关键词 小鼠 卵巢 FSH 玻璃化冻存 active CASPASE-3

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胎牛血清联合FSH对玻璃化冻存小鼠卵巢的保护作用 被引量：2

2

作者 苏芹 裴承斌 +4 位作者 张淑雅 罗晓强 徐荣荣 王燕蓉 裴秀英 《宁夏医科大学学报》 2016年第6期629-633,598,共6页

目的观察玻璃化冻存液中联合添加促卵泡刺激素(follicle-stimulatiny hormore,FSH)与胎牛血清对卵巢的保护作用,为优化卵巢玻璃化冷冻保存技术提供科学依据。方法将3周龄雌性ICR小鼠卵巢分为新鲜对照组(FCG)、空白对照玻璃化冻存组(B-V... 目的观察玻璃化冻存液中联合添加促卵泡刺激素(follicle-stimulatiny hormore,FSH)与胎牛血清对卵巢的保护作用,为优化卵巢玻璃化冷冻保存技术提供科学依据。方法将3周龄雌性ICR小鼠卵巢分为新鲜对照组(FCG)、空白对照玻璃化冻存组(B-VCG)、FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VCG)、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)干预玻璃化冻存组(FBS-VCG)、FBS联合FSH干预玻璃化冻存组(FBS+FSH-VCG)5组,采用卵泡计数方法计算正常卵泡率,采用免疫组织化学方法及蛋白免疫印迹技术观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 FBS+FSH-VCG组的正常卵泡百分比高于B-VCG组(P=0.012),FBS+FSHVCG组和FBS-VCG(P=0.751)和FSH-VCG(P=0.693)组比较差异无统计学意义(P>0.05);与FCG组相比,玻璃化冻存各组卵巢组织内的凋亡蛋白Bax表达均升高(P均<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达均减少(P均<0.05);与B-VCG组比较,FBS-VCG、FSH-VCG和FBS+FSH-VCG组的Bcl-2蛋白表达较高(P均<0.05),Bax蛋白表达率较低(P均<0.05);在FBS+FSH-VCG组中,Bcl-2/Bax比值大于1,Bcl-2表达占优势,与B-VCG组相比差异有统计学意义(P=0.034),FBS+FSH-VCG组与FCG组Bcl-2表达相似。结论小鼠卵巢组织玻璃化冻存过程中胎牛血清和FSH的添加可以减少对卵巢组织的冷冻损伤,提高正常卵泡百分比,二者联合添加对卵巢的保护效果最好。 展开更多

关键词 玻璃化冻存 小鼠卵巢 正常卵泡百分比 胎牛血清 FSH BCL-2/BAX

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结核分枝杆菌TB10.4亚单位疫苗的构建及免疫原性研究

3

作者 胡健 裴秀英 +4 位作者 苏芹 王博 高玉婧 蒲静 张宁 《宁夏医科大学学报》 2015年第6期626-630,共5页

目的构建结核分枝杆菌TB10.4基因的原核表达载体,表达和纯化该蛋白,构建亚单位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法从重组质粒p ET-SUMO-TB 10.4获得基因片断后,将其插入到载体p ET-28a(+),转化Ecoli DH5α感受态细胞,随机筛选阳性克隆,... 目的构建结核分枝杆菌TB10.4基因的原核表达载体,表达和纯化该蛋白,构建亚单位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法从重组质粒p ET-SUMO-TB 10.4获得基因片断后,将其插入到载体p ET-28a(+),转化Ecoli DH5α感受态细胞,随机筛选阳性克隆,测序正确后并将该重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化并复性。随机将C57BL/6雌性小鼠分为Tris-HCl组、TB10.4组(佐剂为DDA/Poly I∶C)及卡介苗(BCG)3组,每组10只,每只小鼠每次免疫200μL,其中DDA250μg及Poly I∶C 25μg,蛋白量为20μg,而BCG为5×106CFU,分别于1、4、7周皮下免疫小鼠。末次免疫4周后,用特异性抗原TB10.4刺激脾淋巴细胞,检测其分泌IFN-γ水平;用ELISA检测血清特异性抗体Ig G2b、Ig G1。结果构建了原核表达重组质粒p ET-28a-TB10.4,并在分子量约为10.4k Da处观察到蛋白条带;小鼠血清中产生特异性抗体Ig G2b与Ig G1,体外脾淋巴细胞受TB10.4刺激时分泌IFN-γ水平显著高于Tris-HCl组(P<0.05)及BCG组(P<0.05)。结论 TB10.4蛋白与佐剂构建了亚单位疫苗,该疫苗可在C57BL/7小鼠中诱导抗原特异性免疫应答,可作为新型结核亚单位疫苗的候选疫苗予以进一步研究。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 TB10.4 免疫原性

