目的建立基于GADD45α基因的遗传毒性高通量筛选体系(Green Screen human cells,GSHC),并将其应用于新型可生物降解的食品接触材料改性淀粉/聚对苯二甲酸-己二酸丁二酯(MS/PBAT)的遗传毒性评价。方法将克隆有GADD45α基因启动子和增强...目的建立基于GADD45α基因的遗传毒性高通量筛选体系(Green Screen human cells,GSHC),并将其应用于新型可生物降解的食品接触材料改性淀粉/聚对苯二甲酸-己二酸丁二酯(MS/PBAT)的遗传毒性评价。方法将克隆有GADD45α基因启动子和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒用慢病毒转染的方法感染p53野生型人淋巴母细胞系TK6,构建稳转细胞系。用已知遗传毒性阳性和阴性的物质对构建的GSHC系统进行验证。在此基础上,以MS/PBAT为研究材料,对使用4%乙酸、20%乙醇、50%乙醇和95%乙醇作为食品模拟物进行迁移实验获得的多组分迁移物开展遗传毒性评价,并采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)对遗传毒性阳性迁移物进行验证。结果在GSHC筛选体系下,遗传毒性阳性物质甲基磺酸甲酯(MMS)、丝裂霉素C(MMC)和环磷酰胺(CTX)和遗传毒性阴性物质DMSO,均得到了预期结果。GSHC筛选体系下的MA/PBAT的4%乙酸、50%乙醇和95%乙醇3种阳性迁移物的Ames实验结果为阴性。结论GSHC方法可用于多组分迁移物的遗传毒性评价。需要进一步确定GSHC的生物检测限(LOBD),并与成熟的体外测试法进行对比分析。展开更多
文摘目的建立基于GADD45α基因的遗传毒性高通量筛选体系(Green Screen human cells,GSHC),并将其应用于新型可生物降解的食品接触材料改性淀粉/聚对苯二甲酸-己二酸丁二酯(MS/PBAT)的遗传毒性评价。方法将克隆有GADD45α基因启动子和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒用慢病毒转染的方法感染p53野生型人淋巴母细胞系TK6,构建稳转细胞系。用已知遗传毒性阳性和阴性的物质对构建的GSHC系统进行验证。在此基础上,以MS/PBAT为研究材料,对使用4%乙酸、20%乙醇、50%乙醇和95%乙醇作为食品模拟物进行迁移实验获得的多组分迁移物开展遗传毒性评价,并采用鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)对遗传毒性阳性迁移物进行验证。结果在GSHC筛选体系下,遗传毒性阳性物质甲基磺酸甲酯(MMS)、丝裂霉素C(MMC)和环磷酰胺(CTX)和遗传毒性阴性物质DMSO,均得到了预期结果。GSHC筛选体系下的MA/PBAT的4%乙酸、50%乙醇和95%乙醇3种阳性迁移物的Ames实验结果为阴性。结论GSHC方法可用于多组分迁移物的遗传毒性评价。需要进一步确定GSHC的生物检测限(LOBD),并与成熟的体外测试法进行对比分析。
