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临床用间充质干细胞的质量控制研究 被引量:5
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作者 耿洁 张磊 +3 位作者 韩之波 王有为 王斌 韩忠朝 《中国医药生物技术》 2013年第3期225-230,共6页
科学界取得的突破性进展正在使干细胞治疗疾病成为可能,美、英、法、韩、印、中等国均开展了多项间充质干细胞制品的临床研究。但由于研究机构间缺乏统一规范,各机构对于干细胞制品无统一的衡量标准,造成研究结果无法相互认可和形成... 科学界取得的突破性进展正在使干细胞治疗疾病成为可能,美、英、法、韩、印、中等国均开展了多项间充质干细胞制品的临床研究。但由于研究机构间缺乏统一规范,各机构对于干细胞制品无统一的衡量标准,造成研究结果无法相互认可和形成公认的结论,阻碍了研究进程;任何一项科学研究都是循序渐进的,干细胞作为新型治疗手段,在其分离、扩增、制备、贮存、传送、回输等过程中,制品的一致性、稳定性如缺乏有效的控制方法,将导致干细胞治疗的安全性、有效性评价很难实现;随着对干细胞的认识不断加深,广大科研工作者结合自身的研究,提出自己的经验和体会,不断与国际标准接轨,对提高我国干细胞研究的水平具有重要意义。欢迎全国各有关单位和专业人员踊跃参与讨论,为临床用间充质干细胞的质量研究建言献策,使这项技术健康有序的发展,造福广大患者。 展开更多
关键词 间充质干细胞 临床研究 质量控制 干细胞治疗 科学研究 国际标准 有效性评价 科研工作者
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脐带间充质干细胞移植对肠辐射损伤模型鼠治疗作用的实验研究 被引量:3
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作者 曹晓沧 王邦茂 +8 位作者 赵辉 杜利清 王彦 李进 王芹 杜伟廷 刘强 韩忠朝 樊飞跃 《中国辐射卫生》 2010年第3期257-261,共5页
目的探讨脐带间充质干细胞移植对小鼠肠道损伤的治疗作用,为人急性肠型放射病的治疗寻找可靠的供体来源。方法体外诱导观察间充质干细胞的体外多向分化能力。对肠道放射损伤模型鼠移植CM-D iI荧光标记后的人间充质干细胞,组化染色观察... 目的探讨脐带间充质干细胞移植对小鼠肠道损伤的治疗作用,为人急性肠型放射病的治疗寻找可靠的供体来源。方法体外诱导观察间充质干细胞的体外多向分化能力。对肠道放射损伤模型鼠移植CM-D iI荧光标记后的人间充质干细胞,组化染色观察肠道粘膜的病理变化,激光共聚焦显微镜观察供体细胞在模型鼠肠道粘膜的定位。结果移植MSC5周后模型鼠的一般状况和肠道病理学表现明显改善,荧光示踪发现移植细胞分布于肠粘膜淋巴组织内和腺上皮细胞间,提示MSC可能参与了肠道粘膜的修复过程。结论脐带间充质干细胞移植可以明显改善模型鼠的肠道病变,有望用于人急性肠型放射病的治疗。 展开更多
关键词 电离辐射 肠型放射病 间充质干细胞 细胞移植
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间充质干细胞的来源及其对肝脏损伤及修复的研究进展 被引量:4
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作者 赵钦军 任红英 韩忠朝 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2014年第4期32-41,共10页
全球终末期肝病、肝衰竭的发病率和死亡率逐年升高,且目前肝移植是唯一疗效确切的治疗选择,但是,肝移植的使用受到肝源供体严重不足,长期存活率低,医疗费用昂贵等缺点使得原位肝移植的应用受限,绝大多数患者无法受益。为了克服肝脏器官... 全球终末期肝病、肝衰竭的发病率和死亡率逐年升高,且目前肝移植是唯一疗效确切的治疗选择,但是,肝移植的使用受到肝源供体严重不足,长期存活率低,医疗费用昂贵等缺点使得原位肝移植的应用受限,绝大多数患者无法受益。为了克服肝脏器官短缺,干细胞替代治疗策略逐渐成为另一个肝病治疗的重要选择,干细胞治疗,特别是间充质干细胞(MSC)提供了一个新的肝病治疗选择。MSC是一群贴壁生长的成纤维细胞样细胞,由于MSC能够分化为多种类型的细胞,能够产生多种的细胞因子和生长因子,具有造血支持和免疫调节和抗炎功能,MSC被认为在再生医学领域具有重大的科学和实用价值。另外,由于MSC应用于治疗实验性肝损伤能明显提高动物存活率,明显改善肝功能。此外,一些临床前研究和临床研究也表明MSC对肝损伤性疾病具有显著地疗效。因此MSC在损伤性和退行性肝脏疾病的治疗具有广阔的应用前景。本文综述了MSC在肝损伤疾病治疗应用的进展,并对MSC在肝病治疗中的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 间充质干细胞 肝细胞 肝损伤 肝衰竭