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卵巢移植对去势大鼠海马神经元和雌激素膜受体GPR30表达的影响 被引量：2

4

作者 刘芳 黑常春 +6 位作者 孔斌 常青 郑小敏 吴凯 周文献 朱万平 赵承军 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第7期889-893,共5页

目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元形态、尼氏体数量和雌激素膜受体GPR30表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组、去势组和卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢移植... 目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元形态、尼氏体数量和雌激素膜受体GPR30表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组、去势组和卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢移植组在切除双侧卵巢7 d后,肾被膜下移植出生3 d内乳鼠的卵巢。于移植后的7、14、21和28 d,尼氏染色观察海马神经元形态、尼氏体数量;免疫组织化学法和Western blot检测GPR30蛋白的表达。结果去势组随去势时间延长,海马神经元排列散乱,胞体皱缩,核固缩深染,神经元尼氏体数量减少(P<0.05),GPR30表达减少(P<0.05)。卵巢移植组随移植时间的延长,细胞形态逐渐好转并与正常形态接近,海马神经元内尼氏体数量和GPR30蛋白表达逐步恢复,并接近对照组。结论卵巢移植可以逆转去势所致神经元形态改变,并提高GPR30蛋白的表达,促进海马神经元蛋白合成功能的恢复。 展开更多

关键词 卵巢去势 卵巢移植 海马神经元 GPR30

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小鼠卵巢玻璃化冻融过程中FSH干预对血管生成相关因子表达的影响 被引量：2

5

作者 张红 马文叶 +12 位作者 杨延周 裴秀英 常青 马会明 马文智 孙苗 于佳 蔡玉芳 王红燕 黑常春 赵承军 孔斌 王燕蓉 《宁夏医科大学学报》 2015年第7期735-740,封2,共7页

目的在小鼠卵巢玻璃化冻融过程中给予重组人卵泡雌激素(r FSH)干预,通过观察其对卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSH-R)及与血管生成相关的Integrinαvβ3、Angpt-2、Kindlin-2蛋白表达的影响,提供FSH干预对卵... 目的在小鼠卵巢玻璃化冻融过程中给予重组人卵泡雌激素(r FSH)干预,通过观察其对卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSH-R)及与血管生成相关的Integrinαvβ3、Angpt-2、Kindlin-2蛋白表达的影响,提供FSH干预对卵巢血管生成相关因子影响的依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、0.3IU·m L-1FSH干预玻璃化冻存组(FSH-VG)。对3组卵巢内各级卵泡进行计数;通过免疫组化方法观察并分析各组FSH-R、Angpt-2、Kindlin-2在卵巢不同细胞中的定位;观察粘附分子Integrinαvβ3在各组卵巢细胞中表达,并进行亚基表达量的分析。结果FSH-VG组的原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡及总卵泡数均高于VCG组,但低于FCG组(P均<0.05),闭锁卵泡数VCG组高于FCG及FSH-VG组(P均<0.05);FSH-R与Angpt-2阳性表达呈现FSH-VG与VCG组均低于FCG组(P<0.05),但FSH-VG组高于VCG组(P<0.05);Kindlin-2阳性表达在FSH-VG组与FCG组之间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.01或<0.05);Integrinβ3蛋白表达量FCG与FSH-VG组间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于VCG组(P<0.05),Integrinαv的表达3组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加FSH可以上调FSH-R及粗血管生成的相关因子Integrinβ3、Angpt-2和Kindlin-2蛋白的表达,提高正常卵泡数。 展开更多

关键词 小鼠卵巢 RFSH 玻璃化冻存 FSH-R Integrin ΑVΒ3 Angpt-2 Kindli

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宁夏回族与汉族人群基质金属蛋白酶9基因单核苷酸多态性的分布特征 被引量：1

