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miR-17-5p靶向自噬相关蛋白ATG7调控巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染作用的研究 被引量:9
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作者 洪丹彤 张帆 +5 位作者 王淑娥 王红霞 刘昆梅 徐广贤 霍正浩 郭乐 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1-8,共8页
目的:通过研究miR-17-5p对自噬相关基因ATG7的靶向调控机制和对细胞自噬的作用,探究miR-17-5p在结核分枝杆菌介导的自噬途径中的作用及其机制。方法:生物信息学分析得到miR17-5p的靶基因ATG7,通过成功构建载体ATG7野生型(pMirGLO-ATG7-3... 目的:通过研究miR-17-5p对自噬相关基因ATG7的靶向调控机制和对细胞自噬的作用,探究miR-17-5p在结核分枝杆菌介导的自噬途径中的作用及其机制。方法:生物信息学分析得到miR17-5p的靶基因ATG7,通过成功构建载体ATG7野生型(pMirGLO-ATG7-3'UTR-WT)和突变型,利用双萤光素酶报告系统、Western blot验证miR-17-5p和ATG7的靶向关系,同时构建结核分枝杆菌(H37Ra)感染的人源性THP-1巨噬细胞模型,将做不同处理的细胞分为三组:miR-17-5p mimics、miR-17-5p inhibitor、miR-17-5p nc。通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测H37Ra感染对miR-17-5p表达量的影响,并且进一步通过Western blot、免疫荧光观察检测LC3蛋白的表达量和自噬小体的数量。结果: MTB感染能够引起miR-17-5p的下调,随着感染复数的增加有明显的降低。而生物信息学预测结果显示miR-17-5p与ATG7具有靶向性,双萤光素酶报告实验、Western blot验证miR-17-5p能够和ATG7靶向结合,并对其进行负调控。进一步通过Western blot、免疫荧光观察发现miR-17-5p mimics组LC3Ⅱ的表达下调,自噬小体表达降低,而miR-17-5p inhibitor组相反。其中对H37Ra感染组与未感染组之间比较,ATG7和LC3Ⅱ蛋白表达明显增强。结论: miR-17-5p直接靶向结合ATG7 3'UTR抑制自噬,在巨噬细胞抗MTB过程中发挥作用。 展开更多
关键词 自噬 结核分支杆菌 miR-17-5p ATG7
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双氢睾酮调节原代培养大鼠Sertoli细胞GDNF的表达
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作者 常青 王丽梅 +6 位作者 黑常春 蔡玉芳 吴凯 孔斌 朱万平 沈新生 赵承军 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第11期1481-1485,共5页
目的观察双氢睾酮对原代培养大鼠Sertoli细胞GDNF及相关细胞信号通路关键蛋白的表达,探讨Sertoli细胞GDNF表达调控的机制。方法原代培养出生后20 d大鼠Sertoli细胞,给予双氢睾酮干预,免疫荧光检测GDNF在细胞中定位和表达强度,Western b... 目的观察双氢睾酮对原代培养大鼠Sertoli细胞GDNF及相关细胞信号通路关键蛋白的表达,探讨Sertoli细胞GDNF表达调控的机制。方法原代培养出生后20 d大鼠Sertoli细胞,给予双氢睾酮干预,免疫荧光检测GDNF在细胞中定位和表达强度,Western blot检测GDNF,ERK和CREB蛋白的表达及磷酸化情况,并用ERK和c AMP/PKA信号通路抑制剂干预。结果 GDNF表达在Sertoli细胞质中,双氢睾酮干预可增加GDNF的表达(P<0.05),并使ERK和CREB磷酸化水平增高(P<0.05),使用ERK和c AMP/PKA信号通路抑制剂可减低双氢睾酮诱导的GDNF表达(P<0.05)。结论双氢睾酮通过激活ERK信号通路诱导Sertoli细胞GDNF的表达。 展开更多
关键词 双氢睾酮 SERTOLI细胞 GDNF ERK 信号通路
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白细胞介素1受体拮抗剂基因多态性与复发性自然流产的关联性研究 被引量:2
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作者 张静 包俊华 +5 位作者 赵学峰 刘芳 王国平 陆宏 党洁 霍正浩 《宁夏医科大学学报》 2012年第5期435-437,共3页
目的探讨白细胞介素1受体拮抗剂(Interleukin-1 Receptor Antagonist,IL-1Ra)基因多态性与宁夏汉族复发性自然流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)的相关性。方法应用聚合酶链反应(PolymeraseChain Reaction,PCR)技术检测191例反... 目的探讨白细胞介素1受体拮抗剂(Interleukin-1 Receptor Antagonist,IL-1Ra)基因多态性与宁夏汉族复发性自然流产(Recurrent Spontaneous Abortion,RSA)的相关性。方法应用聚合酶链反应(PolymeraseChain Reaction,PCR)技术检测191例反复自然流产患者和193例健康对照IL-1RN第二内含子中可变串联重复序列(Variable Number of Tandem Repeats,VNTR)多态性。结果 RSA组和对照组IL-1RN*1/1、IL-1RN*1/2、IL-1RN*1/3、IL-1RN*1/4、IL-1RN*2/2基因型频率分别为75.39%、20.42%、0、1.05%、3.14%和83.94%、11.92%、1.04%、2.07%、1.04%;等位基因IL-1RN*1、IL-1RN*2的频率分别为86.13%、13.35%和91.45%、6.99%,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。携带有IL-1RN*2等位基因的个体发生复发性自然流产的危险性显著高于携带IL-1RN*1的个体(OR=2.03,95%CI:1.242~3.308)。结论 IL-1RN*2可能与宁夏汉族复发性自然流产的遗传易感性有关。 展开更多
关键词 白细胞介素1受体拮抗剂 基因 多态性 复发性自然流产
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宁夏回汉族人群MBL基因G54A位点多态性的分布特征
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作者 随瑞枝 刘芳 +3 位作者 李岩 高玉婧 蒋学峰 裴秀英 《宁夏医科大学学报》 2011年第7期629-631,635,共4页
目的探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)结构基因外显子1第54位密码子点突变G54A多态性在宁夏回汉族人群的分布特征。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测MBL基因外显子1第54位密码子点突变G54A的基因型。结果 (1... 目的探讨甘露聚糖结合凝集素(MBL)结构基因外显子1第54位密码子点突变G54A多态性在宁夏回汉族人群的分布特征。方法应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测MBL基因外显子1第54位密码子点突变G54A的基因型。结果 (1)宁夏回与汉族群体的MBL基因54(G/A)多态性位点基因型频率和等位基因频率的分布差异无统计学意义(P>0.05);(2)宁夏群体的基因型频率分布与高加索人等群体差异无统计学意义(P>0.05),而与广东汉族群体以及日本群体比较差异有统计学意义(P<0.01);(3)宁夏人群第54位密码子等位基因频率与高加索人等群体差异无统计学意义(P>0.05),而等位基因频率与广东汉族、张家口汉族以及日本群体差异有统计学意义(P<0.01)。结论不同的区域种族群体MBL结构基因外显子1第54位密码子的基因型频率和等位基因频率分布不尽一致。 展开更多
关键词 甘露糖结合凝集素 基因多态性 回族 汉族
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