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间充质干细胞生长汇合度自动分析算法研究 被引量:2
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作者 白华 张凤凤 +4 位作者 张诚 赵军发 严淑琳 张建中 韩之波 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第11期1444-1451,共8页
细胞生长汇合度是细胞体外培养环节中的重要参数。目前的细胞汇合度评估方法主要依靠人工,其结果效率低、精度差,且主观性强。图像处理技术具有快速、准确、自动化程度高等优点,在生物医学领域应用日益广泛,用来分析细胞汇合度可以在很... 细胞生长汇合度是细胞体外培养环节中的重要参数。目前的细胞汇合度评估方法主要依靠人工,其结果效率低、精度差,且主观性强。图像处理技术具有快速、准确、自动化程度高等优点,在生物医学领域应用日益广泛,用来分析细胞汇合度可以在很大程度上提高检测效率和客观准确性。该文提出的贴壁细胞生长汇合度自动分析算法首先运用灰度形态学的高低帽变换组合与背景减除相结合的预处理增强图像对比度,然后运用改进的K-Means聚类算法将前景和背景进行粗略地区分,最后通过面积滤波和二值形态学的算法组合对图像进行后处理,实现前景和背景的良好区分并计算细胞汇合度。实验结果显示,该算法准确性较高,可有效替代传统人工方法对细胞汇合度进行自动检测。 展开更多
关键词 间充质干细胞 细胞汇合度 数学形态学 改进的K-Means算法 图像处理
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性别对小型猪基础麻醉效果的影响 被引量:2
5
作者 刘天文 李剑明 +4 位作者 王帆 李军 高作潮 赵梦 张杰民 《实验动物科学》 2020年第1期66-68,73,共4页
目的探究性别对小型猪基础麻醉效果的影响。方法30只巴马香猪和24只农大Ⅱ系小型猪,雌雄各半。首剂量200 mg陆眠宁复合10 mg咪达唑仑,于耳后颈部肌注,完成基础麻醉。观察记录动物达到保定效果所用的时间以及追加药物的剂量。结果巴马香... 目的探究性别对小型猪基础麻醉效果的影响。方法30只巴马香猪和24只农大Ⅱ系小型猪,雌雄各半。首剂量200 mg陆眠宁复合10 mg咪达唑仑,于耳后颈部肌注,完成基础麻醉。观察记录动物达到保定效果所用的时间以及追加药物的剂量。结果巴马香猪组,雌性较雄性平均追加30%~50%的首剂量;农大Ⅱ系组,雌性较雄性平均追加50%~100%的首剂量。结论研究表明性别影响小型猪的基础麻醉用药量和麻醉起效时间。加大对雌性个体的麻药剂量,可以缩短麻醉躁动期和手术准备时间。 展开更多
关键词 性别 小型猪 基础麻醉
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携氧抗休克液对清醒大鼠重度失血性休克中血乳酸和碱剩余变化的影响 被引量:3
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作者 张艳 马涛 杨成民 《安徽医药》 CAS 2016年第1期38-40,共3页
目的观察携氧抗休克液对清醒大鼠重度失血性休克复苏过程中血乳酸和剩余碱变化的影响,以评估其对失血性休克复苏的作用。方法 24只SD大鼠在清醒状态下经股动脉释放其全身总血量的65%,制作重度失血性休克模型,随机分为3组,每组8只,即生... 目的观察携氧抗休克液对清醒大鼠重度失血性休克复苏过程中血乳酸和剩余碱变化的影响,以评估其对失血性休克复苏的作用。方法 24只SD大鼠在清醒状态下经股动脉释放其全身总血量的65%,制作重度失血性休克模型,随机分为3组,每组8只,即生理盐水(NS)组、万汶组(羟乙基淀粉130/0.4)和携氧抗休克液组(万汶+HBOCs)组。分别在休克前,休克末、复苏后及复苏后2 h,抽取血液进行血乳酸(LD)、剩余碱(BE)的测定。结果休克后,LD浓度明显高于休克前(P<0.01)。复苏后,三组大鼠LD均有所下降,携氧抗休克液组下降最明显,万汶组次之,NS组最差,差异有统计学意义(P<0.01);复苏2 h后,三组大鼠LD均有所下降,携氧抗休克液体组下降最明显,基本恢复到休克前水平(P>0.05);万汶组次之,NS组最差,差异有统计学意义(P<0.05)。结论携氧抗休克液体能明显的降低重度失血性休克大鼠动脉血乳酸含量,改善碱剩余,减轻代谢性酸中毒,保护组织细胞,减少无氧代谢所造成的损伤。 展开更多