6

作者 马雯 马玲玲 +6 位作者 李燕 潘琳 耿芝 盛优静 马占兵 陆宏 霍正浩 《宁夏医科大学学报》 2016年第6期666-669,673,封3,共6页

目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP 9)基因rs2236416、rs3787268和rs3918254位点在宁夏回、汉族以及不同性别间的分布特征。方法采用Taq Man基因分型技术,分析614例(回族304例,汉族310例)宁夏籍学生MMP9基因3个单核苷酸多态性位点基因型,比... 目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP 9)基因rs2236416、rs3787268和rs3918254位点在宁夏回、汉族以及不同性别间的分布特征。方法采用Taq Man基因分型技术,分析614例(回族304例,汉族310例)宁夏籍学生MMP9基因3个单核苷酸多态性位点基因型,比较不同民族及性别基因频率的分布差异。结果宁夏回、汉族人群MMP 9 rs2236416、rs3787268、rs3918254 3个SNP位点等位基因频率分别为rs2236416(A:86.2%/87.9%,G:13.8%/12.1%);rs3787268(A:33.5%/38.9%,G:66.5%/61.1%);rs3918254(C:64.6%/68.9%,T:35.4%/31.1%),除了rs2236416位点基因型频率在回、汉族女性之间差异有统计学意义(P<0.05),其余SNP位点基因型频率在回、汉族群体以及不同性别间差异均无统计学意义(P>0.05)。rs3787268位点基因型频率分布与欧洲人群不同(P<0.05);rs3918254位点基因型频率分布与欧洲人群和非洲人群之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MMP9 rs2236416基因型频率在女性群体中有民族间差异,rs3787268、rs3918254多态性位点等位基因频率在宁夏回、汉族以及不同性别之间均无差异;rs3787268、rs3918254位点的基因型频率分布在种族和地区间存在差异。 展开更多

关键词 MMP9基因 基因多态性 回族 汉族

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卵巢移植对去势大鼠海马神经元PSD-95表达的影响 被引量：1

7

作者 王丽梅 刘芳 +5 位作者 黑常春 吴凯 郑小敏 朱万平 常青 赵承军 《宁夏医科大学学报》 2015年第7期745-748,封3,共5页

目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元尼氏体数量、突触后密度蛋白95(PSD-95)表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组,去势组和去势卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢... 目的观察去势大鼠卵巢移植后海马神经元尼氏体数量、突触后密度蛋白95(PSD-95)表达的变化,评价卵巢移植对海马神经元功能的保护作用。方法成年雌性SD大鼠分为对照组,去势组和去势卵巢移植组。对照组行假手术,去势组行双侧卵巢切除,卵巢移植组在切除双侧卵巢后,肾被膜下移植出生3d内乳鼠的卵巢。在去势和移植后的7、14、21和28d,尼氏染色测量海马神经元尼氏面积;免疫组织化学法和Western-blot检测PSD-95蛋白的表达情况。结果对照组见正常海马形态,神经元尼氏体丰富,PSD-95蛋白表达于神经元胞体。去势组随去势时间延长,海马神经元排列散乱,神经元层数减少,海马神经元胞体有皱缩,核有固缩深染。在去势28d时,尼氏体面积,PSD-95累计光密度和蛋白表达量分别减少到对照组的6.42%,33.33%和42.48%(P均<0.05)。卵巢移植组神经元形态随移植时间逐渐接近正常形态,在移植28d时,海马神经元内尼氏体面积,PSD-95累计光密度和蛋白表达量分别恢复到对照组的81.68%,86.67%和88.50%(P>0.05)。结论卵巢去势可损害海马神经元的功能和减少PSD-95蛋白的表达,卵巢移植可以逆转去势所致神经元形态改变,并提高PSD-95蛋白的表达。 展开更多

关键词 去势 卵巢移植 海马神经元 突触后密度蛋白95

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冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN和GRB10DNA甲基化及表达的影响 被引量：1

8

作者 周雪 王燕蓉 +6 位作者 田龙 马良宏 颜贝 田稼 张帆 周岳 王红燕 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2017年第1期54-59,共6页