关键词 清醒大鼠 重度失血性休克 携氧抗休克液 血乳酸盐 碱剩余
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酶制剂对面包品质的影响 被引量:2
7
作者 冯莉 解云 +1 位作者 王珊珊 侯慧娟 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2013年第14期66-68,73,共4页
研究木聚糖酶、脂肪酶和蛋白酶对面包品质及老化的影响。通过正交试验确立添加0.001%木聚糖酶、0.00013%脂肪酶,不添加蛋白酶为加工面包的最优化工艺条件。脂肪酶是影响感官的主要因素,三种酶共同影响面包的硬度及破碎性。
关键词 木聚糖酶 脂肪酶 蛋白酶 面包
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内镜冷光辐射对美蓝染色胃癌细胞SGC7901 DNA损伤的研究
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作者 曹晓沧 杜伟廷 +6 位作者 刘强 赵辉 杜利清 王彦 王邦茂 韩忠朝 樊飞跃 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期489-491,共3页
目的 探讨胃镜冷光源照射对美蓝(MB)染色后的胃癌细胞DNA的损伤情况,并探索损伤的发生机制和作用规律.方法 应用单细胞凝胶电泳技术,检测DNA损伤情况;Annexin VFITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡;采用荧光探针DCFH-DA,进行细胞内... 目的 探讨胃镜冷光源照射对美蓝(MB)染色后的胃癌细胞DNA的损伤情况,并探索损伤的发生机制和作用规律.方法 应用单细胞凝胶电泳技术,检测DNA损伤情况;Annexin VFITC/PI双染后流式细胞仪检测细胞凋亡;采用荧光探针DCFH-DA,进行细胞内活性氧(ROS)检测.结果 冷光照射MB染色的SGC7901细胞后,其DNA损伤程度较未照射组增加(F=8.39,P<0.05),损伤严重程度与光照时间呈正相关,光照停止则有损伤修复,照射后细胞较未照射细胞出现明显凋亡(x2=7.71,P<0.05);同时,经照射后的细胞内ROS高于未照射组(F=34.11,P<0.01).结论 美蓝色素内镜的冷光辐射可造成SGC7901细胞的DNA损伤,并诱发细胞凋亡,其作用机制与光化学反应激发产生的过量ROS有关. 展开更多
关键词 色素内镜 美蓝 单细胞凝胶电泳 活性氧 细胞凋亡 辐射
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基于CiteSpace可视化分析间充质干细胞治疗糖尿病足的研究现状及趋势
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作者 贾红红 杜文静 喻昊 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2022年第5期282-288,共7页
目的探索间充质干细胞(MSCs)治疗糖尿病足的研究现状,研究热点和研究趋势。方法本文利用分析软件CiteSpace和文献管理软件EndNote,运用可视化分析方法对近10年内Web of science数据库中收录的MSCs用于治疗糖尿病足的研究文献数据进行处... 目的探索间充质干细胞(MSCs)治疗糖尿病足的研究现状,研究热点和研究趋势。方法本文利用分析软件CiteSpace和文献管理软件EndNote,运用可视化分析方法对近10年内Web of science数据库中收录的MSCs用于治疗糖尿病足的研究文献数据进行处理,从研究作者、研究机构、科学分类和关键词等方面绘制知识图谱。结果共纳入231篇文献。(1)研究热点主要包括创面修复、血管新生、生长因子和诱导分化等;(2)旁分泌作用和诱导分化机制在糖尿病足的皮肤再生和伤口愈合中发挥有益作用;(3)突变词(2020年至2022年)主要包括"脂肪源间充质干细胞"与"临床试验";(4)在领域交流合作方面我国的研究机构和学者占主导地位,且在研究学科上呈多学科研究趋势。结论通过可视化分析初步展示近10年糖尿病足的研究现状、热点与趋势,且描绘MSCs治疗糖尿病足的临床应用与价值,为今后糖尿病足的研究工作提供有益参考和借鉴。 展开更多
关键词 间充质干细胞 糖尿病足 可视化分析 知识图谱
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人脐带间充质干细胞注射液的长期稳定性研究
10
作者 耿洁 张磊 +1 位作者 王斌 韩忠朝 《中国医药生物技术》 2013年第3期230-234,共5页
近年来随着干细胞研究的快速发展,干细胞逐渐在医学领域得到广泛应用。为适应临床使用的需要,各种干细胞制品制剂诸如新鲜制剂、冻存制剂、凝胶剂、组织工程细胞装置相继被开发。美国、加拿大、韩国的一些干细胞药物相继完成临床前研... 近年来随着干细胞研究的快速发展,干细胞逐渐在医学领域得到广泛应用。为适应临床使用的需要,各种干细胞制品制剂诸如新鲜制剂、冻存制剂、凝胶剂、组织工程细胞装置相继被开发。美国、加拿大、韩国的一些干细胞药物相继完成临床前研究进入临床试验阶段,这些都标志着干细胞从实验室技术向着药物的方向发展。干细胞向药物转化过程中的药学研究是药物安全性和有效性的基础,参照药物研发技术规范进行干细胞药物制剂稳定性的研究是非常重要的一部分。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 长期稳定性 注射液 药物安全性 药物制剂 组织工程细胞 实验室技术 医学领域
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药物研发方面诱导多能干细胞的应用分析
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作者 魏喆 《当代化工研究》 2019年第1期174-175,共2页
再生医学领域研究工作近年来不断深入,目前诱导多能干细胞具有的多组织潜能在药物研发中的应用价值也被不断挖掘出来。基于多能干细胞药物研发技术现状,文章首先分析了多能干细胞产生技术的主要技术内容,其次对药物研发方面诱导多能干... 再生医学领域研究工作近年来不断深入,目前诱导多能干细胞具有的多组织潜能在药物研发中的应用价值也被不断挖掘出来。基于多能干细胞药物研发技术现状,文章首先分析了多能干细胞产生技术的主要技术内容,其次对药物研发方面诱导多能干细胞的应用途径与模式进行了阐述和分析,希望可以为多能干细胞在药物研发方面治疗与应用提供更为丰富的经济价值与应用价值。 展开更多
关键词 药物研发 多能干细胞 应用分析
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人脐带间充质干细胞冻存复苏后的生物学特征 被引量:6
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作者 王有为 韩之波 +5 位作者 严淑琳 毛爱彬 王斌 王丁 陈可 韩忠朝 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1729-1733,共5页
背景:冻存脐带间充质干细胞,并有效地保持其生物学特性,是储存脐带间充质干细胞以供临床使用的重要工艺之一。目的:观察冻存后脐带间充质干细胞的生物学特性,验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征。方法:从脐带分离得到间充质干细胞... 背景:冻存脐带间充质干细胞,并有效地保持其生物学特性,是储存脐带间充质干细胞以供临床使用的重要工艺之一。目的:观察冻存后脐带间充质干细胞的生物学特性,验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征。方法:从脐带分离得到间充质干细胞后,将其冻存于液氮之中。比较经冻存复苏后的脐带间充质干细胞和新鲜制备的脐带间充质干细胞活率、抑制人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素等方面的异同。检验经冻存复苏后的脐带间充质干细胞是否具有多向分化潜能,其表型是否满足间充质干细胞的基本特征。结果与结论:在细胞活率和抑制人外周血单个核细胞分泌γ-干扰素方面,冻存和新鲜的脐带间充质干细胞差异无显著性意义。经冻存复苏后的脐带间充质干细胞保持了间充质干细胞的基本形态,其表型满足间充质干细胞的基本要求,具有多向分化的潜能。 展开更多
关键词 冻存 脐带间充质干细胞 成骨分化 成脂分化 调节免疫