目的探讨精液冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN、GRB10甲基化状态和mRNA表达的影响。方法将20份人精液标本平行分为2组:新鲜组(n=20)和冷冻组(n=20)。采用计算机辅助精子分析(CASA)进行两组精液的常规参数检测;Percoll密度梯度离心法... 目的探讨精液冷冻复苏过程对人精子印记基因SNRPN、GRB10甲基化状态和mRNA表达的影响。方法将20份人精液标本平行分为2组:新鲜组(n=20)和冷冻组(n=20)。采用计算机辅助精子分析(CASA)进行两组精液的常规参数检测;Percoll密度梯度离心法纯化精子,SNRPN、GRB10基因的甲基化率采用Sequenom DNA测序分析;SNRPN、GRB10基因的mRNA表达采用qRT-PCR定量分析。结果冷冻组精子浓度、精子活力、前向运动精子百分比均低于新鲜组(P<0.05),冷冻组不活动精子百分比显著高于新鲜组(P<0.05);冷冻组精子SNRPN mRNA表达显著低于新鲜组(P<0.05);冷冻组精子GRB10启动子区亚片段检测的-902Cp G位点(即转录起始点上游989 bp处)的甲基化率显著下降(P<0.05);GRB10 mRNA表达较新鲜组显著升高(P<0.05)。结论冷冻复苏过程影响人精子GRB10、SNRPN基因的DNA甲基化和mRNA表达,提示精子库常规使用的精液冻储技术可能改变配子的表观遗传信息,进而调控基因的表达。 展开更多

关键词 精液冷冻 DNA甲基化 小分子核糖体蛋白多肽N 生长因子受体结合蛋白10

原文传递

小鼠卵巢玻璃化冻存全程添加FSH、FSH+LH对Cx43表达的影响

9

作者 陈杰 常青 +7 位作者 杨延周 裴秀英 马文智 马会明 黑常春 于佳 孙苗 王燕蓉 《宁夏医科大学学报》 2015年第12期1391-1395,封4,共6页

目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵... 目的通过在玻璃化冻存全程给予小鼠卵巢组织促卵泡刺激素(FSH)、FSH和促黄体生成素(LH)共同干预,观察FSH及FSH+LH干预对冻存卵巢卵泡缝隙连接蛋白(connexin-43,Cx43)表达的影响,从而判断最佳的激素保护方法。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织分为新鲜对照组(CG),玻璃化冻存对照组(VCG),0.3IU·m L^(-1)FSH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH),以及0.15IU·m L^(-1)FSH+0.15IU·m L^(-1)LH全程干预玻璃化冻存组(OG-FSH+LH)。通过免疫组织化学法、Western blot技术及荧光定量PCR检测,观察并分析各组卵巢组织Cx43蛋白表达量。结果免疫组织化学及Western blot检测结果表明Cx43蛋白表达量在OG-FSH+LH组最高,其次为OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),各组间两两比较差异均有统计学意义(P均<0.05);荧光定量PCR检测结果显示Cx43mRNA表达量从高到低依次为OG-FSH+LH组、OG-FSH组、CG组及VCG组(P<0.05),且各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冻存全程添加FSH+LH的干预方式更有利于冻融卵巢组织缝隙连接蛋白Cx43蛋白的表达。 展开更多

关键词 小鼠 卵巢 促卵泡刺激素 促黄体生成素 玻璃化冻存 缝隙连接蛋白

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rhFSH干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶表达及卵泡凋亡的影响

10

作者 马文叶 张红 +11 位作者 杨延周 裴秀英 常青 马会明 马文智 孙苗 于佳 蔡玉芳 王红燕 黑常春 赵承军 王燕蓉 《宁夏医科大学学报》 2015年第12期1379-1383,封2,共6页

目的通过观察重组人卵泡刺激素(rh FSH)干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)表达以及卵泡凋亡的影响,提供rh FSH降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡作用的实验室依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为三组:新鲜... 目的通过观察重组人卵泡刺激素(rh FSH)干预对玻璃化冻融小鼠卵巢中葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)表达以及卵泡凋亡的影响,提供rh FSH降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡作用的实验室依据。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为三组:新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU·L^(-1)rh FSH干预玻璃化冻存组(rh FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学技术及Western blot技术,观察并分析各组卵巢内葡萄糖神经酰胺转移酶(UGCG)、抗凋亡蛋白Bcl2和促凋亡蛋白Bax在卵巢不同细胞中的定位和蛋白表达量。结果与FCG组相比,两个冻融组卵巢结构较疏松,但rh FSH-VG组卵泡基质结构较VCG组整齐且较致密。原始卵泡、初级卵泡、正常卵泡和卵泡总数的计数及UGCG和Bcl2的表达显示,rh FSH-VG组高于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均低于FCG组(P<0.05)。闭锁卵泡计数和Bax的表达显示rh FSH-VG组低于VCG组(P<0.05),但这两个冻融组均高于FCG组(P<0.05)。结论玻璃化冻融过程中添加rh FSH可以上调UGCG和Bcl2的表达,下调Bax表达,提示其可能通过降调神经酰胺的含量从而达到抗凋亡目的。 展开更多