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负载人脐带间充质干细胞的水凝胶对糖尿病小鼠皮肤创面愈合的疗效 被引量:4
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作者 刘司麒 吴明芮 +4 位作者 乔铃然 颉丽英 陈思宇 韩之波 左琳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期21-27,共7页
背景:目前,缺乏有效的治疗方法促进糖尿病患者的皮肤创面愈合。人脐带间充质干细胞已被证明对皮肤再生具有多种治疗作用,可注射水凝胶具有良好的生物相容性和可调节性,可以提高干细胞治疗的效果。目的:以负载人脐带间充质干细胞的水凝... 背景:目前,缺乏有效的治疗方法促进糖尿病患者的皮肤创面愈合。人脐带间充质干细胞已被证明对皮肤再生具有多种治疗作用,可注射水凝胶具有良好的生物相容性和可调节性,可以提高干细胞治疗的效果。目的:以负载人脐带间充质干细胞的水凝胶为切入点,观察其对小鼠糖尿病皮肤创面的疗效,并探索可能的作用机制。方法:①链脲佐菌素溶液连续腹腔注射5 d构建C57BL/6J小鼠糖尿病模型,经尾静脉采血测血糖值评估模型是否建立成功。②造模成功后,利用打孔器建立小鼠背部皮肤损伤模型,水凝胶组给予纯水凝胶敷胶治疗,复合水凝胶组给予负载有人脐带间充质干细胞的水凝胶治疗,对照组给予等量生理盐水治疗,治疗第7,14天观察创面愈合情况。结果与结论:①敷胶后的14 d内,水凝胶组、复合水凝胶组小鼠皮肤创面面积明显低于对照组(P<0.05),复合水凝胶组的皮肤创面面积明显低于水凝胶组(P<0.05);②苏木精-伊红染色结果显示:复合水凝胶组创面肉芽组织新生率明显高于水凝胶组和对照组(P<0.05);③Masson染色结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织胶原沉积率明显增加(P<0.05);④免疫组化CD31染色结果显示:复合水凝胶组创面组织中新生微血管数量明显高于水凝胶组和对照组(P<0.05);⑤免疫组化CD45染色结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织中炎症面积明显减少(P<0.05);⑥免疫荧光染色和qRT-PCR结果显示:与对照组和水凝胶组相比,复合水凝胶组创面组织中M2巨噬细胞及其标志性因子白细胞介素10表达显著升高,且M1巨噬细胞及其标志性因子白细胞介素6表达明显降低(P<0.05);⑦上述结果提示:负载人脐带间充质干细胞的氯化壳聚糖-β-甘油磷酸钠复合水凝胶通过促进糖尿病创面肉芽组织和微血管形成,减轻炎症反应,从而促进创面愈合。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 糖尿病 氯化壳聚糖 水凝胶 巨噬细胞 白细胞介素10 白细胞介素6 修复
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脐带血移植的应用进展及脐带血库建设 被引量:8
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作者 吴海江 朱德琳 韩忠朝 《生命科学》 CSCD 2007年第2期169-173,共5页
脐带血(umbilical cord blood)作为公认的造血干细胞重要来源之一,已经被广泛地用于治疗儿童和成人的良恶性血液系统疾病以及中枢神经系统疾病、实体瘤、缺血性下肢血管病和组织再生等。相对于骨髓移植和外周血来源的造血干细胞移植,脐... 脐带血(umbilical cord blood)作为公认的造血干细胞重要来源之一,已经被广泛地用于治疗儿童和成人的良恶性血液系统疾病以及中枢神经系统疾病、实体瘤、缺血性下肢血管病和组织再生等。相对于骨髓移植和外周血来源的造血干细胞移植,脐带血移植(UCBT)在细胞收集使用、干细胞增殖能力以及移植物抗宿主反应等方面都具有明显的优势。目前的数据显示,因为HLA配型等原因而无法进行骨髓移植的患者应该尽早进行UCBT。此外,UCBT的增多促进了脐带血库的快速建设。本文针对UCBT和脐带血库的最新进展进行了综述。 展开更多
关键词 脐带血移植 脐带血库 造血干细胞
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不同供者来源及不同传代次数人脂肪间充质干细胞端粒酶的活性检测 被引量:2
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作者 池颖 王有为 +1 位作者 韩之波 韩忠朝 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第45期8825-8828,共4页
背景:目前对于脂肪间充质干细胞端粒酶的表达尚无统一定论。目的:探讨不同供者来源和不同传代次数的成人脂肪间充质干细胞是否表达端粒酶活性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2009-08在中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学技... 背景:目前对于脂肪间充质干细胞端粒酶的表达尚无统一定论。目的:探讨不同供者来源和不同传代次数的成人脂肪间充质干细胞是否表达端粒酶活性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2009-08在中国医学科学院血液学研究所泰达生命科学技术研究中心完成。材料:成人脂肪组织来源于天津怡丽医学美容整形门诊接受抽脂术的5例健康供者,Hela细胞由中国医学科学院基础医学研究所基础医学细胞中心提供。方法:分别从每例健康供者抽取20mL脂肪组织,胶原酶消化法体外分离培养人脂肪间充质干细胞,待细胞生长至80%融合时胰酶消化传代。以Hela细胞作为对照,加入含体积分数为10%胎牛血清的1640培养基,待细胞生长至80%融合时胰酶消化传代。主要观察指标:人脂肪间充质干细胞的形态、表型、分化潜能,RT-PCR法检测人脂肪间充质干细胞端粒酶基因的表达,TRAP-ELISA法检测人脂肪间充质干细胞的端粒酶活性。结果:实验分离得到的人脂肪间充质干细胞呈贴壁生长,显微镜下呈梭形,当细胞密度较大时表现出漩涡状生长;CD19,CD34,CD11b,CD45,HLA-DR呈阴性表达,CD73,CD90,CD105呈阳性表达;成脂诱导后油红O染色可见明显红色油滴,成骨诱导后VonKossa染色可见黑色颗粒,提示有钙沉积。P1,P4,P7代人脂肪间充质干细胞均不表达端粒酶反转录酶基因,5例不同供者来源的脂肪间充质干细胞亦均不表达端粒酶反转录酶基因。Hela细胞具有端粒酶活性,人脂肪间充质干细胞不表达端粒酶活性。结论:不同供者来源和不同传代次数的人脂肪间充质干细胞均不表达端粒酶mRNA,也无端粒酶活性。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脂肪 端粒酶
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人脐带间充质干细胞移植治疗心肌肥厚模型小鼠 被引量:1
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作者 颉丽英 刘司麒 +3 位作者 吴明芮 高尔和 韩之波 左琳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第30期4826-4833,共8页
背景:左心室肥厚作为高血压病常见的靶器官损害,是心脑血管疾病高发病率和死亡率的独立危险因素。间充质干细胞可以促进组织修复,调节免疫反应,可作为治疗心肌肥厚的种子细胞。目的:观察人脐带间充质干细胞静脉注射治疗小鼠心肌肥厚的... 背景:左心室肥厚作为高血压病常见的靶器官损害,是心脑血管疾病高发病率和死亡率的独立危险因素。间充质干细胞可以促进组织修复,调节免疫反应,可作为治疗心肌肥厚的种子细胞。目的:观察人脐带间充质干细胞静脉注射治疗小鼠心肌肥厚的疗效。方法:①将C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、人脐带间充质干细胞组、PBS组,其中人脐带间充质干细胞组和PBS组采用主动脉弓缩窄术构建C57BL/6J小鼠心肌肥厚模型,人脐带间充质干细胞组小鼠术后第5周开始,尾静脉注射细胞混悬液,每周1次,连续4周,PBS组小鼠尾静脉注射等量PBS,术后6-11周采用超声心动图观察各组小鼠心功能,术后9,10,11周采用苏木精-伊红染色、Western blot检测心肌细胞肥大程度;②体外实验中,通过异丙肾上腺素诱导H9c2细胞肥大,然后将人脐带间充质干细胞与肥大的H9c2细胞共培养于Transwell^(TM)小室中,共培养48 h后F-actin染色分析H9c2细胞横截面积,qRT-PCR检测H9c2细胞内心房钠尿肽、脑钠尿肽和β-肌球蛋白重链mRNA表达量。