关键词 小鼠卵巢 重组人卵泡刺激素 玻璃化冻融 葡萄糖神经酰胺转移酶 BCL2 Bax

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XRCC1 Arg399Gln与老年性年龄相关白内障的关联研究

11

作者 郭孟境 徐惠芳 +4 位作者 彭亮 张钏 裴利国 杨帆 霍正浩 《宁夏医科大学学报》 2013年第5期493-496,606,共5页

目的探讨XRCC1Arg399Gln与老年性年龄相关白内障的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测260例年龄相关白内障患者和276例年龄相匹配正常对照者的XRCC1基因Arg399Gln。结果病例组XRCC1Arg399Gln A等位... 目的探讨XRCC1Arg399Gln与老年性年龄相关白内障的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测260例年龄相关白内障患者和276例年龄相匹配正常对照者的XRCC1基因Arg399Gln。结果病例组XRCC1Arg399Gln A等位基因频率和GA+AA基因型频率在病例组明显升高于对照组,G等位基因频率和GG基因型频率在对照组明显升高(P<0.05)。结论 XRCC1Arg399Gln与宁夏人群老年年龄相关性白内障存在关联性。 展开更多

关键词 XRCC1 基因多态性 年龄相关性白内障

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玻璃化冻融不同时段rFSH联合rLH干预对小鼠卵巢VEGF及Cx37表达的影响 被引量：3

12

作者 陈杰 王燕蓉 +2 位作者 常青 黑常春 孙苗 《宁夏医科大学学报》 2019年第2期114-120,共7页

目的通过在玻璃化冻存的不同时段给予小鼠卵巢组织重组人卵泡刺激素(recombinant follicle-stimulating hormone,rFSH)与重组人黄体生成素(recombinant luteinizing hormone,rLH)共同干预,观察对冻融小鼠卵巢组织的形态学、血管内皮生... 目的通过在玻璃化冻存的不同时段给予小鼠卵巢组织重组人卵泡刺激素(recombinant follicle-stimulating hormone,rFSH)与重组人黄体生成素(recombinant luteinizing hormone,rLH)共同干预,观察对冻融小鼠卵巢组织的形态学、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及缝隙连接蛋白(connexin-37,Cx37)表达的影响。方法将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢组织随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、冻存全程添加rFSH+rLH组(OG-rFSH+rLH)、冻存前添加rFSH+rLH组(BG-rFSH+rLH)以及冻存后添加rFSH+rLH组(AG-rFSH+rLH),干预组浓度均为0.15IU·mL^(-1) rFSH+0.15IU·mL^(-1) rLH。通过形态学、免疫组织化学技术观察并分析各组卵巢组织形态结构及VEGF、Cx37蛋白表达量的改变;通过Realtime PCR技术检测并分析各组VEGF及Cx37 mRNA的表达变化。结果正常卵泡百分比在VCG组最低,OG-rFSH+rLH组最高(P<0.05),在BG-rFSH+rLH组低于OG-rFSH+rLH组,高于FCG组、VCG组及AG-rFSH+rLH组(P<均0.05);干预组VEGF蛋白表达量由高到低依次为OG-rFSH+rLH组、BG-rFSH+rLH组、AGrFSH+rLH组,且均高于VCG组(P<0.05);Cx37蛋白表达量及VEGF mRNA表达量均为OG-rFSH+rLH组最高,VCG组最低(P<0.05);Cx37 mRNA表达量在OG-rFSH+rLH组最高,VCG组最低,FCG组高于VCG组,低于BG-rFSH+rLH组和AG-rFSH+rLH组(P均<0.05)。结论玻璃化冻存过程添加rFSH+rLH的干预模式提升卵泡存活率、VEGF、Cx37蛋白及mRNA的表达,最佳干预效果依次为全程干预、冻存前时段干预及冻存后时段干预。 展开更多

关键词 小鼠 卵巢 重组人卵泡刺激素 重组人黄体生成素 血管内皮生长因子 缝隙连接蛋白 玻璃化冻存

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