结果与结论:①超声心动图结果证实:人脐带间充质干细胞组小鼠左心室射血分数、左室短轴缩短率明显高于同期PBS组(P<0.05);②苏木精-伊红染色结果发现,相比于PBS组,人脐带间充质干细胞组心肌纤维排列整齐,心肌细胞横截面积明显减小(P<0.05);③Western blot实验结果证明,人脐带间充质干细胞组小鼠心肌组织中心房钠尿肽、脑钠尿肽和β-肌球蛋白重链蛋白水平明显低于同期PBS组(P<0.01);④与异丙肾上腺素组相比,共培养后的H9c2细胞面积明显减小(P<0.01),同时,H9c2细胞中心房钠尿肽、脑钠尿肽和β-肌球蛋白重链mRNA水平明显减少(P<0.05);⑤结果表明,人脐带间充质干细胞可通过抑制细胞内肥大相关基因的表达,在一定程度上缓解压力负荷型心肌肥厚的发生,改善小鼠心功能。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 小鼠 主动脉弓缩窄术 细胞肥大 细胞共培养 心房利钠肽 脑利钠肽 肌球蛋白重链
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人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品的构建
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作者 王有为 韩之波 +2 位作者 康健 孟磊 韩忠朝 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第8期1853-1854,1857,共3页
目的:构建用于检测人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品。方法:通过逆转录PCR扩增得到目的片段后连接至pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞。分别经PCR和测序验证重组质粒的正确性。分光光度计测量重组质粒的吸光值,换算成拷贝... 目的:构建用于检测人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品。方法:通过逆转录PCR扩增得到目的片段后连接至pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞。分别经PCR和测序验证重组质粒的正确性。分光光度计测量重组质粒的吸光值,换算成拷贝数浓度后作梯度稀释制得质粒标准品。10倍梯度稀释质粒标准品后进行实时荧光定量PCR分析。结果:人端粒酶催化亚基(hTERT)基因片段成功克隆至pMD18-T载体之中,重组质粒序列完全正确。实时荧光定量PCR分析10倍梯度稀释的质粒标准品所得标准曲线良好。结论:成功构建了人端粒酶催化亚基(hTERT)实时荧光定量PCR标准品。 展开更多
关键词 端粒酶逆转录酶 逆转录多聚酶链式反应 多聚酶链式反应
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间充质干细胞用于类风湿关节炎治疗的理论及应用前景
18
作者 刘广洋 韩忠朝 朱德琳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期860-861,F0004,共3页
关键词 类风湿关节炎 间充质干细胞 组织修复 免疫调节
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间充质干细胞作为肿瘤基因治疗载体的研究进展
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作者 韩喆(综述) 朱德琳(审校) 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2010年第6期425-428,共4页
肿瘤基因治疗采用的病毒载体缺乏对肿瘤细胞的特异性,是影响疗效、产生不良反应的重要原因。以间充质干细胞为载体,利用其对肿瘤细胞的定向趋化和追踪特性,在肿瘤局部获得稳定、高水平的抗癌基因表达,为高靶向性肿瘤基因治疗开辟了... 肿瘤基因治疗采用的病毒载体缺乏对肿瘤细胞的特异性,是影响疗效、产生不良反应的重要原因。以间充质干细胞为载体,利用其对肿瘤细胞的定向趋化和追踪特性,在肿瘤局部获得稳定、高水平的抗癌基因表达,为高靶向性肿瘤基因治疗开辟了新途径。 展开更多
关键词 肿瘤 治疗 间充质干细胞
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